导读:本文包含了单克隆细胞株论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:胶质母细胞瘤,人脑胶质母细胞瘤细胞系U87,单克隆细胞株,肿瘤异质性
单克隆细胞株论文文献综述
蒋迎娣,殷莹,浦浙宁,张博,龚玲丽[1]（2019）在《人脑胶质母细胞瘤细胞系U87的单克隆细胞构建及异质性研究》一文中研究指出目的人胶质母细胞瘤细胞细胞系U87被作为胶质母细胞瘤(GBM)异质性研究的模型,但从基因水平探讨其异质性来源的研究较少。文章旨在构建人胶质母细胞瘤细胞系U87单克隆细胞株,检测不同单克隆细胞株的表型和遗传背景差异,并探讨产生表型差异的分子机制。方法利用小分子荧光染料羟基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺脂(CFSE)作为筛选标记,有限稀释法构建U87单克隆细胞株,并挑选具有典型形态特征的2株单克隆化细胞,经短串联重复序列(STR)鉴定后进行后续研究。采用CCK-8、EdU掺入法增殖实验和和平板克隆形成实验检测细胞增殖能力;肿瘤干细胞成球实验检测细胞成球能力;免疫荧光和CCK-8法黏附实验检测细胞黏附能力;3D侵袭实验检测细胞侵袭能力;Annexin V/PI双染流式细胞术检测细胞对化疗药物的敏感性;转录组测序(RNA-seq)对细胞进行测序及生物信息学分析;qRT-PCR验证富集通路中代表性差异基因mRNA表达量。结果构建了形态较为均一U87单克隆细胞株CF5和G11。其中CF5小而短粗,G11大而细长。CCK-8增殖实验结果显示,CF5细胞增殖能力较U87、G11明显增强,U87较G11明显增强(P<0.001)。EdU掺入法增殖实验结果显示,CF5 EdU阳性细胞比例(0.54±0.05)较G11细胞(0.35±0.03)、U87(0.44±0.03)明显增加,U87较G11明显增强(P<0.01)。肿瘤干细胞成球实验显示,CF5干细胞成球能力较U87、G11明显增强,U87较G11明显增强(P<0.01)。免疫荧光法黏附实验显示,黏附1 h后G11黏附面积较U87、CF5明显增强,U87较CF5明显增强(P<0.001)。3D培养侵袭实验结果显示,G11细胞侵袭能力较U87、CF5明显增强,U87较CF5明显增强(P<0.05)。交互分析发现CF5相对G11和U87均下调的基因159个,均上调的基因303个;G11相对CF5和U87均下调的基因有281个,上调的基因则有116个;通路富集分析显示CF5和G11在细胞外基质相关的通路有最高的富集度,细胞外基质相关通路与肿瘤侵袭、耐药等功能表型密切相关。结论成功构建从形态、功能表型到基因背景具有显着差异的U87单克隆细胞株CF5、G11,为研究GBM异质性和基因功能奠定了基础。(本文来源于《医学研究生学报》期刊2019年11期）
周勇,韩德明,马煜宁,程金平[2]（2019）在《抗萘单克隆抗体杂交瘤细胞株的构建》一文中研究指出为了构建针对石油运输泄露导致的海洋环境中萘等多环芳烃污染的免疫学快速检测方法,需获得高效稳定的分泌抗萘单克隆抗体的杂交瘤细胞株。本文以2-萘丁酸-KLH为免疫抗原免疫BALb/c小鼠,间接竞争ELISA测定小鼠血清效价,用细胞融合筛选技术筛选抗萘单克隆抗体杂交瘤细胞株,捕获ELISA测定小鼠免疫球蛋白亚型。结果显示,实验小鼠免疫血清效价最高能达到1∶80000,经过HAT筛选、复检和亚克隆后得到5个能分泌抗萘单克隆抗体的细胞株,细胞株上清液效价最高能达到1∶15625,抗萘单克隆抗体免疫球蛋白亚型均为IgG1,Kappa轻链。本方法成功构建的杂交瘤细胞株能稳定高效分泌抗萘单克隆抗体,抗体亚型符合免疫学检测的特性,为萘的ELISA检测方法建立及胶体金免疫层析(GICA)试纸条的研制提供了稳定高效的单克隆抗体源。(本文来源于《海洋环境科学》期刊2019年05期）
张勇,覃鸿妮,谢钰珍,王倩文[3]（2019）在《高表达抗PD-1单克隆抗体细胞株工艺开发的研究》一文中研究指出以PD-1分子为靶点,以中国仓鼠卵巢(CHO)细胞为宿主,构建高表达抗PD-1单克隆抗体的细胞株,优化细胞株筛选工艺,优化工艺参数,得到稳定高表达PD-1细胞株。运用悬浮细胞CHO表达抗PD-1的抗体,首先在质粒构建中,将重链和轻链插到同一个载体上,保证了重链和轻链的比例为1∶1,实现共表达,轻重链在一个载体上,再同PD-1基因共转染,对后面的基因扩增筛选提供基础。采用悬浮培养,使用化学成分确定的培养基CD培养基,支持重组CHO细胞的生长,达到高密度培养,从而得到高表达蛋白。结果表明蛋白表达量稳定性分析表明,筛选出两株表达量较高的细胞株,表达量分别达到2.03 g/L和2.09 g/L,为抗PD-1抗体的生产提供了稳定高产的细胞系。得到了稳定高表达PD-1细胞株,且蛋白质量与原研药一致。(本文来源于《生物化工》期刊2019年04期）
杨海南,孙元元,伍江平,袁艳华,王小利[4]（2019）在《抗PD-1单克隆抗体联合CIK细胞对肺癌细胞株杀伤作用的研究》一文中研究指出目的:研究程序性死亡受体1(program cell death-1,PD-1)单克隆抗体联合细胞因子诱导的杀伤细胞(cytokine-induced killer cells,CIK cells)对肺癌细胞株的杀伤作用及相关机制,探究该治疗方法在肺癌治疗中的可行性。方法:患者外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)在体外采用多种细胞因子诱导为CIK,并用流式细胞术(flow cytometry,FCM)分析CIK细胞的表型。培养A520及H1975肺癌细胞,利用FCM检测其表面HLA-ABC,HLA-A2,HLA-DR及PD-L1的表达情况。将CIK细胞和抗PD-1单抗Nivolumab单独或者联合作用于A520及H1975肺癌细胞。用ELISPOT法测定不同组γ干扰素(interferon gamma,IFN-γ)的释放,用CCK8法检测CIK细胞对肺癌细胞株的杀伤率。结果:CIK细胞对于肺癌细胞株的杀伤随着效靶比(effect target ratio,E∶T)的增加而加强;对于PD-L1高表达的肺癌细胞,Nivolumab与CIK细胞联合使用对肺癌细胞株的杀伤优于单一的CIK细胞及Nivolumab。结论:对于PD-L1高表达的A520肺癌细胞,PD-1单抗Nivolumab能够提升CIK细胞的杀伤作用,而对于PD-L1表达水平低的H1975细胞,Nivolumab不能提升CIK细胞的杀伤作用。(本文来源于《现代肿瘤医学》期刊2019年12期）
张松,乔自林,马桂兰,刘丽霞,王家敏[5]（2019）在《MDCK单克隆细胞生长特性分析》一文中研究指出目的:分析MDCK(犬肾细胞,Madin-Darby canine kidney cells,MDCK)单克隆细胞的生长特性,确定MDCK单克隆细胞库的可用性。方法:通过台盼蓝拒染测定细胞复苏活率,依据细胞生长的快慢、好坏和观察细胞形态判定细胞的生长速度、状态和形态.结果:MDCK单克隆细胞平均复苏活率为0.954±0.016,2～3 d长满的细胞占92.1%.57.9%的细胞生长状态良好,具有多角上皮样、梭形成纤维样和圆形岛状样叁种形态.结论:MDCK单克隆细胞库中细胞复苏活率达到0.954±0.016,92.1%的单克隆细胞株在2～3 d长至单层致密,细胞状态良好.库内细胞有叁种形态,可为病毒敏感细胞基质筛选提供丰富的资源。(本文来源于《西北民族大学学报(自然科学版)》期刊2019年01期）
张松,张丽,乔自林,王家敏,马桂兰[6]（2019）在《MDCK单克隆细胞的制备方法研究》一文中研究指出为优化有限稀释法制备MDCK单克隆细胞的参数条件,从而提高有限稀释法制备MDCK单克隆细胞株的效率。使用有限稀释法制备MDCK单克隆细胞,通过比较不同类型血清、血清浓度和单孔接种密度对制备MDCK单克隆细胞数的影响,确定有限稀释法制备MDCK单克隆细胞的最佳实验条件。结果显示,添加15%胎牛血清、最佳单孔接种密度为1个·孔~(-1)是制备MDCK单克隆细胞的最佳条件。(本文来源于《浙江农业科学》期刊2019年02期）
周勇,张佳琪,廖浩祥,马煜宁,程金平[7]（2019）在《抗DEP单克隆抗体杂交瘤细胞株的构建》一文中研究指出为构建针对水环境中邻苯二甲酸二乙酯(Diethyl phthalate,DEP)等邻苯二甲酸酯类(Phthalates,PAEs)化合物的免疫学快速检测方法,需获得高效稳定的分泌抗DEP单克隆抗体的杂交瘤细胞株.以邻苯二甲酸单乙酯(Monoethylphthalate,MEP)-BSA为免疫抗原免疫BALb/c小鼠,间接竞争ELISA测定小鼠血清效价,用细胞融合筛选技术筛选抗DEP单克隆抗体杂交瘤细胞株.结果显示,实验小鼠免疫血清效价最高能达到1:5 000,经过HAT筛选、复检和亚克隆后得到9个能分泌抗DEP单克隆抗体的细胞株,细胞株上清液效价最高能达到1:10 000,对DEP的抑制率最高能达到86.5%,且其对11种结构类似物的交叉反应率均低于0.1%,特异性较好.本研究成功构建的杂交瘤细胞株能稳定高效分泌抗DEP单克隆抗体,可为DEP的ELISA检测方法建立及胶体金免疫层析(Colloidal gold immunochromatography assay,GICA)试纸条的研制提供稳定高效的单克隆抗体源.(图8表2参23)(本文来源于《应用与环境生物学报》期刊2019年03期）
王晓煜,陈良标[8]（2018）在《斑马鱼ZF4单克隆细胞对适应低温环境下的转录组分析》一文中研究指出环境温度影响生物生长发育的一个重要的因素,低温会减少生物的生理活动,减缓生长速度,损伤自身细胞器,并可能导致死亡。然而,细胞可以通过低温诱导的膜流动性变化、蛋白及核酸形态结构变化以及代谢物浓度变化来适应冷胁迫。关于斑马鱼低温胁迫机制的研究却十分有限。本实验将斑马鱼ZF4单克隆细胞放于18℃,13℃进行长期驯化,28℃作为对照。利用Illumina测序技术用于阐明分子机制和鉴定在冷冻应激反应中起重要作用的基因。转录组结果显示,28℃/18℃有5612个差异基因,上调1638个,下调3974个;28℃/13℃有5193个差异基因,上调1933个,下调3260个;626个共有的差异基因。28℃/13℃与28℃/18℃相比,上调差异基因显着性的增加。这些差异基因抵御冷冻压力的过程,涉及到多个代谢通路碳水化合物运输和代谢、氨基酸代谢、能量代谢和脂质代谢方面显示出显着的差异。其中,DNA复制,糖酵解/糖异生,错配修复,碳代谢,精氨酸/脯氨酸代谢,脂肪酸分解,缬氨酸,亮氨酸,异亮氨酸分解是很显着的调控代谢通路。具体分析了糖酵解/糖异生,错配修复,脂肪酸分解的代谢通路,揭示了许多基因和代谢通路与抗冻的关系,并拓展了对参与低温环境的复杂分子机制的理解。(本文来源于《2018年中国水产学会学术年会论文摘要集》期刊2018-11-15）
李炯,张吉凤,赵波,蔡振彬,朱肖楠[9]（2018）在《稳定表达α-氨基-3-羟基-5-甲基-4-异恶唑丙酸受体GluA1亚基单克隆细胞株的构建》一文中研究指出目的构建稳定表达α-氨基-3-羟基-5-甲基-4-异恶唑丙酸(AMPA)受体GluA1亚基的细胞株。方法PCR扩增GluA1目的基因,并将其装载至慢病毒表达载体PLV. 0-绿色荧光蛋白(GFP),采用4质粒系统转染HEK293T细胞包装慢病毒。嘌呤霉素抗性筛选细胞,挑选单克隆细胞株用Real-time PCR、Western blotting、免疫荧光和全细胞膜片钳鉴定GluA1的表达与功能。结果菌落PCR鉴定扩增产物与GluA1分子量(2724 bp)一致,经测序插入慢病毒载体序列与GluA1序列一致;慢病毒感染并抗性筛选的HEK293T细胞经Real-time PCR、Western blotting和免疫荧光实验证明,GluA1在过表达GluA1组的HEK293T细胞正确表达,空载体组不表达。单克隆挑选的稳定细胞株免疫荧光染色显示,各细胞膜表面GluA1蛋白表达相对一致。单克隆细胞在电压钳模式下,细胞外液加10 mmol/L谷氨酸诱导,空载体组检测不到电信号,而过表达GluA1组可记录5~40 p A电信号。结论成功构建了稳定表达AMPA受体GluA1亚基的HEK293T细胞株。(本文来源于《解剖学报》期刊2018年05期）
[10]（2018）在《KD452:一种单克隆细胞培养方法》一文中研究指出本发明属于单克隆细胞培养技术领域,具体涉及一种利用基因编辑技术构建稳定表达细胞系过程中的单克隆细胞培养方法。该方法以CRISPR/Cas9基因编辑技术为基础,具体包括:利用CRISPR/Cas9技术对基因组进行编辑,利用3D软纤维蛋白基质胶对筛选所得细胞进行培养等步骤。总体而言,本发明将优化后的3D软纤维蛋白基质胶培(本文来源于《科技创新与品牌》期刊2018年08期）
单克隆细胞株论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
为了构建针对石油运输泄露导致的海洋环境中萘等多环芳烃污染的免疫学快速检测方法,需获得高效稳定的分泌抗萘单克隆抗体的杂交瘤细胞株。本文以2-萘丁酸-KLH为免疫抗原免疫BALb/c小鼠,间接竞争ELISA测定小鼠血清效价,用细胞融合筛选技术筛选抗萘单克隆抗体杂交瘤细胞株,捕获ELISA测定小鼠免疫球蛋白亚型。结果显示,实验小鼠免疫血清效价最高能达到1∶80000,经过HAT筛选、复检和亚克隆后得到5个能分泌抗萘单克隆抗体的细胞株,细胞株上清液效价最高能达到1∶15625,抗萘单克隆抗体免疫球蛋白亚型均为IgG1,Kappa轻链。本方法成功构建的杂交瘤细胞株能稳定高效分泌抗萘单克隆抗体,抗体亚型符合免疫学检测的特性,为萘的ELISA检测方法建立及胶体金免疫层析(GICA)试纸条的研制提供了稳定高效的单克隆抗体源。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
单克隆细胞株论文参考文献
[1].蒋迎娣,殷莹,浦浙宁,张博,龚玲丽.人脑胶质母细胞瘤细胞系U87的单克隆细胞构建及异质性研究[J].医学研究生学报.2019
[2].周勇,韩德明,马煜宁,程金平.抗萘单克隆抗体杂交瘤细胞株的构建[J].海洋环境科学.2019
[3].张勇,覃鸿妮,谢钰珍,王倩文.高表达抗PD-1单克隆抗体细胞株工艺开发的研究[J].生物化工.2019
[4].杨海南,孙元元,伍江平,袁艳华,王小利.抗PD-1单克隆抗体联合CIK细胞对肺癌细胞株杀伤作用的研究[J].现代肿瘤医学.2019
[5].张松,乔自林,马桂兰,刘丽霞,王家敏.MDCK单克隆细胞生长特性分析[J].西北民族大学学报(自然科学版).2019
[6].张松,张丽,乔自林,王家敏,马桂兰.MDCK单克隆细胞的制备方法研究[J].浙江农业科学.2019
[7].周勇,张佳琪,廖浩祥,马煜宁,程金平.抗DEP单克隆抗体杂交瘤细胞株的构建[J].应用与环境生物学报.2019
[8].王晓煜,陈良标.斑马鱼ZF4单克隆细胞对适应低温环境下的转录组分析[C].2018年中国水产学会学术年会论文摘要集.2018
[9].李炯,张吉凤,赵波,蔡振彬,朱肖楠.稳定表达α-氨基-3-羟基-5-甲基-4-异恶唑丙酸受体GluA1亚基单克隆细胞株的构建[J].解剖学报.2018
[10]..KD452:一种单克隆细胞培养方法[J].科技创新与品牌.2018
标签：胶质母细胞瘤; 人脑胶质母细胞瘤细胞系U87; 单克隆细胞株; 肿瘤异质性;