本文主要研究内容
作者管晓艳(2019)在《苜蓿特有钙调素类蛋白(CML)铁营养功能研究》一文中研究指出:黄花苜蓿(Medicago falcata L.)和紫花苜蓿(Medicago sativa L.)是重要的豆科牧草,具有营养物质丰富、粗蛋白质含量高等特点,是优质饲用植物。黄花苜蓿抗逆性强,具有耐旱、耐寒、耐盐碱的优良品质,紫花苜蓿产草量高、适应性强,因此它们是天然的基因资源库。钙调素类蛋白(Calmodulin-like protein,CML)是重要的Ca2+结合蛋白,在细胞信号转导中发挥重要作用,然而黄花苜蓿及紫花苜蓿中有关钙调素类蛋白的研究还鲜有报道。本研究通过转录组测序技术挖掘黄花和紫花苜蓿中钙调素类蛋白基因,对转录组测序数据分析发现12个特有的预测编码钙调素类蛋白基因,运用农杆菌介导的花序浸染法将基因转入野生型拟南芥Col-0基因组中,获得稳定遗传的转基因拟南芥。本研究对黄花苜蓿的两个基因MfCML29和MfCML1在植物生长过程中的生理功能进行探讨,为苜蓿中钙调素类蛋白的相关研究提供参考。本论文主要结果如下:⑴通过Gateway克隆技术连接12个基因到双元表达载体pGWB605和pGWB617上,利用农杆菌介导的花序浸染法将基因转入野生型拟南芥中,在含草铵膦的抗性培养基上筛选获得稳定表达12个基因的转基因株系。⑵对12个蛋白进行生物信息学分析,其中MfCML29和MfCML1生物信息学预测表明均含有一个EF-hand保守结构域。亚细胞定位结果表明,MfCML29和MfCML1蛋白均定位在植物细胞的内质网上。⑶对MfCML29和MfCML1转基因拟南芥在不同矿质阳离子培养基上进行表型分析,结果表明转基因拟南芥在含不同Ca2+、Zn2+、Mg2+、Mn2+浓度的培养基上,幼苗生长表型与野生型拟南芥Col-0相比,均无显著差异,但在不同Fe2+浓度培养基上存在区别,在低铁条件下,MfCML29和MfCML1转基因拟南芥具有抗低铁表型,转基因拟南芥植株叶片大且颜色比Col-0绿,根长、鲜重显著高于Col-0,由此推测黄花苜蓿钙调素类蛋白候选基因MfCML29和MfCML1参与调控植物Fe营养平衡。⑷为了进一步探讨MfCML29转基因拟南芥低铁敏感表型的机制,测量转基因拟南芥和Col-0全苗Fe元素含量,结果发现转基因拟南芥内的铁含量显著高于Col-0,说明MfCML29参与Fe元素的积累。
Abstract
huang hua mu xu (Medicago falcata L.)he zi hua mu xu (Medicago sativa L.)shi chong yao de dou ke mu cao ,ju you ying yang wu zhi feng fu 、cu dan bai zhi han liang gao deng te dian ,shi you zhi si yong zhi wu 。huang hua mu xu kang ni xing jiang ,ju you nai han 、nai han 、nai yan jian de you liang pin zhi ,zi hua mu xu chan cao liang gao 、kuo ying xing jiang ,yin ci ta men shi tian ran de ji yin zi yuan ku 。gai diao su lei dan bai (Calmodulin-like protein,CML)shi chong yao de Ca2+jie ge dan bai ,zai xi bao xin hao zhuai dao zhong fa hui chong yao zuo yong ,ran er huang hua mu xu ji zi hua mu xu zhong you guan gai diao su lei dan bai de yan jiu hai xian you bao dao 。ben yan jiu tong guo zhuai lu zu ce xu ji shu wa jue huang hua he zi hua mu xu zhong gai diao su lei dan bai ji yin ,dui zhuai lu zu ce xu shu ju fen xi fa xian 12ge te you de yu ce bian ma gai diao su lei dan bai ji yin ,yun yong nong gan jun jie dao de hua xu jin ran fa jiang ji yin zhuai ru ye sheng xing ni na gai Col-0ji yin zu zhong ,huo de wen ding wei chuan de zhuai ji yin ni na gai 。ben yan jiu dui huang hua mu xu de liang ge ji yin MfCML29he MfCML1zai zhi wu sheng chang guo cheng zhong de sheng li gong neng jin hang tan tao ,wei mu xu zhong gai diao su lei dan bai de xiang guan yan jiu di gong can kao 。ben lun wen zhu yao jie guo ru xia :⑴tong guo Gatewayke long ji shu lian jie 12ge ji yin dao shuang yuan biao da zai ti pGWB605he pGWB617shang ,li yong nong gan jun jie dao de hua xu jin ran fa jiang ji yin zhuai ru ye sheng xing ni na gai zhong ,zai han cao an lin de kang xing pei yang ji shang shai shua huo de wen ding biao da 12ge ji yin de zhuai ji yin zhu ji 。⑵dui 12ge dan bai jin hang sheng wu xin xi xue fen xi ,ji zhong MfCML29he MfCML1sheng wu xin xi xue yu ce biao ming jun han you yi ge EF-handbao shou jie gou yu 。ya xi bao ding wei jie guo biao ming ,MfCML29he MfCML1dan bai jun ding wei zai zhi wu xi bao de nei zhi wang shang 。⑶dui MfCML29he MfCML1zhuai ji yin ni na gai zai bu tong kuang zhi yang li zi pei yang ji shang jin hang biao xing fen xi ,jie guo biao ming zhuai ji yin ni na gai zai han bu tong Ca2+、Zn2+、Mg2+、Mn2+nong du de pei yang ji shang ,you miao sheng chang biao xing yu ye sheng xing ni na gai Col-0xiang bi ,jun mo xian zhe cha yi ,dan zai bu tong Fe2+nong du pei yang ji shang cun zai ou bie ,zai di tie tiao jian xia ,MfCML29he MfCML1zhuai ji yin ni na gai ju you kang di tie biao xing ,zhuai ji yin ni na gai zhi zhu xie pian da ju yan se bi Col-0lu ,gen chang 、xian chong xian zhe gao yu Col-0,you ci tui ce huang hua mu xu gai diao su lei dan bai hou shua ji yin MfCML29he MfCML1can yu diao kong zhi wu Feying yang ping heng 。⑷wei le jin yi bu tan tao MfCML29zhuai ji yin ni na gai di tie min gan biao xing de ji zhi ,ce liang zhuai ji yin ni na gai he Col-0quan miao Feyuan su han liang ,jie guo fa xian zhuai ji yin ni na gai nei de tie han liang xian zhe gao yu Col-0,shui ming MfCML29can yu Feyuan su de ji lei 。
论文参考文献
论文详细介绍
论文作者分别是来自内蒙古大学的管晓艳,发表于刊物内蒙古大学2019-08-13论文,是一篇关于拟南芥论文,钙调素类蛋白论文,亚细胞定位论文,营养论文,内蒙古大学2019-08-13论文的文章。本文可供学术参考使用,各位学者可以免费参考阅读下载,文章观点不代表本站观点,资料来自内蒙古大学2019-08-13论文网站,若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权,请联系我们删除。
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