1.(长沙医学院2014级本科临床2班湖南长沙410219)
2.(长沙医学院病理生理学教研室湖南长沙410219)
课题基金:长沙医学院校级大学生创新性课题:长医教[2016]19号-041
【摘要】目的:探讨槲皮素对小白鼠血液中酒精含量的影响。方法:将40只健康3-4周龄雄性小鼠随机分为4组,A组(对照组)及B、C、D组(实验组)。给实验组和对照组小鼠灌胃酒精溶液0.16ml/10g酒精同时灌胃,造模实验结束半小时后开始灌胃给药,三组实验组分别以40mg/kg、80mg/kg、120mg/kg槲皮素蒸馏水0.2ml/10g悬浊液灌胃,对照组加入0.2ml/10g悬浊液相同体积的蒸馏水。半小时后抽取小鼠血液2ml,使用分光光度仪测其血清中酒精含量,并记录数据,通过t检验来反映酒精的变化。结果:与对照组对比,B、C、D组血清酒精含量差异与A组血清酒精含量差异有统计学意义(P<0.05)。实验组之间对比,B、C、D组血清酒精含量之间差异有统计学意义(P<0.05)。结论:槲皮素具有降低血液中酒精含量的作用
【关键词】槲皮素;解酒作用;
引言
据统计我国酒精依赖者人群已达2亿左右,慢性酒精中毒率日益增高{1~2}。研究得出乙醇可以麻醉人的中枢神经、运动神经和末梢神经,使人的动活迟缓,生理机能减退,视力、听力等感知能力降低{3}。主要因为乙醇在人体的转化为乙醛,它能与蛋白质结合,形成乙醛-蛋白质产物,破坏蛋白质的结构和性质,使某些酶降低活性或失去活性;还可导致某些组织失去作用而死亡,长期大量饮酒蓄积的毒物与饮酒量成正比,乙醛对人体肝脏和胰脏功能的影响最为严重{4}。近年来我国酒精性肝硬化逐渐有超过病毒性肝硬化的趋势,而肝硬化患者是肝癌的高危人群。基于酒精对人体的多重危害,所以涌出大批学者对解酒药物的研究,以求寻找高效的酒精药物,以此来降低酒精对人体的损害。这也是本实验目的所在。
众所周知黄铜类药物近年来都是科学家们研究的热点,比如实验使用的是槲皮素,它是一种多羟基黄酮类化合物,它具有抗氧化及清除自由基的作用,降低氧化损伤,还具有抗癌、抗炎、抗菌、抗病毒、降糖降压、免疫调节及心血管保护作用等槲皮素具有较好的祛痰、止咳作用,用于治疗慢性支气管炎,对冠心病及高血压患者有辅助治疗作用{4}。所以在此之前国内外有很多对槲皮素的研究,但主要在抗肿瘤、抗氧化、抗感染、免疫抑制、心血管保护和血糖调节等方面{5}。
虽然研究说明槲皮素能抑制病鼠血清AST活性(P0.05)升高;能降低病鼠血清高TG含量(P0.01);能降低大鼠酒精性脂肪肝肝细胞TG含量;肝组织病理检查,槲皮素能明显改善肝组织脂肪变性{6}以及槲皮素预处理对氧化应激肝细胞有一定的保护作用{7}。还有研究说明茶多酚的抗氧化能力能抑制乙醇氧化成乙醛,也可以清除机体由乙醇氧化应激产生的自由基,保护大脑免受酒精危害{8},即茶多酚具有解酒作用。槲皮素与茶多酚有很多相似的功能,茶多酚和槲皮素在体外皆为非常有效的氧自由基清除剂{9},也同样具有强抗氧化能力,综合前面这两点我们可以大胆我们联想到槲皮素是否会与茶多酚具有相同的解酒作用。因此我们对其展开研究,研究方案与结果如下:
1.材料与方法
1.1材料
3-4周龄雄性鼠40只,体重20-25g,购自长沙市开福区湘华生物技术公司,小鼠灌胃器针头、10ml注射器、天平、蒸馏水、离心机、一套学生试管、52度邵阳大曲、分光光度仪、刻度吸量管、微量移液器、机能和生物化学实验室的仪器设备。
1.2方法与步骤
1.2.1动物分组健康清洁小白鼠40只,随机分成4组,分别为对照组,槲皮素B组(40g/kg),槲皮素C组(80g/kg),槲皮素D组(120g/kg),每组10只。
1.2.2具体操作
1.2.2.1灌胃酒精给实验组和对照组小鼠灌胃酒精溶液0.16ml/10g酒精同时灌胃,如小白鼠症出现醉酒(如:四肢无力、嗜睡、运动减少、反应迟钝等)症状,证明小白鼠醉酒模型建立成功。
1.2.2.2给药造模实验结束后开始灌胃给药,半小时后三组实验组分别以40mg/kg、80mg/kg、120mg/kg槲皮素蒸馏水0.2ml/10g悬浊液灌胃,对照组加入0.2ml/10g悬浊液相同体积的蒸馏水。
1.3.2.3指标检测半小时后以2.17mmol/L酒精标准液使用分光光度仪在500nm波长下测定各只小鼠血液的吸光度值。
1.3统计学方法
统计学采用软件SPSS13.0版,多组间比较用τ检验。
2.结果
2.1酒精数据分析结果
3.讨论
国内现有文献影响的研究,但人们对槲皮素的研究大多在它的抗癌、降压及心血管保护等作用,而我们研究其抗氧化性对动物的解酒作用是人们所未涉及的。
本次实验中选择测量小鼠血液中酒精的值来判断槲皮素对酒精的作用。根据相关研究,被消化道吸收的酒,90%~98%自门脉进入肝脏,并通过肝脏被代谢,经肝脏处理后的酒及其代谢物进入体循环,仅仅2%~10%的酒经尿、汗、呼气排出,或转移至唾液或乳汁中。酒精代谢在肝脏中按下列化学过程进行,最终产物是水和二氧化碳,CH3CH2OH→CH3CHO→CH3COOH→CO2+H2O{10}。所以大部分酒精及其产物都存在人体血液中,所以本次实验中选择测量血液中酒精的值来可直接得出槲皮素是否能降低血液中酒精含量。
实验组与对照组数据相比,B、C、D组血清酒精含量差异与A组血清酒精含量差异有统计学意义(P<0.05),实验组之间对比,B、C、D组血清酒精含量之间差异有统计学意义(P<0.05说明槲皮素有解酒作用,综上所述,结合已经得出的槲皮素具有保肝护肝的作用,其药用价值会比单纯具有解酒作用的一些解酒药更高。通过实验,我们观察到小鼠服药浓度越大,解酒作用越大,在本次实验所用浓度中小白鼠未有中毒表现,因为本次实验数据过小,无法精确得出最适浓度,实验时间过短,对药物长期服用效果未知,待动物研究成熟,也可向人体研究方向延伸,这些都是今后可研究方向,本次实验研究的成果,为这些研究方向提供了研究依据及一定的数据支持,具有参考意义。解酒药物的研究是一个长期的话题,寻求一种安全有效的酒精药物也是一个长期的任务。
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第一作者:何彩艳
通讯作者:夏妍