导读:本文包含了果糖结合蛋白论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献,主要关键词:固醇调节元件结合蛋白-1c,五层龙,果糖,脂肪肝
果糖结合蛋白论文文献综述
刘磊[1](2014)在《五层龙提取物改善高果糖所致大鼠脂肪肝的重要分子靶点—肝脏固醇调节元件结合蛋白-1c》一文中研究指出目的:五层龙提取物(SOR)为治疗肥胖和糖尿病的传统中草药,这两种疾病都与脂肪肝密切相关。已有研究证实SOR具有改善脂肪肝的作用,但是其机制尚不清楚。本文旨在研究SOR改善高果糖所致大鼠脂肪肝的分子机制。方法:选取24只健康SD大鼠随机分为4组(n=6),饲养10周:(1)空白对照组:自由饮水;(2)果糖对照组:给予10%果糖水(w/v,每天配制);(3)SOR低浓度药物组:果糖溶液+SOR提取物5mg/kg;(4)SOR高浓度药物组:果糖溶液+SOR提取物20mg/kg。每叁天记一次体重,并根据体重变化调整用药组大鼠给药量。用药组起始果糖水浓度均为10%,每天记录摄食量与饮用果糖水量,并计算果糖摄入量,根据果糖对照组近叁天果糖摄入量,调整果糖水浓度使用药组大鼠果糖摄入量与果糖对照组一致。于第10周末,夜间禁食14h后,称重,乙醚麻醉下,摘除眼球取血,分离血浆检测TC、TG、血糖、NEFA及胰岛素含量;处死大鼠,取肝脏称重,行肝脏H.E染色和油红O染色,同时检测肝脏TG、TC含量;用TRIzol提取肝组织总RNA,逆转录获得cDNA,用Real-Time PCR方法检测肝脏脂质合成转录因子SREBP-1c、ChREBP及其下游相关基因FAS、ACC-1、SCD-1、LPK和脂质氧化相关基因PPAR-α、CPT-1α、ACO及PPAR-γ、CD36的mRNA水平;提取肝细胞核蛋白,用Western blot方法检测调节脂质合成的两个关键转录因子SREBP-1c和ChREBP的蛋白表达量。实验数据应用StatView统计软件进行分析,以均数±标准误(x±SEM)表示,t检验进行两组数据的差异比较。结果:1.生化指标:与空白对照组相比,果糖对照组的血浆TC、TG、血糖及胰岛素含量明显增加,而NEFA显着下降(P<0.05);SOR用药组相对于果糖对照组,血浆TC、TG、血糖、胰岛素及NEFA均无明显改变(P>0.05)。2.肝相关参数:各组大鼠肝重与肝TC含量无差异(P>0.05);但果糖对照组与空白对照组相比,肝重与体重比、肝TG含量明显升高(P<0.05);SOR(20mg/kg)显着下调果糖引起的肝TG含量的升高(P<0.05)。3.形态学显示:(1)H.E染色显示,果糖对照组肝细胞空泡化的程度较空白对照组明显增强,SOR(20mg/kg)明显改善肝细胞空泡化的程度。(2)ORO染色显示,与空白对照组比较,果糖对照组ORO染色阳性面积区域及阳性面积率明显增加(P<0.05),SOR(20mg/kg)具有明显的改善作用(P<0.05)。4. Real-Time PCR结果:果糖对照组相对于空白对照组,显着上调肝脏SREBP-1c、FAS、ACC-1、SCD-1、ChREBP及LPK mRNA的表达并下调ACO与CPT-1α mRNA的表达(P<0.05),对PPAR-γ、PPAR-α、及CD36mRNA无显着性影响(P>0.05);SOR(20mg/kg)明显抑制肝脏SREBP-1c、FAS、ACC-1、SCD-1及ChREBP mRNA的过表达(P<0.05),但对LPK、PPAR-γ、PPAR-α、ACO、CPT-1α及CD36mRNA无明显改变(P>0.05)。5.Western blot分析显示:与空白对照组比较,果糖对照组细胞核SREBP-1c和ChREBP的蛋白含量增加(P<0.05),SOR(20mg/kg)明显抑制SREBP-1c核蛋白的表达(P<0.05),但没有显着改变ChREBP核蛋白含量(P>0.05)。结论1. SOR(20mg/kg)能够改善高果糖所致大鼠脂肪肝;2.肝脏SREBP-1c是SOR改善高果糖诱导所致大鼠脂肪肝的重要分子靶点。(本文来源于《重庆医科大学》期刊2014-05-01)
郭燕红,刘大伟,何湘,陈宣男,黄留玉[2](2009)在《长双歧杆菌NCC2705株果糖结合蛋白BL0033基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达》一文中研究指出目的:克隆长双歧杆菌NCC2705株果糖结合蛋白BL0033的基因,利用大肠杆菌表达GST-BL0033融合蛋白并纯化。方法:以长双歧杆菌NCC2705株基因组为模板,PCR扩增BL0033基因,并将其插入pGEX-4T-1表达载体,转化至大肠杆菌DH5α;提取质粒,经PCR、质粒双酶切及测序鉴定后,转入大肠杆菌BL21,并对表达条件进行摸索;用谷胱甘肽-Sepharose4B树脂对可溶性GST-BL0033融合蛋白进行纯化。结果:PCR扩增的BL0033基因长度接近1000bp,与预期值一致;重组菌在IPTG浓度为0.05mmoL/L的条件下,于16℃诱导过夜后,SDS-PAGE分析可见可溶性表达条带,相对分子质量约60×103,与预期值一致;亲和纯化后,SDS-PAGE结果显示单一的表达条带。结论:克隆了BL0033蛋白的基因,并表达纯化了融合蛋白GST-BL0033,为进一步研究长双歧杆菌NCC2705株BL0033蛋白功能奠定了基础。(本文来源于《生物技术通讯》期刊2009年06期)
果糖结合蛋白论文开题报告
(1)论文研究背景及目的
此处内容要求:
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例:
目的:克隆长双歧杆菌NCC2705株果糖结合蛋白BL0033的基因,利用大肠杆菌表达GST-BL0033融合蛋白并纯化。方法:以长双歧杆菌NCC2705株基因组为模板,PCR扩增BL0033基因,并将其插入pGEX-4T-1表达载体,转化至大肠杆菌DH5α;提取质粒,经PCR、质粒双酶切及测序鉴定后,转入大肠杆菌BL21,并对表达条件进行摸索;用谷胱甘肽-Sepharose4B树脂对可溶性GST-BL0033融合蛋白进行纯化。结果:PCR扩增的BL0033基因长度接近1000bp,与预期值一致;重组菌在IPTG浓度为0.05mmoL/L的条件下,于16℃诱导过夜后,SDS-PAGE分析可见可溶性表达条带,相对分子质量约60×103,与预期值一致;亲和纯化后,SDS-PAGE结果显示单一的表达条带。结论:克隆了BL0033蛋白的基因,并表达纯化了融合蛋白GST-BL0033,为进一步研究长双歧杆菌NCC2705株BL0033蛋白功能奠定了基础。
(2)本文研究方法
调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
果糖结合蛋白论文参考文献
[1].刘磊.五层龙提取物改善高果糖所致大鼠脂肪肝的重要分子靶点—肝脏固醇调节元件结合蛋白-1c[D].重庆医科大学.2014
[2].郭燕红,刘大伟,何湘,陈宣男,黄留玉.长双歧杆菌NCC2705株果糖结合蛋白BL0033基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达[J].生物技术通讯.2009
标签:固醇调节元件结合蛋白-1c; 五层龙; 果糖; 脂肪肝;