导读:本文包含了亚洲璃眼蜱唾液腺论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:亚洲璃眼蜱,转录组,定量蛋白质组,iTRAQ
亚洲璃眼蜱唾液腺论文文献综述
李静[1]（2016）在《利用组学方法研究亚洲璃眼蜱唾液腺协助其高效吸血的分子机制》一文中研究指出蜱是世界上仅次于蚊子的第二大吸血节肢动物。吸血过程中不但破坏宿主(包括人)皮肤组织造成多种病原体侵染,同时蜱类也是多种极其危险病原体的传播媒介,如伯氏疏螺旋体、粒细胞无性体、斑疹伤寒等。因此对其研究具有重要的意义。雌蜱在吸血过程中身体会经历巨大的变化,特别是交配完成后,雌蜱体积会迅速增大数十倍,最终依靠大量的血液提供原料和能量来完成产卵活动,因此全面了解蜱类不同吸血期的标志性分子对于分析这一物种特殊的生活史具有重要的意义。除此之外蜱类的重要器官——唾液腺具有特殊的生理机能,可以促进蜱类在短时期内大量吸血,因此解析唾液腺的分子机能对于全面了解并开展蜱类的综合防治具有重要意义。本实验首次采用高通量第二代测序技术(Illumina HiSeq2500)对饥饿期、交配前吸血期、交配后半饱期和饱血期的亚洲璃眼蜱进行了转录组测序,以期找到不同吸血期蜱类所表达的特殊基因,为全面了解蜱类吸血和交配过程中的生理机能奠定基础,同时该数据作为后期开展唾液腺的定量蛋白质组研究的Database,为全面分析唾液腺的生理机能奠定基础。测序结果共得到16.39 Gb Clean Data,各样品Q30碱基百分比均不小于82.91%。将Clean Data中的Reads进行拼接组装,共得到71586条Unigene。Unigene的N50为2109,预示着基因的组装完整性较高。将这些Unigene与Nr、Uniprot、GO、COG、KOG、KEGG、Pfam七个数据库分别进行BLAST比对,其中在Uniprot库中注释上相关功能的基因数为15414个,同时对差异基因进行GO分析,从“细胞组分”、“分子功能”和“代谢过程”叁方面,来对亚洲璃眼蜱生长过程中出现的差异变化进行描述。最终将这些基因翻译成相应的氨基酸序列,作为定量蛋白质组学研究的Database。通过计算Unigene的FPKM值寻找亚洲璃眼蜱体内的表达基因,并比较同一Unigene在四个时期表达值的高低变化,共发现6448个在四个吸血时期均出现表达量变化的基因。同时利用iTRAQ定量蛋白质组学方法对四个吸血时期的雌蜱唾液腺中所有蛋白质进行了高通量定量研究,用114~117四标iTRAQ试剂分别标定四个吸血时期的雌蜱唾液腺蛋白,结果显示在这四个时期表达量均出现变化的蛋白有617个。通过对结果中差异蛋白的分析,使得我们能够更加全面的了解亚洲璃眼蜱唾液腺的生理机能,以及更深层次的调控机制和部分物质的代谢规律,为研究和探寻蜱类的综合防治提供了有力的理论支撑。(本文来源于《河北师范大学》期刊2016-03-10）
张冰炳,龚海燕,周勇志,曹杰,张厚双[2]（2014）在《亚洲璃眼蜱唾液腺多肽Ha-11的鉴定、表达和生物学功能的初步研究》一文中研究指出本研究对亚洲璃眼蜱多肽Ha-11的编码基因进行了克隆、表达和初步的功能分析。该基因开放阅读框(open reading frame,ORF)为372 bp,编码123个氨基酸,其中含23个氨基酸的信号肽。将去除信号肽的编码区基因亚克隆至pGEX-4T-1载体,大肠杆菌中诱导表达,获得了37 kDa重组蛋白。抗重组Ha-11蛋白的免疫血清识别半饱血雌蜱的唾液腺中约11 kDa的天然蛋白。Real-time PCR结果表明该基因在亚洲璃眼蜱的各发育阶段、各组织中均有表达,但以若蜱表达量最高,而组织中以淋巴液表达量最高。重组蛋白在体外可以抑制脾细胞增殖和细胞因子IL-2、IFN-γ的分泌。研究结果显示Ha-11在蜱吸血过程中可能具有抗炎作用。(本文来源于《中国动物传染病学报》期刊2014年03期）
张冰炳[3]（2014）在《亚洲璃眼蜱唾液腺两个小肽分子的鉴定》一文中研究指出唾液腺分子在蜱吸血和传播病原过程中起着很重要的作用,如抗凝血、抗炎症和抑制宿主免疫反应,从而有利于病原传播。本论文根跟据实验室前期构建的cDNA文库数据,以亚洲璃眼蜱唾液腺吸血后表达差异的二个小肽分子Ha-11和P18为对象,进行其功能鉴定。亚洲璃眼蜱多肽Ha-11的编码基因开放阅读框(ORF)为372bp,编码123个氨基酸,其中含23个氨基酸的信号肽,生物信息学分析表明该多肽无高度同源性分子,为功能未知的唾液腺多肽。将去除信号肽的编码区基因亚克隆至pGEX-4T-1载体,大肠杆菌中诱导表达,获得了37kDa重组蛋白。抗重组Ha-11蛋白的免疫血清识别半饱血雌蜱的唾液腺中约11kDa的天然蛋白。Real-time PCR结果表明该基因在亚洲璃眼蜱的各发育阶段、各组织中均有表达,但各发育阶段中以若蜱表达量最高,而组织中以淋巴液表达量最高。重组蛋白在体外可以抑制脾细胞增殖和细胞因子IL-2、IFN-γ的分泌。研究结果显示Ha-11在蜱吸血过程中可能具有抗炎作用。亚洲璃眼蜱唾液腺多肽P18的编码基因开放阅读框架ORF为465bp,编码154氨基酸,有一个16个氨基酸的信号肽。生物信息学分析表明该多肽无高度同源性分子,为功能未知的唾液腺多肽。利用表达载体P18/pET-32a/BL21表达蛋白,制备抗血清。Western Blotting分析表明在唾液腺中以天然形式存在。Real-time PCR表明该基因在若蜱、唾液腺中大量表达。脾细胞增殖实验表明,重组蛋白抑制脾细胞增殖并且抑制脾细胞上清中TNF-α、IFN-γ的表达。P18基因的RNAi结果发现对于亚洲蜱的饱血率、孵化率有较大的影响,实验组24h上体率相对对照组由33.75%下降至17.5%,孵化率由18.75%下降至8.88%。实验证明唾液腺两个小肽在吸血过程中起着重要的意义。(本文来源于《上海师范大学》期刊2014-04-01）
程天印,周金林,周勇志,施启顺,林矫矫[4]（2008）在《亚洲璃眼蜱唾液腺新基因GP15的表达和鉴定》一文中研究指出将GP15的阅读框序列插入pET32a(+)制成重组质粒,通过BL21成功表达出相对分子质量为36 000的蛋白。该蛋白可被His.Bind从细菌裂解物纯化出来,也可为抗融合蛋白抗体所识别。表达形式分析显示,融合蛋白以包涵体形式在大肠肝菌内表达。(本文来源于《中国兽医学报》期刊2008年02期）
程天印,周金林,周勇志,施启顺,林矫矫[5]（2006）在《亚洲璃眼蜱唾液腺一新基因(GP_(29))的原核表达及产物鉴定》一文中研究指出将吸血诱导的亚洲璃眼蜱唾液腺差异表达基因GP29的开放性阅读框插入pGEX-4T-1,转化BL21,表达出一相对质量为53 ku的蛋白,其大小与预计结果一致。蛋白质的肽质量图谱和“1381.7511”肽段序列两方面的结果证明,SDS-PAGE胶板上相对质量为53 ku的蛋白就是由目的基因表达的GST融合蛋白。该蛋白与SwissPROT库中的任何蛋白均有较大差别,可能是一个新功能分子。(本文来源于《畜牧兽医学报》期刊2006年11期）
程天印,周金林[6]（2006）在《亚洲璃眼蜱唾液腺差异表达基因文库的构建及分析》一文中研究指出单雌蜱繁殖群中挑选未吸血雌蜱60只,随机分成Ⅰ、Ⅱ两组。Ⅰ组直接剖取唾液腺。Ⅱ组于吸血后第5天采集,分离唾液腺。Trizol法提取总RNA,经第一链合成、LD-PCR、Ras Ⅰ酶切、接头连接和抑制消减杂交(SSH)等步骤,获得差异表达基因的cDNA片段。将纯化的cDNA片段与pGEM T-Easy 载体连接,转化DHSa,获得159个白色菌落。酶切检查表明,142个克隆含有插入片段,片段大小为(本文来源于《全国动物生理生化第九次学术交流会论文摘要汇编》期刊2006-08-01）
程天印,周金林[7]（2006）在《亚洲璃眼蜱唾液腺新基因GP_(15)的表达和鉴定》一文中研究指出将GP15的阅读框序列插入ET32a(+)制成重组质粒,通过BL21成功表达出一相对质量为36000的蛋白。该蛋白可被His／Bind从细菌裂解物纯化出来,也可为抗融合蛋白抗体所识别。表达形式分析显示, 融合蛋白以包涵体形式在大肠肝菌内表达。(本文来源于《全国动物生理生化第九次学术交流会论文摘要汇编》期刊2006-08-01）
程天印,周金林[8]（2006）在《亚洲璃眼蜱唾液腺-新基因(GP_(29))的原核表达及产物鉴定》一文中研究指出将吸血诱导的亚洲璃眼蜱唾液腺差异表达基因GP29开放性阅读框插入pGEX-4T-1,转化BL21,表达出一相对质量为53000μ的蛋白,其大小与预计结果一致。蛋白质的肽质量图谱和“1381．7511”肽段序列两方面的结果证明,SDS-PAGE胶板上相对质量为53000μ的蛋白就是由目的基因表达的GST融合蛋白。该蛋白与Swiss PROT库中的任何蛋白均有较大差别,可能是一个新功能分子。(本文来源于《全国动物生理生化第九次学术交流会论文摘要汇编》期刊2006-08-01）
程天印,周金林,周勇志,施启顺,林矫矫[9]（2006）在《亚洲璃眼蜱唾液腺差异表达基因文库的构建及分析》一文中研究指出从单雌蜱克隆群中挑选未吸血雌蜱60只,随机分成两组。未吸血组直接剖取唾液腺。半饱血组于蜱吸血第5d采集,分离唾液腺。Trizol法提取总RNA,经第一链合成、LD-PCR、RasⅠ酶切、接头连接和抑制消减杂交(SSH)等步骤,获得差异表达基因的cDNA片段。将纯化的cDNA片段与pGEMT-Easy载体连接,转化DH5a,获得204个白色菌落。扩增检查表明,136个克隆含有插入片段,片段大小为250bp～850bp。测出有效序列120个。由10个cDNA片段的RT-PCR检查结果初步断定,本研究消减效果良好。由网上资源分析得:21个片段与其他蜱的基因,19个片段与按蚊、库蚊、钩虫、奥斯特线虫等其他吸血寄生虫的基因,9个与果蝇的基因具有同源性。(本文来源于《中国预防兽医学报》期刊2006年03期）
程天印,周金林,周勇志,施启顺,林矫矫[10]（2006）在《亚洲璃眼蜱唾液腺差异表达基因GP_(15)的克隆和分析》一文中研究指出目的通过扩增Ha7.7,获得包含该EST的基因全长,以便研究该基因的生物学功能。方法以Ha7.7-GSP1和Ha7.7-GSP2和Ha7.7-GSP3为引物,RACE法扩增亚洲璃眼蜱雌成蜱唾液腺总RNA,获得基因的5′-端。根据Ha7.7和5′-端序列设计全长引物(Ha7.7-FLP+和Ha7.7-FLP-),扩增cDNA第1链获,得全长cDNA。结果分析表明,基因大小为449bp,由吸血诱导亚洲璃眼蜱成蜱唾液腺表达。结论与数据库资料比对显示,GP15为新纪录(Genbank登录号DQ020265)。(本文来源于《中国病原生物学杂志》期刊2006年02期）
亚洲璃眼蜱唾液腺论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本研究对亚洲璃眼蜱多肽Ha-11的编码基因进行了克隆、表达和初步的功能分析。该基因开放阅读框(open reading frame,ORF)为372 bp,编码123个氨基酸,其中含23个氨基酸的信号肽。将去除信号肽的编码区基因亚克隆至pGEX-4T-1载体,大肠杆菌中诱导表达,获得了37 kDa重组蛋白。抗重组Ha-11蛋白的免疫血清识别半饱血雌蜱的唾液腺中约11 kDa的天然蛋白。Real-time PCR结果表明该基因在亚洲璃眼蜱的各发育阶段、各组织中均有表达,但以若蜱表达量最高,而组织中以淋巴液表达量最高。重组蛋白在体外可以抑制脾细胞增殖和细胞因子IL-2、IFN-γ的分泌。研究结果显示Ha-11在蜱吸血过程中可能具有抗炎作用。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
亚洲璃眼蜱唾液腺论文参考文献
[1].李静.利用组学方法研究亚洲璃眼蜱唾液腺协助其高效吸血的分子机制[D].河北师范大学.2016
[2].张冰炳,龚海燕,周勇志,曹杰,张厚双.亚洲璃眼蜱唾液腺多肽Ha-11的鉴定、表达和生物学功能的初步研究[J].中国动物传染病学报.2014
[3].张冰炳.亚洲璃眼蜱唾液腺两个小肽分子的鉴定[D].上海师范大学.2014
[4].程天印,周金林,周勇志,施启顺,林矫矫.亚洲璃眼蜱唾液腺新基因GP15的表达和鉴定[J].中国兽医学报.2008
[5].程天印,周金林,周勇志,施启顺,林矫矫.亚洲璃眼蜱唾液腺一新基因(GP_(29))的原核表达及产物鉴定[J].畜牧兽医学报.2006
[6].程天印,周金林.亚洲璃眼蜱唾液腺差异表达基因文库的构建及分析[C].全国动物生理生化第九次学术交流会论文摘要汇编.2006
[7].程天印,周金林.亚洲璃眼蜱唾液腺新基因GP_(15)的表达和鉴定[C].全国动物生理生化第九次学术交流会论文摘要汇编.2006
[8].程天印,周金林.亚洲璃眼蜱唾液腺-新基因(GP_(29))的原核表达及产物鉴定[C].全国动物生理生化第九次学术交流会论文摘要汇编.2006
[9].程天印,周金林,周勇志,施启顺,林矫矫.亚洲璃眼蜱唾液腺差异表达基因文库的构建及分析[J].中国预防兽医学报.2006
[10].程天印,周金林,周勇志,施启顺,林矫矫.亚洲璃眼蜱唾液腺差异表达基因GP_(15)的克隆和分析[J].中国病原生物学杂志.2006