导读:本文包含了白草花叶病毒论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献,主要关键词:百合,茎尖培养,病毒病,车前草花叶病毒
白草花叶病毒论文文献综述
吴青青,胡小京,崔嵬,石乐娟,马红叶[1](2019)在《百合车前草花叶病毒的脱毒组培技术》一文中研究指出为百合种苗快速繁殖提供参考,以带有车前草花叶病毒的罗宾娜为材料,采用组培苗与栽培种球2种形式,通过茎尖培养与热处理+茎尖培养2种脱毒方式处理,以获得最佳组培苗的处理方式。结果表明:以MS+6-BA 1.0毫克/升+NAA 0.5毫克/升+2,4-D 0.1毫克/升+蔗糖30克/升+琼脂7克/升+活性炭1克/升,酸碱度5.8为茎尖培养基,能获得百合脱毒的再生植株。(本文来源于《农技服务》期刊2019年05期)
贺丽娜,李金庆,厉艳,粟智平,封立平[2](2019)在《半巢式RT-Realtime PCR方法检测藜草花叶病毒》一文中研究指出[目的]根据藜草花叶病毒(SoMV)全基因组中多聚蛋白质基因序列保守区,分别设计2套TaqMAN探针和引物,建立半巢式实时荧光PCR检测SoMV的新方法。[方法]提取病毒核酸进行反转录操作合成cDNA,依据设计好的2套TaqMAN探针和引物,分别进行实时荧光PCR特异性与灵敏度检测,并进行2套引物探针的扩增效率对比试验。[结果]方法特异性强,灵敏度高达0.4 fg/μL植物总RNA,2套引物探针的扩增效率试验对比结果显示扩增效率几乎完全一样。[结论]该方法适用于藜草花叶病毒的检疫鉴定。(本文来源于《安徽农业科学》期刊2019年02期)
Robe[3](2018)在《荷兰进口百合中车前草花叶病毒的鉴定及分子特征研究》一文中研究指出百合是世界上集观赏、食用为一体的重要园艺作物,植物学分类上属于百合科(Liliaceae)百合属(Lilium)。为满足对百合的巨大需求,中国主要从荷兰引进了大量的百合鳞茎繁殖材料。带毒鳞茎的引进致使百合病毒在中国传播、蔓延。病毒是百合产量提升的重要限制因素。在中国,百合上的病毒主要有百合斑驳病毒(Lilymottlevirus,LMoV)、百合无症病毒(Lilysymptomlessvirus,LSV)和黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus,CMV)。最近,一种新的感染百合的车前草花叶病毒(Plantagoasiaticamosaicvirus,PlAMV)被鉴定,该病毒属于甲型线形病毒科(Alphafilexiviridae)马铃薯X病毒属(Potexvirus),在美国、匈牙利、荷兰、哥斯达黎加、智利、西班牙、英国、意大利、日本、韩国、俄国和中国均有报道。本研究的主要目的是通过高通量测序(Nextgeneration sequencing,NGS)鉴定百合植物中PlAMV,分析其分子特性,利用RT-PCR和RT-qPCR进行验证。首先,建立3个百合样品的混合池进行高通量测序。测得reads序列用Trinity软件拼接成较长的contig片段,使用NCBI在线分析工具BLASTN进行contig序列的比对分析。基于序列比对结果,设计2对引物扩增百合样品中PlAMV的全基因组序列。同时,从北京、云南和辽宁采集百合样品共计40份,提取总RNA,RT-PCR和RT-qPCR方法检测PlAMV的侵染情况,统计发生率。对PCR产物进行克隆测序,使用MEGA6软件构建系统发育树。NGS测序拼接后获得一个长度为6174 nt的contig,与GenBank数据中的登陆的PlAMV分离物序列一致性为78%to 99%。之后,以RT-PCR结合5'和3'RACE方法从百合‘Siberia’中获得PlAMV的全长基因组,该PlAMV-Siberia分离物全长6101 nt。与Potexvirus相似,PlAMV-Siberia包含5个开放阅读框,分别编码156 kDa(ORF1)、25 kDa(ORF2)、12 kDa(ORF3)、13 kDa(ORF4)和12 kDa(ORF5)大小的蛋白。PlAMV-Siberia全基因组与GenBank数据中的登陆的PlAMV分离物核酸序列一致性为78%to 99%,编码区氨基酸序列一致性为49-99%。研究构建了基于ORF1(RdRP)和OFR5(CP)的系统发育树,表明PlAMV-Siberia与PlAMV-Concador分离物关系较近。基于Potexviruses病毒属全基因组的进化发育分析结果表明,PlAMV-Siberia与郁金`香X病毒(Tulip virus X,TVX)聚在一起。最后,本研究设计了特异性引物和TaqMan探针,建立了一步RT-qPCR检测体系,用于快速诊断百合样品中的PlAMV。对已知浓度的总RNA,进行10倍浓度梯度稀释,即从10~(10)到10~1,制作了RT-qPCR的定量标准曲线。研究比较了传统RT-PCR和一步RT-qPCR方法对百合样品中PlAMV的检测特异性、灵敏性和适用性,发现两种检测方法结果基本一致。使用RT-qPCR检测了来自于北京的40个百合样品,仅5个样品显示PlAMV阳性,检出率为12.5%。相较于传统RT-PCR方法,RT-qPCR操作简单、快速、可靠性高,能够用于对百合中PlAMV的常规检测。本研究首次建立了百合样品中PlAMV的TaqMan探针一步RT-qPCR检测方法。(本文来源于《中国农业科学院》期刊2018-05-25)
杨姗萍,廖富荣,艾洪木[4](2018)在《反转录环介导等温扩增技术检测藜草花叶病毒》一文中研究指出藜草花叶病毒(Sowbane mosaic virus,SoMV)为南方菜豆花叶病毒属Sobemovirus的成员,被我国列为禁止进境的检疫性有害生物,它不仅可以侵染藜科杂草,也可侵染葡萄、甜菜、菠菜等经济植物(沈淑琳,1990),主要分布于欧洲及南北美洲国家及南非、日本、土耳其等国家或地区,可通过汁液、昆虫及种子传播。目前,国内外已建立了SoMV的RT-PCR检测方法(陈青等,2010),但尚未有反转录环介导等温扩增(本文来源于《植物保护学报》期刊2018年02期)
李鑫,陈雅诗,朱连,张寅寅,黑多尔[5](2017)在《进境荷兰百合中车前草花叶病毒的分子鉴定及序列分析》一文中研究指出对一株进境隔离种植中疑似病毒症状的荷兰百合进行检测、鉴定。采用RT-PCR方法对疑似样品的部分基因序列进行扩增、测序,比对后,建立系统发育树进行亲缘关系分析。结果表明,采用香石竹潜隐病毒属和马铃薯X病毒属(CarlapCar1I/M4T和Potex 5/Potex 1RC)简并引物均可扩增到预期大小的片段(1 257 nts和737 nts)。序列分析显示,扩增片段与车前草花叶病毒(Plantago asiatica mosaic virus,Pl AMV)3'端序列(包含TGBp2、TGBp1、CP,3’-NTS)和部分依赖于RNA的RNA聚合酶基因序列一致性可达79.9%~99.5%和80.5%~99.3%。利用PlAMV的特异性引物(PlAMV-cpup/PlAMV-cpdw)进行检测,结果进一步证实该百合样品含有PlAMV。通过建立系统发育树得出,该病毒分离物与来自荷兰的PlAMV百合分离物优先聚为一簇,表明二者的亲缘关系最近。这是我国口岸首次截获车前草花叶病毒的报道。(本文来源于《植物病理学报》期刊2017年02期)
冯黎霞,赵立荣,武目涛,于璇[6](2016)在《藜草花叶病毒的研究概述》一文中研究指出藜草花叶病毒(Sowbane mosaic virus,So MV)是菠菜上的重要有害生物,可通过种子、花粉、昆虫介体和机械等方式传播。随着我国种子、种苗进口量的进一步扩大和产业化种植,藜草花叶病毒传入我国的风险非常大。本文综述了藜草花叶病毒的生物学特性、分布、寄主范围、为害症状、传播途径、检测技术等,论述了藜草花叶病毒传入我国的潜在危害性和风险。(本文来源于《中国蔬菜》期刊2016年08期)
李鑫,张寅寅,黑多尔,潘工兵,朱连[7](2016)在《辽宁局全国首次在进境荷兰百合中检出亚洲车前草花叶病毒》一文中研究指出2015年10月,辽宁出入境检验检疫局大窑湾口岸将荷兰进境的百合种球送至国家级重点实验室北方隔离苗圃进行检疫,在隔离种植期间发现一染病植株,经实验室检测确定其为亚洲车前草花叶病毒(Plantago asiatica mosaic virus,Pl AMV),这是我国口岸首次检出该种高风险性植物病毒。亚洲车前草花叶病毒是马铃薯X病毒属(Potexvirus)成员。1976年在前苏联车前草中首次报道,(本文来源于《植物检疫》期刊2016年01期)
辛言言,张永江,马洁,李桂芬[8](2014)在《实时荧光RT-PCR方法检测藜草花叶病毒》一文中研究指出本研究根据藜草花叶病毒(Sowbane mosaic virus,SoMV)基因保守序列设计引物和TaqMan探针,建立了该病毒的实时荧光RT-PCR(Real-time PCR)检测方法。该方法特异性好,可有效区分SoMV、南方菜豆花叶病毒(Southern bean mosaic sobemo virus,SBMV)、烟草环斑病毒(Tobacco ring spot virus,TRSV)、番茄环斑病毒(Tomato ringspot Nepovirus,ToRSV)及南芥菜花叶病毒(Arabis mosaic virus,ArMV);灵敏度高,可检测到0.8fg/μL的总RNA;给SoMV提供了快速灵敏的检测技术以防止其传播扩散。(本文来源于《中国植物病理学会2014年学术年会论文集》期刊2014-07-30)
王婷[9](2013)在《狗尾草花叶病毒的农杆菌侵染性克隆构建与应用》一文中研究指出狗尾草花叶病毒(Foxtail mosaic virus, FoMV)是马铃薯X病毒属(Potexvirus)的成员,单组份、单链、正义RNA、种传病毒,有着广泛的寄主范围,可感染包括水稻、小麦、玉米等56种单子叶植物和至少35种双子叶植物。其基因组大小约6.2kb,与马铃薯X病毒(Potato virus X, PVX)的基因组结构与组成十分相似,目前对于马铃薯病毒载体中PVX的基础性研究已经完成,被作为VIGS载体以及外源蛋白的表达载体广泛应用双子叶植物中,而在国内外利用FoMV作为载体的研究还少有报道。本研究利用分子生物学方法,将FoMV基因组全序列分段克隆到携带有精确转录35S启动子的载体pCB301,获得完整的重组质粒,电转化至农杆菌GV3101,通过浸润接种至普通本氏烟(Nicotiana benthamiana)和RDR6RNA干扰本氏烟(N.benthamiana RDR6)上,观察症状并利用分子生物学进行病毒检测,然后通过摩擦接种的方式将病毒转接至单子叶植物大麦(Hordeum vulgare)上,植株表现出轻微花叶和条纹式退绿等症状,继而通过分子检测方式验证病毒,从而成功构建了基于FoMV的单子叶植物的农杆菌侵染性克隆pCB301-FoMV-wt,为进一步构建FoMV-VIGS奠定基础,也为单子叶植物功能基因组的研究提供了重要理论基础和技术铺垫。实验结果显示:RDR6RNA干扰本氏烟(N.benthamiana RDR6)中病毒含量始终高于普通本氏烟;继而将pCB301-FoMV-wt浸润接种至四个品种的大麦(H. vulgare Golden Promise, Ingrid, Movex, Pallas),结果均未有相应症状发生也未检测到病毒,这表明对于大麦这样的叶片窄而长且表面具有较厚角质的单子叶植物,不易采用农杆菌注射接种的方式进行病毒侵染;研究还表明病毒在植株上是否具有侵染活性不仅与接种方式有关,也与被侵染植物本身的品种有关,在本研究中,品种为H. vulgare Golden Promise的大麦无论是浸润接种还是机械摩擦接种均不能被病毒所侵染。在获得农杆菌侵染性克隆pCB301-FoMV-wt的基础上,利用分子生物学方法,对其进行改造,构建含有2个FoMV CP亚基因组启动子的新克隆,这2个CP亚基因组启动子正向相邻直接重复,在2个CP亚基因组启动子中间引入酶切位点,酶切位点下游含有完整的CP基因及其启动子,获得的克隆是作为候选VIGS载体(pCB301-FoMV-VIGS)。其次在pCB301-FoMV-VIGS基础上分别插入GFP ORF片段和来自大麦(H. vulgareMovex)的内源PDS片段,获得的克隆命名为pCB301-FoMV-PDS、pCB301-FoMV-GFP。将构建的pCB301-FoMV-VIGS、pCB301-FoMV-PDS、pCB301-FoMV-GFP重组质粒通过电转化进入农杆菌GV3101,继而采用浸润接种的方法接种至RDR6RNAi本氏烟上,但植物并无症状显现。摘取本氏烟上的各组病毒接种叶,通过摩擦接种的方法转接病毒至大麦(H. vulgareMovex),结果显示,接种过pCB301-FoMV-VIGS、pCB301-FoMV-PDS、pCB301-FoMV-GFP的大麦均表现出pCB301-FoMV-wt的野生型症状,而并未发生基因沉默效应和绿色荧光显现,分子检测结果也表明只存在野生型pCB301-FoMV-wt病毒。究其原因,首先我们推测病毒在植株体内发生了基因重组效应,造成插入片段丢失,导致改造的FoMV恢复成野生型病毒;其次,转基因所加入的外源基因片段的长度,以及所插入外源基因的位置也有可能是导致其病毒诱导基因沉默没有出现的原因。(本文来源于《浙江理工大学》期刊2013-06-01)
冯黎霞,何瑞芳,钟国强,张洪玲,胡学难[10](2013)在《进境菠菜种子中藜草花叶病毒的免疫捕获RT-PCR检测》一文中研究指出本研究基于藜草花叶病毒(Sowbane mosaic virus,SoMV)外壳蛋白基因的保守区域设计特异性引物,建立了SoMV的免疫捕获反转录PCR(IC-RT-PCR)方法。应用建立的IC-RT-PCR方法,从来自丹麦和荷兰的进境菠菜种子中检测到SoMV。这是我国进境种子中截获SoMV的首次报道。(本文来源于《植物检疫》期刊2013年01期)
白草花叶病毒论文开题报告
(1)论文研究背景及目的
此处内容要求:
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例:
[目的]根据藜草花叶病毒(SoMV)全基因组中多聚蛋白质基因序列保守区,分别设计2套TaqMAN探针和引物,建立半巢式实时荧光PCR检测SoMV的新方法。[方法]提取病毒核酸进行反转录操作合成cDNA,依据设计好的2套TaqMAN探针和引物,分别进行实时荧光PCR特异性与灵敏度检测,并进行2套引物探针的扩增效率对比试验。[结果]方法特异性强,灵敏度高达0.4 fg/μL植物总RNA,2套引物探针的扩增效率试验对比结果显示扩增效率几乎完全一样。[结论]该方法适用于藜草花叶病毒的检疫鉴定。
(2)本文研究方法
调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
白草花叶病毒论文参考文献
[1].吴青青,胡小京,崔嵬,石乐娟,马红叶.百合车前草花叶病毒的脱毒组培技术[J].农技服务.2019
[2].贺丽娜,李金庆,厉艳,粟智平,封立平.半巢式RT-RealtimePCR方法检测藜草花叶病毒[J].安徽农业科学.2019
[3].Robe.荷兰进口百合中车前草花叶病毒的鉴定及分子特征研究[D].中国农业科学院.2018
[4].杨姗萍,廖富荣,艾洪木.反转录环介导等温扩增技术检测藜草花叶病毒[J].植物保护学报.2018
[5].李鑫,陈雅诗,朱连,张寅寅,黑多尔.进境荷兰百合中车前草花叶病毒的分子鉴定及序列分析[J].植物病理学报.2017
[6].冯黎霞,赵立荣,武目涛,于璇.藜草花叶病毒的研究概述[J].中国蔬菜.2016
[7].李鑫,张寅寅,黑多尔,潘工兵,朱连.辽宁局全国首次在进境荷兰百合中检出亚洲车前草花叶病毒[J].植物检疫.2016
[8].辛言言,张永江,马洁,李桂芬.实时荧光RT-PCR方法检测藜草花叶病毒[C].中国植物病理学会2014年学术年会论文集.2014
[9].王婷.狗尾草花叶病毒的农杆菌侵染性克隆构建与应用[D].浙江理工大学.2013
[10].冯黎霞,何瑞芳,钟国强,张洪玲,胡学难.进境菠菜种子中藜草花叶病毒的免疫捕获RT-PCR检测[J].植物检疫.2013