导读:本文包含了正负筛选论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:基因打靶,正负筛选,codA,DT-A
正负筛选论文文献综述
李珊珊,安书红,刘昱辉[1]（2011）在《植物基因打靶中正负筛选系统的研究》一文中研究指出基因打靶是反向遗传学研究的重要工具,在植物基因功能研究等方面具有重要意义。正负筛选系统是一种筛选发生正确基因打靶转化株的方法,能够减少筛选的工作量,使植物基因打靶效率大大提高。通过近些年的研究改进,正负筛选在植物基因打靶研究中的应用逐渐成熟,就植物基因打靶研究中正负筛选系统的原理及研究进展进行综述,对今后的基因打靶研究具有重要的参考价值。(本文来源于《中国农业科技导报》期刊2011年06期）
常宏宇,宫锋,季守平,鲍国强,李素波[2]（2010）在《利用正负筛选打靶载体在猪肾细胞系PK-15细胞中敲除GGTA1基因》一文中研究指出目的半乳糖-α1,3-半乳糖(αGal)表位是猪到人异种移植中引起排斥反应的主要异种抗原。通过同源重组敲除猪α1,3-半乳糖基转移酶基因可从异种移植物表面彻底清除αGal表位。本研究的目的在于利用正负筛选打靶载体定向缺失猪GGTA1基因。方法构建猪α1,3-半乳糖基转移酶基因正负筛选打靶载体pSL/GT,载体包含了正负筛选标记基因neo和tk,打靶载体线性化后用脂质体包裹转染猪肾细胞系PK-15细胞,利用G418和GANC进行抗性细胞克隆的药物筛选,挑选抗性克隆进行PCR及Southern杂交鉴定。结果共得到436个抗性细胞克隆,其中31个克隆PCR结果阳性。经Southern杂交鉴定证实,其中1个克隆发生了同源重组,为杂合子。结论本研究构建了有效的猪GGTA1基因的正负筛选打靶载体pSL/GT,并利用其在猪肾细胞系PK-15细胞中定向缺失GGTA1基因,获得了杂合子GGTA1(+/-)PK-15细胞。(本文来源于《军事医学科学院院刊》期刊2010年03期）
酆孟洁,邱晨,赖映君,陈彩霞,李富荣[3]（2005）在《免疫磁珠正负筛选在分离外周血CD8~+和CD4~+T细胞亚群中的应用》一文中研究指出为了探讨免疫磁珠分离技术及其正、负筛选策略在人外周血T淋巴细胞亚群分离提纯中的应用,应用补 体细胞毒法和正负筛选策略相结合的免疫磁珠法分离健康人外周血中CD4+T细胞、CD8+T细胞;用流式细胞术法 比较两种分离方法分离的靶细胞纯度;台盼蓝染色染色法和细胞培养后平板计数法检测免疫磁珠法分离的CD4+T 细胞、CD8+T细胞的活力和生长情况。结果表明:补体细胞毒法分离后CD4+T细胞纯度、CD8+T细胞纯度分别为 (76.0±2.8)％和(77.0±3.0)％,明显高于分离前的(34.6±3.7)％和(32.0±3.7)％(P<0.05);免疫磁殊法 分离后CD4+T细胞和CD8+T细胞纯度为(94.2±1.4)％和(93.8±3.0)％,显着高于补体细胞毒法(P<0.05)。 磁珠分离法获得的CD4+T细胞、CD8+T细胞细胞活力分别为(96.0±2.4)％和(95.0±3.6)％;细胞计数法表明 磁珠分离法获得的CD4+T细胞、CD8+T细胞对植物血凝素(PHA)的刺激保持了良好的增殖能力。结论:免疫磁珠 法较补体细胞毒法分离效率高,不影响细胞的活力和增殖能力;正负筛选策略相结合的免疫磁珠法在同时获取高 纯度的CD4+T细胞、CD8+T细胞时可获得满意效果,尤其适应于只有较少量血标本的情况,为进一步研究CD4+T 细胞、CD8+T细胞的生物学特性创造了条件。(本文来源于《中国实验血液学杂志》期刊2005年02期）
正负筛选论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的半乳糖-α1,3-半乳糖(αGal)表位是猪到人异种移植中引起排斥反应的主要异种抗原。通过同源重组敲除猪α1,3-半乳糖基转移酶基因可从异种移植物表面彻底清除αGal表位。本研究的目的在于利用正负筛选打靶载体定向缺失猪GGTA1基因。方法构建猪α1,3-半乳糖基转移酶基因正负筛选打靶载体pSL/GT,载体包含了正负筛选标记基因neo和tk,打靶载体线性化后用脂质体包裹转染猪肾细胞系PK-15细胞,利用G418和GANC进行抗性细胞克隆的药物筛选,挑选抗性克隆进行PCR及Southern杂交鉴定。结果共得到436个抗性细胞克隆,其中31个克隆PCR结果阳性。经Southern杂交鉴定证实,其中1个克隆发生了同源重组,为杂合子。结论本研究构建了有效的猪GGTA1基因的正负筛选打靶载体pSL/GT,并利用其在猪肾细胞系PK-15细胞中定向缺失GGTA1基因,获得了杂合子GGTA1(+/-)PK-15细胞。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
正负筛选论文参考文献
[1].李珊珊,安书红,刘昱辉.植物基因打靶中正负筛选系统的研究[J].中国农业科技导报.2011
[2].常宏宇,宫锋,季守平,鲍国强,李素波.利用正负筛选打靶载体在猪肾细胞系PK-15细胞中敲除GGTA1基因[J].军事医学科学院院刊.2010
[3].酆孟洁,邱晨,赖映君,陈彩霞,李富荣.免疫磁珠正负筛选在分离外周血CD8~+和CD4~+T细胞亚群中的应用[J].中国实验血液学杂志.2005