重组磷酸甘油脱氢酶论文-苏明杰,赵红梅

重组磷酸甘油脱氢酶论文-苏明杰,赵红梅

导读:本文包含了重组磷酸甘油脱氢酶论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献,主要关键词:酿酒酵母,甘油-3-磷酸脱氢酶,半乳糖,Profinia

重组磷酸甘油脱氢酶论文文献综述

苏明杰,赵红梅[1](2016)在《重组酿酒酵母甘油-3-磷酸脱氢酶的诱导与纯化》一文中研究指出为了解重组酿酒酵母GCY1基因表达甘油-3-磷酸脱氢酶的情况,以SD-URA 2%葡萄糖、3×YP+6%半乳糖、SC-URA 2%半乳糖和SC-URA2%半乳糖加5%1 M Na Cl等4种培养基诱导培养,粉碎破壁酵母,采用Profinia蛋白质全自动高速纯化,并用SDS-PAGE凝胶电泳测定分子质量。结果显示:含有GCY1基因的酿酒酵母在25℃下振动培养48 h,其OD600 nm吸光值:3×YP+6%半乳糖培养物OD值为8.75,而3×YP+2%半乳糖+5%1 M Na Cl培养物OD值为7.35。采用Profinia低压液相色谱纯化,只有3×YP+2%半乳糖+5%1 M Na Cl培养基中酿酒酵母表达甘油-3-磷酸脱氢酶,且经SDS-PAGE凝胶电泳测得分子质量为65 ku。(本文来源于《饲料研究》期刊2016年02期)

代霄燕,许丽萍,白文成,韩润林[2](2011)在《重组A群链球菌叁磷酸甘油醛脱氢酶与脂蛋白(a)的相互作用》一文中研究指出叁磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)是A群链球菌(group A Streptococcus,GAS)表面的纤溶酶原(Plg)受体之一,其C末端的赖氨酸残基可以与Plg的赖氨酸结合位点(LBS)相结合。脂蛋白(a)[Lp(a)]中的载脂蛋白(a)[Apo(a)]与Plg有很高的同源性。因此本实验室提出了Lp(a)可能与GAS表面的Plg受体相结合,进而可能竞争性抑制GAS与Plg结合的假说。本研究克隆了GAS的GAPDH及其C末端敲除赖氨酸残基的突变体基因,酶切后将其连接到表达载体pASK-IBA37中,并在大肠杆菌BL-21中表达了这两个重组蛋白(rGAPDH和rGAPDHΔ345)。通过酶联免疫吸附试验(ELISA)对rGAPDH和rGAPDHΔ345与Lp(a)的相互作用机制进行了研究。结果表明rGAPDHΔ345与Lp(a)的结合值比rGAPDH显着降低,说明rGAPDH及rGAPDHΔ345与Lp(a)通过LBS发生特异性结合,而且一定浓度的赖氨酸类似物6-氨基己酸(EACA)可以抑制这种结合,Lp(a)对rGAPDH与Plg的相互作用也有明显的抑制。(本文来源于《内蒙古农业大学学报(自然科学版)》期刊2011年03期)

代霄燕[3](2011)在《重组A群链球菌叁磷酸甘油醛脱氢酶与脂蛋白(a)的相互作用》一文中研究指出叁磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)是A群链球菌(group A Streptococcus, GAS)表面的纤溶酶原(Plg)受体之一,其C末端的赖氨酸残基可以与Plg的赖氨酸结合位点(LBS)相结合。脂蛋白(a)[Lp(a)]中的载脂蛋白(a)[Apo(a)]与Plg有很高的同源性,也含有LBS,因此本实验室提出了Lp(a)可能与GAS表面的Plg受体相结合,进而可能竞争性抑制GAS与Plg结合的假说。而且本实验室已经证明了GAS表面的烯醇化酶能够与Lp(a)发生特异性结合。为了更进一步探索Lp(a)是否与其它的GAS表面Plg受体结合,本研究克隆了GAS的GAPDH及其C末端敲除赖氨酸残基的突变体GAPDHΔ345基因,酶切后将其连接到表达载体pASK-IBA37中,并在大肠杆菌BL-21中表达了这两个重组蛋白(rGAPDH和rGAPDHΔ345)。通过酶联免疫吸附试验(ELISA)对rGAPDH和rGAPDHΔ345与Lp(a)的相互作用机制进行了研究。结果表明rGAPDHΔ345与Lp(a)的结合值比rGAPDH显着降低,而且一定浓度的赖氨酸类似物6-氨基己酸(EACA)可以抑制这种结合,说明rGAPDH及rGAPDHΔ345与Lp(a)通过LBS发生特异性结合。另外,Lp(a)对rGAPDH与Plg的相互作用也有明显的抑制。(本文来源于《内蒙古农业大学》期刊2011-04-01)

徐辉[4](2006)在《重组盐生杜氏藻双功能域3-磷酸甘油脱氢酶的表达纯化和部分酶学性质研究》一文中研究指出盐生杜氏藻Dunaliella salina(简称盐藻)是一种抗盐能力很强的单细胞绿藻,具有极强的渗透调节能力。甘油是它的主要渗透调节物质。杜氏藻细胞内有一条专门的调节渗透压的代谢途径,即甘油循环代谢途径,它能对外界盐浓度变化作出迅速反应,调节胞内甘油浓度以使细胞内外达到渗透平衡。3-磷酸甘油(G-3-P)脱氢酶是甘油循环中的第一个酶,在其中起重要的调节作用。因此研究杜氏藻G-3-P脱氢酶的性质具有重要意义。 实验室在前期工作中已获得盐藻Osm-GPD的全长基因,生物信息学分析表明该基因结构相对于其它物种的GPD基因而言非常特殊,即同时具有两个功能结构域:GPD Domain和SGPP Domain。本研究在对具有双功能域的重组盐生杜氏藻3-磷酸甘油脱氢酶的表达条件优化和纯化的基础上,对其性质进行了初步研究。 1、表达条件的优化 通过降低诱导温度和改变诱导剂浓度浓度的方法,在30℃,0.3mmol/L IPTG的条件下,诱导工程菌株BL21(DE3)/pET32-GPD1.9,目的蛋白质重组盐生杜氏藻3-磷酸甘油脱氢酶以可溶蛋白的形式存在于上清中。 2、重组盐生杜氏藻3-磷酸甘油脱氢酶的纯化 将酶粗提液经Chelating F.F.金属螯合层析,透析,肠激酶酶切,Chelating H.P.金属螯合层析等步骤,分离纯化了重组3-磷酸甘油脱氢酶,SDS-PAGE结果都显示出一条带,GPD(逆向)比活性为192U/mg,GPP比活性为4440U/mg;SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳测得相对分子质量为60KDa。 3、酶活性影响因素的测定(本文来源于《四川大学》期刊2006-05-15)

张咏莉,吴德,余新炳[5](2005)在《华支睾吸虫3-磷酸甘油醛脱氢酶重组蛋白的纯化、酶学活性及免疫学研究》一文中研究指出目的体外制备华支睾吸虫3-磷酸甘油醛脱氢酶重组蛋白(CsGAPDH),分析其酶学活性及免疫学特性。方法常规表达重组质粒pGEX-4T-1-GAPDH,用谷胱甘肽-S-转移酶(GST)亲和纯化试剂盒纯化重组蛋白,经十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE),用凝血酶和纯化柱酶切、纯化的CsGAPDH免疫BALB/c小鼠,制备抗血清。ELISA检测抗IgG抗体滴度,浓缩型S-P免疫组化3步法检测CsGAPDH抗原在免疫小鼠体内的分布和表达。蛋白质印迹法(Western blotting)鉴定其抗血清的特异性。建立酶反应体系测定重组蛋白CsGAPDH的酶催化活性。结果纯化蛋白样品呈单一条带。免疫动物获取CsGAPDH抗血清,在免疫过程中抗体滴度呈连续上升趋势。CsGAPDH抗原分布和表达于小鼠肌细胞膜部位。免疫小鼠血清具有抗CsGAPDH特异性抗体。重组蛋白CsGAPDH具有酶生理活性,其酶活力单位为2 872 U min-1.ml-1。结论制备的重组蛋白CsGAPD H具有较好的酶活性和免疫原性。(本文来源于《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》期刊2005年04期)

重组磷酸甘油脱氢酶论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

叁磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)是A群链球菌(group A Streptococcus,GAS)表面的纤溶酶原(Plg)受体之一,其C末端的赖氨酸残基可以与Plg的赖氨酸结合位点(LBS)相结合。脂蛋白(a)[Lp(a)]中的载脂蛋白(a)[Apo(a)]与Plg有很高的同源性。因此本实验室提出了Lp(a)可能与GAS表面的Plg受体相结合,进而可能竞争性抑制GAS与Plg结合的假说。本研究克隆了GAS的GAPDH及其C末端敲除赖氨酸残基的突变体基因,酶切后将其连接到表达载体pASK-IBA37中,并在大肠杆菌BL-21中表达了这两个重组蛋白(rGAPDH和rGAPDHΔ345)。通过酶联免疫吸附试验(ELISA)对rGAPDH和rGAPDHΔ345与Lp(a)的相互作用机制进行了研究。结果表明rGAPDHΔ345与Lp(a)的结合值比rGAPDH显着降低,说明rGAPDH及rGAPDHΔ345与Lp(a)通过LBS发生特异性结合,而且一定浓度的赖氨酸类似物6-氨基己酸(EACA)可以抑制这种结合,Lp(a)对rGAPDH与Plg的相互作用也有明显的抑制。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

重组磷酸甘油脱氢酶论文参考文献

[1].苏明杰,赵红梅.重组酿酒酵母甘油-3-磷酸脱氢酶的诱导与纯化[J].饲料研究.2016

[2].代霄燕,许丽萍,白文成,韩润林.重组A群链球菌叁磷酸甘油醛脱氢酶与脂蛋白(a)的相互作用[J].内蒙古农业大学学报(自然科学版).2011

[3].代霄燕.重组A群链球菌叁磷酸甘油醛脱氢酶与脂蛋白(a)的相互作用[D].内蒙古农业大学.2011

[4].徐辉.重组盐生杜氏藻双功能域3-磷酸甘油脱氢酶的表达纯化和部分酶学性质研究[D].四川大学.2006

[5].张咏莉,吴德,余新炳.华支睾吸虫3-磷酸甘油醛脱氢酶重组蛋白的纯化、酶学活性及免疫学研究[J].中国寄生虫学与寄生虫病杂志.2005

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