李红叶
（南京瑞东医院儿科江苏南京210033）
【摘要】目的：探讨肺炎支原体咽拭子快速培养法在支原体肺炎早期诊断中的临床价值。方法：选取本院2012年5月～2014年8月收治的下呼吸道感染患儿139例，将其分为病程≤7d组及﹥7d组，分别进行肺炎支原体咽拭子培养与肺炎支原体MP-IgM检测。比较两组不同方法的阳性率。结果：≤7d组中咽拭子培养阳性率显著高于肺炎支原体MP-IgM检测，P＜0.05；﹥7d组中两组阳性率比较差异无统计学意义，P＞0.05。结论：咽拭子快速培养法对病程一周内的早期支原体感染的诊断价值优于MP-IgM检测。
【关键词】咽拭子快速培养；支原体MP-IgM检测；早期诊断
【中图分类号】R446【文献标识码】A【文章编号】1007-8231（2015）19-0087-02
近年来，肺炎支原体感染率呈逐年上升趋势，临床表现多种多样，且很难与病毒细菌等其他病原微生物感染鉴别，目前临床最常用的诊断方法为支原体MP-IgM检测，但血MP-IgM产生较晚，不利于临床早期诊断治疗。我院自2012年采用肺炎支原体咽拭子快速测定培养试剂盒，对支原体感染的快速诊断起到了较好效果。现将结果报道如下。
1.资料与方法
1.1一般资料
选取2012年5月～2014年8月我院收治的下呼吸道感染患儿139例，其中男74例，女65例，年龄10月～11岁，平均年龄±4.26岁。各患儿均符合下呼吸道感染临床诊断标准。且排除肺结核、肺部占位性病变、异物吸入及先天免疫性缺陷等疾病，所有患儿就诊前1周均未应用过大环内酯类抗生素。将全部患儿按入院时病程分为两组：≤7天组70例，＞7天组69例，两组患儿在性病、年龄及临床表现等方面均无差异性，P＞0.05，无统计学意义。所有患儿家长均知情同意。
1.2方法
入院后所有患儿均给予咽拭子支原体快速培养及血清MP-IgM检测。
1.2.1咽拭子快速培养法清晨未进食前，温开水漱口后，采用支原体（Uu/Mh/MP）分离鉴定培养基（珠海迪尔生物工程有限公司，粤食药监械字2008第2400319号），以生理盐水湿润的无菌拭子在患儿咽喉部经过数次捻转后，将采集的标本拭子插入培养瓶，在靠近液面上方的瓶壁挤压旋转使拭子中样本渗入。旋紧瓶盖，置35～37℃孵箱，24小时观察结果，培养基由紫色变为绿色进而变为清晰透明黄色为阳性。不变色者继续放置24小时，仍不变色为阴性。
1.2.2血清肺炎支原体IgM检测取患儿3ml血液经离心10min后分离出血清，以ELLS法按操作程序完成检测，MP抗体滴度≥1：80为阳性，或一周后双份血清MP抗体滴度四倍以上升高也为阳性。
1.3统计学处理
采用SPSS11.0统计软件。计数资料采用均数±标准差表示，阳性率的比较采用χ2检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。
2.结果
用两种方法检测处于不同发病阶段中的患儿，其中病程≤7天组中咽拭子培养阳性率明显高于血清MP-IgM检测阳性率，P＜0.05。＞7天组中咽拭子快速培养与血清MP-IgM检测阳性率比较差异无统计学意义，P＞0.05。比较结果见下表。
3.讨论
支原体是介于细菌和病毒之间的微小病原体，其尖端附着于气道纤毛上皮细胞受体上，分泌毒性物质，损害上皮细胞，使粘膜清除功能异常，导致慢性咳嗽。且由于MP与人体某些组织存在部分共同抗原，故感染后可形成相应组织的自身抗体，导致多系统免疫损害[1]。据报道中国MP感染率在流行高峰期可达33%～35%[2]，所以早期快速地检查出病原体，及时应用大环内酯类抗生素有利于缩短患儿治疗病程，减少各系统并发症的发生。
目前肺炎支原体感染的实验室诊断方法主要依靠支原体培养、血清学检查和核酸检测等检查手段[3]。临床上MP感染最常见的检测方法是血清MP-IgM检测[4]，MP-IgM大多于起病后第一周开始出现，至第三四周达高峰，2～4个月消失，故IgM多在发病后7～10天检测为最佳时机[5]，但此时间明显不利于临床的早期诊断与及时治疗。此外PCR或特异性基因探针检测病原体DNA快速、敏感、特异性高，可做早期诊断方法，但试剂和仪器昂贵无法在临床推广。传统的MP分离培养鉴定，操作繁琐且阳性率低，对结果进行判定需要2～3周，大多不能应用于临床。肺炎支原体咽拭子快速培养法是近年用于早期检测支原体感染的方法之一，其应用肺炎支原体的代谢产物使专用培养液中的指示剂颜色发生改变来判断其生长，以检测病原体的存在，不受发病时间影响。
本次研究显示，病程≤7天组中患儿咽拭子培养阳性率明显高于血清MP-IgM检测，病程＞7天组患儿血清MP-IgM检测与咽拭子快速培养组阳性率无明显差异。提示咽拭子快速培养法与血清MP-Ig检测对不同病程的支原体感染诊断具有差异性，血清MP-IgM检测对病程＞7天患儿更具有临床意义。咽拭子快速培养法对病程一周内的早期支原体感染的诊断价值优于MP-IgM检测。在此次试验中，咽拭子快速培养法总阳性率36.69%，血清肺炎支原体IgM检测总阳性率32.37%，P＞0.05，差异无统计学意义，提示咽拭子快速培养法与MP-IgM检测法同样对临床MP-IgM诊断具有可靠性。
支原体咽拭子快速培养法是利用培养基中所含物质被支原体生长产物分解变色来判断其是否存在。支原体分离鉴定培养基中主要含支原体基础肉汤、酵母提取液、指示剂、尿素、葡萄糖、生长因子等，当MP生长时，葡萄糖被分解，生成的酸性物质引起PH下降，培养基由紫色变成黄色。培养基内加有抑菌剂，可抑制细菌和真菌的生长，故对MP的灵敏度较高，特异性强。因检测结果很大程度上依赖于标本的采集，采集标本中受污染会导致培养结果准确性下降。所以在采集前应尽可能要求患儿漱口、暂不进食，保持口腔清洁，以提高培养结果准确率。
咽拭子MP快速培养法可以在MP感染起病初期采取标本检测，所以对早期未生成抗体的感染患儿尽早诊断，及时治疗，具有积极意义。且MP快速培养法对机体无创伤性，患儿易于接受，对实验室条件要求不高，特异性强，灵敏度高，值得在临床中开展应用。
【参考文献】
[1]薛辛东，杜立中.《儿科学》人民卫生出版社2006第十二章第六节肺炎p291.
[2]辛德莉，李贵，李娟等.北京地区MP肺炎的流行状况[J].实用儿科临床杂志，2006.21(16):1054-1055.
[3]鲁继荣，刘丽.儿童非典型病原体的实验室诊断[J].临床儿科杂志，2009.2(7):612-615.
[4]陈扬清.肺炎支原体抗体检测在诊断儿童肺炎中的意义[J].现代诊断与治疗，2012.23（6）：767.768.
[5]袁壮，董宗祈，鲁继荣等.小儿肺炎支原体诊断治疗中的几个问题[J].中国实用儿科杂志，2002.17（8）：449-457.