导读:本文包含了诱饵寡核苷酸论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:超声微泡,超声辐照,STAT3诱饵寡核苷酸,食管鳞癌
诱饵寡核苷酸论文文献综述
王磊,李立峰,柳芳莉,朱雯,卢强[1]（2018）在《超声靶向微泡联合超声辐照介导的STAT3诱饵寡核苷酸对食管鳞状细胞癌生长的影响》一文中研究指出目的分析超声微泡联合超声辐照转染STAT3诱饵寡核苷酸(STAT3 decoy oIigonuc Ieotide,STAT3 Decoy ON)对食管鳞状细胞癌生长活性的影响及影响机制。方法食管鳞癌细胞系EC9706细胞体外培养,根据不同转染方式分为E组(超声微泡+超声照射)、P组(脂质体+超声照射)、C组(仅超声照射)、CC组(超声微泡);采用错配寡核苷酸作为E组、P组组内对照分为EC、PC组。免疫荧光实验及流式细胞仪检测各组转染效率,MTT比色法分析各组细胞抑制率,分析STAT3 Decoy ON转染后对食管鳞癌癌细胞增殖活性的影响;同时利用实时荧光定量PCR、Western blot检测STAT信号通路下游分子表达含量,观察各组细胞相关基因表达水平的变化;裸鼠皮下移植瘤模型显示不同转染方式及STAT3 Decoy ON对小鼠移植瘤体质量和体积的影响。结果免疫荧光实验及流式细胞仪检测结果显示相比其他各组,E组细胞转染率最高(F=3.737,P=0.014),凋亡率亦是最高(F=1.483,P=0.329);MTT比色法结果提示E组细胞抑制率高于P组(F=8.382,P<0.001),亦高于CC组(F=6.469,P<0.001)。同对照组相比,E组、P组、CC组转染STAT3 Decoy ON后,STAT3、bcl-xL、Cyclin D1 mRNA相对含量下降(F=5.328,P<0.001),其中E组下降最为明显。裸鼠移植瘤实验提示E组、P组及CC组裸鼠移植瘤的生长存在抑制作用,E组作用强度最强。结论超声辐照联合超声微泡是行之有效的转染方式,转染STAT3 Decoy ON能明显抑制食管鳞癌细胞活性,增强细胞凋亡,具有潜在的临床治疗价值。(本文来源于《现代预防医学》期刊2018年13期）
方年富,冷芳,张静,李弼民[2]（2014）在《NF-κB“诱饵”寡核苷酸对TNBS诱导小鼠结肠炎的影响》一文中研究指出目的:探讨NF-κB"诱饵"寡核苷酸对TNBS灌肠诱导BALB/C小鼠模型肠道炎症,NF-κB p65蛋白表达及TNF-α、IL-1β、TGF-βmRNA表达的影响,研究其对实验性结肠炎的治疗效果及机制。方法:将40只BALB/C小鼠随机分为正常对照组(NC组)、模型对照组(TNBS组)、NF-κB p65错义寡核苷酸组(MSODN组)和NF-κB"诱饵"寡核苷酸组(Decoy ODN组),采用2,4,6-叁硝基苯磺酸(TNBS)灌肠造模。造模24 h后对各组进行相应灌肠治疗,光镜下观察肠黏膜炎症并评分,免疫组化检测各组小鼠肠黏膜NF-κB p65蛋白表达,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测各组小鼠结肠组织TNF-α、IL-1β、TGF-βmRNA表达。结果:Decoy ODN组小鼠在结肠炎症评分较TNBS组和MSODN组明显改善(P<0.05)。Decoy ODN组小鼠肠黏膜NF-κB p65蛋白表达与NC组和MSODN组比较无明显差异(P>0.05)。Decoy ODN组小鼠结肠组织TNF-α、IL-1β、TGF-βmRNA的表达水平较TNBS组和MSODN组明显减少(P<0.05)。结论 :NF-κB Decoy ODN对小鼠TNBS结肠炎有较好的治疗作用,其作用机制可能是通过下调炎性因子TNF-α、IL-1β、TGF-β的表达实现的。(本文来源于《实用医学杂志》期刊2014年04期）
高敏[3]（2013）在《C/EBPs诱饵寡核苷酸对脓毒症小鼠多器官损伤的保护作用及机制研究》一文中研究指出背景及目的：脓毒症(sepsis)是感染导致的全身炎症反应综合征(system inflammatory response syndrome, SIRS),是重症监护病房(ICU)内常见并发症及首要死亡原因。脓毒症治疗花费高,医疗资源消耗大,对人类健康和社会经济造成巨大威胁。CCAAT增强子结合蛋白(CCAAT enhancer binding protein, C/EBPs)是一组属于碱性亮氨酸拉链(basic region leucine zipper, bZIP)家族的转录调控因子,目前已发现6个成员：α、β、γ、δ、ε和ζ。其中成员α、β、δ及ε在各种炎症性疾病急性期反应中发挥关键作用,且作为转录因子有着共同的特异性识别序列RTTGCGYAAY(其中R为A或G,Y为C或T)。因此,为了寻找新的脓毒症防治靶点,本研究采用转录因子诱饵策略(transcription factor decoy strategy, TFDs)体外合成针对转录因子C/EBPs的哑铃形诱饵寡脱氧核苷酸(C/EBPs decoy ODNs),然后探讨了C/EBPs decoy ODNs对脓毒症的影响及其机制。方法：1)体外实验：先采用免疫印迹分析(western blot, WB)及凝胶滞留实验(electrophoretic mobility shift assay, EMSA)观察LPS(1μg/mL)刺激下RAW264.7细胞内C/EBPs蛋白表达水平及DNA结合活性的变化以期验证C/EBPs在炎症反应中发挥重要作用；然后设计合成针对转录因子C/EBPs的特异性哑铃形decoy ODNs及用于对照的突变寡脱氧核苷酸(C/EBPs mutant ODNs),在采用电泳及EMSA验证ODNs的合成符合设计要求后用阳离子转染试剂TurboFect将荧光基团FAM标记的ODNs转染入RAW264.7细胞,分别采用流式细胞术检测ODNs转染效率；Hoechst染核后经荧光显微镜观察decoy ODNs在细胞内的分布；alamarBlue实验观察ODNs的细胞毒性；WB观察其对C/EBPs蛋白表达水平的影响；采用ELISA检测|C/EBPs decoy ODNs对LPS (1μg/mL)刺激下RAW264.7细胞上清中细胞因子TNF-a, IL-1β及IL-6的表达影响；采用Real-time PCR检测C/EBPs decoy ODNs对LPS (1μg/mL)刺激下RAW264.7细胞内多个C/EBPs炎症相关靶基因的表达影响。2)体内试验：采用盲肠结扎穿刺(CLP)制备脓毒症小鼠模型,经量效实验和时效实验观察C/EBPs decoy ODNs对脓毒症小鼠存活率的影响；尾静脉注射FAM标记的C/EBPs decoy ODNs6h及24h后检测组织匀浆上清荧光密度观察decoy ODNs的器官分布及停留情况；然后通过检测反应多器官损伤的血清生化指标及多器官光镜下形态学变化观察C/EBPs decoy ODNs对脓毒症小鼠多器官损伤的保护作用；采用ELISA检测C/EBPs decoy ODNs对脓毒症小鼠血清细胞因子TNF-α, IL-1β及IL-6的表达影响,采用Real-time PCR检测C/EBPs decoy ODNs对肺组织中多个C/EBPs炎症相关靶基因表达的影响。结果：1)体外实验：RAW264.7细胞中CEBPα蛋白在基础状态下表达较高,LPS刺激后1h即开始降低,于6h降到最低峰,之后又开始上升,于24h恢复到基础水平；CEBPβ基础水平较低,LPS刺激后1h即开始升高,于12h达到高峰,24h又开始下降,但仍高于基础水平；CEBPδ基础水平较低,LPS刺激后1h即开始升高,一直持续至24h;CEBPε于LPS刺激后6h开始升高,24h又开始下降,但仍高于基础水平。细胞核中CEBPα、β、δ及ε的表达变化与其在细胞总蛋白中的表达情况基本一致；但CEBPα蛋白在LPS刺激后6h才开始降低；CEBPε则于LPS刺激后1h则有所下降,于3h开始升高,一直持续至24h。C/EBPsDNA结合活性在LPS刺激后1h即开始增加,于6h和12h时达到高峰,C/EBPs的这种高水平的DNA结合活性一直持续到24h；且CEBP(3及CEBPδ的DNA结合活性远高于CEBPα和CEBPε。电泳及EMSA结果表明C/EBPs decoy ODNs和mutant ODNs符合设计要求。转染ODNs4h之后,RAW264.7细胞C/EBPs decoy ODNs和C/EBPs mutant ODNs的转染效率分别为87.35%及87.71%；荧光显微镜下观察,发现转染4h之后decoy ODNs大部分定位于细胞核；C/EBPs decoy ODNs和mutant ODNs均无明显细胞毒性作用；C/EBPs decoy ODNs和：mutant ODNs不影响RAW264.7细胞中CEBPα、β、δ及ε蛋白表达水平。C/EBPs decoy ODNs能抑制LPS刺激下RAW264.7细胞TNF-α, IL-1β及IL-6的表达。C/EBPs decoy ODNs能抑制LPS刺激下RAW264.7细胞IL-6, IL-1β, IL-18, MCP-1, MIF, caspase-1, NF-κB1, ICAM1, VCAM1和Fgα的mRNA表达。2)体内试验：量效实验表明CLP后立即给予小剂量(10μg)、中剂量(30μg)、大剂量(90μg) C/EBPs decoy ODNs干预分别可使CLP所致的脓毒症小鼠存活率提高30%、60%及70%; C/EBPs mutant ODNs干预则对脓毒症小鼠存活率无明显影响。时效实验发现术后0、3、6、12h给予C/EBPs decoy ODNs (30μg)干预可使脓毒症小鼠存活率提高60%、50%、40%及30%。尾静脉注射6h后,C/EBPs decoy ODNs在肝、肺、肾组织中均有分布；注射24h之后,C/EBPs decoy ODNs在肝、肺组织中仍有停留,而肾组织中则已检测不到。C/EBPs decoy ODNs降低脓毒症小鼠血清生化指标BUN, Cr, ALT, AST, LDH及CK-MB水平,减轻其心、肝、肺、肾的组织损伤；C/EBPs decoy ODNs降低脓毒症小鼠血清炎症因子TNF-α, IL-1β及IL-6表达水平；C/EBPs decoy ODNs降低脓毒症小鼠肺组织多个炎症相关因子IL-6, IL-1β, IL-18, MCP-1, MIF, caspase-1, NF-κB1, ICAM1, VCAM1及Fgα的mRNA表达。结论：C/EBPs在LPS所致的炎症反应中发挥重要作用,可作为脓毒症防治的潜在干预靶点；C/EBPs decoy ODNs通过干扰C/EBPs DNA结合活性而抑制多个炎症相关靶基因的表达,从而发挥对脓毒症小鼠多器官损伤的保护作用。(本文来源于《中南大学》期刊2013-11-01）
张静[4]（2013）在《NF-κB“诱饵”寡核苷酸对TNBS诱导小鼠慢性肠纤维化的影响及疗效观察》一文中研究指出研究背景：炎症性肠病（IBD）的病因及发病机制尚不明确，是一类慢性非特异性肠道炎性疾病，发病率日益增多，受到了越来越多的关注。IBD包括克罗恩病（CD）和溃疡性结肠炎（UC），两者均具有慢性、反复发作、迁延不愈的特点，临床表现也相似，如腹泻、便血、消瘦等。肠纤维化是IBD发病过程中常见的严重并发症，可引起肠壁狭窄，最终导致肠梗阻。目前认为IBD的发病与环境、感染、遗传、免疫、非甾体抗炎药、抽烟等多因素相互作用有关。迄今为止，传统药物治疗包括抗生素、氨基水杨酸类、肾上腺糖皮质激素以及免疫抑制剂，但疗效有限，副作用大，患者依从性差；新型药物主要为生物制剂如肿瘤坏死因子α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）的单抗，但长期使用的安全性问题尚存争议。无论传统药物还是新型药物，对于IBD炎症及纤维化的疗效都不尽如人意，因此探讨IBD发病机制，寻找新型有效的治疗药物及确定治疗疗程是本领域目前研究的一个热点。现研究表明，核转录因子κBp65（NF-κBp65）在IBD的发生发展中起到重要作用，可以调控多种炎性因子的释放，已成为IBD治疗的新靶点。NF-κBp65“诱饵”寡核苷酸（Decoy ODN）可阻断NF-κBp65的表达，导致相应靶基因丧失转录功能，减少细胞因子的释放，成为IBD治疗的新方向。本实验通过合成NF-κBp65Decoy ODN作为干预手段，对叁硝基苯磺酸（TNBS）诱导的动物模型进行干预，为NF-κBp65Decoy ODN治疗IBD提供理论依据。研究目的：探讨NF-κBp65Decoy ODN干预灌肠对TNBS/50%乙醇（EtOH）诱导动物模型的影响，并研究NF-κBp65Decoy ODN治疗的最佳治疗疗程。通过观察各组实验小鼠的疾病活动指数（DAI），分析研究结肠组织学病理变化，胶原纤维的增生程度，IL-1β、TNF-α、Col-ⅢmRNA的表达水平，NF-κBp65、TGF-β1的蛋白表达水平，进而研究NF-κBp65Decoy ODN在治疗TNBS诱导小鼠肠道炎症及肠纤维化中的作用机制，为NF-κBp65Decoy ODN治疗IBD提供理论依据。研究方法：1.IBD动物模型建立实验开始前24小时禁食不禁水，灌肠时持3.5F导管，从肛门插入肠道深约5.5cm，给予2mg TNBS/50%EtOH100ul灌肠，将小鼠倒置60秒。连续6周，每周1次。2.实验分组将80只体重约20-25克，6-8周龄，雌性BALB/C小鼠随机分成8组，每组10只，分别为：空白组，TNBS组，MSODNⅠ、Ⅱ、Ⅲ组，Decoy ODNⅠ、Ⅱ、Ⅲ组。（1）空白组：每周给予NS100ul灌肠2次，连续6周，每周2次；（2）TNBS组：按上述方法造模，每周TNBS灌肠24小时后给予NS100ul灌肠；（3）MSODNⅠ组：按上述方法造模，第一到二周TNBS灌肠24小时后给予MSODN100ul灌肠，其余四周均给予NS灌肠；（4）MSODN Ⅱ组：按上述方法造模，第一到四周TNBS灌肠24小时后给予MSODN100ul灌肠，其余二周均给予NS灌肠；（5）MSODN Ⅲ组：按上述方法造模，每周TNBS灌肠24小时后给予MSODN100ul灌肠；（6）Decoy ODNⅠ组：按上述方法造模，第一到二周TNBS灌肠24小时后给予Decoy ODN100ul灌肠，其余四周均给予NS灌肠；（7）Decoy ODN Ⅱ组：按上述方法造模，第一到四周TNBS灌肠24小时后给予Decoy ODN100ul灌肠，其余二周均给予NS灌肠；（8）Decoy ODN Ⅲ组：按上述方法造模，每周TNBS灌肠24小时后给予DecoyODN100ul灌肠。3.观察指标和检测方法所有实验小鼠于最后一次灌肠1周后，颈椎脱臼法处死小鼠，取结肠组织，HE染色评估小鼠结肠炎症程度，VG染色评估小鼠结肠纤维化程度，逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测IL-1β、TNF-α及Col-ⅢmRNA的表达水平，免疫组织化学检测小鼠结肠组织NF-κBp65、TGF-β1的蛋白表达水平。结果：1.一般情况及DAI评分：空白组小鼠，实验期间小鼠饮食正常，活动自如，毛发光泽，无死亡；TNBS组、MSODNⅠ、Ⅱ、Ⅲ组小鼠，每周灌肠后，3天内出现少食，体重减轻，少动，毛发无光泽，腹泻，大便潜血甚至肉眼血便，4天后不良症状逐渐减轻，实验期间，不良症状以3-4周较明显，之后症状趋于稳定，死亡集中在第3周；Decoy ODNⅠ、Ⅱ、Ⅲ组小鼠，每周灌肠后，均会出现上述不良症状，但程度较轻，其中Decoy ODN Ⅲ组程度最轻，3天内症状明显，之后逐渐恢复，实验期间，不良症状以3-4周较明显，无死亡。各组实验小鼠DAI评分，不同时间段内比较，空白组无统计学意义（P>0.05）；TNBS组，MSODNⅠ、Ⅱ、Ⅲ组，有统计学意义（P<0.05）；Decoy ODNⅠ、Ⅱ、Ⅲ组由于治疗疗程不同，对小鼠DAI评分影响并不全都有统计学意义。在相同时间段内，空白组相对于其它实验组小鼠，DAI评分低，有统计学意义（P<0.01）；TNBS组与MSODNⅠ、Ⅱ、Ⅲ组比较，无统计学意义（P>0.05）；Decoy ODNⅠ、Ⅱ、Ⅲ组与TNBS组、MSODNⅠ、Ⅱ、Ⅲ组比较，DAI评分低，有统计学意义（P<0.05）。Decoy ODNⅠ、Ⅱ、Ⅲ组之间由于治疗疗程不同，对小鼠DAI评分影响并不全都有统计学意义。2.大体观察及病理表现：肉眼观察空白组小鼠结肠组织呈淡红色，无特殊改变；TNBS组、MSODNⅠ、Ⅱ、Ⅲ组小鼠，可见结肠肠管变形，肠壁增厚粘连，可见明显充血、水肿，糜烂、溃疡，甚至出现结节；Decoy ODNⅠ、Ⅱ、Ⅲ组亦可见上述改变，但症状较轻，且肠壁无明显变形、增厚粘连，其中DecoyODN Ⅲ组程度最轻。病理表现，空白组小鼠无特殊病理学改变，TNBS组、MSODNⅠ、Ⅱ、Ⅲ组小鼠，HE染色可见炎症表现，如细胞结构紊乱，腺体破坏、隐窝破坏、炎性细胞浸润；VG染色可见纤维化表现，如黏膜下和浆膜层出现大量的粉红色胶原纤维增生，固有肌层明显增厚。Decoy ODNⅠ、Ⅱ、Ⅲ组亦可见上述病理学改变，但炎症及纤维化程度较轻，其中Decoy ODN Ⅲ组程度最轻。各组实验小鼠肠炎症及纤维化评分，空白组相对于其它实验组评分低，有统计学意义（P<0.01）；TNBS组与MSODNⅠ、Ⅱ、Ⅲ组比较，无统计学意义（P>0.05）；Decoy ODNⅠ、Ⅱ、Ⅲ组与TNBS组、MSODNⅠ、Ⅱ、Ⅲ组比较评分低，有统计学意义（P<0.05）；Decoy ODNⅠ、Ⅱ、Ⅲ组叁组之间亦有统计学意义（P<0.05），其中Decoy ODN Ⅲ组评分最低。3.小鼠结肠IL-1β、TNF-α、Col-Ⅲα mRNA的表达水平：空白组相对于其它实验组叁项mRNA表达低，有统计学意义（P<0.01）；TNBS组与MSODNⅠ、Ⅱ、Ⅲ组比较，无统计学意义（P>0.05）；Decoy ODNⅠ、Ⅱ、Ⅲ组与TNBS组、MSODNⅠ、Ⅱ、Ⅲ组比较，叁项mRNA表达低，有统计学意义（P<0.05）；Decoy ODNⅠ、Ⅱ、Ⅲ组叁组之间亦有统计学意义（P<0.05），其中Decoy ODNⅢ组叁项mRNA表达最低。4.小鼠结肠NF-κBp65、TGF-β1蛋白表达变化：空白组相对于其它实验组，NF-κBp65、TGF-β1蛋白表达低，有统计学意义（P<0.01）；TNBS组与MSODNⅠ、Ⅱ、Ⅲ组比较，无统计学意义（P>0.05）；Decoy ODNⅠ、Ⅱ、Ⅲ组与TNBS组、MSODNⅠ、Ⅱ、Ⅲ组比较，NF-κBp65、TGF-β1蛋白表达低，有统计学意义（P<0.05）；Decoy ODNⅠ、Ⅱ、Ⅲ组叁组之间亦有统计学意义（P<0.05），其中Decoy ODN Ⅲ组NF-κBp65、TGF-β1蛋白表达最低。结论：1.通过对各组小鼠的DAI、结肠大体、病理及纤维化评分的对比观察，证实2mg TNBS/50%EtOH灌肠可成功诱导小鼠肠道炎症及肠纤维化的形成。2.NF-κBp65Decoy ODN连续用药6周治疗小鼠肠道炎症及纤维化疗效最为显着，NF-κBp65MSODN则无治疗效果。3.NF-κBp65Decoy ODN治疗小鼠结肠的炎症及纤维化的作用机制是下调TNF-a、IL-1β、Col-Ⅲα mRNA表达，抑制NF-κBp65、TGF-β1蛋白表达，NF-κBp65Decoy ODN有望成为治疗IBD的新型药物。(本文来源于《南昌大学》期刊2013-06-01）
刚毅[5]（2009）在《转录因子诱饵策略中由载体表达的双链寡核苷酸的功能研究》一文中研究指出转录因子诱饵策略(TFD strategy,Transcription Factor Decoy strategy)是近年来研究和应用较广的一种用来探索转录因子功能的策略。利用人工合成的含有某转录因子结合位点序列的小片段脱氧寡核苷酸双链能与该转录因子正常的结合位点竞争结合转录因子的特性,达到封闭该转录因子活性的目的。近年来已有众多利用TFD策略研究转录因子的报道,如NFκB、Sp1、NFAT等等。转录因子诱饵策略以其对转录因子封闭效果切实、功能分子为小分子等优点被越来越广泛地应用到分子生物学领域,并于近期初步用于临床,取得了较好效果。虽然转录因子诱饵策略有众多优点,但其缺陷同样突出,其中以功能分子脱氧寡核苷酸ODN(oligodeoxynucleotide)的细胞核转移效率过低最为明显。TFD策略发挥作用需要ODN进入细胞核内与转录因子结合,但未经修饰的ODN入核后有大约90%的分子被溶酶体摄取降解,仅有10%左右的ODN能进入细胞核发挥作用。这对TFD策略的实际应用产生很大的影响。目前有数种方案用以解决这项难题,如引入核定位信号肽(NLS)交联ODN以提高核转移效率、对ODN进行修饰以提高其对溶酶体降解的抵抗力以及利用新型转染试剂提高小分子(ODN)的转染效率等。但这些方案或者成本过高,或者工艺复杂,未能被广泛应用。因此尚需探索新的、更方便经济的方法。我们在对茎-环小干扰RNA即shRNA的研究中发现,其在细胞内表达过程会出现一个阶段,表达出的单链RNA分子会形成暂时性的局部双链。我们设想,既然含有转录因子结合位点序列的ODN(系双链DNA)具有相应的转录因子封闭功能,那么与某转录因子结合位点序列相似的双链RNA是否也具有类似的封闭效应呢?如果猜想是正确的话,那我们就可以利用shRNA来表达这种双链RNA,将载体包装病毒,这样既可以达到封闭的目的,又极大地提高了功能分子的核转移效率。因此本课题将对此进行探讨。【目的】1.明确能够表达与某转录因子结合位点序列相似的双链RNA的载体是否能够封闭该转录因子的活性;2.探索这种载体发挥封闭功能的机制【方法】1.选择在HEK293细胞中有表达的转录因子NFκB,构建其相关载体,包括目的载体即表达上述双链RNA的载体(vector-based ON, V-B ON)及其错序对照scrambled V-B ON,同时构建NFκB的shRNA作为阳性对照1,合成未经修饰的NFκB结合位点序列ODN作为阳性对照2及其错序对照scrambled ODN;2.将各种载体或小分子分别转染HEK293细胞,MTT试验检测细胞生长状态变化;流式细胞术检测转染后细胞受药物作用后的凋亡情况;实时定量PCR及荧光素酶报告基因实验检测转染后细胞内NFκB下游基因IL-8及MCP-1转录活性变化;3.随机选择在HEK293细胞中有表达的3种转录因子(FOS、AP-2α及RXRA),实时定量PCR检测转染后细胞内这叁种转录因子下游基因转录活性的变化以明确这种封闭效应是否广泛存在;4.实时定量PCR检测转染后细胞内NFκB、FOS、AP-2α及RXRA各转录因子本身转录活性的变化,以明确封闭效应是否系载体的RNAi作用所致,探索载体V-B ON发挥作用的机制。【结果】1.目的载体V-B ON能够抑制HEK293细胞的生长,促进转染后细胞凋亡我们在成功构建各种载体的基础上,将各载体及小分子ODN分别转染HEK293细胞,分别在24小时、48小时及72小时做MTT试验。结果证明,叁个时段均出现相似的趋势,即V-B ON与shRNA对细胞生长的相对抑制率相似(V-B ON:42.3±0.152%、57.2±0.612%、29.1±0.441%; shRNA:54.2±0.231%、64.3±0.246%、31.6±0.225%),而合成的小片段ODN对细胞生长的相对抑制率则较低(ODN:18.2±0.294%、21.1±0.546%、11.6±0.331%)。按MTT试验得出的结论,选择48小时作为以下其他实验的处理时间。各载体及小片段转染细胞24小时后,向各组加依托伯苷(VP-16)至终浓度50umol/L。药物处理24小时后收集细胞做流式细胞术。结果显示,V-B ON与shRNA对转染后细胞凋亡的促进程度即相对抑制率相似(V-B ON:42.2±0.437% vs shRNA:50.2±0.512%),而小片段ODN促进程度则较低(22.3±0.601%)。以上相对抑制率为各载体或分子对各自阴性对照的相对抑制率(V-B ON vs scrambled V-B ON;shRNA vs空白载体;ODN vs scrambled ODN)。MTT试验及流式细胞术均证明V-B ON能够抑制HEK293细胞生长,促进其凋亡,效果与shRNA相似。2. V-B ON能够影响转染后细胞内NFκB、FOS、AP-2α及RXRA各因子下游基因转录成功构建了NFκB下游基因IL-8及MCP-1的荧光素酶报告基因载体。报告基因分析证明,转染V-B ON后细胞内IL-8及MCP-1的转录活性明显较阴性对照组降低。成功构建FOS、AP-2α及RXRA等因子的相关载体(V-B ON、scrambledV-B ON及shRNA)。将NFκB、FOS、AP-2α及RXRA等因子的各载体或小分子分别转染细胞,提取RNA,反转录并做实时定量PCR(SYBR Green)。结果显示,各因子下游基因mRNA表达出现程度不一的抑制(转录因子抑制其表达者则是活性升高)。V-B ON与shRNA的抑制率相似,而小片段ODN效果较差。3. V-B ON并不会影响其相应转录因子在转染后细胞内的转录活性,说明V-B ON至少并非通过对相应转录因子的RNA干扰来发挥作用NFκB、FOS、AP-2α及RXRA等因子的各载体或小分子分别转染细胞,提取RNA,反转录并做实时定量PCR,检测四种转录因子本身转录活性的变化。结果显示,与错序对照相比,V-B ON未表现出明显的抑制效果,而shRNA对各分子活性的抑制则很明显。小片段ODN对各分子活性亦无明显影响。【结论】本研究首次提出能够表达与某转录因子结合位点序列相似的双链RNA的载体可能具有与转录因子诱饵策略中ODN相似的转录因子封闭功能的假说,提供了该类载体封闭相应转录因子活性的功能性证据,并初步探讨了其可能机制。这种载体很可能是通过其表达的序列上与某转录因子结合位点相似的双链RNA发挥ODN样作用的。这些发现有助于提高对RNAi及TFD策略的进一步认识,并可能为分子生物学提供新的有力工具。(本文来源于《第四军医大学》期刊2009-04-01）
徐晓云,李彬,蔡建辉,王凤安[6]（2007）在《核因子-κB“诱饵性”寡核苷酸抑制LPS诱导的肠上皮细胞TLR4、IL-8的表达》一文中研究指出目的:研究NF-κBdecoy寡核苷酸对LPS诱导结肠癌细胞SW480后,对TLR4、IL-8表达的影响。方法:体外培养SW480细胞,用LPS(10μg/L)刺激3h后,用脂质体lipofectin2000介导NF-κBdecoyODNs转染6h,收集细胞上清液,用ELISA法检测IL-8;提取细胞mRNA,经RT-PCR法检测TLR4 mRNA、IL-8 mRNA的表达。并设对照组、ScrambledODNs组、lipofectin2000组进行比较。结果:LPS刺激后TLR4 mRNA、IL-8 mRNA和IL-8的表达明显强于对照组;用NF-κBdecoy寡核苷酸干预,可以明显抑制TLR4 mRNA、IL-8 mRNA和IL-8的表达。而ScrambledODNs组和转染剂lipofectin2000组对其没有明显影响。结论:NF-κBdecoyODNs有望成为治疗IBD的一种新型基因药品。(本文来源于《中国病理生理杂志》期刊2007年05期）
刘伟,余佩武,安杰,张超,赵永亮[7]（2007）在《STAT3诱饵寡核苷酸抑制人胃癌细胞裸鼠腹腔种植的初步研究》一文中研究指出目的通过研究STAT3诱饵寡核苷酸对人胃癌MKN45细胞增生及荷瘤裸鼠的作用,探讨其对人胃癌细胞株裸鼠腹腔种植转移的影响。方法以人胃癌细胞MKN45为对象,四甲基偶氮唑蓝(methyl thiazolyl tetralolium,MTT)法检测STAT3诱饵寡核苷酸对肿瘤细胞的增殖抑制效应,凝胶迟滞电泳法(electrophoretic mobility shift assay,EMSA)检测各组细胞STAT3DNA结合活性。裸鼠随机分为4组,将不同方法处理的胃癌细胞接种裸鼠腹腔,观察各组裸鼠的腹腔肿瘤生成、腹水产生、死亡率及生存情况。结果①STAT3诱饵寡核苷酸对人胃癌细胞生长的抑制作用呈时间依赖性。②STAT3诱饵寡核苷酸可特异性抑制胃癌细胞STAT3的DNA结合活性。③STAT3诱饵寡核苷酸能明显减少裸鼠腹水产生,降低荷瘤鼠的死亡率,延长荷瘤鼠的生存期,与其他组相比有显着性差异(P<0.05)。结论STAT3诱饵寡核苷酸对人胃癌裸鼠腹腔种植有明显的抑制作用。(本文来源于《第叁军医大学学报》期刊2007年07期）
刘伟,余佩武,安杰,张超,赵永亮[8]（2007）在《转染STAT3诱饵寡核苷酸对人胃癌细胞的影响》一文中研究指出目的通过研究STAT3诱饵寡核苷酸对人胃腺癌MKN45细胞增生活性及其MMP-2,CD44v6和ICAM-1表达的影响,寻求胃癌治疗中的新靶点。方法以人胃癌细胞MKN45为对象,体外药物敏感实验(MTT)法检测STAT3诱饵寡核苷酸对肿瘤细胞的增殖抑制效应,免疫组化S-P法检测胃癌细胞MMP-2,CD44v6和ICAM-1表达变化情况。结果(1)STAT3诱饵寡核苷酸对人胃癌细胞生长的抑制作用呈时间依赖性;(2)STAT3诱饵寡核苷酸可明显抑制胃癌细胞株细胞MMP-2,CD44v6和ICAM-1的表达。结论STAT3诱饵寡核苷酸可通过抑制胃癌细胞的分裂和增殖,抑制胃癌细胞MMP-2,CD44v6和ICAM-1的表达,干扰肿瘤的转移与复发。(本文来源于《重庆医学》期刊2007年02期）
甘卫华,陈荣华,费莉,潘晓勤[9]（2006）在《激活蛋白1诱饵寡核苷酸对肾小管上皮细胞转化生长因子β1和白介素1β基因及蛋白表达的影响》一文中研究指出核转录因子激活蛋白1(AP-1)在肾小管上皮细胞的活化、炎症介质产生的信号转导中起着重要作用。诱饵(decoy)核酸技术作为一个新的基因治疗策略,可特异性地阻断核转录因子的活性而抑制下游基因的表达,也极可能成为有效治疗肾脏疾病的新方法。本研究借助阳离子(本文来源于《中华肾脏病杂志》期刊2006年11期）
吴礼国,甘华田,欧阳钦,彭兰,张蒙[10]（2006）在《核因子κB“诱饵”寡核苷酸对小鼠葡聚糖硫酸钠结肠炎的影响》一文中研究指出目的探讨核因子κB“诱饵”寡核苷酸(NF-κB Decoy ODN)对葡聚糖硫酸钠(DSS)结肠炎的影响,为寻找一种治疗溃疡性结肠炎(UC)的新药提供实验依据。方法36只BALB/C小鼠按编号抽签随机分为:正常对照组;DSS+NF-κB“诱饵”ODN组;DSS+错配物ODN组;DSS+生理盐水组,每组9只。方法(1)测定各组小鼠血清中尿素氮、肌酐、随机血糖、丙氨酸氨基转移酶、天冬氨酸氨基转移酶浓度。(2)取小鼠结肠组织进行大体及组织形态学观察。(3)免疫组织化学染色观察NF-κB p65在结肠黏膜细胞内的表达。(4)酶联免疫吸附法(ELISA)测定结肠黏膜组织中肿瘤坏死因子α(TNF-α)的含量。(5)共聚焦显微镜观测NF-κB“诱饵”ODN在小鼠结肠黏膜内的分布。结果(1)5%DSS处理的3组小鼠的DAI评分和组织学评分及肠黏膜组织内TNF-α表达均明显高于正常对照组(均P<0·05);而NF-κB“诱饵”ODN组的上述指标均明显低于错义NF-κB“诱饵”ODN组和生理盐水组(均P<0·01)。(2)5%DSS处理的3组小鼠其肠黏膜组织NF-κB p65的表达以胞核为主,而且这3组间NF-κB p65胞核表达差异无统计学意义。相反,正常对照组小鼠NF-κB p65以胞质表达为主。(3)NF-κB诱饵ODN可有效进入小鼠结肠黏膜层和黏膜下层组织。(4)各实验组小鼠肝、肾功能及血糖比较差异无统计学意义。结论NF-κB“诱饵”ODN对小鼠DSS结肠炎有较好的保护作用。(本文来源于《中华医学杂志》期刊2006年20期）
诱饵寡核苷酸论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的:探讨NF-κB"诱饵"寡核苷酸对TNBS灌肠诱导BALB/C小鼠模型肠道炎症,NF-κB p65蛋白表达及TNF-α、IL-1β、TGF-βmRNA表达的影响,研究其对实验性结肠炎的治疗效果及机制。方法:将40只BALB/C小鼠随机分为正常对照组(NC组)、模型对照组(TNBS组)、NF-κB p65错义寡核苷酸组(MSODN组)和NF-κB"诱饵"寡核苷酸组(Decoy ODN组),采用2,4,6-叁硝基苯磺酸(TNBS)灌肠造模。造模24 h后对各组进行相应灌肠治疗,光镜下观察肠黏膜炎症并评分,免疫组化检测各组小鼠肠黏膜NF-κB p65蛋白表达,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测各组小鼠结肠组织TNF-α、IL-1β、TGF-βmRNA表达。结果:Decoy ODN组小鼠在结肠炎症评分较TNBS组和MSODN组明显改善(P<0.05)。Decoy ODN组小鼠肠黏膜NF-κB p65蛋白表达与NC组和MSODN组比较无明显差异(P>0.05)。Decoy ODN组小鼠结肠组织TNF-α、IL-1β、TGF-βmRNA的表达水平较TNBS组和MSODN组明显减少(P<0.05)。结论 :NF-κB Decoy ODN对小鼠TNBS结肠炎有较好的治疗作用,其作用机制可能是通过下调炎性因子TNF-α、IL-1β、TGF-β的表达实现的。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
诱饵寡核苷酸论文参考文献
[1].王磊,李立峰,柳芳莉,朱雯,卢强.超声靶向微泡联合超声辐照介导的STAT3诱饵寡核苷酸对食管鳞状细胞癌生长的影响[J].现代预防医学.2018
[2].方年富,冷芳,张静,李弼民.NF-κB“诱饵”寡核苷酸对TNBS诱导小鼠结肠炎的影响[J].实用医学杂志.2014
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标签：超声微泡; 超声辐照; STAT3诱饵寡核苷酸; 食管鳞癌;