本文主要研究内容
作者王艺凝（2019）在《大肠杆菌耐药性分析及ompF基因与Ⅰ类整合酶基因在生物被膜状态下表达相关性的研究》一文中研究指出：大肠埃希氏菌,又名大肠杆菌（Escherichia coli,E.coli）,属于革兰氏阴性菌,主要分为致病性和非致病性两类。随着抗生素在畜牧业的普遍应用和滥用,导致多重耐药甚至泛耐药大肠杆菌的产生和流行,致使大肠杆菌病的防控愈发困难。因此,通过开展大肠杆菌的耐药性调查,分析其与基因型、致病性和分子流行病学之间的关系,才能够选择更加合适有效的药物对大肠杆菌病进行预防与治疗。细菌耐药性的产生与多种蛋白相关,整合子作为一种重要的耐药基因捕获及传播元件,已经成为产生细菌耐药的主要机制之一,研究发现一些蛋白,如recA等可以通过应激反应影响Ⅰ类整合酶基因的表达,但外膜蛋白F（ompF）作为抗生素进入细菌内部的主要通道,它对大肠杆菌耐药基因的转移是否也有影响,目前尚无报道。本研究从甘肃、青海两省的病料和粪便样品中分离到猪源,牦牛源,鸡源和犬源大肠杆菌各100株。MLST分型发现这400株大肠杆菌共有142个ST型（1STs/2.8株大肠杆菌）,揭示该地区大肠杆菌流行菌株的复杂性。虽然不同动物源大肠杆菌的ST型不同,但均存在ST10（优势ST型）。eBURST分析将142个ST型分为19个克隆群（CCs）和67个单体,其中CC1,CC3,CC7,CC14和CC16克隆群属于潜在的致病群（B2/D群）,其它属于非致病群（A/B1群）。B2/D群大肠杆菌在健康动物中的携带率为12.5%。耐药性检测发现,400株大肠杆菌共存在237个耐药表型,不同动物源大肠杆菌的耐药谱虽然不同,但所有动物源大肠杆菌对氨苄西林,四环素和强力霉素的耐药率均高于其它药物,对美罗培南和多粘菌素的耐药率均低于其它药物;伴侣动物（狗）和家畜（鸡和猪）对大多数抗生素的耐药率均在40%以上,而牦牛对15种抗生素的耐药率均低于40%;此外,伴侣动物（狗）和家畜（鸡和猪）的ESBL大肠杆菌分离株也远远多于牦牛,提示我们对伴侣动物和家畜要合理用药。本研究通过耐药性检测,筛选出一株对本试验所选用的15种抗生素均敏感、且Ⅰ类整合酶基因阳性并能形成生物被膜的大肠杆菌N46（E.coli N46）进行基因敲除,研究其耐药性机理。通过Red同源重组,敲除E.coli N46的ompF基因,命名为E.coli N46/OmpFΔ;通过psTV28质粒成功构建回复株,命名为E.coli N46/OmpFcom。生长曲线检测发现ompF基因虽然不是大肠杆菌生长繁殖所必需的功能性基因,敲除后不会导致大肠杆菌的死亡,但会对大肠杆菌的生长有一定的影响。实时荧光定量PCR检测野生株,ompF基因缺失株和回复株的Ⅰ类整合酶基因在生物被膜状态下的表达情况,发现ompF基因缺失株Ⅰ类整合酶基因的表达水平比野生株明显降低,回复株Ⅰ类整合酶基因的表达水平有所升高,但不能回复到野生株的表达水平。初步确定在生物被膜状态下,ompF基因对大肠杆菌Ⅰ类整合酶基因的表达有影响。
Abstract
da chang ai xi shi jun ,you ming da chang gan jun （Escherichia coli,E.coli）,shu yu ge lan shi yin xing jun ,zhu yao fen wei zhi bing xing he fei zhi bing xing liang lei 。sui zhao kang sheng su zai chu mu ye de pu bian ying yong he lan yong ,dao zhi duo chong nai yao shen zhi fan nai yao da chang gan jun de chan sheng he liu hang ,zhi shi da chang gan jun bing de fang kong yu fa kun nan 。yin ci ,tong guo kai zhan da chang gan jun de nai yao xing diao cha ,fen xi ji yu ji yin xing 、zhi bing xing he fen zi liu hang bing xue zhi jian de guan ji ,cai neng gou shua ze geng jia ge kuo you xiao de yao wu dui da chang gan jun bing jin hang yu fang yu zhi liao 。xi jun nai yao xing de chan sheng yu duo chong dan bai xiang guan ,zheng ge zi zuo wei yi chong chong yao de nai yao ji yin bu huo ji chuan bo yuan jian ,yi jing cheng wei chan sheng xi jun nai yao de zhu yao ji zhi zhi yi ,yan jiu fa xian yi xie dan bai ,ru recAdeng ke yi tong guo ying ji fan ying ying xiang Ⅰlei zheng ge mei ji yin de biao da ,dan wai mo dan bai F（ompF）zuo wei kang sheng su jin ru xi jun nei bu de zhu yao tong dao ,ta dui da chang gan jun nai yao ji yin de zhuai yi shi fou ye you ying xiang ,mu qian shang mo bao dao 。ben yan jiu cong gan su 、qing hai liang sheng de bing liao he fen bian yang pin zhong fen li dao zhu yuan ,mao niu yuan ,ji yuan he quan yuan da chang gan jun ge 100zhu 。MLSTfen xing fa xian zhe 400zhu da chang gan jun gong you 142ge STxing （1STs/2.8zhu da chang gan jun ）,jie shi gai de ou da chang gan jun liu hang jun zhu de fu za xing 。sui ran bu tong dong wu yuan da chang gan jun de STxing bu tong ,dan jun cun zai ST10（you shi STxing ）。eBURSTfen xi jiang 142ge STxing fen wei 19ge ke long qun （CCs）he 67ge chan ti ,ji zhong CC1,CC3,CC7,CC14he CC16ke long qun shu yu qian zai de zhi bing qun （B2/Dqun ）,ji ta shu yu fei zhi bing qun （A/B1qun ）。B2/Dqun da chang gan jun zai jian kang dong wu zhong de xie dai lv wei 12.5%。nai yao xing jian ce fa xian ,400zhu da chang gan jun gong cun zai 237ge nai yao biao xing ,bu tong dong wu yuan da chang gan jun de nai yao pu sui ran bu tong ,dan suo you dong wu yuan da chang gan jun dui an bian xi lin ,si huan su he jiang li mei su de nai yao lv jun gao yu ji ta yao wu ,dui mei luo pei na he duo nian jun su de nai yao lv jun di yu ji ta yao wu ;ban lv dong wu （gou ）he jia chu （ji he zhu ）dui da duo shu kang sheng su de nai yao lv jun zai 40%yi shang ,er mao niu dui 15chong kang sheng su de nai yao lv jun di yu 40%;ci wai ,ban lv dong wu （gou ）he jia chu （ji he zhu ）de ESBLda chang gan jun fen li zhu ye yuan yuan duo yu mao niu ,di shi wo men dui ban lv dong wu he jia chu yao ge li yong yao 。ben yan jiu tong guo nai yao xing jian ce ,shai shua chu yi zhu dui ben shi yan suo shua yong de 15chong kang sheng su jun min gan 、ju Ⅰlei zheng ge mei ji yin yang xing bing neng xing cheng sheng wu bei mo de da chang gan jun N46（E.coli N46）jin hang ji yin qiao chu ,yan jiu ji nai yao xing ji li 。tong guo Redtong yuan chong zu ,qiao chu E.coli N46de ompFji yin ,ming ming wei E.coli N46/OmpFΔ;tong guo psTV28zhi li cheng gong gou jian hui fu zhu ,ming ming wei E.coli N46/OmpFcom。sheng chang qu xian jian ce fa xian ompFji yin sui ran bu shi da chang gan jun sheng chang fan shi suo bi xu de gong neng xing ji yin ,qiao chu hou bu hui dao zhi da chang gan jun de si wang ,dan hui dui da chang gan jun de sheng chang you yi ding de ying xiang 。shi shi ying guang ding liang PCRjian ce ye sheng zhu ,ompFji yin que shi zhu he hui fu zhu de Ⅰlei zheng ge mei ji yin zai sheng wu bei mo zhuang tai xia de biao da qing kuang ,fa xian ompFji yin que shi zhu Ⅰlei zheng ge mei ji yin de biao da shui ping bi ye sheng zhu ming xian jiang di ,hui fu zhu Ⅰlei zheng ge mei ji yin de biao da shui ping you suo sheng gao ,dan bu neng hui fu dao ye sheng zhu de biao da shui ping 。chu bu que ding zai sheng wu bei mo zhuang tai xia ,ompFji yin dui da chang gan jun Ⅰlei zheng ge mei ji yin de biao da you ying xiang 。
论文参考文献
论文详细介绍
论文作者分别是来自中国农业科学院的王艺凝，发表于刊物中国农业科学院2019-07-05论文，是一篇关于大肠杆菌论文,多位点序列分析论文,基因论文,类整合酶基因论文,生物被膜耐药论文,中国农业科学院2019-07-05论文的文章。本文可供学术参考使用，各位学者可以免费参考阅读下载，文章观点不代表本站观点，资料来自中国农业科学院2019-07-05论文网站，若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权，请联系我们删除。
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