导读:本文包含了多梳家族蛋白论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:PcG,PRC1,CBX蛋白,表观遗传调控
多梳家族蛋白论文文献综述
关珊丽[1]（2017）在《多梳蛋白CBX家族成员间的分子互作初步研究》一文中研究指出多梳蛋白家族(Polycomb Group,PcG)是一类重要的表观遗传调控因子,主要参与维持特定基因的转录沉默,与多种干细胞的干性维系、细胞分化、细胞周期的调控、细胞衰老、X染色体失活、基因印记、癌症的发生发展等一系列细胞生理及病理活动密切相关。PcG蛋白主要形成PRC1和PRC2(Polycomb Repressive Complexes 1和2,PRC1/PRC2)两类多梳蛋白抑制复合体,它们彼此相互协同调控基因的表达。其中Chromobox同源蛋白即CBX蛋白作为PRC1复合体的核心组分协助招募并稳定PRC1到染色质的特定区域。在哺乳动物中,CBX蛋白家族包含五个成员,它们在结构和功能方面既有共性又有特性。本课题主要通过双分子荧光互补实验(BiFC)系统研究了CBX家族成员间的分子互作关系,并对鼠源CBX7的一种未知功能的转录剪接体的表达进行了检测和初步研究。结果表明:(1)BiFC实验证明CBX2与CBX7、CBX2与CBX4以及CBX2自身之间存在一定程度的相互作用;(2)利用缺失不同区段的CBX蛋白突变体进行BiFC实验,结果揭示CBX2与CBX7之间的互作位点位于CBX7蛋白的ATHL结构域中;(3)以小鼠脾脏组织cDNA样品为材料,成功克隆得到了与UCSC数据库中序列完全匹配的mCbx7 C剪切体的编码序列,并且进一步制备了mCBX7 C的特异性多克隆抗体,Western Blot初步检测到了该剪切体的蛋白产物。本课题的研究为进一步解释在胚胎干细胞增殖与分化过程中不同CBX蛋白共存的方式及意义奠定了基础。另外对CBX蛋白剪接体的结构与功能研究对揭示其在表观遗传调控中的作用机制提供依据。此外,进一步阐明每种CBX蛋白在胚胎发育等生理过程中的特殊分工,将十分有助于解释其失稳后导致的发育缺陷及肿瘤形成的致病机理,为未来相关疾病的早期诊断、治疗和预后检测提供新的有效靶点。(本文来源于《兰州大学》期刊2017-05-01）
眭伟浩[2]（2016）在《多梳家族蛋白PHC1在人多能干细胞基因组稳定性中的作用研究》一文中研究指出背景再生医学界领袖之一 Richard.GOSS将再生、生命、死亡叁者之间的关系解释为:"如果没有再生,就没有生命,如果处处再生,就没有死亡",可见再生是个体存活维持组织功能的重要机制。基于人干细胞尤其是人多能干细胞(human pluripotent stem cells,hPSCs)含人胚胎干细胞(human embryonic stem cells,hESCs)和人诱导多能干细胞(induced pluripotent stem cells,iPSCs)的再生医学为发展个体化医疗带来了前所未有机遇和前景。hPSCs具有在体外无限复制和向各种谱系细胞分化的潜能,为治疗多个系统的退行性病变提供可能的种子细胞用于移植。但是hPSCs应用于临床还存在很多瓶颈,例如研究表明体细胞重编程过程中过表达重编程因子后引起的DNA复制压力和氧化自由基应激导致的DNA损伤可以破坏iPSCs的基因组产生基因突变,另一方面hPSCs在快速增殖过程中伴随着由细胞代谢和DNA复制活跃产生的活性氧自由基(ROS)也可以导致DNA损伤从而产生基因突变,移植携带基因突变的细胞到体内后可能产生肿瘤。因此研究hPSCs如何维持基因组的稳定性对于获得更安全的hPSCs用于细胞治疗十分重要。相比于体细胞DNA损伤修复的研究,关于hESCs和iPSCs如何维持基因组稳定性的报道却不多,目前的研究发现hPSCs维持基因组稳定性的主要机制为:一.ESCs内线粒体数量较低,同时ESCs主要通过不依赖于线粒体氧化磷酸化的糖酵解代谢方式获得能量,因此产生的ROS水平很低,另外ESCs高表达抗氧化相关基因,因此具备更强的抗.ROS导致的DNA损伤能力;二.ESCs在DNA损伤时会发生分化和凋亡清除无法完成损伤DNA修复的细胞群体。本课题研究了多梳家族蛋白PHC1在hESCs基因组稳定性维持中的作用。我们的研究结果显示利用shRNA沉默PHC1的表达后可以降低NANOG的表达水平,提示PHC1可能参与hESCs的干性维持;进一步通过紫外辐射和阿霉素处理诱导DNA损伤后,敲降PHC1后的hESCs对DNA损伤更敏感。另外,以前的研究表明过表达重编程因子引起的DNA损伤反应是体细胞重编程的一个重要障碍。我们的结果显示在人体细胞重编程过程中敲降PHC1的表达后引起细胞凋亡增加、周期阻滞,从而降低重编程的效率,提示PHC1参与了多能性形成过程中细胞的DNA损伤反应。第一部分PHC1在hESCs干性维持中的作用目的:研究PHC1对于多能性维持的作用。方法:利用qPCR和western blot检测PHC1在hPSCs与分化细胞中的表达差异,构建PHC1 shRNA在hESCs中沉默PHC1基因表达后检测多能性基因的表达变化。结果:PHC1在hPSCs中的表达高度富集。成功构建了在HFF和hESCs中有良好敲降效果的PHC1 shRNA。hESCs中沉默PHC1基因表达后多能性基因OCT4和NANOG在转录水平没有明显差异,但NANOG蛋白水平表达有一定降低。结论:PHC1对于hESCs多能性维持具有一定的作用。第二部分PHC1对于维持hESCs基因组稳定性的作用目的:建立诱导hESCs DNA损伤的模型,探索敲降PHC1后hESCs对DNA损伤修复的反应。方法:沉默PHC1基因表达后,分别采用紫外(UV)辐射,阿霉素(Dox)处理诱导hESCs DNA损伤模型,检测细胞凋亡水平变化细胞增殖情况。结果:对比载体对照组,敲降PHC1可以造成hESCs基因组稳定性下降,对DNA损伤敏感度增加。结论:PHC1对hESCs基因组稳定性维持具有一定作用。第叁部分PHC1在人体细胞重编程中的作用目的:探讨PHC1在过表达转录因子介导的体细胞重编程中的作用。方法:建立利用慢病毒载体过表达OCT4,SOX2,KLF4,c-MYC重编程人成纤维细胞为iPSCs的体系,检测沉默PHC1表达后对重编程效率的影响。结果:重编程过程中沉默PHC1后引起细胞周期阻滞、细胞凋亡增加以及重编程效率降低。结论:PHC1参与人体细胞重编程过程中发生的DNA损伤反应,从而影响重编程效率。(本文来源于《浙江大学》期刊2016-12-01）
胡节立,杨郁文,凌溪铁,王金彦,吴婧[3]（2016）在《番茄多梳蛋白家族基因LeEMF2的功能分析》一文中研究指出多梳蛋白(Polycomb protein)在植物表观遗传调控中起重要作用。已公开的番茄转录组表明一个多梳蛋白基因Le EMF2在抗病番茄CLN2777A中受番茄黄化曲叶病毒(TYLCV)诱导表达。为明确Le EMF2抗TYLCV的作用,我们以CLN2777A为材料,通过RT-PCR克隆该基因全长序列,荧光定量PCR研究Le EMF2的表达模式,并利用病毒诱导的基因沉默(VIGS)技术研究Le EMF2沉默后对番茄抗TYLCV的影响。Le EMF2的开放阅读框为1 917 bp,编码长为638个氨基酸的蛋白。结构域分析表明其含有一个C2H2锌指结构域以及一个VEFS盒,与拟南芥EMF2氨基酸相似度为58.3%。荧光定量PCR发现Le EMF2基因在花、根以及茎顶端生长点的表达量较高,在茎和老叶中表达量次之,在嫩叶中的表达量最低。接种TYLCV 5 d后,Le EMF2基因在CLN2777A中上调表达1倍左右,而在感病番茄TMXA48-4-0的表达则无明显变化。通过农杆菌浸润法将VIGS沉默载体注射CLN2777A子叶15 d后,Le EMF2在沉默番茄植株中的表达量仅为野生型CLN2777A的13%~48%,且沉默株的植株新叶卷曲、皱缩,说明Le EMF2基因对番茄的生长发育、形态建成具有重要作用。Le EMF2沉默植株接种TYLCV 15 d后,荧光定量PCR检测发现沉默植株的病毒量为野生型植株的1.7倍,说明Le EMF2对TYLCV的抗性作用有一定的影响。(本文来源于《分子植物育种》期刊2016年01期）
倪苏婕,赵丽琴,王小凤,郭伟剑[4]（2014）在《多梳家族蛋白CBX7调控胃癌千细胞样特性的功能和机制研究》一文中研究指出研究背景与目的色素框同源蛋白7(chromobox protein homolog 7,CBX7)是一种参与调控细胞增殖和衰老的转录抑制因子,属于Pol ycomb Group(PcG),即多梳组蛋白复合体家族成员。PcG家族蛋白为外源性基因沉默因子,在维持干细胞特性、调控细胞衰老和凋亡及肿瘤的发生发展等病理生物学过程中发挥重要的作用。值得注意的是CBX7在多种肿瘤的发生发展中独立于PcG家族其它成员之外,具有截然相反的双面性作用,在血液系统肿瘤和前列腺癌中发挥癌基因作用;而在胰腺癌、肺癌、结肠癌、膀胱癌和甲状腺癌中发挥肿瘤抑制基因作用。然而,CBX7在胃癌中的作用还不明确。肿瘤干细胞(CancerStemCells,CSCs)是肿瘤中具有自我更新能力并能产生异质性的肿瘤细胞。肿瘤干细胞的特性主要体现在叁个方面:肿瘤干细胞的运动和迁徙能力使肿瘤细胞转移成为可能;肿瘤干细胞可通过自我更新和无限增值维持着肿瘤细胞群的生命力;肿瘤干细胞可以长时间处于休眠状态并表达多种耐药蛋白,使其对杀伤肿瘤细胞的外界理化因素不敏感。肿瘤干细胞的生物学特性很好地解释了在常规治疗方法消灭大部分肿瘤细胞后肿瘤仍可复发的原因。近年来越来越多的证据显示肿瘤干细胞的存在。通过无血清悬浮培养等方法己初步从胃癌细胞系或胃癌组织中分离出胃癌干细胞或干样细胞。胃癌干细胞的分子调控机制是近来胃癌研究领域的热点,主要包括Wnt/β-catenin、Notch和Hedgehog等信号转导通路。已有研究证实PcG蛋白家族的Bmi-l和Mel-18蛋白调控肿瘤干细胞,但目前CBX7蛋白在肿瘤干细胞的表达及对肿瘤干细胞调控的分子机制尚未见报道。研究方法与结果我们通过分析81例胃癌样本发现CBX7蛋白在胃癌组织中的表达远高于癌旁组织,并且CBX7蛋白表达强阳性患者总生存期明显缩短。继之,应用无血清悬浮培养法从SGC-7901和MKN28细胞株中分离出干细胞样亚群,Western blot方法检测到CBX7蛋白和干细胞相关因子Oct4及干细胞表面标志物CD24、CD44等的高表达。由此推测CBX7蛋白表达与胃癌干细胞样的相关生物学特性有关。然后,通过体外平板克隆试验、Transwell细胞迁移和侵袭实验、无血清悬浮培养成球试验及CCK8药物敏感性实验等干性相关检测发现外源CBX7高表达可增强胃癌细胞的克隆增殖、迁移和侵袭能力,促进胃癌干样细胞的自我更新,降低胃癌细胞对化疗药物的敏感性。在胃癌细胞中高表达CBX7可使p16下调。我们进一步通过功能补偿试验发现:下调p16可以逆转CBX7基因沉默导致的胃癌干细胞样特性的减弱。研究结论CBX7蛋白高表达的胃癌患者预后较差。CBX7蛋白可通过抑制下游靶基因p16调控胃癌干样细胞的生物学特性,在胃癌中发挥癌基因作用。我们的研究结果将为胃癌干细胞的靶向治疗提供一个新的靶点。(本文来源于《第9届全国胃癌学术会议暨第二届阳光长城肿瘤学术会议论文汇编》期刊2014-06-27）
Rong-gang,MA,Yang,ZHANG,Ting-ting,SUN,Bo,CHENG[5]（2014）在《多梳抑制复合体PRC1的核心组分CBX家族蛋白在表观遗传调控中的作用(英文)》一文中研究指出研究目的:多梳蛋白家族(PcG)是一类染色质水平上通过表观遗传修饰调控靶基因的转录因子,其主要功能是使其靶基因转录受到抑制进而沉默。PcG通常以多梳蛋白复合体(PRC)的形式存在,目前研究的最多的是PRC1和PRC2。PRC1在PcG对其靶基因进行转录抑制发挥着主要作用。本综述主要论述了哺乳动物中PRC1核心成员CBX蛋白在多梳蛋白调控基因转录过程中发挥的作用及其对胚胎发育、细胞记忆、细胞周期、细胞增殖和肿瘤形成等过程的影响。创新要点:现已有大量有关PcG在表观遗传水平对其靶基因进行修饰转录机制的综述报道,且以PRC1和PRC2为整体来介绍表观遗传调控机制的文章也屡见不鲜。然而,关于PRC1核心成员CBX蛋白在哺乳动中的同源蛋白CBX2、CBX4、CBX6、CBX7、CBX8对哺乳动物个体发育调节及肿瘤发生过程的分子机制并没有系统的论述。本综述主要将这五种CBX蛋白在转录分子水平上的所发挥的功能进行相关的介绍,并且总结了CBX2、CBX4、CBX6、CBX7、CBX8各自最新的研究进展,体现出五种CBX蛋白的共同功能、各自独特的功能及彼此间的相互联系。重要结论:总结了在哺乳动物中的五种CBX蛋白在胚胎发育和肿瘤形成等过程中独特的功能调节机制以及整体的相互作用,发现CBX作为PRC1的核心组分在基因表观遗传调控中发挥着极其重要的作用。(本文来源于《Journal of Zhejiang University-Science B(Biomedicine & Biotechnology)》期刊2014年05期）
徐曼,谈娟,张奎,王雪,崔红娟[6]（2013）在《家蚕多梳蛋白家族基因BmPsc的全长序列克隆及表达分析》一文中研究指出多梳蛋白(polycomb group,PcG)基因Bmi-1(B cell-specific MLV integration site-1)与人类造血干细胞以及多种肿瘤干细胞的维护相关,Bmi-1蛋白具有典型的N端Ring结构,通过结合核小体并抑制其重塑以实现抑制关键基因转录,具有沉默目的基因的功能。Bmi-1在昆虫中的同源基因为Psc(posterior sex combs)。采用RACE技术获得家蚕Psc基因(BmPsc)全长4 084 bp的序列。该基因位于家蚕第4号染色体上,是一个单外显子基因,ORF为3 291 bp,编码1 096个氨基酸,蛋白质分子质量121 kD,等电点(pI)为9.83;同源序列比对发现BmPsc与赤拟谷盗(Tribolium castaneum)的Psc基因序列有58%的相似度,与果蝇(Drosophila melanogaster)的Psc基因序列仅有34%的相似度;氨基酸序列分析显示BmPsc具有保守的N端Ring结构。利用qRT-PCR检测家蚕5龄第3天幼虫各组织以及5龄各时期幼虫血液中BmPsc基因的表达水平,发现BmPsc在各组织均有表达,在精巢以及卵巢中的表达明显较高,其次是翅原基(含造血器官),在循环血液中也有较高表达;在5龄各时期幼虫血液中的表达呈一定规律性,于蜕皮后的5龄第2天以及进入变态前的5龄第6天出现表达峰值,而在5龄中期(第4～5天)为表达低谷。研究结果为进一步阐释该基因在细胞水平以及个体水平对干细胞分化的抑制作用奠定了基础。(本文来源于《蚕业科学》期刊2013年01期）
多梳家族蛋白论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
背景再生医学界领袖之一 Richard.GOSS将再生、生命、死亡叁者之间的关系解释为:"如果没有再生,就没有生命,如果处处再生,就没有死亡",可见再生是个体存活维持组织功能的重要机制。基于人干细胞尤其是人多能干细胞(human pluripotent stem cells,hPSCs)含人胚胎干细胞(human embryonic stem cells,hESCs)和人诱导多能干细胞(induced pluripotent stem cells,iPSCs)的再生医学为发展个体化医疗带来了前所未有机遇和前景。hPSCs具有在体外无限复制和向各种谱系细胞分化的潜能,为治疗多个系统的退行性病变提供可能的种子细胞用于移植。但是hPSCs应用于临床还存在很多瓶颈,例如研究表明体细胞重编程过程中过表达重编程因子后引起的DNA复制压力和氧化自由基应激导致的DNA损伤可以破坏iPSCs的基因组产生基因突变,另一方面hPSCs在快速增殖过程中伴随着由细胞代谢和DNA复制活跃产生的活性氧自由基(ROS)也可以导致DNA损伤从而产生基因突变,移植携带基因突变的细胞到体内后可能产生肿瘤。因此研究hPSCs如何维持基因组的稳定性对于获得更安全的hPSCs用于细胞治疗十分重要。相比于体细胞DNA损伤修复的研究,关于hESCs和iPSCs如何维持基因组稳定性的报道却不多,目前的研究发现hPSCs维持基因组稳定性的主要机制为:一.ESCs内线粒体数量较低,同时ESCs主要通过不依赖于线粒体氧化磷酸化的糖酵解代谢方式获得能量,因此产生的ROS水平很低,另外ESCs高表达抗氧化相关基因,因此具备更强的抗.ROS导致的DNA损伤能力;二.ESCs在DNA损伤时会发生分化和凋亡清除无法完成损伤DNA修复的细胞群体。本课题研究了多梳家族蛋白PHC1在hESCs基因组稳定性维持中的作用。我们的研究结果显示利用shRNA沉默PHC1的表达后可以降低NANOG的表达水平,提示PHC1可能参与hESCs的干性维持;进一步通过紫外辐射和阿霉素处理诱导DNA损伤后,敲降PHC1后的hESCs对DNA损伤更敏感。另外,以前的研究表明过表达重编程因子引起的DNA损伤反应是体细胞重编程的一个重要障碍。我们的结果显示在人体细胞重编程过程中敲降PHC1的表达后引起细胞凋亡增加、周期阻滞,从而降低重编程的效率,提示PHC1参与了多能性形成过程中细胞的DNA损伤反应。第一部分PHC1在hESCs干性维持中的作用目的:研究PHC1对于多能性维持的作用。方法:利用qPCR和western blot检测PHC1在hPSCs与分化细胞中的表达差异,构建PHC1 shRNA在hESCs中沉默PHC1基因表达后检测多能性基因的表达变化。结果:PHC1在hPSCs中的表达高度富集。成功构建了在HFF和hESCs中有良好敲降效果的PHC1 shRNA。hESCs中沉默PHC1基因表达后多能性基因OCT4和NANOG在转录水平没有明显差异,但NANOG蛋白水平表达有一定降低。结论:PHC1对于hESCs多能性维持具有一定的作用。第二部分PHC1对于维持hESCs基因组稳定性的作用目的:建立诱导hESCs DNA损伤的模型,探索敲降PHC1后hESCs对DNA损伤修复的反应。方法:沉默PHC1基因表达后,分别采用紫外(UV)辐射,阿霉素(Dox)处理诱导hESCs DNA损伤模型,检测细胞凋亡水平变化细胞增殖情况。结果:对比载体对照组,敲降PHC1可以造成hESCs基因组稳定性下降,对DNA损伤敏感度增加。结论:PHC1对hESCs基因组稳定性维持具有一定作用。第叁部分PHC1在人体细胞重编程中的作用目的:探讨PHC1在过表达转录因子介导的体细胞重编程中的作用。方法:建立利用慢病毒载体过表达OCT4,SOX2,KLF4,c-MYC重编程人成纤维细胞为iPSCs的体系,检测沉默PHC1表达后对重编程效率的影响。结果:重编程过程中沉默PHC1后引起细胞周期阻滞、细胞凋亡增加以及重编程效率降低。结论:PHC1参与人体细胞重编程过程中发生的DNA损伤反应,从而影响重编程效率。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
多梳家族蛋白论文参考文献
[1].关珊丽.多梳蛋白CBX家族成员间的分子互作初步研究[D].兰州大学.2017
[2].眭伟浩.多梳家族蛋白PHC1在人多能干细胞基因组稳定性中的作用研究[D].浙江大学.2016
[3].胡节立,杨郁文,凌溪铁,王金彦,吴婧.番茄多梳蛋白家族基因LeEMF2的功能分析[J].分子植物育种.2016
[4].倪苏婕,赵丽琴,王小凤,郭伟剑.多梳家族蛋白CBX7调控胃癌千细胞样特性的功能和机制研究[C].第9届全国胃癌学术会议暨第二届阳光长城肿瘤学术会议论文汇编.2014
[5].Rong-gang,MA,Yang,ZHANG,Ting-ting,SUN,Bo,CHENG.多梳抑制复合体PRC1的核心组分CBX家族蛋白在表观遗传调控中的作用(英文)[J].JournalofZhejiangUniversity-ScienceB(Biomedicine&Biotechnology).2014
[6].徐曼,谈娟,张奎,王雪,崔红娟.家蚕多梳蛋白家族基因BmPsc的全长序列克隆及表达分析[J].蚕业科学.2013