导读:本文包含了融合伴侣论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:分子伴侣,DnaJ,超酸性短肽,融合接头
融合伴侣论文文献综述
刘延娟[1]（2018）在《融合超酸性短肽增强大肠杆菌分子伴侣DnaJ活性的研究》一文中研究指出生物体内绝大多数蛋白质必须经过正确折迭形成天然构象,才具有生物学活性。新生多肽有发生错误折迭的倾向,易形成具有潜在细胞毒性的聚集体形式。因此,对细胞或整个生物机体来说,维持体内蛋白质稳态是至关重要的。分子伴侣参与了蛋白质的翻译、折迭、展开、移位和降解等过程,其中,Dna K-DnaJ-Grp E(KJE)分子伴侣系统普遍存在动植物和微生物中并起着重要作用。作为该系统的关键组分,DnaJ的功能不济特别是在胁迫条件下可能无法有效避免错误折迭蛋白聚集,甚至被其扣留形成共聚集,从而引发由蛋白聚集带来的许多生物学问题,譬如包涵体形成、淀粉样肽相关的神经退行性疾病等。因而,对DnaJ进行分子改良特别是提高DnaJ的自身可溶性或许是强化其分子伴侣活性的重要途径。目前,基于增溶接头(特别是超酸性短肽)的融合基因表达策略已成为提高蛋白质可溶性和热稳定性的重要手段。因此,本工作以大肠杆菌DnaJ为研究对象,选取两种具有实效的超酸性短肽(ra3t和tua2)作为融合接头,构建DnaJ融合蛋白,并通过大肠杆菌重组表达分析接头对DnaJ可溶性及其分子伴侣活性的影响,取得的主要结果如下:1.载体构建(1)含分子伴侣基因的原核表达载体构建通过基因组PCR从大肠杆菌BL21(DE3)中分别得到Dna K(K)、DnaJ(J)和Grp E(E)全长基因,然后通过酶切插入到p ET32a(+)载体Nde I和Xho I位点之间,构建了K、J和E的原核表达载体p ET(K)、p ET(J)和p ET(E)。(2)DnaJ融合表达载体构建在p ET(J)的基础上,将超酸性短肽ra3t和tua2插入到DnaJ的N-端、C-端或两端,构建了一系列DnaJ的原核融合表达载体。(3)含靶蛋白基因的原核表达载体构建从已有靶蛋白的p ET载体中重新扩增出Jc APX1(APX1)、Ec MetA(MetA)、Jc TBP1(TBP1)、Nt RCA(RCA)和DnaJ(J)基因片段,通过重组克隆构建了其p ACYC184背景下的系列原核表达载体p AY(APX1)、p AY(MetA)、p AY(TBP1)、p AY(RCA)、p AY(J)。分别从烟草和花椰菜基因组中扩增出基因片段Ntrbc L(rbc L)和Bo WSCP(WCP),并从质粒p EGFP-N1扩增出基因片段EGFP(GFP),然后通过重组克隆进一步构建了原核表达载体p AY(rbc L)、p AY(WCP)和p AY(GFP)。2.KJE分子伴侣系统中DnaJ功能强化具有优先性重组Dna K和Grp E蛋白90%都在上清中,可溶性很高,而DnaJ的可溶性只有50%左右,表明KJE分子伴侣系统中对DnaJ的功能强化具有优先性。3.融合超酸性短肽可提高DnaJ的可溶性DnaJ融合超酸性短肽(ra3t和tua2)可提高它的可溶性,提高了至少1.4倍。4.共表达分析含分子伴侣基因的p ET系列载体与含靶蛋白基因的p AY系列载体可以在大肠杆菌中实现相容性共表达,从而评判分子伴侣对靶蛋白可溶性和活性的影响。(1)DnaJ融合超酸性短肽可进一步提高APX1的可溶性和酶活性DnaJ及其所有超酸性融合蛋白都可提高与它共表达APX1的可溶性,但C-端融合的作用最为显着,所以后续工作则围绕C-端融合DnaJ展开。同时,APX1胶活性染色和酶活测定结果表明,相对于单独DnaJ,超酸性融合DnaJ还可以更好地提高APX1的酶活性,且与对APX1可溶性的提高程度相一致,说明它确能帮助APX1形成具有正确折迭和功能的可溶性蛋白。(2)DnaJ融合超酸性短肽可进一步提高GFP的可溶性和荧光活性与单独DnaJ相比,超酸性融合DnaJ可进一步显着提高与它共表达GFP的可溶性,而且荧光激发结果显示它还能更大程度地提高GFP的荧光活性,这也表明它是能帮助形成具有正确构象的可溶性GFP。(3)DnaJ融合超酸性短肽可进一步提高MetA的可溶性及其共表达重组大肠杆菌的耐热性超酸性融合DnaJ相比单独DnaJ可进一步显着提高与它共表达MetA的可溶性。另外,细菌稀释点板实验发现,44℃高温胁迫下,MetA与超酸性融合DnaJ共表达的大肠杆菌菌株在M9基本培养基上的生长状况最好,表明超酸性融合DnaJ还能相对更好地提高与MetA共表达大肠杆菌菌株的耐热性。同样,这也在一定程度上说明超酸性融合DnaJ是能帮助形成具有正确构象和功能的可溶性MetA,从而赋予其重组大肠杆菌在基本培养基上更好的耐热性。(4)DnaJ融合超酸性短肽可进一步提高其它靶蛋白的可溶性与单独DnaJ相比,超酸性融合DnaJ还能进一步显着提高与其共表达的其它四种靶蛋白(rbcL、RCA、WCP、TBP1)的可溶性。5.DnaJ融合超酸性短肽可进一步提高非共表达重组大肠杆菌和酵母菌的耐热性细菌稀释点板实验显示,与DnaJ相比,在44℃高温胁迫下含超酸性DnaJ融合表达载体的大肠杆菌在LB平板上的菌落生长状况较好;同时,酵母稀释点板实验也发现,在51℃高温胁迫下含超酸性DnaJ融合表达载体的酵母重组菌在YPD平板上的菌落生长状况也更好;这表明DnaJ融合超酸性短肽能够提高它的通用分子伴侣活性,从而赋予其大肠杆菌和酵母重组菌株更好的耐热性。6.DnaJ融合超酸性短肽可提高其自身的可溶性DnaJ作为靶蛋白与超酸性融合DnaJ共表达时,其可溶性明显提高,至少提高了1.2倍,表明超酸性融合DnaJ还可以增强DnaJ自身的可溶性,可能也在一定程度上促进DnaJ的活性。总之,以上结果表明DnaJ仅仅简单融合超酸性短肽就可显着增强它的分子伴侣活性,相比自身能够更有效地提高靶蛋白的可溶性和活性,并赋予其重组大肠杆菌和酵母菌更好的耐热性。超酸性融合DnaJ比单独DanJ具有更高的可溶性,而且这种可溶性提高主要是由同种负电荷排斥作用所致,这样就能将更多与DnaJ相结合的靶蛋白带入可溶状态,不易形成聚集和共聚集,从而有利于靶蛋白的正确折迭。另一方面,DnaJ自身可溶性能够被高可溶的超酸性融合DnaJ提高,也有利于其分子伴侣活性的发挥。这两种机制或许共存,但可能以前者起主导作用。(本文来源于《云南师范大学》期刊2018-05-31）
朱克骏[2]（2016）在《分子伴侣和融合标签改善TEV蛋白酶折迭的效应》一文中研究指出同义突变所引起的蛋白质折迭受损正逐渐成为人们研究的热点,人类部分基因因同义突变而罹患疾病,因此改善同义突变带来的折迭损伤至关重要。在大肠杆菌中通过同义突变提高异源蛋白表达水平的同时,也会降低特定蛋白的折迭,如烟草蚀斑病毒蛋白酶(Tobacco etch virus protease,TEVp)。有关改善密码子突变体蛋白折迭的研究未见报道。为此,我们以大肠杆菌表达系统为模型,研究共表达分子伴侣或者融合标签对不同TEVp突变体蛋白折迭的影响,获得以下结果:1.定性和定量分析了共表达分子伴侣组A(GroEL、GroES和GrpE)或组B(DnaK、DnaJ和ClpB)对6种TEVp突变体(4种氨基酸突变体,2种同义突变体)表达水平的影响。16℃诱导24 h后,共表达分子伴侣组B改善TEVp突变体表达水平要高于分子伴侣组A,表明低温条件下不同分子伴侣在改善同义突变体蛋白折迭时的水平存在差异。2.定性和定量分析了热激条件下,分子伴侣对靶蛋白的折迭效应,37℃诱导4 h后,共表达分子伴侣组A改善对TEVp突变体表达水平要高于分子伴侣组B,表明在高温胁迫下只有特定的分子伴侣组对改善同义突变体蛋白折迭有作用。3.分析了两种标签及TEVp识别序列对6种TEVp突变体的的表达水平影响:重组表达的细胞的粗酶液上清液中,SDS-PAGE检测到了明显MBP融合的TEVp氨基酸突变体特异条带;而含有TEVp识别序列的融合蛋白由胞内自剪切产生的无标签TEVp突变体条带不明显;Trx标签对TEVp的表达水平没有明显改善作用。4.分析了两种标签和TEVp识别序列对6种TEVp突变体酶学活性影响。和前期研究结果相比,MBP提高TEVp氨基酸突变体的水溶性和活性,但是对同义突变体的活性没有明显作用,插入的识别序列近一步提高TEVp氨基酸突变体活性,但是对同义突变体没有明显作用。Trx标签对TEVp氨基酸突变体的水溶性没有较大改善但可提高其活性,但对同义突变体活性没有提升,插入的TEVp识别序列也没有明显提升两类突变体活性的作用。5.分析了提高胞内稀有tRNA水平对融合的TEVp突变体表达和酶学活性的影响。在RosettaTM(DE3)中,融合MBP和Trx标签的TEVp氨基酸突变的活性要比在BL21(DE3)中表达时高,Trx标签对氨基酸突变体的活性提升水平要比MBP标签高;而融合两种标签的TEVp同义突变体的活性相比在BL21(DE3)表达时没有明显的改善。综上所述,本实验证明在不同温度胁迫下,不同类型的分子伴侣改善TEVp突变体特别是同义突变体的表达水平的作用情况存在明显差异;MBP融合标签可以改善TEVp氨基酸突变体水溶性和活性,改善效应受到TEVp识别序列的影响;Trx融合标签改善TEVp氨基酸突变体的活性不受TEVp识别序列的影响;提高稀有tRNA丰度及两类融合标签对TEVp同义突变体的活性并未有较好的改善,暗示了同义突变造成的蛋白质折迭损伤是受基因水平调控的,难以在翻译后水平上被修复。(本文来源于《安徽农业大学》期刊2016-06-01）
马应福[3]（2016）在《媒介融合背景下文化综合类期刊的转型与品牌建设——兼谈《读者》对《人生与伴侣》的启示》一文中研究指出媒介融合为传统媒体尤其是期刊的发展带来新的增长契机。在文化综合类期刊中,《读者》率先进入网络媒体领域,为其他期刊的转型与媒体融合发展提供了丰富的实战经验,也为《人生与伴侣》的转型与品牌建设提供了有益的启示。(本文来源于《新闻爱好者》期刊2016年01期）
常镜,欧阳清,杜晓,杨安钢,赵晶[4]（2015）在《应用分子伴侣探索e23sFv/His融合蛋白的可溶性表达》一文中研究指出目的探讨利用分子伴侣实现e23sFv/His融合蛋白可溶性表达的可行性。方法将分子伴侣质粒pGro7、pKJE7与e23sFv原核表达载体共转化BL21(DE3)感受态细胞。16℃诱导融合蛋白可溶性表达,比较可溶性表达产物相对于常规包涵体不溶形式表达产物在产量和抗原结合活性方面的差异。结果可溶性表达的e23sFv/His产量较小,纯化得率低,其抗原结合活性没有明显优于包涵体表达纯化产物。结论应用pGro7、pKJE7有助于e23sFv/His融合蛋白的可溶性表达,但其表达和纯化得率较低。(本文来源于《细胞与分子免疫学杂志》期刊2015年09期）
王伟,邹文艺,范清林,宋礼华[5]（2013）在《瑞替普酶融合蛋白的表达、纯化及分子伴侣对其复性的影响》一文中研究指出目的构建瑞替普酶(r-PA)融合蛋白的原核表达体系,并研究DsbA、DsbC、pKJE7、pGro7、pTf16等分子伴侣对其复性的影响。方法将r-PA基因克隆到表达载体质粒PET-32a中,通过异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导,在宿主菌E.coli BL21中进行表达。在复性时分别添加不同分子伴侣,研究不同分子伴侣对融合蛋白体外复性的影响。结果SDS-PAGE和Western blot结果表明r-PA融合蛋白正确表达,分子伴侣DsbA、pKJE7、pTf16对融合蛋白的复性有明显效果,体外溶圈实验表明复性后的r-PA具有纤溶活性。结论分子伴侣能有效帮助r-PA融合蛋白的复性。(本文来源于《安徽医科大学学报》期刊2013年11期）
王伟[6]（2013）在《瑞替普酶融合蛋白的表达、纯化及分子伴侣对其复性的影响》一文中研究指出目的构建瑞替普酶r-PA融合蛋白的原核表达体系，并研究DsbA、DsbC、pKJE7、pGro7、pTf16等分子伴侣对其复性的影响。方法：将r-PA基因克隆到表达载体质粒PET-32a中，经PCR及EcoR I、BamH I双酶切鉴定后将重组表达载体PET-32a-r-PA转化至感受态大肠杆菌BL21，通过筛选得到阳性克隆后经IPTG诱导表达，表达产物通过SDS-PAGE和Western blot鉴定。目的蛋白包涵体变性后经镍离子金属螯合层析纯化。37℃培养含有表达分子伴侣蛋白基因重组质粒的工程菌，IPTG诱导表达。在r-PA融合蛋白复性时分别添加不同分子伴侣，研究不同分子伴侣对融合蛋白体外复性的影响。最后采用纤维蛋白-琼脂糖平板测定法测算纯化、复性后样品的单位活性。结果：经PCR及EcoR I、BamH I双酶切鉴定结果表明重组表达载体PET-32a-r-PA构建成功；SDS-PAGE和Western blot鉴定结果表明r-PA融合蛋白得到正确表达；添加分子伴侣参与复性后结果显示添加DsbA、pKJE7、pTf16蛋白组的辅助复性效果明显，复性率达20%左右；纤溶活性检测表明纯化、复性后样品具有纤溶活性，通过计算得到样品的比活为4.8x10~5IU/mg。结论：分子伴侣能有效帮助r-PA融合蛋白的复性。(本文来源于《安徽医科大学》期刊2013-03-01）
张雅娟,肖娟娟,赵艳霞,王尉平[7]（2012）在《人类脂肪瘤高速泳动蛋白融合伴侣类基因LHFPL2的组织表达谱及亚细胞定位》一文中研究指出应用RT-PCR扩增技术,建立人类脂肪瘤高速泳动蛋白融合伴侣类基因LHFPL2在人体内(肺、胎盘、前列腺、卵巢、肾、肝、心、膀胱、骨骼肌、脑、结肠、睾丸、子宫、胃)的组织表达谱,组织表达谱显示LHFPL2在前列腺、膀胱组织中均有表达。为进一步研究其生物学功能,构建pEGFP-C1/LHFPL2融合载体转染细胞,亚细胞定位显示,LHFPL2在整个细胞中均有分布,以细胞核中较多。LHFPL2基因组织表达谱的建立及亚细胞定位,为进一步深入研究LHFPL2的生物学功能奠定基础。(本文来源于《扬州大学学报(农业与生命科学版)》期刊2012年04期）
邓守恒,蔡晓军,李林均,俞远东,李芳[8]（2010）在《硒化壳聚糖通过促进PML-RARα融合蛋白与分子伴侣Hsp90解离下调融合蛋白水平》一文中研究指出目的研究硒化壳聚糖(Sc)下调NB4细胞PML-RARα融合蛋白的作用与分子伴侣Hsp90的关系。方法流式细胞术和免疫印迹法检测Sc处理后NB4细胞内PML-RARα融合蛋白、Hsp90含量的变化;RT-PCR法分析Sc处理后细胞内PML-RARαmRNA水平的改变。结果 Sc可下调NB4细胞内PML-RARα融合蛋白含量,呈量效关系,50,100,200 mg/LSc处理24 h后细胞内PML-RARα融合蛋白阳性率分别为62.8%,33.14%,17.07%,Sc对细胞内PML-RARαmRNA水平没有影响;50,100,200 mg/L Sc处理NB4细胞24 h可使细胞内Hsp90含量减少。结论 Sc下调PML-RARα融合蛋白的含量,主要通过抑制Hsp90分子伴侣的功能,使PML-RARα融合蛋白与Hsp90蛋白解离,PML-RARα融合蛋白失去正常的稳定性,进而被降解。(本文来源于《时珍国医国药》期刊2010年11期）
孙卫国[9]（2009）在《DsbA-DsbA~（mut）融合蛋白作为分子伴侣在原核表达系统中的作用研究》一文中研究指出大肠杆菌因为遗传背景清楚,代时短,易控制成为生产重组蛋白的主要工程菌。目前在利用原核系统表达重组蛋白的过程中常常遇到几个难题是重组蛋白常常以包含体的形式存在、表达量低、生物活性不高和容易降解等。高度还原性的大肠杆菌细胞质环境使表达的重组蛋白不易形成正确的二硫键和完整的四级结构,真核来源的功能蛋白或细胞因子常因原核表达系统的局限性而不能得到类似天然活性的重组蛋白。大肠杆菌自身二硫键的形成都是在其具有氧化性环境的周质腔进行的,大肠杆菌周质腔内二硫键形成蛋白家族成员是大肠杆菌自身蛋白形成正确二硫键的关键因素,它们一级结构都含有活性位点Cys-X-X-Cys,只是中间的氨基酸组成不同。二硫键形成蛋白A(Disulfide bond formation protein A ,DsbA)直接参与二硫键的形成,是迄今所发现的硫氧还蛋白家族中氧化性最强的一个,在体内和体外DsbA均能协助蛋白质折迭。DsbA的突变体DsbA~(mut)蛋白(DsbA mutant protein)是将DsbA的功能区域Cys-Pro-His-Cys中的两个Cys定点突变为Ser,构成Ser-Pro-His-Ser结构,突变后的DsbA蛋白即DsbA~(mut)蛋白不再具有氧化还原酶的功能,但仍然具有促目的蛋白可溶和细胞定位的作用。本课题基于DsbA和DsbA~(mut)蛋白结构和性质特点,对它们在原核表达系统上的作用进行系统研究。我们首先以人神经生长因子(hNGF)作为目标蛋白,比较了几种硫氧还蛋白家族蛋白成员在融合蛋白共复性上作用,发现相对于Trx和DsbC而言,DsbA蛋白在促进hNGF折迭和维持其生物活性上更具有优势作用。接下来,我们在寻找可以促使hNGF原核细胞质可溶性表达融合伴体研究上,发现极少数融合伴体能促使hNGF原核表达可溶性形式,但将DsbA和DsbA~(mut)蛋白串联形成DsbA-DsbA~(mut)融合蛋白作为融合伴体时获得了hNGF原核可溶性的融合表达,并且获得的重组蛋白DsbA-DsbA~(mut)-hNGF是具有良好生物活性功能。鉴于DsbA-DsbA~(mut)融合蛋白在原核表达上特点和作用,我们构建了一种新型高效融合表达载体(pET-dsbA-dsbA~(mut)),并以此载体实现了多个真核来源的功能蛋白原核可溶性的融合表达,生物活性测定实验证实,DsbA-DsbA~(mut)融合蛋白可以促进目的蛋白的空间折迭并维持目的蛋白的天然活性,因此我们所构建的融合表达载体在表达真核活性蛋白上具有通用性。由于构建的融合表达载体表达的融合蛋白可以保持目的蛋白的空间折迭状态,因此利用此载体可以进行蛋白质的结构和功能研究。我们以此融合载体为平台,表达了9个hNGF突变体蛋白,生物活性测定实验发现,当删除hNGF的N末端或C末端的多个氨基酸时,其天然生物活性显着降低或丢失。由于DsbA-DsbA~(mut)融合蛋白与目的蛋白融合表达还需要进一步的切割,为了便于下游目的蛋白的分离纯化,我们又尝试了利用DsbA-DsbA~(mut)融合蛋白与目的蛋白hNGF在原核系统的共表达。目前结果表明,在原核系统共表达hNGF尚有困难。为了进一步探索DsbA蛋白家族在原核系统共表达的可能性,我们又尝试将DsbA蛋白与其家族另一成员DsbC融合,并作为伴侣分子与目的基因hNGF在原核系统共表达。结果表明,将DsbA-DsbC融合蛋白与hNGF在原核表达系统内以单质粒双启动子模式进行共表达,获得了hNGF原核细胞质可溶性表达。而单独的DsbA或DsbC蛋白没有这种作用。通过本课题的研究,我们根据DsbA和DsbA~(mut)蛋白的性质特点获得了一种原核通用融合表达载体,该载体在表达真核来源的活性蛋白或细胞因子具有促可溶和保持目的蛋白天然活性的功能。其次,利用该融合表达载体可以应用于蛋白质结构和功能研究。另外,我们以DsbA-DsbC融合蛋白与hNGF在原核表达系统内共表达,第一次实现了重组hNGF原核细胞质可溶性表达,这种共表达模式在表达其它蛋白尤其是那些含有多个二硫键的功能蛋白上具有潜在参考价值。(本文来源于《中国人民解放军军事医学科学院》期刊2009-05-20）
本报,谭啸[10]（2008）在《IT要成为业务“伴侣”》一文中研究指出“IT技术是可以花钱买来的，而IT与业务融合是买不来的。所以，IT人员一定要研究业务，成为业务发展的‘伴侣’。”沪东重机有限公司(以下简称“沪东重机”)技术中心副主任李大保如是说。(本文来源于《计算机世界》期刊2008-07-21）
融合伴侣论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
同义突变所引起的蛋白质折迭受损正逐渐成为人们研究的热点,人类部分基因因同义突变而罹患疾病,因此改善同义突变带来的折迭损伤至关重要。在大肠杆菌中通过同义突变提高异源蛋白表达水平的同时,也会降低特定蛋白的折迭,如烟草蚀斑病毒蛋白酶(Tobacco etch virus protease,TEVp)。有关改善密码子突变体蛋白折迭的研究未见报道。为此,我们以大肠杆菌表达系统为模型,研究共表达分子伴侣或者融合标签对不同TEVp突变体蛋白折迭的影响,获得以下结果:1.定性和定量分析了共表达分子伴侣组A(GroEL、GroES和GrpE)或组B(DnaK、DnaJ和ClpB)对6种TEVp突变体(4种氨基酸突变体,2种同义突变体)表达水平的影响。16℃诱导24 h后,共表达分子伴侣组B改善TEVp突变体表达水平要高于分子伴侣组A,表明低温条件下不同分子伴侣在改善同义突变体蛋白折迭时的水平存在差异。2.定性和定量分析了热激条件下,分子伴侣对靶蛋白的折迭效应,37℃诱导4 h后,共表达分子伴侣组A改善对TEVp突变体表达水平要高于分子伴侣组B,表明在高温胁迫下只有特定的分子伴侣组对改善同义突变体蛋白折迭有作用。3.分析了两种标签及TEVp识别序列对6种TEVp突变体的的表达水平影响:重组表达的细胞的粗酶液上清液中,SDS-PAGE检测到了明显MBP融合的TEVp氨基酸突变体特异条带;而含有TEVp识别序列的融合蛋白由胞内自剪切产生的无标签TEVp突变体条带不明显;Trx标签对TEVp的表达水平没有明显改善作用。4.分析了两种标签和TEVp识别序列对6种TEVp突变体酶学活性影响。和前期研究结果相比,MBP提高TEVp氨基酸突变体的水溶性和活性,但是对同义突变体的活性没有明显作用,插入的识别序列近一步提高TEVp氨基酸突变体活性,但是对同义突变体没有明显作用。Trx标签对TEVp氨基酸突变体的水溶性没有较大改善但可提高其活性,但对同义突变体活性没有提升,插入的TEVp识别序列也没有明显提升两类突变体活性的作用。5.分析了提高胞内稀有tRNA水平对融合的TEVp突变体表达和酶学活性的影响。在RosettaTM(DE3)中,融合MBP和Trx标签的TEVp氨基酸突变的活性要比在BL21(DE3)中表达时高,Trx标签对氨基酸突变体的活性提升水平要比MBP标签高;而融合两种标签的TEVp同义突变体的活性相比在BL21(DE3)表达时没有明显的改善。综上所述,本实验证明在不同温度胁迫下,不同类型的分子伴侣改善TEVp突变体特别是同义突变体的表达水平的作用情况存在明显差异;MBP融合标签可以改善TEVp氨基酸突变体水溶性和活性,改善效应受到TEVp识别序列的影响;Trx融合标签改善TEVp氨基酸突变体的活性不受TEVp识别序列的影响;提高稀有tRNA丰度及两类融合标签对TEVp同义突变体的活性并未有较好的改善,暗示了同义突变造成的蛋白质折迭损伤是受基因水平调控的,难以在翻译后水平上被修复。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
融合伴侣论文参考文献
[1].刘延娟.融合超酸性短肽增强大肠杆菌分子伴侣DnaJ活性的研究[D].云南师范大学.2018
[2].朱克骏.分子伴侣和融合标签改善TEV蛋白酶折迭的效应[D].安徽农业大学.2016
[3].马应福.媒介融合背景下文化综合类期刊的转型与品牌建设——兼谈《读者》对《人生与伴侣》的启示[J].新闻爱好者.2016
[4].常镜,欧阳清,杜晓,杨安钢,赵晶.应用分子伴侣探索e23sFv/His融合蛋白的可溶性表达[J].细胞与分子免疫学杂志.2015
[5].王伟,邹文艺,范清林,宋礼华.瑞替普酶融合蛋白的表达、纯化及分子伴侣对其复性的影响[J].安徽医科大学学报.2013
[6].王伟.瑞替普酶融合蛋白的表达、纯化及分子伴侣对其复性的影响[D].安徽医科大学.2013
[7].张雅娟,肖娟娟,赵艳霞,王尉平.人类脂肪瘤高速泳动蛋白融合伴侣类基因LHFPL2的组织表达谱及亚细胞定位[J].扬州大学学报(农业与生命科学版).2012
[8].邓守恒,蔡晓军,李林均,俞远东,李芳.硒化壳聚糖通过促进PML-RARα融合蛋白与分子伴侣Hsp90解离下调融合蛋白水平[J].时珍国医国药.2010
[9].孙卫国.DsbA-DsbA~（mut）融合蛋白作为分子伴侣在原核表达系统中的作用研究[D].中国人民解放军军事医学科学院.2009
[10].本报,谭啸.IT要成为业务“伴侣”[N].计算机世界.2008