岩沙海葵毒素论文-李骘,刘诣,李力更,王磊,史清文

岩沙海葵毒素论文-李骘,刘诣,李力更,王磊,史清文

导读:本文包含了岩沙海葵毒素论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献,主要关键词:岩沙海葵毒素,化学全合成,海洋药物,天然产物

岩沙海葵毒素论文文献综述

李骘,刘诣,李力更,王磊,史清文[1](2013)在《天然药物化学史话:岩沙海葵毒素的全合成》一文中研究指出岩沙海葵毒素(palytoxin,PTX)是从海洋生物软体珊瑚Palytoa toxicus中发现的具有非常复杂且结构新颖、特殊的天然有机化合物,其化学全合成的成功令化学家叹为观止。主要对岩沙海葵毒素全合成战略做简要介绍。(本文来源于《中草药》期刊2013年18期)

戴悦婵,焦红,王家骥[2](2009)在《岩沙海葵毒素单克隆抗体的制备及其鉴定》一文中研究指出目的建立岩沙海葵毒素(Palytoxin,PTX)高特异性单克隆抗体杂交瘤细胞株。方法将PTX偶联成具有免疫功能的PTX-PDP-KLH完全抗原,免疫雌性6~8周龄Balb/c小鼠,利用传统杂交瘤技术制备PTX单克隆抗体,并通过间接酶联免疫吸附测定(ELISA)方法筛选克隆阳性杂交瘤细胞株。结果获得能稳定分泌抗PTX单克隆抗体的杂交瘤细胞株B8,与载体蛋白没有发生交叉反应。SDS-PAGE分析表明,McAbB8在50KD和25KD处各出现一条条带,与IgG的重链和轻链的大小相符。结论研究制备了特异性单克隆抗体PTX,为进一步建立快速检测、鉴定海产品中岩沙海葵毒素的方法,奠定有效的实验基础。(本文来源于《中国热带医学》期刊2009年06期)

戴悦婵[3](2009)在《抗岩沙海葵毒素单克隆抗体的制备以及鉴定》一文中研究指出目的:岩沙海葵毒素(Palytoxin, PTX)是目前已知毒性最强烈的海洋生物毒素之一,具有作用于神经、肌肉的电压门控钠通道,改变通道的功能,以及对细胞毒性、溶血等多方面的影响。人类在进食经PTX污染的食物后,可导致严重的肌肉疼痛、腰痛、排黑尿等症状,甚至死亡。而目前在我国乃至全球仍未研究出一种针对该毒素的治疗药物,因此PTX的存在对人类的健康安全构成相当大的威胁。本课题通过化学方法制备出PTX的人工抗原,将其与弗氏佐剂混合后对BALB/c小鼠进行免疫,产生抗PTX抗血清,并以较为成熟的单克隆抗体杂交瘤技术,建立分泌岩沙海葵毒素的高特异性单克隆抗体杂交瘤细胞株。该细胞株的建立为日后在实际工作中对PTX的检测提供有利的工具。方法:本课题分叁部分进行:1.抗PTX的抗血清的制备将PTX与载体蛋白KLH、BSA偶联成具有免疫功能的PTX-PDP-KLH免疫抗原和PTX-PDP-BSA检测抗原。用PTX-PDP-KLH免疫雌性6~8周龄BALB/c小鼠,采用眼眶后静脉丛取血获得抗PTX抗血清,对其效价进行间接ELISA法检测,以健康BALB/c小鼠血清为对照组。2.分泌抗岩沙海葵毒素McAb的杂交瘤制备将能分泌出抗PTX抗血清的免疫小鼠脾脏细胞通过传统杂交瘤技术与NS-1骨髓瘤细胞进行细胞融合,并通过间接ELISA方法筛选克隆阳性杂交瘤细胞株,阳性细胞对其扩大培养并冻存。3.抗岩沙海葵毒素单克隆抗体的检测及生产将成功分泌抗PTX单克隆抗体的融合细胞进行核型分析、特异性分析后,注射进健康BALB/c小鼠体内,14天左右产生腹水。腹水经硫酸铵沉淀、透析、rProteinA亲和层析等方法纯化后得到腹水型抗体。结果: 1.利用连续紫外分光光度计检测出在267 nm时偶联物PTX-PDP-KLH出现峰值,而PTX-PDP-BSA在273 nm时出现峰值。将PTX-PDP-KLH对BALB/c小鼠进行皮下、腹部多点免疫,以PTX-PDP-BSA作为检测抗原进行包被,对其抗血清进行ELISA检测,所得结果发现注射了免疫抗原的小鼠抗血清与对照组有明显差别(1: 2500时OD>7)。2.杂交瘤细胞融合率为21.43 % ,其阳性克隆率为9.1 % ,经过间接ELISA方法反复筛选,获得能稳定分泌抗PTX单克隆抗体的杂交瘤细胞株A6和B8。3.核型分析发现,抗PTX单克隆抗体杂交瘤细胞的染色体数目在94~104之间,特异性检测中PTX与载体蛋白KLH、BSA没有发生交叉反应,显示该抗体为抗PTX的特异性抗体。细胞免疫小鼠后产生4~5 ml的腹水,经过分离纯化后,SDS-PAGE分析表明,抗PTX单克隆抗体细胞株在50 kD和25 kD处各出现一条蛋白条带,与IgG的重链和轻链的大小相符。结论:1.本研究通过化学方法成功将PTX和载体蛋白KLH、BSA偶联,克服了PTX因分子量小而无法刺激机体产生抗体的因素,偶联后的PTX-PDP-KLH具有免疫原性,从而诱导小鼠产生抗PTX抗血清。2.通过杂交瘤技术获得A6和B8两株能稳定分泌抗PTX的单克隆抗体的杂交瘤细胞株,该细胞株分泌的单克隆抗体可与PTX特异性结合,为PTX的鉴定和检测提供坚实的基础。(本文来源于《广州医学院》期刊2009-06-01)

焦红,刘必勇,王家骥,林峰[4](2005)在《岩沙海葵毒素直接酶联免疫吸附检测方法的研究》一文中研究指出[目的]制备岩沙海葵毒素(PTX)多抗血清,纯化并标记辣根过氧化物酶,建立PTX多克隆直接酶联免疫吸附检测方法。[方法]将纯品毒素PTX与大分子蛋白质匙眼血蓝蛋白(KLH)分别巯基化,用化学法偶联二者成为半抗原,以其诱导BALB/c小鼠产生多价抗血清;以辣根过氧化物酶(HRP)标记PTX多抗血清;以PTX纯毒素作为包被抗原,HRP标记的多价抗血清为酶标抗体,建立PTX多抗直接ELISA检测方法。[结果]制备的抗PTX多价抗血清,经纯化后与HRP标记成功;建立的PTX多抗直接ELISA检测法,其最佳工作浓度为18∶0。[结论]本研究制备的PTX人工免疫抗原具有较高的特异性和免疫原性,多克隆抗体为特异性抗PTX抗体,PTX多抗直接ELISA检测法对PTX的检测可达到5~10ug水平,该法应用于海产品中PTX快速检测的结果,待进一步研究。(本文来源于《检验检疫科学》期刊2005年S1期)

刘必勇,焦红,王家骥[5](2005)在《岩沙海葵毒素人工抗原的合成及鉴定》一文中研究指出目的制备岩沙海葵毒素(PTX)的人工抗原和抗血清,为建立PTX的酶联免疫检测方法提供技术基础。方法用小分子succinimidyl3-(2-pyridyldithio)propionate(SPDP)将PTX巯基化成半抗原PTX-PDP,用2-iminothiolane将大分子载体蛋白质匙眼血蓝蛋白(KLH)巯基化成KLH-SH,再将PTX-PDP和KLH-SH反应合成人工抗原PTX-PDP-KLH免疫雌性6~8周龄Balb/c小鼠,进行多抗的制备。用同样的方法制备酶联免疫反应之包被抗原PTX-PDP-BSA,用于检测血清抗体效价。结果根据紫外检测图谱,PTX的最大吸收波长在264nm处,KLH及BSA的最大吸收波长在278及279nm处,而合成的人工抗原PTX-PDP-KLH和PTX-PDP-BSA的最大吸收波长分别在267和273nm处。抗血清经间接酶联免疫吸附法检测,效价达到1∶3200,且与正常Balb/c小鼠、昆明种小鼠及兔血清间无交叉反应。结论合成的人工抗原纯度高,具有较好的免疫原性。(本文来源于《中国生化药物杂志》期刊2005年04期)

焦红,刘必勇,郭素珍,席静,林峰[6](2005)在《海洋生物岩沙海葵毒素血清免疫抗体的制备》一文中研究指出〔目的〕 为建立岩沙海葵毒素(PTX)的酶联免疫快速测试方法提供特异性免疫抗体。〔方法〕 巯基化标准PTX成半抗原PTX -PDP ;巯基化匙眼血蓝蛋白(KLH)成KLH -SH ,两者合成反应人工抗原PTX -PDP -KLH。用PTX -PDP -KLH免疫雌性6~8周龄Balb/c小鼠,制备PTX多克隆抗体。用同样方法制备包被抗原PTX-PDP -BSA ,用以检测血清抗体效价。〔结果〕 紫外检测标准品PTX的最大吸收波长在2 6 4nm处,纯品KLH及BSA的最大吸收波长在2 78nm及2 79nm处,小鼠血清多克隆抗体PTX -PDP -KLH和PTX -PDP -BSA的最大吸收波长分别在2 6 7nm和2 73nm处。抗血清效价达到1:32 0 0 ,与正常Balb/c小鼠、昆明小鼠及兔血清间无交叉反应。〔结论〕 合成的PTX人工抗原纯度高,成功制备PTX多克隆抗体血清。(本文来源于《检验检疫科学》期刊2005年02期)

周维善[7](1981)在《沙海葵毒素的结构测定成功》一文中研究指出沙海葵毒素(Palytoxin)是从海洋Palythoa属的腔肠动物所得的一个剧毒的、水溶性物质。它是Polyketide,而不是多醣或多肽。除天然高分子化合物外,它是分子最大和最复杂的化合物之一。其毒性远远超过河豚毒素和海藻毒素。它对动物具有独特的生物作用,例如具有强烈的血管收缩和冠状痉挛作用。鼠的腹腔注射半致死量(LD_(50))是0.4微克/公斤。双键氢化后或用0.1NNaOH处理后,其毒性完全消失。美国Moore是研究夏威夷(Hawaiian)Palythoa toxica和大溪地(Tahiti)p.sp.的。日本Hirata是研究冲绳岛(Okinawa)的P.tuberculose的。两国化学家几乎都经历(本文来源于《有机化学》期刊1981年06期)

岩沙海葵毒素论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

目的建立岩沙海葵毒素(Palytoxin,PTX)高特异性单克隆抗体杂交瘤细胞株。方法将PTX偶联成具有免疫功能的PTX-PDP-KLH完全抗原,免疫雌性6~8周龄Balb/c小鼠,利用传统杂交瘤技术制备PTX单克隆抗体,并通过间接酶联免疫吸附测定(ELISA)方法筛选克隆阳性杂交瘤细胞株。结果获得能稳定分泌抗PTX单克隆抗体的杂交瘤细胞株B8,与载体蛋白没有发生交叉反应。SDS-PAGE分析表明,McAbB8在50KD和25KD处各出现一条条带,与IgG的重链和轻链的大小相符。结论研究制备了特异性单克隆抗体PTX,为进一步建立快速检测、鉴定海产品中岩沙海葵毒素的方法,奠定有效的实验基础。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

岩沙海葵毒素论文参考文献

[1].李骘,刘诣,李力更,王磊,史清文.天然药物化学史话:岩沙海葵毒素的全合成[J].中草药.2013

[2].戴悦婵,焦红,王家骥.岩沙海葵毒素单克隆抗体的制备及其鉴定[J].中国热带医学.2009

[3].戴悦婵.抗岩沙海葵毒素单克隆抗体的制备以及鉴定[D].广州医学院.2009

[4].焦红,刘必勇,王家骥,林峰.岩沙海葵毒素直接酶联免疫吸附检测方法的研究[J].检验检疫科学.2005

[5].刘必勇,焦红,王家骥.岩沙海葵毒素人工抗原的合成及鉴定[J].中国生化药物杂志.2005

[6].焦红,刘必勇,郭素珍,席静,林峰.海洋生物岩沙海葵毒素血清免疫抗体的制备[J].检验检疫科学.2005

[7].周维善.沙海葵毒素的结构测定成功[J].有机化学.1981

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