（甘肃省灵台县皇甫谧中医院；甘肃平凉744400）
【摘要】目的研究低离子凝胶技术在临床输血中的应用价值。方法将在我院2009年以来388例受血者及供血者同时采用低离子凝胶技术和盐水法进行交叉配血试验。结果采用盐水法，388例受血者结果呈阳性为3例，阳性的检出率为0.77％；采用低离子凝胶技术388例受血者结果阳性为9例，检出率2.32％，况且盐水法所检出的三例显微镜下红细胞可看见3-4个凝集或呈断链状排列，而低离子凝胶技术检出的9例可以用肉眼观察到红细胞有可见凝集。结论低离子凝胶技术在临床输血检验中有着快速，有效，操作简便，结果明显，准确性高灵敏性好等特点，可有效防止临床溶血性输血反应，从而确保输血安全。
【关键词】交叉配血低离子凝胶技术
随着临床输血的广泛应用，输血成为临床贫血病人一种常见的治疗手段，输血安全是医务工作者面临的重要课题，而血型鉴定及交叉配血又是安全输血的最重要的环节,为确保临床输血安全,防止和减少溶血性输血反应和同种免疫引起的非溶血性输血反应的发生,（1）这也对输血科提出严格要求，我院自2009年以来，388例输血病人输血科通过ABO血型和R(h)血型鉴定、采用盐水介质和低离子凝胶技术进行临床交叉配血，抗体筛查、以确保临床输血安全，本文重点讨论低离子凝胶技术在临床输血检验中的应用价值。
1资料和方法
1.1一般资料
在我院2010年一月至2015年12月份我院住院期间收治的病人388例，其中女279例，男109例，年龄18到82岁，所有受血者和供血者的血样均采用ABO血型和R(h)血型鉴定、盐水介质和低离子凝胶技术法进行交叉配血。（1）
我院采用国食药监械（准）字2009第3400076号，凝聚胺介质试剂115112，（台资）珠海贝索生物有限公司。产品特点：灵敏度高，特异性强，性能稳定，保存条件：2-8℃。
1.2.2实验原理
低离子凝胶介质的检验原理是红细胞表面带有大量的负电荷，以避免其产生自发性凝集，当红细胞悬浮在电解质时，阳离子会被红胞的负电荷所吸引，此时红细胞则被扩散的双层离子云所围绕，而形成Zeta电位，Zeta电位决定红细胞之间的排斥作用。而凝聚胺是一种多价阳离子溴化已二甲胺多聚物、具有中和肝素的作用，溶解后产生许多正电荷，能中和红细胞表面唾液酸所产生的负电荷。凝聚胺技术首先利用低离子溶液LIM，降低介质的离子强度，减少红细胞周围的阳离子云，以促进红细胞和病人血清中抗体结合。然后加入凝聚胺（Polybrene）溶液，它是一种高价离子多聚物，，肝素中和剂溶解后能产生很多正电荷，可以中和红细胞表面带有的负电荷，使红细胞Zeta电位降低，缩短红细胞之间的距离，使红细胞产生非特异性的凝聚。最后加入悬浮液(Resuspending),Resuspending）具有中和Polybrene阳离子的作用，是正常的红细胞非特异性凝聚散开，实验结果为阴性：如果红细胞被相应的抗体致敏，则会被凝聚胺凝结，凝聚就不会散开，实验结果为阳性，维持较长时间的凝聚状态，由此可以特异性的检出特异的血型抗原或抗体（IgG、IgM）(3).
1.3方法
1.3.1低离子凝胶技术交叉配血
低离子凝胶技术交叉配血：取受血者的血清一滴加入主测管，再加入一滴3-5％供血者红细胞悬液2-3滴:取一滴供血者血清加入次测管，再加受血者3-5％的红细胞悬液2-3滴，然后在主测，次测均加入0.7ML低离子介质两滴，混匀，然后放置30秒，加入（Polybrene）溶液两滴，混匀，置3400转离心机离心10秒，然后到掉上清液，不要沥干，让管底残留0.1ML液体，轻轻摇动管底，目测管底有无凝集，如无凝集则必须重做，最后加入Resuspending试剂两滴，轻轻摇动管底60秒观察凝集是否散开，如果散开，说明Polybrene引起的非特异性凝聚，配血结果相合，如果凝集不散开，则为红细胞抗原结合的特异性反应，配血结果不和，如反应可凝，则进一步倒在玻片上观察。
1.3.2筛查不规则抗体
取试管三支，各加入被检血清或血浆两滴，分别加入3-5％筛检红细胞悬液各一滴，其他操作方法和凝集胺交叉配血方法相同，
1.3.3盐水法
盐水法配血法和低离子凝胶技术交叉配血凝集配血法同时进行。取受血者的血清一滴加入主测管，再加入一滴3-5％供血者红细胞悬液2-3滴:取一滴供血者血清加入次测管，再加受血者3-5％的红细胞悬液2-3，3400转离心10秒，观察。采用盐水配血介质法只能发现完全抗体，如结果为阴性，可将原标本接着做凝集胺，木瓜酶，抗人球蛋白配血法，以检出不完全抗体，
2结果：采用盐水介质交叉配血，388例结果呈阳性为3例，阳性的检出率为0.77％；采用低离子凝胶技术交叉配血388例结果阳性为9例，检出率2.32％，况且盐水法所检出的三例显微镜下红细胞可看见3-4个凝集，而低离子凝胶技术交叉配血检出的9例可以用肉眼观察到红细胞有明显的凝集以检出IgG、IgM。低离子凝胶技术在临床输血检验中有着快速，有效，操作简便，结果明显、准确性高灵敏性好等特点，可有效防止溶血性输血反应，从而确保输血安全。
3讨论
临床血型鉴定和交叉配血是安全输血的重要保证，输血前检查受血者血清中有无破坏供血者红细胞的抗体（主测交叉配血）和供血者血清中有无破坏受血者红细胞的抗体（次测交叉配血），以保证临床输血安全，根据卫生部发布的临床输血技术规范，指导临床安全合理用血。不规则抗体引起急性或慢性溶血性反应，危害病人的生命。输血科对于ABO血型和R(h)血型的准确鉴定、后有低离子凝胶技术在交叉配血中的合理应用来保证临床输血安全。低离子凝胶技术有着着快速，有效，操作简便，结果明显，准确性高灵敏性好等特点，可有效防止临床溶血性输血反应，可以加快红细胞抗原与抗体结合的速度,缩短了实验时间,提高输血相关实验的检测效率。
(1)陈学军,徐兴强,金小波;凝聚胺试验在抗体检测和交叉配血中的应用概况[J];中国输血杂志;2002年06期
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(2）孙利，方宏安，莫丹，侯史文，陈海炳《实用医学杂志》,2008,24(6):1035-10353孙连明，胡诗学，陈耕。临床输血手册。科学出版社1999:23
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(3）叶应妩，王毓三，申子瑜。《全国临床检验操作规程》第三版东南大学出版。2006:258