赵亚男:苦豆子半胱氨酸蛋白酶SaCP1基因的克隆及功能验证论文

赵亚男:苦豆子半胱氨酸蛋白酶SaCP1基因的克隆及功能验证论文

本文主要研究内容

作者赵亚男(2019)在《苦豆子半胱氨酸蛋白酶SaCP1基因的克隆及功能验证》一文中研究指出:地球水资源约13亿8600万立方千米,其中咸水占97.5%,可用淡水资源相对贫乏。随着人类经济的发展和人口膨胀,水资源短缺现象日益严重,这也导致了干旱地区的扩大和干旱程度的增加,从而加剧了农业干旱。在中国,干旱对农业造成的危害最大,且有受害程度逐年增加的趋势。因此,提高作物的耐旱能力已成为作物抗逆育种亟待解决的问题。随着分子生物学转基因技术的进步,利用转基因技术提高植物耐旱性这一方法已得到广泛重视。在耐旱植物中分离并克隆显著提高植物耐旱性的基因是转基因技术中耐旱基因的选择有效方法之一。苦豆子(Sophora alopecurides L.)是豆科槐属多年生小灌木,广泛分布于我国西北部干旱荒漠地区,具有耐旱、耐盐碱和耐寒的特性,是抗逆基因丰富的基因资源库。本实验从苦豆子苗期cDNA酵母表达文库筛选得到一个耐旱相关基因半胱氨酸蛋白酶SaCP1,并对此基因进行了初步的结构分析和功能验证。主要研究结果如下:1.对苗期苦豆子进行耐旱指标鉴定,结果表明,苦豆子具有强耐旱能力。2.从苦豆子苗期cDNA酵母表达文库中克隆SaCP1基因。SaCP1 ORF全长为534 bp,编码177个氨基酸残基,预测相对分子质量为19.075 KDa。蛋白质三级结构预测结果表明,该基因属于木瓜蛋白酶家族。3.利用荧光定量PCR技术对SaCP1基因进行基因表达分析,结果表明,SaCP1在苦豆子叶片、茎秆、根系中均表达,且在根部表达量最高。4.对苦豆子进行盐(NaCl)、碱(NaHCO3)、干旱(PEG6000)处理后,进行苦豆子苗期转录组测序,结果表明,SaCP1在盐、干旱胁迫下表达量上调,在碱胁迫下表达量下调。SaCP1参与细胞凋亡过程。5.对转入SaCP1基因的酿酒酵母INVSC1 Ura缺陷型进行高渗透胁迫处理,结果表明,SaCP1基因提高了酿酒酵母INVSC1 Ura缺陷型的高渗透胁迫耐受性。6.利用豆科模式转化系统将SaCP1基因转化发根农杆菌K599,侵染大豆子叶节,对转基因大豆发状根进行干旱胁迫(山梨醇)和盐胁迫(NaCl),结果表明,与对照相比,转SaCP1的大豆发状根的耐旱性和耐盐性显著提高,说明SaCP1能提高转基因大豆根系的耐旱性和耐盐性。

Abstract

de qiu shui zi yuan yao 13yi 8600mo li fang qian mi ,ji zhong xian shui zhan 97.5%,ke yong dan shui zi yuan xiang dui pin fa 。sui zhao ren lei jing ji de fa zhan he ren kou peng zhang ,shui zi yuan duan que xian xiang ri yi yan chong ,zhe ye dao zhi le gan han de ou de kuo da he gan han cheng du de zeng jia ,cong er jia ju le nong ye gan han 。zai zhong guo ,gan han dui nong ye zao cheng de wei hai zui da ,ju you shou hai cheng du zhu nian zeng jia de qu shi 。yin ci ,di gao zuo wu de nai han neng li yi cheng wei zuo wu kang ni yo chong ji dai jie jue de wen ti 。sui zhao fen zi sheng wu xue zhuai ji yin ji shu de jin bu ,li yong zhuai ji yin ji shu di gao zhi wu nai han xing zhe yi fang fa yi de dao an fan chong shi 。zai nai han zhi wu zhong fen li bing ke long xian zhe di gao zhi wu nai han xing de ji yin shi zhuai ji yin ji shu zhong nai han ji yin de shua ze you xiao fang fa zhi yi 。ku dou zi (Sophora alopecurides L.)shi dou ke huai shu duo nian sheng xiao guan mu ,an fan fen bu yu wo guo xi bei bu gan han huang mo de ou ,ju you nai han 、nai yan jian he nai han de te xing ,shi kang ni ji yin feng fu de ji yin zi yuan ku 。ben shi yan cong ku dou zi miao ji cDNAjiao mu biao da wen ku shai shua de dao yi ge nai han xiang guan ji yin ban guang an suan dan bai mei SaCP1,bing dui ci ji yin jin hang le chu bu de jie gou fen xi he gong neng yan zheng 。zhu yao yan jiu jie guo ru xia :1.dui miao ji ku dou zi jin hang nai han zhi biao jian ding ,jie guo biao ming ,ku dou zi ju you jiang nai han neng li 。2.cong ku dou zi miao ji cDNAjiao mu biao da wen ku zhong ke long SaCP1ji yin 。SaCP1 ORFquan chang wei 534 bp,bian ma 177ge an ji suan can ji ,yu ce xiang dui fen zi zhi liang wei 19.075 KDa。dan bai zhi san ji jie gou yu ce jie guo biao ming ,gai ji yin shu yu mu gua dan bai mei jia zu 。3.li yong ying guang ding liang PCRji shu dui SaCP1ji yin jin hang ji yin biao da fen xi ,jie guo biao ming ,SaCP1zai ku dou zi xie pian 、jing gan 、gen ji zhong jun biao da ,ju zai gen bu biao da liang zui gao 。4.dui ku dou zi jin hang yan (NaCl)、jian (NaHCO3)、gan han (PEG6000)chu li hou ,jin hang ku dou zi miao ji zhuai lu zu ce xu ,jie guo biao ming ,SaCP1zai yan 、gan han xie pai xia biao da liang shang diao ,zai jian xie pai xia biao da liang xia diao 。SaCP1can yu xi bao diao wang guo cheng 。5.dui zhuai ru SaCP1ji yin de niang jiu jiao mu INVSC1 Uraque xian xing jin hang gao shen tou xie pai chu li ,jie guo biao ming ,SaCP1ji yin di gao le niang jiu jiao mu INVSC1 Uraque xian xing de gao shen tou xie pai nai shou xing 。6.li yong dou ke mo shi zhuai hua ji tong jiang SaCP1ji yin zhuai hua fa gen nong gan jun K599,qin ran da dou zi xie jie ,dui zhuai ji yin da dou fa zhuang gen jin hang gan han xie pai (shan li chun )he yan xie pai (NaCl),jie guo biao ming ,yu dui zhao xiang bi ,zhuai SaCP1de da dou fa zhuang gen de nai han xing he nai yan xing xian zhe di gao ,shui ming SaCP1neng di gao zhuai ji yin da dou gen ji de nai han xing he nai yan xing 。

论文参考文献

论文详细介绍

论文作者分别是来自吉林大学的赵亚男,发表于刊物吉林大学2019-06-25论文,是一篇关于苦豆子论文,发根农杆菌论文,功能鉴定论文,耐旱性论文,半胱氨酸蛋白酶论文,吉林大学2019-06-25论文的文章。本文可供学术参考使用,各位学者可以免费参考阅读下载,文章观点不代表本站观点,资料来自吉林大学2019-06-25论文网站,若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权,请联系我们删除。

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