本文主要研究内容
作者刘芳君（2019）在《甘蔗体细胞融合的分子基础研究》一文中研究指出：甘蔗是喜温作物,甘蔗新台糖22号(ROC22)具有高产高糖等优良特性但耐寒性差,桂糖28号(GT28)是耐寒品种,用ROC22和GT28进行体细胞融合,可望获得耐寒性更强且农艺性状优良的杂交后代。但甘蔗杂合体细胞再生植株目前仍存在很大的困难,原生质体是基因功能分析检测的优质材料,可为研究体细胞融合过程中的分子机理以及解决杂合体细胞再生植株困难提供新的途径。本研究以ROC22和GT28甘蔗品种为材料,探究了甘蔗原生质体RNA提取困难的原因及影响甘蔗原生质体RNA的提取条件,筛选了最适宜甘蔗RNA提取的方法,以甘蔗幼叶和酶解后的原生质体为材料,运用转录组测序技术筛选了甘蔗体细胞融合过程中幼叶酶解前后的差异表达基因,分析了甘蔗杂合体细胞在不同激素浓度下再生相关关键基因的表达情况。研究结果表明:(1)影响甘蔗原生质体RNA提取的两大因素是原生质体RNase活性和渗透压。原生质体RNase活性与原生质体的活力呈极显著负相关,渗透压与原生质体RNase活性呈显著正相关。提取高质量的甘蔗原生质体总RNA需要保证原生质体的活力至少在70%以上,用改良Trizol法提取的甘蔗原生质体总RNA纯度好且产量高。(2)通过对甘蔗幼叶酶解前后的材料进行转录组测序,分析了甘蔗体细胞融合过程中酶解前后的基因表达差异。共得到117411个Unigene,43460个差异表达基因,其中有21123个基因上调表达,22337个基因下调表达。其中与甘蔗体细胞融合密切相关的GO term有发育过程(developmental process)、生长(growth)、细胞增殖(cell proliferation)、转录调控因子活性(transcription regulator activity)、信号转导因子活性(signal transducer activity)、抗氧化活性(antioxidant activity)、氧化胁迫(oxidative stress)、激酶活性(kinase activity)、细胞周期(cell cycle)、细胞分化(cell differentiation)、植物激素信号转导(plant hormone signal transdution)等。杂合体细胞再生相关的关键基因(细胞壁合成、细胞周期调控、细胞增殖、激素信号转导途径)在甘蔗体细胞杂合体细胞融合的不同阶段表达量差异显著,以上结果表明体细胞融合的处理过程可能在分子水平上对杂合体细胞再生植株造成一定程度的影响。(3)将甘蔗杂合体细胞在不同激素浓度下培养,研究了甘蔗杂合体细胞分别在最优和最差激素组合下的生长情况和再生关键基因的差异表达。结果表明,最优激素组合显著提高甘蔗杂合体细胞细胞壁再生速度,且有利于甘蔗杂合体细胞的增殖分裂,在培养30天时,最优激素组合培养条件下的植板率更高;选取了细胞壁合成(GAUT、CESA)、细胞周期调控(Cvclin B、Cyclin A)、细胞增殖(PSK)、生长素和细胞分裂素信号转导途径(Aux/IAA、Cyclin D3、CDC2)8个关键基因,分析了甘蔗杂合体细胞在最优和最差激素组合培养下的8个关键基因的差异表达,结果表明,荧光定量结果与杂合体细胞再生过程的生理指标一致,可见激素是通过调控杂合体细胞再生相关关键基因从而在杂合体细胞再生中起至关重要的作用。
Abstract
gan zhe shi xi wen zuo wu ,gan zhe xin tai tang 22hao (ROC22)ju you gao chan gao tang deng you liang te xing dan nai han xing cha ,gui tang 28hao (GT28)shi nai han pin chong ,yong ROC22he GT28jin hang ti xi bao rong ge ,ke wang huo de nai han xing geng jiang ju nong yi xing zhuang you liang de za jiao hou dai 。dan gan zhe za ge ti xi bao zai sheng zhi zhu mu qian reng cun zai hen da de kun nan ,yuan sheng zhi ti shi ji yin gong neng fen xi jian ce de you zhi cai liao ,ke wei yan jiu ti xi bao rong ge guo cheng zhong de fen zi ji li yi ji jie jue za ge ti xi bao zai sheng zhi zhu kun nan di gong xin de tu jing 。ben yan jiu yi ROC22he GT28gan zhe pin chong wei cai liao ,tan jiu le gan zhe yuan sheng zhi ti RNAdi qu kun nan de yuan yin ji ying xiang gan zhe yuan sheng zhi ti RNAde di qu tiao jian ,shai shua le zui kuo yi gan zhe RNAdi qu de fang fa ,yi gan zhe you xie he mei jie hou de yuan sheng zhi ti wei cai liao ,yun yong zhuai lu zu ce xu ji shu shai shua le gan zhe ti xi bao rong ge guo cheng zhong you xie mei jie qian hou de cha yi biao da ji yin ,fen xi le gan zhe za ge ti xi bao zai bu tong ji su nong du xia zai sheng xiang guan guan jian ji yin de biao da qing kuang 。yan jiu jie guo biao ming :(1)ying xiang gan zhe yuan sheng zhi ti RNAdi qu de liang da yin su shi yuan sheng zhi ti RNasehuo xing he shen tou ya 。yuan sheng zhi ti RNasehuo xing yu yuan sheng zhi ti de huo li cheng ji xian zhe fu xiang guan ,shen tou ya yu yuan sheng zhi ti RNasehuo xing cheng xian zhe zheng xiang guan 。di qu gao zhi liang de gan zhe yuan sheng zhi ti zong RNAxu yao bao zheng yuan sheng zhi ti de huo li zhi shao zai 70%yi shang ,yong gai liang Trizolfa di qu de gan zhe yuan sheng zhi ti zong RNAchun du hao ju chan liang gao 。(2)tong guo dui gan zhe you xie mei jie qian hou de cai liao jin hang zhuai lu zu ce xu ,fen xi le gan zhe ti xi bao rong ge guo cheng zhong mei jie qian hou de ji yin biao da cha yi 。gong de dao 117411ge Unigene,43460ge cha yi biao da ji yin ,ji zhong you 21123ge ji yin shang diao biao da ,22337ge ji yin xia diao biao da 。ji zhong yu gan zhe ti xi bao rong ge mi qie xiang guan de GO termyou fa yo guo cheng (developmental process)、sheng chang (growth)、xi bao zeng shi (cell proliferation)、zhuai lu diao kong yin zi huo xing (transcription regulator activity)、xin hao zhuai dao yin zi huo xing (signal transducer activity)、kang yang hua huo xing (antioxidant activity)、yang hua xie pai (oxidative stress)、ji mei huo xing (kinase activity)、xi bao zhou ji (cell cycle)、xi bao fen hua (cell differentiation)、zhi wu ji su xin hao zhuai dao (plant hormone signal transdution)deng 。za ge ti xi bao zai sheng xiang guan de guan jian ji yin (xi bao bi ge cheng 、xi bao zhou ji diao kong 、xi bao zeng shi 、ji su xin hao zhuai dao tu jing )zai gan zhe ti xi bao za ge ti xi bao rong ge de bu tong jie duan biao da liang cha yi xian zhe ,yi shang jie guo biao ming ti xi bao rong ge de chu li guo cheng ke neng zai fen zi shui ping shang dui za ge ti xi bao zai sheng zhi zhu zao cheng yi ding cheng du de ying xiang 。(3)jiang gan zhe za ge ti xi bao zai bu tong ji su nong du xia pei yang ,yan jiu le gan zhe za ge ti xi bao fen bie zai zui you he zui cha ji su zu ge xia de sheng chang qing kuang he zai sheng guan jian ji yin de cha yi biao da 。jie guo biao ming ,zui you ji su zu ge xian zhe di gao gan zhe za ge ti xi bao xi bao bi zai sheng su du ,ju you li yu gan zhe za ge ti xi bao de zeng shi fen lie ,zai pei yang 30tian shi ,zui you ji su zu ge pei yang tiao jian xia de zhi ban lv geng gao ;shua qu le xi bao bi ge cheng (GAUT、CESA)、xi bao zhou ji diao kong (Cvclin B、Cyclin A)、xi bao zeng shi (PSK)、sheng chang su he xi bao fen lie su xin hao zhuai dao tu jing (Aux/IAA、Cyclin D3、CDC2)8ge guan jian ji yin ,fen xi le gan zhe za ge ti xi bao zai zui you he zui cha ji su zu ge pei yang xia de 8ge guan jian ji yin de cha yi biao da ,jie guo biao ming ,ying guang ding liang jie guo yu za ge ti xi bao zai sheng guo cheng de sheng li zhi biao yi zhi ,ke jian ji su shi tong guo diao kong za ge ti xi bao zai sheng xiang guan guan jian ji yin cong er zai za ge ti xi bao zai sheng zhong qi zhi guan chong yao de zuo yong 。
论文参考文献
论文详细介绍
论文作者分别是来自广西大学的刘芳君，发表于刊物广西大学2019-10-14论文，是一篇关于甘蔗论文,体细胞融合论文,原生质体论文,激素论文,广西大学2019-10-14论文的文章。本文可供学术参考使用，各位学者可以免费参考阅读下载，文章观点不代表本站观点，资料来自广西大学2019-10-14论文网站，若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权，请联系我们删除。
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