猪瘟兔化弱毒疫苗株论文-韩玉莹,李永锋,谢利豹,仇华吉

猪瘟兔化弱毒疫苗株论文-韩玉莹,李永锋,谢利豹,仇华吉

导读:本文包含了猪瘟兔化弱毒疫苗株论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献,主要关键词:猪瘟净化,强毒株,猪瘟疫苗

猪瘟兔化弱毒疫苗株论文文献综述

韩玉莹,李永锋,谢利豹,仇华吉[1](2019)在《猪瘟兔化弱毒疫苗(C株)——10年回眸》一文中研究指出1猪瘟及C株疫苗概况猪瘟(Classical swine fever,CSF)是猪的一种以高热稽留和广泛性出血为主要特征的高度传染性疾病,给许多国家的养猪业造成了重大的经济损失~([1])。世界动物卫生组织(OIE)将其列入须申报(Notifiable)的动物疫病名录。在国务院印发的《国家中长期动物疫病防治规划(2012~2020年)》中,将猪瘟列为5种优先防治的"一类动物疫病"之一。(本文来源于《中国预防兽医学报》期刊2019年06期)

米士江[2](2018)在《猪瘟兔化弱毒疫苗株与流行毒株鉴别单抗的筛选及其特性研究》一文中研究指出猪瘟(Classical swine fever,CSF)是由猪瘟病毒(Classical swine fever virus,CSFV)引起的严重危害全球养猪业的重大传染病。病毒基因组是大小约12,3 kt的单股正链RNA,基于E2基因核苷酸序列的遗传衍化分析将全球的猪瘟病毒分为3个基因型(1、2和3)和11个基因亚型(1.1~1.4;2.1~2.3;3.1~3.4)。家猪和野猪是猪瘟病毒的唯一易感宿主,猪瘟感染通常表现发病急、持续高热、死亡率高等典型特征,但近年来,感染猪多表现出慢性、持续性感染、病程延长、死亡率低等非典型的猪瘟特点,临床实践中很难对此做出准确诊断。非典型猪瘟或持续感染的猪瘟可终身带毒、排毒,是猪瘟传播的重要传染源,严重威胁猪群健康,在健康猪群中准确鉴别并淘汰猪瘟持续性感染的猪只是猪瘟净化的关键所在和技术难点:在猪瘟感染过程中诱导机体产生中和抗体,但由于我国广泛使用猪瘟兔化弱毒株进行免疫,利用常规猪瘟抗体检测方法无法鉴别猪瘟流行毒株感染,而且目前国内外还没有能够鉴别猪瘟兔化弱毒株免疫和猪瘟流行毒株感染的血清学快速检测试剂盒,因此猪瘟持续性感染或隐性感染的血清学快速鉴别诊断对实现我国猪瘟净化至关重要。本研究以分析猪瘟病毒中国分离株和疫苗株的抗原性差异为出发点探究猪瘟持续性感染或隐性感染的血清学快速鉴别诊断方法的建立,并制备了4株抗猪瘟病毒的特异性单抗。为进一步验证这些单抗与猪瘟兔化弱毒株、猪瘟流行毒株以及牛病毒性腹泻病毒的反应性,本研究实验将本实验室保存的110株猪瘟病毒和3株牛病毒性腹泻病毒1型分别接种细胞进行IFA验证;同时利用杆状病毒表达系统成功表达了猪瘟兔化弱毒疫苗株、猪瘟石门毒株、8个基因亚型(2.2、2.3、1.2~1.4、3.1、3.2和3.4)以及7个基因2.1亚亚型(2.1a、2.1b、2.1c、2.1g、2.1h、2.1i和2.1j)代表毒株的E~(rns)蛋白和E2蛋白,用不含β-巯基乙醇的SDS上样缓冲液处理后,以1、3、4号单抗(抗E2蛋白)和2号单抗(抗E~(rns)蛋白)为一抗进行Western blot分析。IFA结果显示,1号单抗不与猪瘟兔化弱毒株反应,能与猪瘟病毒石门株、2株基因1.1亚型流行毒株、全部的基因2.1a(共8株)、2.1g亚亚型(共2株)、2.1i(共1株)、2.1j(共1株)亚亚型毒株以及18株基因2.1b亚亚型(共19株)、16株基因2.1c亚亚型(共18株)、18株基因2.2亚型(共23株)和3株基因2.3亚型(共14株)的猪瘟病毒反应;2号单抗只与猪瘟兔化弱毒株发生强反应,与XD-1-5和XD-1-6两株基因1.1亚型分离株发生非常微弱的反应,与其他毒株均不发生反应;3号单抗能够与全部的基因1.1亚型毒株(共5株)、1株基因2.1c亚亚型毒株(共18株)以及6株基因2.2亚型毒株(共23株)发生反应,与其他毒株均不发生反应;4号单抗能够与全部的基因1.1亚型毒株(共5株)、基因2.1i和2.1j亚亚型(各1株)以及1株基因2.1a亚亚型毒株(共8株)、16株基因2.1b亚亚型毒株(共19株)、2株基因2.1c亚亚型毒株(共18株)3株基因2.1h亚亚型毒株(共19株)、20株基因2.2亚型毒株(共23株)和12株基因2.3亚型毒株(共14株)反应。同时这4株单抗与牛病毒性腹泻病毒1型没有交叉反应。Western blot结果与IFA结果一致:1号单抗与基因1.2、1.3、1.4和3.1亚型毒株的E2蛋白反应,与基因3.2和3.4亚型毒株的E2蛋白不反应;2号单抗与3号单抗与基因1.2~1.4、3.1、3.2和3.4亚型毒株的E~(rns)蛋白和E2蛋白均不反应;而4号单抗与基因1.2~1.4、3.1、3.2和3.4亚型毒株的和E2蛋白均可反应。为明确单抗所识别的抗原表位类型,本研究用含有β-巯基乙醇的SDS上样缓冲液处理杆状病毒系统表达或原核表达的猪瘟兔化弱毒疫苗株E~(rns)蛋白和猪瘟病毒石门株E2蛋白以还原蛋白中的二硫键,并以正常状态的蛋白做对照进行Western blot分析,结果发现1~4号单抗只与真核表达的且未经二硫键还原处理的蛋白反应,表明1~4号单抗均识别构象抗原表位。本研究对4株猪瘟单抗同猪瘟病毒和牛病毒性腹泻病毒的反应性及其所识别抗原的类型进行了充分验证,这些单抗反映了猪瘟病毒株之间存在抗原差异,为猪瘟病毒抗原变异分析提供了手段;同时本研究获得了能区分猪瘟流行毒株与猪瘟兔化弱毒疫苗株的鉴别单抗,为鉴别猪瘟持续感染提供了重要的抗体试剂,对开创我国猪瘟的科学防控与净化新思路具有重要启发作用。(本文来源于《军事科学院》期刊2018-05-28)

张玲楷,李永锋,谢利豹,孙元,王晓[3](2018)在《表达猪圆环病毒2型Cap蛋白的重组猪瘟兔化弱毒疫苗株的构建与鉴定》一文中研究指出猪瘟(CSF)是由猪瘟病毒(CSFV)引起的一种毁灭性传染病,给养猪业造成重大经济损失。猪瘟兔化弱毒疫苗(C株)是一株非常安全、有效的优秀弱毒疫苗,对各年龄和品种的猪都极其安全,同时对不同基因亚型的CSFV均能提供有效的免疫保护。在现地,CSFV和猪圆环病毒2型(PCV2)混合感染的现象时常发生,有必要研制针对这两种病毒混合感染的二价疫苗。本研究首次构建了表达PCV2 Cap蛋白的重组C株,并评价了其在体内外的特性。结果表明,该重组病毒与C株具有相近的体外增殖特征,能够稳定表达Cap蛋白,在家兔体内具有与C株相似的生物学表型,在免疫家兔后10 d,抗CSFV E2抗体全部转阳,然而抗Cap抗体未能转阳。本研究为进一步优化表达PCV2Cap蛋白的重组C株奠定了基础。(本文来源于《生物工程学报》期刊2018年02期)

夏铭崎,薛青红,王炜,李真光,崔力凡[4](2017)在《高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒TJM-F92疫苗株对猪瘟兔化弱毒株的间隔免疫干扰研究》一文中研究指出为研究高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)TJM-F92疫苗株对猪瘟病毒(CSFV)C株的间隔免疫干扰情况,本实验设计在免疫高剂量PRRSV TJM-F92株疫苗毒后第7 d和第14 d分别免疫低剂量CSFV C株疫苗毒,并于CSFV C株疫苗毒免疫后第14 d用CSFV石门系血毒攻击实验动物,通过体液免疫水平、免疫攻毒保护水平及病理学变化等方面进行评价。结果表明,间隔7 d免疫组与间隔14 d免疫组CSFV ELISA抗体水平与CSFV C株单独免疫对照组抗体水平无显着差异;攻击CSFV石门系血毒后,间隔7 d免疫组与间隔14 d免疫组均未出现猪瘟临床症状,组织器官病理变化轻微,对CSFV石门系血毒攻击可产生良好的保护效果。CSF阴性对照组实验动物5/5表现出猪瘟明显临床症状并全部死亡。以上结果表明,高剂量PRRSV TJM-F92疫苗株与低剂量CSFV C株间隔7 d或14 d免疫,PRRSV TJM-F92株对CSFV C株无免疫干扰作用。(本文来源于《中国预防兽医学报》期刊2017年07期)

夏铭崎,王炜,印春生,王鑫,和彦良[5](2017)在《高剂量高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒TJM-F92疫苗株对低剂量猪瘟兔化弱毒株的免疫干扰研究》一文中研究指出为研究高剂量高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)TJM-F92疫苗株对低剂量猪瘟病毒(CSFV)C株是否存在免疫干扰作用,本研究对不同方式免疫动物从体液免疫水平、免疫攻毒保护水平及病理学变化等方面进行免疫干扰评价。结果表明,高剂量PRRSV TJM-F92疫苗株与低剂量CSFV C株联合免疫组CSFV抗体水平与低剂量CSFV C株单独免疫对照组CSFV抗体水平无显着差异,联合免疫组中高剂量PRRSV TJM-F92株未抑制低剂量CSFV C株抗体生成;攻击CSFV石门血毒后,联合免疫组与低剂量CSFV C株单独免疫对照组均未出现猪瘟临床症状,组织器官病理变化轻微,两组免疫组均可对CSFV石门系血毒攻击产生良好的保护效果。阴性对照组实验动物均表现出猪瘟明显临床症状并全部死亡。本研究表明,高剂量PRRSV TJM-F92株对低剂量CSFV C株无免疫干扰作用。本研究为PRRSV免疫防制措施的制定提供了实验依据。(本文来源于《中国预防兽医学报》期刊2017年06期)

张玲楷[6](2017)在《表达猪圆环病毒2型Cap蛋白的重组猪瘟兔化弱毒疫苗株的构建和鉴定》一文中研究指出猪瘟(classical swine fever,CSF)是由猪瘟病毒(classical swine fever virus,CSFV)引起的一种高度传染性、致死性疾病,具有较高的发病率和致死率。猪瘟在我国呈散发或地方性流行,严重危害我国养猪业。目前疫苗接种仍是防控猪瘟的主要方式。20世纪50年代,我国研制出的猪瘟兔化弱毒株(C株或HCLV株)是一株非常安全、有效的减毒活疫苗,该疫苗接种猪体后可以抵抗不同基因型CSFV的感染。猪圆环病毒病(porcine circovirus-associated disease,PCVAD)是由猪圆环病毒2型(porcine circovirus type 2,PCV2)引起的多种病症的总称。该病遍及全世界,给各个国家的养猪业造成极大的经济损失。该病导致感染猪产生严重的免疫抑制,降低猪体的抵抗力,常与CSF等其它疾病混合感染,加重对养猪业的危害。PCV2是引起PCVAD的病原体,其可感染各种年龄的猪,尤其严重危害仔猪的生长。其编码多个开放阅读框(open reading frame,ORF),其中ORF1和ORF2为两个较大的开放性阅读框,分别编码复制相关蛋白(Rep)和核衣壳蛋白(Cap)。Cap蛋白是PCV2的唯一结构蛋白,并且是主要的免疫原性蛋白。本研究旨在以C株为载体,采用多种策略表达PCV2 Cap蛋白,并且评价重组病毒的生物学特性和免疫原性,为研制同时抵抗CSFV和PCV2感染的二价疫苗奠定基础。本研究利用CSFV反向遗传学,采用不同策略拯救了以C株为骨架、包含PCV2 Cap基因的4株重组病毒。首先,以融合或单独表达形式表达Cap基因,分别成功获得重组病毒为rHCLV-Cap和rHCLV-2ACap。其次,我们又构建了单独表达去除核定位信号,并在氨基端引入不同分泌信号肽Cap基因的重组病毒rHCLV-usp Cap(带有泛素特异性肽酶基因的信号肽)和rHCLV-pspCap(带有催乳素基因的信号肽)。然后,用免疫荧光试验检测重组病毒Cap蛋白的表达;将拯救的重组病毒连续传代至第20代,用RT-PCR扩增插入的外源Cap基因,分析重组病毒的遗传稳定性;通过绘制生长曲线分析重组病毒在SK6细胞上的生长能力。最后,将4株重组病毒分别以耳缘静脉途径接种家兔后,评价重组病毒的生物学特性。结果表明,rHCLV-Cap和rHCLV-2ACap在细胞核中表达外源Cap蛋白,而rHCLV-uspCap和rHCLV-pspCap在细胞质中表达Cap蛋白;重组病毒连续传代20次后,插入的基因在其基因组中稳定存在并且不存在任何突变;重组病毒在SK6细胞上的生长能力与亲本病毒没有显着的差异;在接种后36 h,重组病毒引起家兔的体温升高至40.8℃并维持18 h;在接种后3 d,能够在接种重组病毒的所有家兔脾脏中检测到病毒基因组,并且可以从家兔脾脏中分离到接种的重组病毒,在分离的重组病毒基因组中可以扩增到插入的外源Cap基因,并且未发生任何突变;在接种后第10 d,接种重组病毒的所有家兔都可以产生抗CSFV中和抗体,然而只有r HCLV-uspCap和rHCLV-pspCap在加强免疫后3 w可以诱导家兔产生针对抗PCV2 Cap的特异性抗体。总之,我们采用多种策略成功构建了表达Cap基因的重组C株,进一步的研究证实,Cap基因在重组病毒基因组中具有遗传稳定性,4株重组病毒均可引起家兔产生定型热反应并在家兔脾脏中复制,并保持了C株在家兔体内的免疫原性,值得注意的是,2株表达不带核定位信号的Cap蛋白的重组病毒可以诱导抗Cap特异性抗体的产生。本研究创建了C株作为载体表达外源基因的平台,为研制能够同时预防猪瘟和猪圆环病毒病的二价疫苗奠定了基础。(本文来源于《中国农业科学院》期刊2017-06-01)

朱子健,唐志芬,杨金雨,闫丽辉,夏伟[7](2017)在《猪瘟兔化弱毒疫苗与猪圆环病毒2型灭活疫苗同时接种的免疫效果评价》一文中研究指出为评价猪瘟兔化弱毒疫苗和猪圆环病毒2型(PCV2)灭活疫苗同时免疫效果,本实验采用猪瘟活疫苗(细胞源)和PCV2灭活疫苗(LG株)两种疫苗同时分点注射和混合注射35日龄仔猪,于免疫后间隔3周、5周、7周、9周采血,通过猪瘟病毒(CSFV)抗体检测试剂盒和PCV2抗体检测试剂盒进行CSFV和PCV2特异性抗体检测。结果显示,无论是两种疫苗同时颈部两侧分点分别注射,还是用PCV2灭活疫苗稀释CSFV活疫苗后混合免疫,免疫后3周CSFV和PCV2抗体均呈阳性,CSFV抗体滴度和PCV2抗体滴度于7周和9周达到峰值,与各疫苗单独免疫对照组抗体产生时间和滴度无明显差异。实验表明,两种疫苗可以同时注射或采用PCV2灭活疫苗稀释CSFV活疫苗进行免疫,均不影响各自免疫抗体的产生。因此,可以将PCV2灭活疫苗作为CSFV活疫苗的稀释剂,采用一次性注射的形式同时接种这两种疫苗,为简化这两种病临床疫苗免疫注射方面提供了实验依据。(本文来源于《中国预防兽医学报》期刊2017年02期)

徐炜[8](2017)在《猪瘟兔化弱毒疫苗的生产进展与应用》一文中研究指出猪瘟又称猪霍乱或烂肠瘟,是猪的一种急性、发热传染病,其危害严重,目前仍是威胁养猪业的重要传染病。我国自上世纪五十年代开始推行预防为主的防疫方针,并研制了中国系的猪瘟兔化疫苗,其安全有效且优越性,表现于对猪安全,不带毒,不排毒,被认为是比较理想的疫苗,获得世界的认可。本疫苗在国内大规模使用后,生产方法不断改进,不断创新,为我国控制和消灭猪瘟做出了巨大的贡献。(本文来源于《现代畜牧科技》期刊2017年01期)

詹先强,姚尧,翁顺太[9](2017)在《不同品种兔对猪瘟兔化弱毒疫苗敏感性的研究》一文中研究指出目的研究日本大耳白兔、獭兔、福建黄兔3个品种兔对猪瘟兔化弱毒疫苗不同的敏感性,筛选目标性检验兔。方法分别给3个品种兔静脉注射一定量的猪瘟兔化弱毒疫苗,根据体温反应和攻毒结果测定疫苗中病毒的兔体感染量(Rabbit Infective Dose,RID)。结果给不同品种兔注射不同批次的兔源猪瘟活疫苗和细胞源猪瘟活疫苗,通过每只兔的热反应发现,獭兔对猪瘟兔化弱毒疫苗的兔体感染量高于日本大耳白兔及福建黄兔,差异有统计学意义(F=6.391,P<0.05)。结论獭兔对猪瘟兔化弱毒疫苗的敏感性优于日本大耳白兔及福建黄兔,可以作为猪瘟兔化弱毒疫苗的首选检验兔。(本文来源于《医学动物防制》期刊2017年03期)

贾蕊,祁艳华,牛艳,王彦伟,杨庆宝[10](2016)在《猪瘟野毒株与兔化弱毒疫苗株RT-LAMP检测方法的建立》一文中研究指出背景:猪瘟(classical swine fever,CSF)是由猪瘟病毒(classical swine fever virus,CSFV)引起的接触性传染病,以高热性、出血性和高死亡率为特征。猪瘟病毒是单股正链核糖核酸病毒,病毒粒子呈圆形球状,基因组大小约为12.3 kb。目前,针对猪瘟的诊断方法主要包括病毒病原学检测,血清学检测和分子生物学检测叁大类。环介导等温扩增(LAMP)属于分子生物学检测法,是利用自循环链置换反应原理在恒温条件下实现对DNA的特异、高效和快速扩增,其操作简单,不需要昂贵的仪器设备,易于监控,同时对生物污染物的耐受性强,可有效克服PCR反应中常见的酶失活的问题,在病毒等病原微生物的临床检测上应用广泛。方法:为了建立猪瘟野毒株与兔化弱毒疫苗株RT-LAMP检测方法,本研究根据猪瘟标准强毒株(shimen等)、疫苗株(HCLV等)、不同基因亚型的CSFV野毒株以及牛病毒性腹泻病毒1型(BVDV-1)和牛病毒性腹泻病毒2型(BVDV-2)的全基因组序列,利用DNAman软件系统对猪瘟强弱毒株的序列进行比对,设计一套分别针对猪瘟弱毒株与强毒株的特异性环介导等温扩增引物,优化RT-LAMP反应体系与反应条件,分别建立猪瘟强毒株和弱毒疫苗株的RT-LAMP检测方法。结果:结果表明65℃恒温作用1h即可完成RT-LAMP扩增,RT-LAMP扩增产物用罗丹明B指示剂观察颜色变化,阳性呈黄色,阴性呈橙红色;用琼脂糖凝胶电泳进行检测,阳性扩增有特异性梯形条带产生。经检测,猪瘟强弱毒株的RT-LAMP检测方法,特异性良好,同时建立的RT-LAMP检测方法比RT-PCR灵敏度高出1000倍,且重复性稳定性良好。结论:本试验建立的猪瘟强毒株与弱毒疫苗株的RT-LAMP检测技术是一种快速准确,特异性好,灵敏度高,适合基层使用的方法,实现了对猪瘟强毒株和兔化弱毒株核酸的特异、高效和快速检测,为猪瘟的现场快速检测提供更加简便、快速的方法,可以满足基层检疫的需要。(本文来源于《第十一届全国免疫学学术大会摘要汇编》期刊2016-11-04)

猪瘟兔化弱毒疫苗株论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

猪瘟(Classical swine fever,CSF)是由猪瘟病毒(Classical swine fever virus,CSFV)引起的严重危害全球养猪业的重大传染病。病毒基因组是大小约12,3 kt的单股正链RNA,基于E2基因核苷酸序列的遗传衍化分析将全球的猪瘟病毒分为3个基因型(1、2和3)和11个基因亚型(1.1~1.4;2.1~2.3;3.1~3.4)。家猪和野猪是猪瘟病毒的唯一易感宿主,猪瘟感染通常表现发病急、持续高热、死亡率高等典型特征,但近年来,感染猪多表现出慢性、持续性感染、病程延长、死亡率低等非典型的猪瘟特点,临床实践中很难对此做出准确诊断。非典型猪瘟或持续感染的猪瘟可终身带毒、排毒,是猪瘟传播的重要传染源,严重威胁猪群健康,在健康猪群中准确鉴别并淘汰猪瘟持续性感染的猪只是猪瘟净化的关键所在和技术难点:在猪瘟感染过程中诱导机体产生中和抗体,但由于我国广泛使用猪瘟兔化弱毒株进行免疫,利用常规猪瘟抗体检测方法无法鉴别猪瘟流行毒株感染,而且目前国内外还没有能够鉴别猪瘟兔化弱毒株免疫和猪瘟流行毒株感染的血清学快速检测试剂盒,因此猪瘟持续性感染或隐性感染的血清学快速鉴别诊断对实现我国猪瘟净化至关重要。本研究以分析猪瘟病毒中国分离株和疫苗株的抗原性差异为出发点探究猪瘟持续性感染或隐性感染的血清学快速鉴别诊断方法的建立,并制备了4株抗猪瘟病毒的特异性单抗。为进一步验证这些单抗与猪瘟兔化弱毒株、猪瘟流行毒株以及牛病毒性腹泻病毒的反应性,本研究实验将本实验室保存的110株猪瘟病毒和3株牛病毒性腹泻病毒1型分别接种细胞进行IFA验证;同时利用杆状病毒表达系统成功表达了猪瘟兔化弱毒疫苗株、猪瘟石门毒株、8个基因亚型(2.2、2.3、1.2~1.4、3.1、3.2和3.4)以及7个基因2.1亚亚型(2.1a、2.1b、2.1c、2.1g、2.1h、2.1i和2.1j)代表毒株的E~(rns)蛋白和E2蛋白,用不含β-巯基乙醇的SDS上样缓冲液处理后,以1、3、4号单抗(抗E2蛋白)和2号单抗(抗E~(rns)蛋白)为一抗进行Western blot分析。IFA结果显示,1号单抗不与猪瘟兔化弱毒株反应,能与猪瘟病毒石门株、2株基因1.1亚型流行毒株、全部的基因2.1a(共8株)、2.1g亚亚型(共2株)、2.1i(共1株)、2.1j(共1株)亚亚型毒株以及18株基因2.1b亚亚型(共19株)、16株基因2.1c亚亚型(共18株)、18株基因2.2亚型(共23株)和3株基因2.3亚型(共14株)的猪瘟病毒反应;2号单抗只与猪瘟兔化弱毒株发生强反应,与XD-1-5和XD-1-6两株基因1.1亚型分离株发生非常微弱的反应,与其他毒株均不发生反应;3号单抗能够与全部的基因1.1亚型毒株(共5株)、1株基因2.1c亚亚型毒株(共18株)以及6株基因2.2亚型毒株(共23株)发生反应,与其他毒株均不发生反应;4号单抗能够与全部的基因1.1亚型毒株(共5株)、基因2.1i和2.1j亚亚型(各1株)以及1株基因2.1a亚亚型毒株(共8株)、16株基因2.1b亚亚型毒株(共19株)、2株基因2.1c亚亚型毒株(共18株)3株基因2.1h亚亚型毒株(共19株)、20株基因2.2亚型毒株(共23株)和12株基因2.3亚型毒株(共14株)反应。同时这4株单抗与牛病毒性腹泻病毒1型没有交叉反应。Western blot结果与IFA结果一致:1号单抗与基因1.2、1.3、1.4和3.1亚型毒株的E2蛋白反应,与基因3.2和3.4亚型毒株的E2蛋白不反应;2号单抗与3号单抗与基因1.2~1.4、3.1、3.2和3.4亚型毒株的E~(rns)蛋白和E2蛋白均不反应;而4号单抗与基因1.2~1.4、3.1、3.2和3.4亚型毒株的和E2蛋白均可反应。为明确单抗所识别的抗原表位类型,本研究用含有β-巯基乙醇的SDS上样缓冲液处理杆状病毒系统表达或原核表达的猪瘟兔化弱毒疫苗株E~(rns)蛋白和猪瘟病毒石门株E2蛋白以还原蛋白中的二硫键,并以正常状态的蛋白做对照进行Western blot分析,结果发现1~4号单抗只与真核表达的且未经二硫键还原处理的蛋白反应,表明1~4号单抗均识别构象抗原表位。本研究对4株猪瘟单抗同猪瘟病毒和牛病毒性腹泻病毒的反应性及其所识别抗原的类型进行了充分验证,这些单抗反映了猪瘟病毒株之间存在抗原差异,为猪瘟病毒抗原变异分析提供了手段;同时本研究获得了能区分猪瘟流行毒株与猪瘟兔化弱毒疫苗株的鉴别单抗,为鉴别猪瘟持续感染提供了重要的抗体试剂,对开创我国猪瘟的科学防控与净化新思路具有重要启发作用。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

猪瘟兔化弱毒疫苗株论文参考文献

[1].韩玉莹,李永锋,谢利豹,仇华吉.猪瘟兔化弱毒疫苗(C株)——10年回眸[J].中国预防兽医学报.2019

[2].米士江.猪瘟兔化弱毒疫苗株与流行毒株鉴别单抗的筛选及其特性研究[D].军事科学院.2018

[3].张玲楷,李永锋,谢利豹,孙元,王晓.表达猪圆环病毒2型Cap蛋白的重组猪瘟兔化弱毒疫苗株的构建与鉴定[J].生物工程学报.2018

[4].夏铭崎,薛青红,王炜,李真光,崔力凡.高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒TJM-F92疫苗株对猪瘟兔化弱毒株的间隔免疫干扰研究[J].中国预防兽医学报.2017

[5].夏铭崎,王炜,印春生,王鑫,和彦良.高剂量高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒TJM-F92疫苗株对低剂量猪瘟兔化弱毒株的免疫干扰研究[J].中国预防兽医学报.2017

[6].张玲楷.表达猪圆环病毒2型Cap蛋白的重组猪瘟兔化弱毒疫苗株的构建和鉴定[D].中国农业科学院.2017

[7].朱子健,唐志芬,杨金雨,闫丽辉,夏伟.猪瘟兔化弱毒疫苗与猪圆环病毒2型灭活疫苗同时接种的免疫效果评价[J].中国预防兽医学报.2017

[8].徐炜.猪瘟兔化弱毒疫苗的生产进展与应用[J].现代畜牧科技.2017

[9].詹先强,姚尧,翁顺太.不同品种兔对猪瘟兔化弱毒疫苗敏感性的研究[J].医学动物防制.2017

[10].贾蕊,祁艳华,牛艳,王彦伟,杨庆宝.猪瘟野毒株与兔化弱毒疫苗株RT-LAMP检测方法的建立[C].第十一届全国免疫学学术大会摘要汇编.2016

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