本文主要研究内容
作者王瑞英,余飞,刘万卉（2019）在《13C6-酪氨酸标记的蛋清溶菌酶的表达及NMR测定》一文中研究指出：针对蛋白质核磁共振(NMR)信号复杂难以解析的问题,选用选择性标记方法可简化蛋白质NMR谱图.本实验以蛋清溶菌酶(HEL)为目标蛋白,构建了p ET-HEL蛋白表达载体,转入到大肠杆菌Ε. coli BL21(DE3)中,得到重组菌株.然后通过改变诱导温度、诱导浓度以及诱导时间等条件来优化HEL在大肠杆菌Ε. coli BL21(DE3)中的表达条件,通过SDS-PAGE电泳分析,确定了最佳表达条件:37℃、0. 4 mmol/L IPTG诱导8 h.按最佳条件于诱导前加入13C6-酪氨酸进行选择性标记,扩大表达,经过变复性处理与Ni柱纯化后,获得选择性标记的HEL.进一步制备标记蛋白核磁样品进行测定,得到简化的NMR谱.本研究为采用NMR简化分析蛋白质的结构奠定了基础.
Abstract
zhen dui dan bai zhi he ci gong zhen (NMR)xin hao fu za nan yi jie xi de wen ti ,shua yong shua ze xing biao ji fang fa ke jian hua dan bai zhi NMRpu tu .ben shi yan yi dan qing rong jun mei (HEL)wei mu biao dan bai ,gou jian le p ET-HELdan bai biao da zai ti ,zhuai ru dao da chang gan jun Ε. coli BL21(DE3)zhong ,de dao chong zu jun zhu .ran hou tong guo gai bian you dao wen du 、you dao nong du yi ji you dao shi jian deng tiao jian lai you hua HELzai da chang gan jun Ε. coli BL21(DE3)zhong de biao da tiao jian ,tong guo SDS-PAGEdian yong fen xi ,que ding le zui jia biao da tiao jian :37℃、0. 4 mmol/L IPTGyou dao 8 h.an zui jia tiao jian yu you dao qian jia ru 13C6-lao an suan jin hang shua ze xing biao ji ,kuo da biao da ,jing guo bian fu xing chu li yu Nizhu chun hua hou ,huo de shua ze xing biao ji de HEL.jin yi bu zhi bei biao ji dan bai he ci yang pin jin hang ce ding ,de dao jian hua de NMRpu .ben yan jiu wei cai yong NMRjian hua fen xi dan bai zhi de jie gou dian ding le ji chu .
论文参考文献
论文详细介绍
论文作者分别是来自烟台大学学报(自然科学与工程版)的王瑞英,余飞,刘万卉，发表于刊物烟台大学学报(自然科学与工程版)2019年03期论文，是一篇关于选择性标记论文,蛋清溶菌酶论文,酪氨酸论文,蛋白质的表达纯化论文,包涵体论文,烟台大学学报(自然科学与工程版)2019年03期论文的文章。本文可供学术参考使用，各位学者可以免费参考阅读下载，文章观点不代表本站观点，资料来自烟台大学学报(自然科学与工程版)2019年03期论文网站，若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权，请联系我们删除。
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