导读:本文包含了毒害艾耳球虫论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:鸡,毒害艾美尔球虫,海南霉素,药效
毒害艾耳球虫论文文献综述
高嫣珺,周婷婷,丁慧勇,卜仕金[1]（2019）在《海南霉素钠预混剂对鸡毒害艾美耳球虫的效力试验》一文中研究指出为评价海南霉素钠预混剂对鸡毒害艾美耳球虫的疗效,采用人工感染的方式,选用180只鸡健康雏鸡,随机分为5组,每组30只。除不感染不给药组外,每组鸡均经嗉囊感染毒害艾美耳球虫孢子化卵囊2×10~4个。受试药物与对照药物均经混饲给药,海南霉素钠浓度为7.5 mg/kg,莫能菌素浓度为100 mg/kg,地克珠利浓度为1 mg/kg,给药持续时间为10 d,期间动物均自由采食。结果显示:海南霉素钠预混剂在防治爆发性球虫病时有良好效果,综合其对鸡人工感染毒害艾美耳球虫的临床症状(血便)、病变损害和卵囊的控制及增重等影响,海南霉素钠预混剂按推荐剂量7.5 mg/kg连续使用10 d,对鸡毒害艾美耳球虫有较好的疗效。(本文来源于《中国家禽》期刊2019年16期）
范现成[2]（2019）在《毒害艾美耳球虫感染雏鸡小肠lncRNAs、miRNAs和CircRNAs表达谱分析》一文中研究指出毒害艾美耳球虫(Eimeria necatrix)是鸡球虫病中主要致病虫种之一,常寄生于鸡小肠和盲肠的上皮细胞内,导致受损肠道严重出血,病鸡常表现腹泻、血痢、生长缓慢等临床症状,有较高发病率和死亡率,对鸡的养殖造成严重威胁。目前,该病的防治主要依赖药物和疫苗,药物虽然具有较好的驱虫效果,但易产生药物残留和耐药性;疫苗在鸡球虫的预防控制中可有效避免化学药物带来的许多副作用,但其存在高成本、易散毒、免疫保护力不够等缺点。近些年来的研究表明,非编码RNA(non-coding RNA,ncRNA)可在宿主与寄生虫的相互作用中发挥重要的调节作用,特别是长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)、环状RNA(Circular RNA,CircRNA)和微小RNA(microRNA,miRNA)参与了许多疾病的发生和发展过程,并已作为多种疾病防治的潜在靶标和诊断、预后的生物标志。基于此,本研究以E.necatrix感染雏鸡为模型,利用高通量测序技术系统研究与E.necatrix感染相关的宿主小肠的全转录组表达谱。1.获得了E.necatrix感染雏鸡小肠的mRNA和lncRNA表达谱:将8000个E.necatrix卵囊经口感染10 d的雏鸡,在感染后108 h取雏鸡小肠中段进行RNA-seq分析,共获得1543个显着差异表达的mRNA(707个上调mRNA和836个下调mRNA)和95个显着差异表达的lncRNA(49个上调lncRNA和46个下调lncRNA)。共表达网络分析显示,这些lncRNA和mRNA之间存在37134条共表达关系,其中38个lncRNA顺式调节73个mRNA,而87个lncRNA反式调节1453个mRNA。GO功能和KEGG通路富集分析发现,差异表达的lncRNA的靶基因显着富集于E.necatrix感染相关的AMPK、PPAR和JAK-STAT等免疫通路。2.获得了E.necatrix感染雏鸡小肠的miRNA表达谱:在雏鸡小肠中段组织中鉴定出1266个miRNA,包括663个已知的miRNA和603个新的miRNA。进一步研究发现,E.necatrix感染引起了雏鸡小肠35个miRNA显着差异表达(16个上调和19个下调);功能分析发现其中的21个miRNA的4568个靶mRNA显着富集于2047个GO条目(转录、转录后调控和粘附分子连接等)和54个KEGG通路(钙信号通路、MAPK信号通路和胰岛素信号通路等)。3.获得了E.necatrix感染雏鸡小肠的CircRNA表达谱:在雏鸡小肠中段组织中共鉴定出4153个CircRNA序列,E.necatrix感染引起了雏鸡小肠13个CircRNA显着差异表达(9个上调CircRNA和4个下调CircRNA)。功能分析发现,这些CircRNAs来源基因主要参与正调控NF-κB信号通路、磷脂酰肌醇信号通路等。CircRNA-miRNAmRNA互做网络分析发现,本研究中差异表达的CircRNAs可能通过吸附2个差异表达的miRNA,间接调控62个差异表达的靶mRNA,而这些靶mRNAs主要富集在MAPK、JAK-STAT等通路。综上所述,本研究运用RNA-seq技术对E.necatrix感染雏鸡的小肠中段组织进行测序分析发现,E.necatrix感染改变了小肠中的mRNAs、lncRNAs、miRNAs和CircRNAs表达谱,功能分析发现这些RNA分子可能参与了E.necatrix与雏鸡小肠的互作过程。这些研究结果为深入揭示E.necatrix与雏鸡的互作机制提供了基础数据。(本文来源于《西北农林科技大学》期刊2019-04-01）
汪飞燕,闫欣,刘悦,王乐乐,李文静[3]（2019）在《不同感染剂量对毒害艾美耳球虫繁殖力的影响》一文中研究指出为研究不同感染剂量对毒害艾美耳球虫繁殖力的影响,设4个感染剂量组:500、2 500、5 000和10 000个孢子化卵囊/鸡,每组5只23日龄雏鸡,经鸡嗉囊接种卵囊。感染后鸡粪便中出现卵囊起至第16天,每天用麦克马斯特氏法对各组粪便中卵囊进行计数;在感染后第16天扑杀鸡,取盲肠进行卵囊计数。结果显示,各试验组鸡均无发生死亡,但10 000个卵囊感染组的临床症状最为严重;感染后144 h粪便中查见卵囊,500、2 500和5 000个卵囊感染组均出现2个排卵囊峰值,10 000个卵囊感染组只出现1个峰值,在第7～13天产出的卵囊量均占总产量的94.74%以上;每鸡粪便中排出的卵囊数随感染剂量的增加而增多,但单个卵囊的产量随感染剂量的增加而减少;感染后第16天盲肠中卵囊数不到总卵囊量的1%。结论:在疫苗生产或增殖传代时,感染剂量可选择10 000个卵囊/鸡,在感染后第7～13天收集粪便中卵囊。(本文来源于《中国家禽》期刊2019年01期）
马艺飞[4]（2018）在《毒害艾美耳球虫子孢子cDNA文库筛选及SNF2基因克隆表达与功能研究》一文中研究指出毒害艾美耳球虫(Eimeria necatrix)是7种鸡球虫中致病性最大的虫种之一,主要危害8～18周龄的鸡,引起急性小肠球虫病,给养鸡业造成极大的经济损失,因此迫切需要寻找可行的防控措施。鸡球虫的生活史包括孢子生殖、裂殖生殖和配子生殖叁个阶段,其生长发育过程中的一些关键性调控因子可能是防控鸡球虫病的有效作用靶点。在本课题组的前期研究工作中,已应用SMART技术构建了毒害艾美耳球虫子孢子cDNA文库。在此基础上,本研究对该文库进一步筛选,以获取毒害艾美耳球虫的功能基因,并对毒害艾美耳球虫SNF2基因进行克隆表达和免疫原性分析,为研究毒害艾美耳球虫亚单位疫苗奠定基础。首先,用免疫学和质粒文库两种方法对毒害艾美耳球虫子孢子cDNA文库进行筛选,获取EST序列。(1)免疫学方法:用制备的鼠抗子孢子可溶性蛋白多抗作为一抗,对文库进行筛选,初筛得到40个疑似阳性克隆,经两次复筛后获得190个阳性克隆;将复筛得到的阳性噬菌体载体λTriplEx2转化为质粒载体pTriplEx2后,送公司测序,得到26条球虫基因组的EST序列,共5个重迭群。(2)质粒文库方法:直接将λTriplEx2噬菌体文库转化为pTripIEx2文库,选出150个克隆,送公司测序,得到53条EST序列,共21个重迭群。比较两种方法获得的EST序列,有5条序列相同。对21个重迭群的生物信息学分析显示,其分别编码参与DNA复制过程的SNF2家族解旋酶、延伸因子G,参与RNA前体剪接过程的剪切因子,调节蛋白如丝氨酸蛋白酶抑制剂,参与细胞周期调控的PUA结构域蛋白,线粒体内膜tim17亚单位,结构域蛋白如丝氨酸/苏氨酸蛋白磷酸酶、腺苷酸环化酶相关蛋白,子孢子入侵相关的微线体蛋白mic-1、核糖体蛋白、顶体膜抗原、MA2(ma-2)mRNA,Etm033F10 假设蛋白,Etm087F12 假设蛋白,Etm032G09 假设蛋白和Etm128F02假设蛋白。其次,从获得的EST序列中选取毒害艾美耳球虫SNF2基因开展研究。根据GenBank中毒害艾美耳球虫SNF2基因序列设计3对引物,用RT-PCR的方法,通过分段扩增再拼接的方法获得了毒害艾美耳球虫全长SNF2基因序列,并对该基因进行了氨基酸序列、功能结构域等分析研究。该基因全长3 426 bp。接着对SNF2基因N端结构域序列进行截短原核表达,表达的融合蛋白大小为36 kDa左右,主要以包涵体形式存在。用表达产物制备鼠多抗,再以该多抗经Western blot检测子孢子可溶性蛋白,发现天然的SNF2蛋白大小为120 kDa左右,与预测的理论值相符。最后,将纯化复性的重组蛋白rEnSNF2按不同剂量(200、100、50 μg/羽)免疫无球虫感染的雏鸡,免疫2次后,除未免疫未攻虫组外,其余各试验组均感染毒害艾美耳球虫孢子化卵囊,以成活率、卵囊减少率、病变记分、平均增重等为指标,评测重组蛋白的免疫保护效果。结果显示,rEnSNF2以每羽鸡200μg的免疫剂量保护效果最好,与未免疫未攻虫组相比,重组蛋白rEnSNF2能降低病变记分与卵囊产量,提高存活率,并能诱导机体产生特异性抗体。(本文来源于《扬州大学》期刊2018-04-01）
李巧巧[5]（2018）在《毒害艾美耳球虫早熟株选育及Engam59基因原核表达与免疫保护力研究》一文中研究指出鸡球虫病是一种严重危害养鸡业的寄生原虫病,该病的防治主要采用在饲料中添加化学药物和疫苗免疫预防两种方法。目前在临床上应用的鸡球虫病疫苗包括活疫苗和亚单位疫苗两大类。活疫苗又包括毒疫苗和弱毒疫苗两大类,由于弱毒疫苗的虫株毒力低,免疫后不引起不良反应或反应轻,所以更受养殖户青睐。亚单位疫苗的生产需从感染的鸡体内分离纯化配子体,然后再用亲和柱层析的方法分离纯化配子体蛋白,因此生产费时、成本昂贵。利用基因重组技术研制基因工程疫苗可能解决这一难题。毒害艾美耳球虫(Eimeria necatrix)是鸡球虫病的重要病原,在临床上常危害8～18周龄的鸡,引起鸡的急性小肠球虫病。近年来,在我国随着生长周期较长的黄羽鸡饲养数量的不断攀升,以及采用地面平养方式,使得由毒害艾美耳球虫引起的球虫病呈上升趋势,给养鸡业带来很大的经济损失。为此,本研究采用早熟选育的方法培育毒害艾美耳球虫减毒株,同时应用基因工程技术原核表达毒害艾美耳球虫配子体蛋白Engam59基因,纯化表达产物,进行动物免疫保护试验,评价重组配子体抗原的免疫保护力以及早熟株的免疫原性,旨在为鸡球虫病减毒疫苗和基因工程疫苗的研制奠定基础。1毒害艾美耳球虫单卵囊虫株的建立其PCR鉴定分离毒害艾美耳球虫单个卵囊,感染3日龄无球虫雏鸡,收集鸡粪便中卵囊,培养孢子化后感染雏鸡扩增卵囊;卵囊孢子化后再感染无球虫雏鸡,观察肠道病变、虫体寄生部位以及卵囊形态。以4种鸡球虫实验室保存株(毒害、巨型、柔嫩、堆型艾美耳球虫)的基因组DNA为模板,分别用针对4种球虫的ITS-1序列设计的种特异性引物进行PCR扩增,扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳分析,观察特异性条带。根据肠道病变、虫体寄生部位和卵囊形态特征,鉴定单卵囊分离株为毒害艾美耳球虫,其潜在期为156 h。PCR结果显示,只有在模板和扩增引物为同一种球虫时,方能扩增出特异性条带,表明本室保存的4种鸡球虫均为纯种株。2毒害艾美耳球虫的早熟株选育以毒害艾美耳球虫单卵囊分离株为亲本株,采用早熟株选育方法选育毒害艾美耳球虫早熟株。经26代早熟选育后,再连续传代2次,扩增卵囊。扩增卵囊培养孢子化后,以0.5 × 104、1 × 104、3 × 104、5 × 104个/羽的剂量感染14日龄雏鸡,同时设亲本株为对照组,以平均体重、死亡率和肠道病变记分为指标,评价早熟株的致病性。结果显示,经26代早熟选育后潜在期从156h缩短到140h,早熟株与亲本株相比致病性明显减弱。3毒害艾美耳球虫配子体Engam59基因的原核表达根据Engam59基因的ORF序列和质粒pET-28a(+)酶切位点设计引物,以重组质粒pGEM-T-Easy-gam59为模板扩增出表达片段,大小为1419 bp(已除掉信号肽部分)。将该基因片段与载体pET-28a(+)连接,构建重组表达质粒pET-28a(+)-gam59。重组质粒pET-28a(+)-gam59转化BL21,诱导表达。融合蛋白经SDS-PAGE分析显示大小为57 kDa左右,Western blot分析显示重组蛋白能被抗6 × HIS标签单抗特异性识别。可溶性分析显示重组蛋白以包涵体存在。用纯化的重组蛋白免疫小鼠制备多抗,以制备的抗重组蛋白鼠多抗为一抗,Western blot检测毒害艾美耳球虫配子体蛋白,见有一大小为56kDa左右的特异性条带。结果表明体外重组表达配子体蛋白rEnGAM59具有较好的免疫原性。4毒害艾美耳球虫重组配子体蛋白rEnGAM59的免疫保护效果以雏鸡为试验动物,卵囊减少率、病变记分、平均增重等为指标,评价重组蛋白rEnGAM59的免疫保护效果,并检测免疫后产生的特异性抗体水平。结果显示,与未免疫攻虫组相比,重组蛋白rEnGAM59在一定程度上能降低卵囊产量与减轻病变记分,提高平均增重,但不能达到卵囊免疫组的免疫保护水平。早熟株卵囊免疫组与亲本株卵囊免疫组的免疫保护效果相近,无显着差异。(本文来源于《扬州大学》期刊2018-04-01）
刘丹丹,曹李琴,朱玉兰,许金俊,陶建平[6]（2017）在《毒害艾美耳球虫配子体Engam59基因的克隆表达及其表达产物的免疫原性分析》一文中研究指出提取毒害艾美耳球虫配子体总RNA,应用RT-PCR扩增得到Engam59基因,对其克隆测序并进行序列分析。结果表明,Engam59基因全长为1 473 bp,为一个完整的开放阅读框,编码490个氨基酸,具有1个酪氨酸-丝氨酸富集区和1个脯氨酸-甘氨酸富集区,与柔嫩艾美耳球虫Etgam59基因的同源性为93.4%。选择该基因编码的第211~432位氨基酸间的肽段进行截短表达,获得的重组蛋白大小在27.69 ku左右,主要以包涵体的形式存在。Western-blot分析结果显示,该重组蛋白能被小鼠抗重组蛋白多克隆抗体和毒害艾美耳球虫病鸡康复血清识别,表明该重组蛋白具有很好的免疫原性。本研究结果为进一步探析毒害艾美耳球虫配子体蛋白的功能与研制鸡球虫病基因工程疫苗奠定了基础。(本文来源于《中国兽医科学》期刊2017年12期）
马艺飞,杜彩娟,王乐乐,刘丹丹,许金俊[7]（2017）在《毒害艾美耳球虫蔗糖非酵解解旋酶2基因片段的克隆与原核表达》一文中研究指出为了研究毒害艾美耳球虫蔗糖非酵解解旋酶2(SNF2)基因的功能,以提取的毒害艾美耳球虫子孢子总RNA为模板,应用RT-PCR技术扩增SNF2基因片段,克隆至pGEM-T-Easy载体,测序后构建pET30a-EnSNF2表达载体,转化大肠杆菌BL21,重组菌经测序鉴定后诱导表达,对表达产物进行SDS-PAGE分析和Western blot鉴定。结果显示:克隆的片段长822 bp,编码274个氨基酸;重组蛋白大小为36 ku左右,以包涵体形式为多,能被组氨酸(HIS)单抗特异性识别,表明该基因片段获得成功表达。研究结果为制备针对毒害艾美耳球虫SNF2的多抗和进一步研究该基因的功能奠定了基础。(本文来源于《畜牧与兽医》期刊2017年08期）
杜彩娟,查夕馨,黄晓星,刘丹丹,许金俊[8]（2017）在《毒害艾美耳球虫卵囊壁蛋白的SDS-PAGE及Western blot分析》一文中研究指出利用聚丙烯酰胺凝胶(SDS-PAGE)电泳技术,分析了毒害艾美耳球虫未孢子化卵囊壁可溶性蛋白。用鼠抗毒害艾美耳球虫重组配子体蛋白rEnGAM56和rEnGAM59多克隆抗体,对卵囊壁可溶性蛋白进行了Western blot分析。结果显示,至少有24条较清晰的电泳条带,其中6条为相对明显的主带,其相对分子质量分别为37 000,35 000,34 000,20 000,14 000和12 000。Western blot分析显示,鼠抗rEnGAM59和rEnGAM56多抗均能识别1条条带,前者的相对分子质量约14 000,后者约30 000。推测30 000和14 000卵囊壁蛋白分别来自毒害艾美耳球虫配子体蛋白EnGAM56和EnGAM59。(本文来源于《中国兽医学报》期刊2017年05期）
贾传礼[9]（2017）在《毒害艾美耳球虫配子体cDNA文库的构建与筛选及其动力蛋白基因的表达》一文中研究指出鸡球虫病是由一种或数种艾美耳球虫寄生于鸡消化道上皮细胞内而引起的一种原虫寄生虫病,严重危害养鸡业。毒害艾美耳球虫(Eimerianecatrix)是鸡球虫病的重要病原之一,主要危害8～18周龄的鸡,引起鸡的急性小肠球虫病。目前,球虫病的防治主要依赖化学药物或鸡球虫病活疫苗。随着抗球虫药物的广泛与大量使用,球虫耐药性以及人们对药物残留肉蛋、污染环境等诸多问题也随之出现。同时活球虫疫苗又存在生产成本高、容易扩散病原、致弱虫株毒力易返强、虫株的抗原变异、疫苗导致饲料报酬降低、疫苗接种的剂量难以控制等弊端。因此,鸡球虫保护性抗原基因的筛选与克隆表达及其免疫保护力的研究一直是鸡球虫病研究的热点。为此,本文以毒害艾美耳球虫配子体为材料,构建毒害艾美耳球虫配子体cDNA文库,并用免疫学方法从文库中筛选抗原基因,对ENH_00080190基因进行了克隆表达和免疫原性分析,为研究毒害艾美耳球虫亚单位疫苗奠定基础。1毒害艾美耳球虫配子体的分离与纯化24日龄无球虫雏鸡,每鸡经嗉囊感染10 000个毒害艾美耳球虫孢子化卵囊。感染148 h后收取第二代裂殖子。经外科手术方法,将第二代裂殖子直接注入鸡盲肠内,使第二代裂殖子同步发育至配子体;手术后30 h剖检鸡,刮取盲肠黏膜,研磨后用0.5 mmol/L透明质酸酶消化,释放配子体;随后经过60目铜筛、260目锦纶筛兜和17 μm PET膜过滤,滤液经离心洗涤后用裂解液裂解红细胞;最后用30%和50%的Percoll,5 000 rpm离心15 min,分离纯化配子体。结果显示,本法获得的配子体纯度高、数量多,这为研究毒害艾美耳球虫配子体阶段的基因组学、蛋白质组学和免疫学等奠定了基础。2毒害艾美耳球虫配子体cDNA文库的构建用Trizol试剂提取毒害艾美耳球虫配子体总RNA,随后采用SMART技术构建了毒害艾美耳球虫配子体cDNA噬菌体表达文库。经鉴定,结果显示,总RNA的OD260/OD280值为1.95,样品的28S和18S条带清晰,原始文库容量为3.42×106 pfu/mL,重组率为90%,扩增后的文库容量为2.6× 1 010 pfu/mL,插入片段长度250～1000 bp。3毒害艾美耳球虫配子体cDNA文库的筛选首先,制备抗毒害艾美耳球虫的鸡康复血清和鼠抗毒害艾美耳球虫配子体多抗血清;两种血清经ELISA检测,显示两种多抗均有很高的效价;随后,用制备的鼠多抗对文库进行筛选,初次筛选共筛出疑似5个阳性克隆,复筛后确定阳性克隆3个;最后,对复筛后获得的阳性克隆进行PCR鉴定,对获得的EST序列进行生物信息学分析。结果显示,3个EST序列的长度分别为734 bp、270 bp和606 bp,分别编码毒害艾美耳球虫特有蛋白基因、毒害艾美耳球虫动力蛋白基因和毒害艾美耳球虫假定蛋白基因。4毒害艾美耳球虫动力蛋白基因表达及免疫原性分析首先,依据ENH_00080190序列合成毒害艾美耳球虫动力蛋白基因,并将其插入到与载体pET-28a(+)连接,构建重组表达质粒,转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞。其次,用IPTG诱导表达,对表达产物进行SDS-PAGE电泳分析。最后,以毒害艾美耳球虫感染鸡康复血清为一抗进行Western-blot检测。结果显示,基因全长为270 bp,编码89个氨基酸;表达产物大小约为13 kDa,主要以包涵体形式存在;重组蛋白能被鸡康复血清识别,显示重组蛋白具有免疫原性。(本文来源于《扬州大学》期刊2017-05-01）
楚德军,刘建平[10]（2017）在《不同细胞系中培养毒害艾美耳球虫对比研究》一文中研究指出在体外培养的过程中,细胞系是影响球虫发育的主要因素。本研究主要对比不同细胞系对于毒害艾美耳球虫发育的影响。5种不同的细胞系在37℃,5%CO2在6孔板中培养至细胞融合。将纯化好的子孢子在分别37℃和41℃入侵细胞。利用HE染色地方法检测细胞内毒害艾美耳球虫的发育程度。所有的细胞系均有球虫入侵。VERO细胞中,毒害艾美耳球虫的发育最好。在VERO细胞培养基中加入不同浓度血清和叶酸,观察球虫发育情况,确定最佳实验条件,为下一步研究做好准备。(本文来源于《畜牧兽医科学(电子版)》期刊2017年04期）
毒害艾耳球虫论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
毒害艾美耳球虫(Eimeria necatrix)是鸡球虫病中主要致病虫种之一,常寄生于鸡小肠和盲肠的上皮细胞内,导致受损肠道严重出血,病鸡常表现腹泻、血痢、生长缓慢等临床症状,有较高发病率和死亡率,对鸡的养殖造成严重威胁。目前,该病的防治主要依赖药物和疫苗,药物虽然具有较好的驱虫效果,但易产生药物残留和耐药性;疫苗在鸡球虫的预防控制中可有效避免化学药物带来的许多副作用,但其存在高成本、易散毒、免疫保护力不够等缺点。近些年来的研究表明,非编码RNA(non-coding RNA,ncRNA)可在宿主与寄生虫的相互作用中发挥重要的调节作用,特别是长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)、环状RNA(Circular RNA,CircRNA)和微小RNA(microRNA,miRNA)参与了许多疾病的发生和发展过程,并已作为多种疾病防治的潜在靶标和诊断、预后的生物标志。基于此,本研究以E.necatrix感染雏鸡为模型,利用高通量测序技术系统研究与E.necatrix感染相关的宿主小肠的全转录组表达谱。1.获得了E.necatrix感染雏鸡小肠的mRNA和lncRNA表达谱:将8000个E.necatrix卵囊经口感染10 d的雏鸡,在感染后108 h取雏鸡小肠中段进行RNA-seq分析,共获得1543个显着差异表达的mRNA(707个上调mRNA和836个下调mRNA)和95个显着差异表达的lncRNA(49个上调lncRNA和46个下调lncRNA)。共表达网络分析显示,这些lncRNA和mRNA之间存在37134条共表达关系,其中38个lncRNA顺式调节73个mRNA,而87个lncRNA反式调节1453个mRNA。GO功能和KEGG通路富集分析发现,差异表达的lncRNA的靶基因显着富集于E.necatrix感染相关的AMPK、PPAR和JAK-STAT等免疫通路。2.获得了E.necatrix感染雏鸡小肠的miRNA表达谱:在雏鸡小肠中段组织中鉴定出1266个miRNA,包括663个已知的miRNA和603个新的miRNA。进一步研究发现,E.necatrix感染引起了雏鸡小肠35个miRNA显着差异表达(16个上调和19个下调);功能分析发现其中的21个miRNA的4568个靶mRNA显着富集于2047个GO条目(转录、转录后调控和粘附分子连接等)和54个KEGG通路(钙信号通路、MAPK信号通路和胰岛素信号通路等)。3.获得了E.necatrix感染雏鸡小肠的CircRNA表达谱:在雏鸡小肠中段组织中共鉴定出4153个CircRNA序列,E.necatrix感染引起了雏鸡小肠13个CircRNA显着差异表达(9个上调CircRNA和4个下调CircRNA)。功能分析发现,这些CircRNAs来源基因主要参与正调控NF-κB信号通路、磷脂酰肌醇信号通路等。CircRNA-miRNAmRNA互做网络分析发现,本研究中差异表达的CircRNAs可能通过吸附2个差异表达的miRNA,间接调控62个差异表达的靶mRNA,而这些靶mRNAs主要富集在MAPK、JAK-STAT等通路。综上所述,本研究运用RNA-seq技术对E.necatrix感染雏鸡的小肠中段组织进行测序分析发现,E.necatrix感染改变了小肠中的mRNAs、lncRNAs、miRNAs和CircRNAs表达谱,功能分析发现这些RNA分子可能参与了E.necatrix与雏鸡小肠的互作过程。这些研究结果为深入揭示E.necatrix与雏鸡的互作机制提供了基础数据。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
毒害艾耳球虫论文参考文献
[1].高嫣珺,周婷婷,丁慧勇,卜仕金.海南霉素钠预混剂对鸡毒害艾美耳球虫的效力试验[J].中国家禽.2019
[2].范现成.毒害艾美耳球虫感染雏鸡小肠lncRNAs、miRNAs和CircRNAs表达谱分析[D].西北农林科技大学.2019
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[4].马艺飞.毒害艾美耳球虫子孢子cDNA文库筛选及SNF2基因克隆表达与功能研究[D].扬州大学.2018
[5].李巧巧.毒害艾美耳球虫早熟株选育及Engam59基因原核表达与免疫保护力研究[D].扬州大学.2018
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