导读:本文包含了外周血采集物论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:巨细胞病毒特异性T细胞,细胞因子,外周血干细胞采集物,体外扩增
外周血采集物论文文献综述
夏瑜[1]（2019）在《联合多种细胞因子体外扩增外周血干细胞采集物来源的CMV特异性T细胞》一文中研究指出目的建立巨细胞病毒特异性T淋巴细胞(cytomegalovirus specific T cells,CMV CTL)体外扩增的方法,通过实验证明经G-CSF动员的供者外周血干细胞采集物来源的CMV CTL具有抗巨细胞病毒作用,为临床开展过继免疫疗法治疗巨细胞病毒感染提供新的依据。方法用1μg/mL全长巨细胞病毒PP65(CMV pp65)多肽体外多轮刺激由粒细胞-集落刺激因子(granulocyte colony-stimulating factor,G-CSF)动员的外周血干细胞采集物中分离的单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMC),同时加入白细胞介素2(interleukin 2,IL-2)、IL-15、IL-21扩增20天。在培养第7天,加入丝裂霉素处理的负载CMV pp65抗原肽的自体PBMC,第10天补充经γ射线辐照处理并负载CMV pp65抗原肽的PBMC和CD3(OKT3);对照组为未加入抗原肽进行扩增的PBMC组。采用多色流式细胞术分别对扩增前、扩增后的T淋巴细胞表型及细胞内肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和γ干扰素(interferon-γ,IFN-γ)的分泌水平进行分析,同时检测CD107a脱颗粒杀伤功能,并通过ELISA检测供者血清中CMV IgM/IgG抗体滴度水平。结果培养后可以收集得到(165.26±6.14)×10~6个细胞,其中CD3~+T细胞占89.21%,CD8~+T细胞占CD3~+T细胞的(43.54±28.03)%,CD4~+T细胞占CD3~+T细胞(34.23±26.18)%。获得的CD3~+T细胞以效应记忆性T细胞(effector memory T cells,T_(EM))为主,且扩增培养后的CD8~+和CD4~+T_(EM)比例较培养前显着增高。另外,培养后干细胞样记忆性T细胞(stem cell-like memory T cells,T_(SCM))和组织原位记忆T细胞(tissue-resident memory T cells,T_(RM))的比例均较培养前显着增加。在功能实验中,培养后得到的IFN-γ~+分泌型CMV特异性CD8~+T细胞群比例较扩增前明显增加,TNF-α~+CMV特异性CD8~+T细胞比例呈增长趋势;能够分别分泌IFN-γ和TNF-α的CMV特异性CD4~+T细胞群比例与培养前无明显变化。培养后CD8~+CMV特异性T细胞的CD107a表达水平为(3.28±1.97)%,与培养前无显着统计学差异。此外,供者体内CMV IgG水平与供者年龄呈现正相关,且在该培养体系下,IFN-γ~+和TNF-α~+CMV特异性T细胞扩增比例与供者年龄呈负相关。结论本研究成功建立了在体外有效扩增CMV CTL的方法,同时证明了由G-CSF动员的供者外周血干细胞采集物扩增得到的CMV CTL具有抗巨细胞病毒作用。(本文来源于《重庆医科大学》期刊2019-05-01）
夏瑜,张在利,李莎,詹茜,肖青[2]（2019）在《外周血干细胞采集物来源的巨细胞病毒特异性T细胞的体外培养和扩增》一文中研究指出目的建立巨细胞病毒特异性细胞毒性T淋巴细胞(CMV CTL)体外扩增的方法。方法用1μg/mL全长巨细胞病毒pp65(CMV pp65)多肽体外多轮刺激由粒细胞-集落刺激因子(G-CSF)动员的外周血干细胞采集物中分离的单个核细胞(PBMC),同时加入白细胞介素2(IL-2)、 IL-15、 IL-21扩增20 d。在培养第7天,加入丝裂霉素处理的负载CMV pp65抗原肽的自体PBMC,第10天补充经γ射线辐照处理并负载CMV pp65抗原肽的PBMC和CD3(OKT3);对照组为未加入抗原肽进行扩增的PBMC组。采用多色流式细胞术分别对扩增前、扩增后的T淋巴细胞表型及细胞内肿瘤坏死因子α(TNF-α)和γ干扰素(IFN-γ)的分泌水平进行分析, ELISA检测供者血清中CMV IgM/IgG抗体滴度水平。结果培养后可以收集得到(165.26±6.14)×10~6个细胞,其中CD3~+ T细胞占89.21%, CD8~+ T细胞占CD3~+ T细胞的(43.54±28.03)%, CD4~+ T细胞占CD3~+ T细胞(34.23±26.18)%。获得的CD3~+ T细胞以效应记忆性T细胞(T_(EM))为主,且扩增培养后的CD8~+和CD4~+ T_(EM)比例较培养前显着增高。另外,培养后干细胞样记忆性T细胞(T_(SCM))和组织原位记忆T细胞(T_(RM))的比例均较培养前显着增加。在功能实验中,培养后得到的IFN-γ~+的分泌型CMV特异性CD8~+ T细胞群比例较扩增前明显增加, TNF-α~+ CMV特异性CD8~+ T细胞比例呈增长趋势;能够分别分泌IFN-γ和TNF-α的CMV特异性CD4~+ T细胞群比例与培养前无明显变化。此外,供者体内CMV IgG水平与供者年龄呈现正相关,且在该培养体系下, IFN-γ~+和TNF-α~+ CMV特异性T细胞扩增比例与供者年龄呈负相关。结论本研究成功建立了在体外有效的培养和扩增CMV CTL的方法。(本文来源于《细胞与分子免疫学杂志》期刊2019年01期）
王萌,任汉云,孙慧,谢新生,马杰[3]（2016）在《动员后骨髓和外周血采集物中T细胞CCR5表达的对比研究》一文中研究指出目的:研究动员后骨髓和外周血采集物中T细胞CCR5表达的异同,分析移植物中T细胞CCR5的表达与移植后急性移植物抗宿主病(GVHD)发生的相关性。方法:选取行亲缘异基因造血干细胞移植的46对供受者为研究对象,应用重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)动员后,测定并比较骨髓(G-BM)和外周血采集物(G-PB)中CCR5~+T细胞的相对比例和绝对数量,然后分析输注的CCR5~+T细胞数量和移植后Ⅱ-Ⅳ度急性GVHD发生的相关性。结果:G-PB中CD3~+CD4~+及CD3~+CD8~+T细胞的CCR5~+细胞所占的比例均明显低于G-BM(P<0.01),但G-PB中CD3~+CD4~+CCR5~+及CD3~+CD8~+CCR5~+T细胞的绝对数均是骨髓中的15-25倍,且输注的CCR5~+T细胞的绝对数量不是受者发生急性GVHD的危险因素(P>0.05)。结论:G-PB和G-BM中CCR5~+T细胞比例和绝对数量存在显着差别,不同来源的干细胞具有不同的免疫特性。此外,移植后急性GVHD的发生与移植物中CCR5~+T细胞的数量无关,而可能受其相对比例影响。(本文来源于《中国实验血液学杂志》期刊2016年03期）
徐玲玲,赵翔宇,黄晓军[4]（2010）在《rhG-CSF对供者骨髓和外周血采集物中Th17细胞的影响》一文中研究指出本研究探讨人重组粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)供者体内应用对骨髓采集物(GBM)和外周血采集物(GPB)中Th17细胞的影响。对25名亲缘供者皮下注射rhG-CSF5μg/(kg.d),连用5天,于第4、5天分别采集骨髓和外周血,注射前留取部分供者稳态骨髓(steady state bone mavrow,SSBM)和稳态外周血(steady state peripheral blood,SSPB)。采用流式细胞术测定动员前后供者骨髓和外周血中T细胞分泌IL-17的变化。结果显示:rhG-CSF体内应用后供者骨髓中CD4+T细胞和CD8+T细胞分泌Il-17的能力较稳态骨髓明显下降(GBM vs SSBM Th17/CD4+T,0.74%±0.27%vs1.78%±1.19%,p<0.05;Tc17/CD8+T,0.19%±0.16% vs 0.36%±0.37%,p<0.05),外周血中的变化与骨髓相同(GPBvsSSPBTh17/CD4+ T,1.82%±0.91%vs3.26%±1.89%,p<0.01;Tc17/CD8+T,0.21%±0.17%vs0.44%±0.28%,p<0.01)。25例供者GBM与GPB相比,GPB中Th17/CD4+ T和Tc17/CD8+ T的比值均高于GBM(p<0.05,p<0.01)。结论:体内应用rhG-CSF能够抑制供者骨髓及外周血采集物中Th17细胞的产生,它可能是GPB和/或GBM混合移植对GVHD的发生率没有增加的部分原因。(本文来源于《中国实验血液学杂志》期刊2010年06期）
谢振卿,郝牧,李斯丹,邹德慧,孟恒星[5]（2009）在《动员后外周血采集物CD34+细胞黏附分子表达水平与移植后造血重建的临床相关性研究》一文中研究指出目的:比较自体移植患者和异体移植正常供者动员后采集物中CD34+细胞表面黏附分子表达水平,探讨其与造血重建的相关性。方法:中国医学科学院血液病医院的自体移植患者和异体移植供者,患者接受与其疾病相关化疗联合每天10ug/(本文来源于《第12届全国实验血液学会议论文摘要》期刊2009-11-05）
丁胜,王红祥,赵湜,王中京,邓琳[6]（2009）在《糖尿病周围血管病患者外周血干细胞采集物CD34~+细胞数相关因素分析》一文中研究指出近年来,随着糖尿病患病率的明显增高,糖尿病周围血管病变发病率也明显上升。它常导致足部溃疡或坏疽而截肢致残。干细胞移植技术在糖尿病周围血管病变治疗中,取得了显着的成效。血管内皮祖细胞(endothelial progenitor cell,EPC)是一群形(本文来源于《临床荟萃》期刊2009年13期）
上官志敏[7]（2009）在《应用TGF-β_1从rhG-CSF动员的外周血采集物中诱导产生CD4+CD25+调节性T细胞》一文中研究指出目的:1)明确免疫磁珠法从rhG-CSF(human recombination granulocyte colony stimulating factor ,人重组的粒细胞集落刺激因子)动员的外周血干细胞采集物中分选CD4+CD25–T细胞和CD4+CD25+T细胞的可行性。2)研究rhG-CSF动员的外周血采集物中CD4+CD25–T细胞经转化生长因子β1(transforming growing factor-β1,TGF-β1)诱导产生CD4+CD25+调节性T细胞的可能性,进一步分析其表型,通过抑制试验评价其在细胞增殖方面的抑制功能。3)证明TGF-β1在CD4+CD25–T细胞转化为CD4+CD25+调节性T细胞中的作用。方法:2007年9月—2008年9月间本院外周血干细胞移植术供者按照常规方法皮下注射rhG-CSF10μg/(kg·d),连续5天,在第5天动员达到高峰时采集外周血干细胞。收集10例采集物,为rhG-CSF动员后的外周血采集物(G-PB)。同时收集外周血干细胞移植术供者rhG-CSF动员前外周血(PB)10例。用免疫磁珠法(magnetic activated cell sorting,MACS)分选出CD4+CD25-T细胞,评级分选效率,并用TGF-β1进行诱导,分别应用流式细胞术(flow cytometry,FCM)、逆转录PCR(reverse transcription-PCR ,RT-PCR)和细胞增殖、抑制试验测定诱导后细胞的CD25、Foxp3表达和免疫抑制功能,比较2组之间CD4+CD25+T细胞转化率、抑制功能的差异。结果:1)G-PB和PB用MACS的方法可以分选到纯度大于90%的CD4+CD25–T细胞。但是细胞的获得率并没有达到理想水平。2)分选得到的CD4+CD25–T细胞在抗-CD3 McAb和TGF-β1作用下CD25+分子表达不同,经FCM分析,分别为:(77.9±2.3)%和(65.7±4.2)%,差异有统计学意义(P<0.05);3)RT-PCR检测,G-PB和PB来源的CD4+CD25–T细胞经TGF-β1诱导产生的CD4+CD25+T细胞和新鲜分离出的CD4+CD25+T细胞均表达Foxp3,且TGF-β1诱导产生的CD4+CD25+T细胞的Foxp3的表达量更高;4)经抑制试验分析,PB、G-PB来源的CD4+CD25–T细胞经TGF-β1诱导产生的CD4+CD25+T细胞均可以抑制健康献血者的单个核细胞的增殖,表明诱导后的细胞具有免疫抑制功能,3H-TdR掺入试验所得的cpm值分别为:11739±352和18732±437,阳性对照和阴性对照的cpm值为:38283±328、1300±94,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:1)可以采用免疫磁珠法从rhG-CSF动员的外周血干细胞采集物中分选出CD4+CD25–T细胞和CD4+CD25+T细胞。2)TGF-β1在CD4+CD25–T细胞转化为CD4+CD25+调节性T细胞中起到重要作用,可以把来源于PB或G-PB的CD4+CD25–T细胞转化为CD4+CD25+T细胞,并且诱导后的细胞具有免疫抑制功能,RT-PCR显示有Foxp3表达。3)rhG-CSF动员的外周血可作为CD4+CD25+调节性T细胞的重要来源。(本文来源于《安徽医科大学》期刊2009-04-01）
上官志敏,王保龙,梁晓浏,叶书来,陈家萍[8]（2009）在《应用TGF-β_1从rhG-CSF动员的外周血采集物中诱导产生CD4~+ CD25~+调节性T细胞》一文中研究指出目的探讨在人重组的粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)动员的外周血单个核细胞中诱导产生CD4+CD25+调节性T细胞可行性及其表型和功能。方法收集本院外周血干细胞移植术供者rhG-CSF动员前外周血(PB组)和动员后的外周血采集物(G-PB组)各10例,用免疫磁珠法分选出CD4+CD25?T细胞,并用转化生长因子β1(TGF-β1)进行诱导,分别应用流式细胞术、RT-PCR和细胞增殖、抑制试验测定诱导后细胞的CD25、Foxp3表达和免疫抑制功能,比较2组之间CD4+CD25+T细胞转化率、抑制功能的差异。结果1)G-PB和PB来源的CD4+CD25?T细胞在抗-CD3 M cAb和TGF-β1作用下CD25+分子表达不同,分别为:(77.9±2.3)%和(65.7±4.2)%,差异有统计学意义(P<0.05);2)TGF-β1诱导产生的CD4+CD25+T细胞高表达Foxp3;3)PB、G-PB来源的TGF-β1诱导产生的CD4+CD25+T细胞具有免疫抑制功能,cpm值分别为:11 739±352和18 732±437(P<0.05)。结论G-CSF动员的外周血可作为CD4+CD25+调节性T细胞的重要来源。(本文来源于《中国输血杂志》期刊2009年02期）
常英军,赵翔宇,霍明瑞,黄晓军[9]（2009）在《rhG-CSF动员的骨髓和外周血干细胞混合移植物首次采集时供者外周血单核细胞计数反映混合采集物中CD34~+细胞含量》一文中研究指出本研究探讨人重组粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)动员的骨髓和外周血干细胞混合移植健康供者首次干细胞采集时供者外周血单核细胞数量与骨髓/外周血混合采集物中CD34+细胞数量的关系。对70名亲缘健康供者均皮下注射rhG-CSF 5μg/(kg.d),连续5天。第4天和第5天分别采集骨髓和外周血干细胞。首次干细胞采集时用EX2100血细胞分析仪检测供者外周血细胞计数,同时应用流式细胞仪测定骨髓和外周血混合采集物中的CD34+细胞数量。结果表明:rhG-CSF动员的70例供者首次干细胞采集时外周血单核细胞的数量为(1.15±0.60)×109/L;骨髓和外周血采集物中的CD34+细胞总量分别是(5.85±2.93)×107和(1.33±0.77)×108;骨髓和外周血混合采集物的CD34+细胞总量是(1.92±0.86)×108。Pearson和Spearman分析显示首次干细胞采集时供者外周血单核细胞计数(×109/L)与骨髓采集物中CD34+细胞的总量(相关系数:r=0.265,p=0.027)、外周血采集物中CD34+细胞总量(r=0.340,p=0.004)以及混合移植物中CD34+细胞的总量(r=0.398,p=0.001)均存在显着的相关性;多因素分析表明,首次干细胞采集时供者外周血单核细胞计数与骨髓采集物、外周血采集物以及混合移植物中CD34+细胞的总量均呈正相关关系(p值分别为0.027、0.004和0.001)。首次干细胞采集时供者外周血单核细胞数量对混合移植物中CD34+细胞总量预测的敏感性是71%,特异性是70%(p=0.007)。结论:rhG-CSF动员的骨髓和外周血混合移植健康供者首次干细胞采集时外周血单核细胞计数可有效预测输注给受者的CD34+细胞总量即采集效果。(本文来源于《中国实验血液学杂志》期刊2009年01期）
霍明瑞,赵翔宇,常英军,罗小华,黄晓军[10]（2008）在《rhG-CSF动员的外周血采集物与稳态骨髓中CD4~+、CD8~+初始及记忆T细胞亚群的比较》一文中研究指出本研究探讨重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)动员的外周血采集物(G-PB)与稳态骨髓(SS-BM)中CD4+、CD8+初始、记忆T细胞亚群的差异。依据细胞表面CD45RA和CD62L的表达将CD4+、CD8+T细胞划分为初始T细胞(naive,CD45RA+CD62L+)、中心记忆T细胞(central memory,TCM,CD45RA-CD62L+)、效应记忆T细胞(effector memory,TEM,CD45RA-CD62L-)、终末分化效应记忆T细胞(terminally differentiated effector memory,TTD,CD45RA+CD62L-)。用流式细胞仪测定G-PB与SS-BM中CD4+、CD8+初始和记忆T细胞的比例组成,并计算每微升采集物中各细胞亚群的绝对数量。结果表明:G-PB中CD4+、CD8+T细胞的比例组成及CD4+/CD8+比值均高于SS-BM(p<0.05);G-PB中CD4+初始T细胞的比例显着低于SS-BM(p<0.001),而CD4+TEM比例显着高于SS-BM(p<0.001);G-PB中CD8+初始和记忆T细胞亚群的比例与SS-BM无显着差异(p>0.05);与SS-BM相比,G-PB中CD4+CD62L+T细胞的比例明显降低(p=0.001),每微升G-PB移植物中的各淋巴细胞亚群均明显高于SS-BM(p<0.001)。结论:G-PB与SS-BM中CD4+、CD8+初始和记忆T细胞亚群在相对和绝对数量方面存在明显的差异,这种差异可能影响G-PB和SS-BM移植后急性、慢性移植物抗宿主病发生率及其程度的异同。(本文来源于《中国实验血液学杂志》期刊2008年03期）
外周血采集物论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的建立巨细胞病毒特异性细胞毒性T淋巴细胞(CMV CTL)体外扩增的方法。方法用1μg/mL全长巨细胞病毒pp65(CMV pp65)多肽体外多轮刺激由粒细胞-集落刺激因子(G-CSF)动员的外周血干细胞采集物中分离的单个核细胞(PBMC),同时加入白细胞介素2(IL-2)、 IL-15、 IL-21扩增20 d。在培养第7天,加入丝裂霉素处理的负载CMV pp65抗原肽的自体PBMC,第10天补充经γ射线辐照处理并负载CMV pp65抗原肽的PBMC和CD3(OKT3);对照组为未加入抗原肽进行扩增的PBMC组。采用多色流式细胞术分别对扩增前、扩增后的T淋巴细胞表型及细胞内肿瘤坏死因子α(TNF-α)和γ干扰素(IFN-γ)的分泌水平进行分析, ELISA检测供者血清中CMV IgM/IgG抗体滴度水平。结果培养后可以收集得到(165.26±6.14)×10~6个细胞,其中CD3~+ T细胞占89.21%, CD8~+ T细胞占CD3~+ T细胞的(43.54±28.03)%, CD4~+ T细胞占CD3~+ T细胞(34.23±26.18)%。获得的CD3~+ T细胞以效应记忆性T细胞(T_(EM))为主,且扩增培养后的CD8~+和CD4~+ T_(EM)比例较培养前显着增高。另外,培养后干细胞样记忆性T细胞(T_(SCM))和组织原位记忆T细胞(T_(RM))的比例均较培养前显着增加。在功能实验中,培养后得到的IFN-γ~+的分泌型CMV特异性CD8~+ T细胞群比例较扩增前明显增加, TNF-α~+ CMV特异性CD8~+ T细胞比例呈增长趋势;能够分别分泌IFN-γ和TNF-α的CMV特异性CD4~+ T细胞群比例与培养前无明显变化。此外,供者体内CMV IgG水平与供者年龄呈现正相关,且在该培养体系下, IFN-γ~+和TNF-α~+ CMV特异性T细胞扩增比例与供者年龄呈负相关。结论本研究成功建立了在体外有效的培养和扩增CMV CTL的方法。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
外周血采集物论文参考文献
[1].夏瑜.联合多种细胞因子体外扩增外周血干细胞采集物来源的CMV特异性T细胞[D].重庆医科大学.2019
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[6].丁胜,王红祥,赵湜,王中京,邓琳.糖尿病周围血管病患者外周血干细胞采集物CD34~+细胞数相关因素分析[J].临床荟萃.2009
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[8].上官志敏,王保龙,梁晓浏,叶书来,陈家萍.应用TGF-β_1从rhG-CSF动员的外周血采集物中诱导产生CD4~+CD25~+调节性T细胞[J].中国输血杂志.2009
[9].常英军,赵翔宇,霍明瑞,黄晓军.rhG-CSF动员的骨髓和外周血干细胞混合移植物首次采集时供者外周血单核细胞计数反映混合采集物中CD34~+细胞含量[J].中国实验血液学杂志.2009
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