导读:本文包含了耐阿霉素论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:食管癌,耐药,阿霉素,黏附
耐阿霉素论文文献综述
张青汶,刘瑞敏,李克[1]（2019）在《耐阿霉素食管癌细胞株EC9706/ADM的EMT-MET现象及机制》一文中研究指出目的:建立耐阿霉素食管癌细胞株EC9706/ADM,探讨耐药细胞的EMT-MET现象及机制。方法:采用中等浓度间歇法建立耐阿霉素食管癌细胞株EC9706/ADM,用MTT法测定细胞的耐药指数及多药耐药性,Transwell小室实验检测耐药细胞的体外侵袭能力,实时荧光定量PCR和Western blot检测细胞在不同黏附时间EMT相关分子标志物E-cadherin、N-cadherin、Vimentin、Fibronectin和基质金属蛋白酶MMP2、MMP7、MMP9等的表达。结果:成功建立耐阿霉素食管癌细胞株EC9706/ADM,细胞的耐药指数为32.2,对顺铂、5-氟尿嘧啶、环磷酰胺产生交叉耐药性。与EC9706亲本细胞相比,EC9706/ADM细胞体外侵袭能力明显增强。黏附实验中,在黏附早期,耐药细胞E-cadherin表达降低而N-cadherin表达显着增高,黏附后期,E-cadherin表达升高而N-cadherin表达显着降低,基质金属酶在细胞黏附过程中表达均升高。结论:食管癌耐阿霉素细胞EC9706/ADM侵袭能力增强,可能与基质金属酶表达量增高和细胞发生EMT-MET转换相关。(本文来源于《现代肿瘤医学》期刊2019年23期）
朱聪,贾秀红,刘迎雪[2]（2018）在《芍药苷对慢性髓系白血病耐阿霉素细胞株K562/ADR多药耐药性的逆转作用及机制》一文中研究指出目的观察芍药苷对慢性髓系白血病(chronic myelogenous leukemia,CML)耐阿霉素(adriamycin,ADR)细胞株K562/ADR多药耐药性的逆转作用,并探讨其作用机制。方法 CCK-8法检测ADR对K562/ADR细胞和K562细胞的半抑制浓度(IC50),计算K562/ADR细胞对ADR的耐药倍数; CCK-8法检测芍药苷对K562/ADR细胞的细胞毒性,选择细胞增殖抑制率<10%的芍药苷浓度用于后续实验。将K562/ADR细胞分为A(分别加入0、4、8、16、32μg/m L的ADR)、B(分别加入0、4、8、16、32μg/m L的ADR及2μmol/L的芍药苷)、C(分别加入0、4、8、16、32μg/m L的ADR及4μmol/L的芍药苷)叁组,CCK-8法检测叁组ADR对K562/ADR细胞的IC50,计算其耐药逆转倍数。将K562/ADR细胞分为a(加入3μg/m L的ADR)、b(加入2μmol/L的芍药苷及3μg/m L的ADR)、c(加入4μmol/L的芍药苷及3μg/m L的ADR)叁组,流式细胞仪检测叁组K562/ADR细胞内ADR浓度,Western blotting法检测叁组K562/ADR细胞中多药耐药相关蛋白MRP1、MAPK信号通路蛋白p38和磷酸化p38 (p-p38)。结果 ADR对K562/ADR细胞、K562细胞的IC50分别为(48. 37±2. 10)、(1. 47±0. 36)μg/m L,K562/ADR细胞对ADR的耐药倍数为32. 91倍。芍药苷在K562/ADR细胞内的无毒剂量为2、4μmol/L。A、B、C组ADR对K562/ADR细胞的IC50分别为(29. 97±1. 72)、(20. 03±0. 75)、(13. 78±0. 63)μg/m L,两两相比,P均<0. 05; B、C组ADR的耐药逆转倍数分别为1. 51、2. 17倍。a、b、c组ADR荧光强度分别为320±14、676±62、883±28,两两相比,P均<0. 05。a、b、c组K562/ADR细胞中MRP1蛋白的相对表达量分别为87. 69%±1. 54%、80. 95%±4. 10%、67. 72%±5. 98%,两两相比,P均<0. 05; p-p38蛋白的相对表达量分别为72. 43%±2. 67%、63. 18%±2. 32%、52. 23%±6. 02%,两两相比,P均<0. 05。结论芍药苷能逆转K562/ADR细胞对ADR的耐药性,其逆转作用与抑制细胞P38 MAPK信号通路及下调MRP1蛋白表达有关。(本文来源于《山东医药》期刊2018年47期）
吴琼[3]（2018）在《靛玉红抑制乳腺癌细胞MCF-7和耐阿霉素细胞MCF-7/Adr的增殖研究》一文中研究指出目的乳腺癌是严重危害全世界妇女健康的恶性肺瘤,在许多发达国家已位居女性恶性肿瘤死亡之首,乳腺癌目前存在两方面问题,一方面是发病率增多,另一方面则是易复发。靛玉红,也被称为炮弹树碱,对肿瘤细胞的具有抑制作用。本课题旨在验证靛玉红在细胞水平上对人乳腺癌MCF-7细胞株的抑制作用,并探究是否能够逆转耐药细胞株的耐药性。方法购买靛玉红纯品,以乳腺癌细胞MCF-7为研究对象,在细胞水平上确定靛玉红对MCF-7增殖的抑制作用和最佳浓度;从细胞增殖和凋亡角度,初步探讨靛玉红抑制MCF-7细胞生长的机制。在上述基础上,以耐阿霉素乳腺癌细胞MCF-7/Adr为研究对象,验证靛玉红是否可以增加该细胞对阿霉素药物敏感性,并用免疫印迹法检测耐药蛋白的表达。结果添加10μg/mL、50μg/mL、100μg/mL都能显着降低MCF-7细胞的存活率,随着靛玉红浓度的增加,MCF-7的存活率逐渐降低。相同浓度靛玉红对MCF-7细胞的抑制作用具有时间依赖性,当时间延长时抑制效果更好。与对照组相比,靛玉红组凋亡细胞数量显着升高,G0-G1期细胞数量增加,而分裂期S细胞显着减少。当阿霉素的浓度为50 μg/mL的时候,联合使用靛玉红可以起到次加作用;当阿霉素的浓度为75、100 μg/mL的时候,联合使用靛玉红可以起到协同作用。联用靛玉红以后,MCF-7/Adr细胞的IC50=20.61,耐药指数=21.25,明显低于联用靛玉红之前的25.62。施加靛玉红后,耐药细胞MCF-7/Adr的耐药蛋白P-gp表达明显降低。结论靛玉红能够通过抑制增殖或引起凋亡作用,抑制人乳腺癌细胞MCF-7的生长。靛玉红能够抑制耐阿霉素人乳腺癌细胞MCF-7/Adr的生长,并逆转其耐药性,是通过降低P-gp耐药蛋白的表达实现的。(本文来源于《浙江中医药大学》期刊2018-12-01）
陈娟,张娜,陈雪艳,黎昆东,杨艳红[4]（2018）在《miR-125b-5p在耐阿霉素乳腺癌细胞中的分子功能分析》一文中研究指出目的利用生物信息学方法寻找miR-125b-5p在人野生乳腺癌细胞(MCF-7)耐受阿霉素过程中所调控的相关基因,为后续的深入研究提供理论依据。方法应用RNAhybrid2. 1. 2、Miranda3. 3a、Target Scan7.0 3种在线工具预测miR-125b-5p靶基因,取其交集靶基因;对交集靶基因进行Gene Ontology(GO)分子功能、生物学过程分析;根据MCF-7和人耐阿霉素乳腺癌细胞株(MCF-7/ADR)的RNA-seq测序结果,筛选出与miR-125b-5p有关的显着差异表达基因。结果应用3种在线工具预测获得47个交集靶基因; miR-125b-5p靶基因GO分子功能集中于离子转运体活性、氧化还原酶活性以及MAP激酶活性;生物学过程集中于细胞周期调节、氧化还原调控、凋亡细胞清除(P<0.01); miR-125b-5p可能与CAMSAP3、PIGG、MAPK3、ANAPC15、STC2、NEIL1、BIN3和IGFALS 8个基因构成负调控关系;部分上皮-间叶转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)相关基因在MCF-7/ADR中明显发生变化。结论miR-125b-5p可能通过调控STC2和MAPK3的表达来参与乳腺癌耐阿霉素过程。(本文来源于《广东药科大学学报》期刊2018年05期）
韦立群[5]（2018）在《迷迭香酸衍生物RAD-9诱导耐阿霉素乳腺癌细胞株MCF-7/ADM凋亡及其机制的研究》一文中研究指出目的:(1)探究迷迭香酸衍生物RAD-9能否降低MCF-7/ADM细胞的耐药性。(2)探究迷迭香酸衍生物RAD-9诱导耐阿霉素乳腺癌MCF-7/ADM细胞凋亡及其机制。方法:(1)乳腺癌耐阿霉素细胞株MCF-7/ADM耐药性的鉴定:(1)MTT法检测乳腺癌细胞株MCF-7及MCF-7/ADM对化疗药物阿霉素(ADM)的耐药性,计算阿霉素在两株细胞中的IC_(50)及MCF-7/ADM细胞的耐药倍数。(2)实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测多药耐药基因MDR1、MDR2 mRNA在两株细胞中的表达情况。(3)Western blot检测P-pg、EGFR、NF-κB、Akt、p-Akt、ERK、p-ERK、p38、p-p38蛋白在两株细胞中的表达情况。(2)RAD-9对MCF-7/ADM细胞凋亡的影响及其机制的探究:(1)MTT法检测RAD-5、RAD-9、RAD-11以及RAD-9联合ADM对MCF-7/ADM细胞的增殖的影响。(2)集落形成法观察RAD-9对MCF-7/ADM细胞集落形成能力的影响。(3)光学显微镜下观察RAD-9对MCF-7/ADM细胞形态的影响。(4)Hoechst33258观察RAD-9对MCF-7/ADM细胞核凋亡形态的影响。(5)流式细胞术检测RAD-9对MCF-7/ADM细胞凋亡情况的影响。(6)实时荧光定量PCR法检测RAD-9对MCF-7/ADM细胞中多药耐药基因MDR1、MDR2 mRNA表达水平的影响。(7)Western blot检测RAD-9对MCF-7/ADM细胞中Bcl-2、Bax、caspase-3、P-pg、EGFR、Akt、p-Akt、ERK、p-ERK、p38、p-p38蛋白表达的影响。结果:(1)MTT结果显示ADM能显着抑制MCF-7细胞增殖且有浓度依赖性,而对MCF-7/ADM细胞抑制作用比MCF-7弱(P<0.05);qRT-PCR结果显示耐阿霉素MCF-7/ADM细胞中耐药基因MDR1、MDR2 mRNA的表达水平显着高于MCF-7细胞(P<0.05);Western blot结果显示在MCF-7/ADM细胞中,P-pg、EGFR、p-Akt、p-ERK的表达量显着高于MCF-7细胞(P<0.05),p-p38的表达量显着低于MCF-7细胞(P<0.05),与文献报道一致,符合肿瘤细胞的耐药性。(2)RAD-9对MCF-7及MCF-7/ADM细胞增殖、集落形成、凋亡的影响:(1)MTT结果显示RAD-9能有效抑制乳腺癌MCF-7和MCF-7/ADM细胞的生长(P<0.05),且呈浓度依赖性,但无细胞毒性的RAD-9(25μmol·L~(-1))与不同浓度ADM联用并不能增强ADM的抗肿瘤效果。(2)集落形成实验结果显示RAD-9能显着抑制MCF-7/ADM细胞的集落形成能力(P<0.05)。(3)显微镜下观察到RAD-9干预MCF-7/ADM细胞48h后,细胞细胞形态明显变圆且体积缩小,细胞间的连接渐渐消失,细胞单个脱离并且漂浮在培养基中。(4)Hoechst33258和流式细胞术检测结果显示RAD-9能显着诱导MCF-7/ADM细胞的凋亡,并有浓度依赖性(P<0.05)。(5)Western blot结果显示,RAD-9能显着下调凋亡相关蛋白Bcl-2的表达水平(P<0.05),上调凋亡相关蛋白Bax及caspase-3的表达水平(P<0.05)。这些结果提示RAD-9能诱导MCF-7/ADM细胞凋亡。(3)RAD-9对耐药基因MDR1、MDR2和P-pg蛋白的影响:(1)实时荧光定量PCR结果显示RAD-9干预MCF-7/ADM细胞48h后,多药耐药基因MDR1、MDR2 mRNA的表达水平显着下调(P<0.05),提示RAD-9能够下调MCF-7/ADM细胞中多药耐药基因MDR1、MDR2 mRNA的表达水平。(2)Western blot结果显示,RAD-9能显着下调MCF-7/ADM细胞中P-pg蛋白的表达水平(P<0.05)。以上结果表明RAD-9诱导MCF-7/ADM细胞凋亡的机制可能与下调耐药基因MDR1、MDR2及MDR1编码的P-pg蛋白降低MCF-7/ADM的耐药性有关。(4)RAD-9对EGFR及其下游PI3K/Akt、ERK/MAKP和p38/MAPK通路的影响:Western blot结果显示:(1)RAD-9单独或与EGFR抑制剂(PD153035)联用都可以显着下调MCF-7/ADM细胞中EGFR的表达水平(P<0.05)。(2)对于EGFR的下游通路,RAD-9可以显着下调p-Akt的表达水平(P<0.05),并且可以逆转胰岛素(Insulin)对p-Akt的激活作用(P<0.05)。(3)RAD-9和ERK抑制剂(SCH772984)单独或联用都可以显着下调p-ERK的表达水平(P<0.05),但对ERK的表达没有影响(P>0.05)。(4)RAD-9可以显着上调p-p38的表达水平(P<0.05),但对p38的表达无影响(P>0.05)。RAD-9诱导MCF-7/ADM细胞凋亡,可能与抑制EGFR及其下游的PI3K/Akt、ERK/MAPK通路,激活p38/MAPK通路有关。结论:(1)RAD-9能有效抑制人乳腺癌细胞MCF-7和MCF-7/ADM细胞的增殖,并能诱导MCF-7/ADM细胞凋亡。(2)RAD-9在基因水平上可以显着下调MCF-7/ADM细胞中多药耐药基因MDR1和MDR2 mRNA的表达水平,在蛋白水平上可以显着下调MDR1基因编码的P-pg蛋白的表达水平,从而降低MCF-7/ADM的耐药性诱导其凋亡。(3)RAD-9诱导MCF-7/ADM细胞凋亡的机制可能与其抑制EGFR信号转导通路以及EGFR下游的PI3K/Akt、ERK/MAPK信号转导通路,激活p38/MAPK通路有关。(本文来源于《广西医科大学》期刊2018-05-01）
徐钰驹[6]（2018）在《CDCA4调控MCF-7/ADM乳腺癌耐阿霉素细胞株增殖及凋亡的研究》一文中研究指出背景:乳腺癌是全球性的健康挑战。早期乳腺癌患者经手术治疗及放化疗有较为令人满意的生存率。尽管如此,很多已发生转移的晚期乳腺癌患者失去了手术治疗的机会,需要通过放化疗等手段延长生存时间。在乳腺癌的化疗中,频发的肿瘤耐药现象是改善化疗患者预后的最主要障碍之一。另外,乳腺癌晚期患者全身状况往往较差,难以耐受高强度的放化疗。此时,基因靶向治疗就成为了一种潜在的乳腺癌补充治疗方案。诸多研究表明某些耐药相关基因的敲除能一定程度上抑制甚至逆转癌细胞的化疗耐药性形成。课题组前期研究表明CDCA4是受Nrf2信号通路调控的下游基因,而该信号通路被报道与多种肿瘤的化疗耐药性有密切关系。目前,国内外关于CDCA4与乳腺癌关系的研究报道尚较罕见。因而探讨CDCA4表达水平与人乳腺癌耐阿霉素细胞株MCF-7/ADM肿瘤生物学行为的关系很有必要。目的:本研究旨在探讨人乳腺癌耐阿霉素细胞株MCF-7/ADM肿瘤生物学行为(包括增殖、凋亡和细胞周期)与CDCA4表达水平的关系。深入探讨CDCA4的表达在人类乳腺癌中的功能,以期最终能够为乳腺癌潜在的基因靶向治疗方案提供科学的理论依据。方法:本研究选用人乳腺癌耐阿霉素细胞株MCF-7/ADM作为研究对象,经CDCA4-shRNA转染成功构建MCF-7/ADM稳定转染株,下调CDCA4基因的表达水平。随后应用RT-qPCR法检测CDCA4-shRNA转染对CDCA4mRNA水平的干扰效率,应用Western blot法检测敲减后CDCA4的蛋白水平。确认稳定转染株构建成功后,采用克隆形成实验及MTT法检测细胞增殖能力,采用流式细胞仪分别检测细胞凋亡和周期。结果:1、CDCA4-shRNA经慢病毒转染至人乳腺癌耐阿霉素细胞株MCF-7/ADM;经过稳定传代后,以RT-qPCR法检测敲减组(KD)与阴性对照组(NC)的CDCA4 mRNA相对表达丰度,结果发现相对于阴性对照组,敲减组中CDCA4基因的敲减效率达到58.1%;以Western blot检测敲减组与对照组CDCA4蛋白质相对丰度,结果表明敲减组中CDCA4蛋白丰度显着下降;稳定转染细胞株构建成功,符合进一步功能学实验要求(P<0.05),故选为试验模型进行进一步实验;2、以克隆形成实验检测稳定转染CDCA4-shRNA的MCF-7/ADM细胞(KD)及阴性对照组细胞株(NC)的增殖能力,发现CDCA4-shRNA转染组MCF-7/ADM细胞(KD)相对于阴性对照组细胞株(NC)的增殖明显缓慢,差异有统计学意义(P<0.05)。3、以MTT法检测稳定转染CDCA4-shRNA的MCF-7/ADM细胞(KD)及阴性对照组细胞株(NC)的增殖能力,实验结果表明相比阴性对照组细胞株(NC)组,稳定转染CDCA4-sh RNA的MCF-7/ADM细胞(KD)组细胞增殖减缓,差异有统计学意义(P<0.05)。4、以流式细胞仪检测稳定转染CDCA4-shRNA的MCF-7/ADM细胞(KD)及阴性对照组细胞株(NC)的凋亡率,结果发现乳腺癌耐阿霉素细胞株MCF-7/ADM稳定转染CDCA4-shRNA后沉默CDCA4表达,导致细胞凋亡率显着增高(P<0.05)。5、以流式细胞仪检测CDCA4对MCF-7/ADM细胞增殖和生长的促进作用是否与细胞周期的调控有关。在CDCA4-shRNA转染组细胞(KD)中,40.0%的细胞处于G0/G1期,29.34%处于S期,30.56%处于细胞周期的G2/M期。相较于阴性对照组(NC)处于G1期的细胞显着减少(P<0.05),处于S期的细胞显着减少(P<0.05),而处于G2/M期的细胞显着增多(P<0.05)。结论:发现CDCA4的表达水平与人乳腺癌耐阿霉素细胞株MCF-7/ADM的细胞命运密切相关。RNA干扰技术和细胞功能性实验的结果表明,敲减CDCA4基因的表达水平可以抑制MCF-7/ADM细胞的增殖并诱导其凋亡,这与CDCA4对MCF-7/ADM细胞周期的调控作用密切相关。这些数据为潜在的基因靶向治疗乳腺癌提供了科学依据。尽管如此CDCA4在乳腺癌中的其他潜在功能仍需要通过其他相关研究来进一步阐明。(本文来源于《广西医科大学》期刊2018-05-01）
滕小路,刘淼,张腾跃,黄金,王成[7]（2018）在《维拉帕米通过调节Bcl-2表达对胃癌细胞株耐阿霉素的影响》一文中研究指出[目的]探讨Bcl-2在维拉帕米逆转胃癌阿霉素化疗耐药中的作用及初步机制研究。[方法 ]MTT法检测维拉帕米逆转胃癌细胞系(SGC-7901、BGC-823、AGS、HGC-27)对3种化疗药物(氟尿嘧啶、阿霉素、顺铂)的耐药能力;流式细胞仪Annexin V-FITC/PI法检测维拉帕米对阿霉素作用下的胃癌细胞系(SGC-7901、HGC-27)凋亡水平的影响。Western blotting检测Bcl-2蛋白表达水平。[结果 ]SGC-7901细胞系在单药阿霉素组和阿霉素联合维拉帕米组中的半数抑制浓度(IC50)分别为1.51±0.12μg/ml、0.22±0.01μg/ml,两组差异有统计学意义(P<0.05);HGC-27细胞中分别为1.24±0.19μg/ml、1.06±0.08μg/ml,两组差异无统计学意义(P>0.05)。凋亡实验表明在SGC-7901细胞系中,单药阿霉素组中的细胞凋亡率为36.76%,阿霉素联合维拉帕米组为61.10%,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。HGC-27细胞系中,阿霉素组细胞凋亡率19.79%,阿霉素联合维拉帕米组为21.92%,两组比较差异无统计学意义(P>0.05)。SGC-7901细胞中维拉帕米促进ADM组胃癌细胞凋亡指数明显高于HGC-27(P<0.05)。q RT-PCR实验显示Bcl-2可能介导维拉帕米促进胃癌细胞凋亡;Western blotting结果显示在SGC-7901细胞中,阿霉素联合维拉帕米组Bcl-2的表达明显低于单药阿霉素组,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);而HGC-27中2组间差异无统计学意义。[结论]维拉帕米通过下调Bcl-2表达增强维拉帕米逆转胃癌细胞化疗耐受的能力,并促进胃癌细胞凋亡。(本文来源于《肿瘤学杂志》期刊2018年04期）
崔兵,韩正阳,万诚诚,刘纪君,贺晓珊[8]（2018）在《miR-143调控DNMT3B表达对肝细胞癌耐阿霉素敏感性的影响》一文中研究指出目的:构建耐药细胞株SMMC-7721/ADM,探讨miR-143在调控肝细胞癌耐阿霉素中的作用机制。方法:采用逐步递增阿霉素浓度法构建耐阿霉素细胞株SMMC-7721/ADM,评估其IC_(50)值;采用荧光定量PCR技术检测miR-143、DNA甲基转移酶3B(DNMT3B)、多耐药基因1(MDR1)变化、Bax和Bcl-2 mRNA表达水平;Western blotting检测DNMT3B蛋白表达;通过转染miR-143 mimics上调耐药细胞株SMMC-7721/ADM中miR-143表达水平后,检测耐药细胞IC_(50)、侵袭能力、细胞凋亡、DNMT3B、MDR1变化。应用脂质体-2000瞬时转染miR-143 mimics于耐药细胞株,观察上述指标变化。结果:成功构建耐药细胞株SMMC-7721/ADM,IC_(50)值升高78.97倍(P<0.01),miR-143表达量降低,DNMT3B、MDR1、Bax、Bcl-2表达量升高(P<0.05~P<0.01)。转染miR-143 mimics后耐药细胞株IC_(50)值降低57%,侵袭能力下降,细胞凋亡增加,DNMT3B表达减少,MDR1 mRNA表达减少(P<0.01)。结论:miR-143可能通过降低DNMT3B表达提高肝细胞癌对阿霉素的敏感性。(本文来源于《蚌埠医学院学报》期刊2018年02期）
黄云[9]（2017）在《人弥漫大B细胞淋巴瘤耐阿霉素和耐利妥昔单抗细胞株的构建及其耐药特性分析》一文中研究指出目的:分别建立人弥漫大B细胞淋巴瘤(diffuse large B-cell lymphoma,DLBCL)阿霉素(Adriamycin,ADM)及利妥昔单抗(Rituximab,RTX)耐药细胞株,检测耐药株形态,增殖,药物敏感性的变化及多药耐药基因1的(multidrug resistance gene 1,MDR1)表达情况,探讨化疗药物与RTX之间是否存在交叉耐药现象。为DLBCL耐药研究奠定模型基础,对DLBCL继发耐药后的临床用药提供理论依据。方法:1.以体外低浓度梯度递增法诱导构建人耐阿霉素DLBCL细胞株Pfeiffer/ADM和耐RTX DLBCL细胞株Pfeiffer/R。2.显微镜下比较亲代及耐药细胞株的形态变化。3.运用细胞计数法,绘制亲代和耐药细胞株的生长曲线,计算倍增时间。4.阿霉素、依托泊苷(etoposide,VP-16)、长春新碱(vincristine,VCR)对Pfeiffer、Pfeiffer/ADM、Pfeiffer/R作用72h后,运用CCK-8法检测细胞增殖抑制情况,计算半数抑制浓度IC50。5.以健康人血清作为补体来源,1μg/mL,3μg/mL,10μg/mL,30μg/mL的RTX作用于Pfeiffer、Pfeiffer/ADM、Pfeiffer/R细胞株6h后,运用CCK-8法比较耐药细胞株及亲代细胞对RTX介导的补体依赖性细胞毒性(complement-dependent cytotoxicity,CDC)的差别。6.实时荧光定量PCR检测Pfeiffer、Pfeiffer/ADM、Pfeiffer/R细胞株中MDR1mRNA的表达情况。结果:1.成功构建耐ADM细胞株Pfeiffer/ADM及耐RTX细胞株Pfeiffer/R。2.显微镜下,Pfeiffer、Pfeiffer/ADM、Pfeiffer/R在细胞形态上无明显差别。3.Pfeiffer,Pfeiffer/ADM,Pfeiffer/R的倍增时间分别为(32.28±1.18)h,(31.41±2.03)h及(32.03±1.77)h,叁细胞株体外增殖速度相似,差异无统计学意义(p>0.05)。4.通过cck-8法测得adm,vp16,vcr对pfeiffer的ic50值分别为(0.038±0.0090)μg/ml,(0.26±0.045)μg/ml,(0.0093±0.0023)μg/ml,对pfeiffer/adm的ic50值分别为(0.48±0.049)μg/ml,(3.42±0.45)μg/ml,(0.16±0.0032)μg/ml,计算耐药指数分别为12.87,13.18,16.85,表明pfeiffer/adm具有多药耐药性。而adm,vp16,vcr对pfeiffer/r的ic50值分别为(0.038±0.046)μg/ml,(0.25±0.13)μg/ml,(0.0098±0.00014)μg/ml,与pfeiffer比较差异无统计学意义(p>0.05),提示pfeiffer/r对化疗药物adm、vp-16和vcr依旧敏感。5.以健康人血清作为补体来源,1,3,10,30μg/ml的rtx作用于pfeiffer、pfeiffer/adm、pfeiffer/r细胞株6h后,对pfeiffer细胞的抑制率分别为28.58%,47.06%,69.00%,77.20%,对pfeiffer/adm为30.33%,47.21%,64.63%,72.53%,与pfeiffer细胞比较,差异无统计学意义(p>0.05),提示pfeiffer/adm对rtx依旧敏感。pfeiffer/r细胞的抑制率分别为11.04%,24.12%,40.56%,53.58%,与pfeiffer细胞比较,差异具有统计学意义(p<0.05),提示pfeiffer/r对rtx产生耐药。6.qrt-pcr检测发现,pfeiffer和pfeiffer/adm细胞的mdr1mrna的相对表达量分别为(1.00±0.10)和(82033.27±4187.24),差异具有统计学意义(p<0.001)。然而pfeiffer与pfeiffer/r细胞的mdr1mrna的相对表达量分别为(1.03±0.33)和(3.00±1.32),两者差异无统计学意义(p>0.05)。结论:运用低浓度梯度递增法可成功构建耐阿霉素人dlbcl细胞株pfeiffer/adm和耐rtx人dlbcl细胞株pfeiffer/r。pfeiffer/adm具有多药耐药性,其mdr1基因表达明显上调,对rtx介导的cdc效应仍敏感;pfeiffer/r对rtx介导的cdc效应产生耐药,但对化疗药物vp-16、vcr、adm仍敏感,其mdr1基因表达无明显变化。提示化疗药物vp-16、vcr、adm与rtx之间无交叉耐药。本研究所构建的耐药细胞株是进行下一步耐药机制或逆转耐药研究的理想模型。(本文来源于《广西医科大学》期刊2017-05-01）
张牧坤[10]（2016）在《mTOR抑制剂依维莫司联合紫杉醇对耐阿霉素乳腺癌细胞株MCF-7/ADR的增殖抑制作用及分子机制的研究》一文中研究指出目的化疗药物抵抗导致乳腺癌患者化疗失败已成为一个问题。研究发现,PI3K/AKT/m TOR信号通路失调是机体产生耐药的原因之一,而雷帕霉素靶蛋白m TOR基因是该通路的关键基因。本研究旨在探讨紫杉醇联合m TOR抑制剂依维莫司对MCF-7/ADR耐药细胞株的治疗效果,并探讨其相关作用机制。方法乳腺癌耐阿霉素细胞株MCF-7/ADR细胞培养于含10%胎牛血清、1000ng/ml阿霉素的RPMI1640培养基中,给予紫杉醇和依维莫司干预,1、MTT法分别检测紫杉醇和依维莫司作用细胞48h的IC50,根据IC50结果设置紫杉醇和依维莫司的浓度,MTT法检测联合用药的效果;2、流式细胞术检测各用药组作用于MCF-7/ADR细胞48h后细胞凋亡率;3、Western blot检测各组细胞中PI3K、m TOR、4EBP1、p-p I3K、p-AKT、p-m TOR和p-4EBP1蛋白的表达情况。结果1、MTT结果表明,紫杉醇和依维莫司抑制细胞增殖具有剂量依赖性,其紫杉醇IC50为9.59μg/m L,依维莫司IC50为32.582μg/m L。紫杉醇和依维莫司联合时抗增殖作用大于紫杉醇或依维莫司单独作用,组合指数均小于0.9。2、用药组MCF-7/ADR细胞出现凋亡现象,凋亡率与对照组相比差异有统计学意义((P<0.05)。紫杉醇联合依维莫司处理细胞,细胞出现凋亡现象最明显,凋亡率与对照组、紫杉醇组、依维莫司组相比,差异均有统计学意义(P<0.05),紫杉醇和依维莫司联合作用与单独用紫杉醇处理相比,在诱导细胞凋亡时有协同作用。3、Western blot分析表明,紫杉醇和依维莫司处理导致细胞内PI3K、m TOR、4EBP1、p-p I3K、p-AKT、p-m TOR和p-4EBP1的表达水平下降。与单独用药相比,联合用药下降水平明显较单独用药剧烈,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论1.依维莫司能够增强紫杉醇对MCF-7/ADR细胞的影响,抑制细胞增殖并诱导细胞凋亡,使细胞分裂停滞在S期。2.依维莫司增强紫杉醇对细胞的增殖抑制作用,主要是通过m TOR信号通路蛋白如m TOR、p-m TOR及其下游底物4EBP1的下调。(本文来源于《安徽医科大学》期刊2016-03-01）
耐阿霉素论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的观察芍药苷对慢性髓系白血病(chronic myelogenous leukemia,CML)耐阿霉素(adriamycin,ADR)细胞株K562/ADR多药耐药性的逆转作用,并探讨其作用机制。方法 CCK-8法检测ADR对K562/ADR细胞和K562细胞的半抑制浓度(IC50),计算K562/ADR细胞对ADR的耐药倍数; CCK-8法检测芍药苷对K562/ADR细胞的细胞毒性,选择细胞增殖抑制率<10%的芍药苷浓度用于后续实验。将K562/ADR细胞分为A(分别加入0、4、8、16、32μg/m L的ADR)、B(分别加入0、4、8、16、32μg/m L的ADR及2μmol/L的芍药苷)、C(分别加入0、4、8、16、32μg/m L的ADR及4μmol/L的芍药苷)叁组,CCK-8法检测叁组ADR对K562/ADR细胞的IC50,计算其耐药逆转倍数。将K562/ADR细胞分为a(加入3μg/m L的ADR)、b(加入2μmol/L的芍药苷及3μg/m L的ADR)、c(加入4μmol/L的芍药苷及3μg/m L的ADR)叁组,流式细胞仪检测叁组K562/ADR细胞内ADR浓度,Western blotting法检测叁组K562/ADR细胞中多药耐药相关蛋白MRP1、MAPK信号通路蛋白p38和磷酸化p38 (p-p38)。结果 ADR对K562/ADR细胞、K562细胞的IC50分别为(48. 37±2. 10)、(1. 47±0. 36)μg/m L,K562/ADR细胞对ADR的耐药倍数为32. 91倍。芍药苷在K562/ADR细胞内的无毒剂量为2、4μmol/L。A、B、C组ADR对K562/ADR细胞的IC50分别为(29. 97±1. 72)、(20. 03±0. 75)、(13. 78±0. 63)μg/m L,两两相比,P均<0. 05; B、C组ADR的耐药逆转倍数分别为1. 51、2. 17倍。a、b、c组ADR荧光强度分别为320±14、676±62、883±28,两两相比,P均<0. 05。a、b、c组K562/ADR细胞中MRP1蛋白的相对表达量分别为87. 69%±1. 54%、80. 95%±4. 10%、67. 72%±5. 98%,两两相比,P均<0. 05; p-p38蛋白的相对表达量分别为72. 43%±2. 67%、63. 18%±2. 32%、52. 23%±6. 02%,两两相比,P均<0. 05。结论芍药苷能逆转K562/ADR细胞对ADR的耐药性,其逆转作用与抑制细胞P38 MAPK信号通路及下调MRP1蛋白表达有关。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
耐阿霉素论文参考文献
[1].张青汶,刘瑞敏,李克.耐阿霉素食管癌细胞株EC9706/ADM的EMT-MET现象及机制[J].现代肿瘤医学.2019
[2].朱聪,贾秀红,刘迎雪.芍药苷对慢性髓系白血病耐阿霉素细胞株K562/ADR多药耐药性的逆转作用及机制[J].山东医药.2018
[3].吴琼.靛玉红抑制乳腺癌细胞MCF-7和耐阿霉素细胞MCF-7/Adr的增殖研究[D].浙江中医药大学.2018
[4].陈娟,张娜,陈雪艳,黎昆东,杨艳红.miR-125b-5p在耐阿霉素乳腺癌细胞中的分子功能分析[J].广东药科大学学报.2018
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[10].张牧坤.mTOR抑制剂依维莫司联合紫杉醇对耐阿霉素乳腺癌细胞株MCF-7/ADR的增殖抑制作用及分子机制的研究[D].安徽医科大学.2016