导读:本文包含了白藜叁醇结合蛋白论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:运动,白藜芦醇,老年肥胖,视黄醇结合蛋白4
白藜叁醇结合蛋白论文文献综述
崔嘉琴,柏友萍,吴琳,孙明明,林潺[1]（2017）在《运动与白藜芦醇对老年肥胖大鼠视黄醇结合蛋白4、血糖和胰岛素敏感性的影响》一文中研究指出目的探讨运动与白藜芦醇对老年肥胖大鼠内脏脂肪组织视黄醇结合蛋白4(RBP4)mRNA和蛋白表达、血浆RBP4浓度、血糖及胰岛素敏感性的影响。方法建立SD老年肥胖大鼠模型,选取自然生长老年大鼠6只为正常组,将24只肥胖鼠随机分为肥胖对照、运动、白藜芦醇、运动+白藜芦醇4组。白藜芦醇为52.5 mg/(kg·d)灌胃,5次/周,持续干预8周。干预后测血糖、胰岛素敏感性、内脏脂肪组织RBP4 mRNA表达(qRT-PCR)、蛋白表达(Western blot)及血浆RBP4浓度(ELISA)。结果 8周干预后,(1)RBP4 mRNA表达:肥胖组(2.63±0.45)高于正常组(2.10±0.15)(P<0.05);白藜芦醇组(1.84±0.33)、运动组(1.91±0.15)和运动+白藜芦醇组(2.13±0.11)低于肥胖组(P<0.05,P<0.01)。(2)RBP4蛋白表达:肥胖组(1.346±0.025)高于正常组(1.196±0.017)(P<0.01);运动组(1.025±0.006)低于肥胖组(P<0.01)、白藜芦醇组(0.735±0.015)和运动+白藜芦醇组(0.701±0.018)低于运动组(P<0.01);运动+白藜芦醇组低于白藜芦醇组(P<0.05)。(3)血浆RBP4浓度:肥胖组[(16.00±1.54)μg/L]高于正常组[(13.02±2.20)μg/L](P<0.01);运动组[(14.76±1.56)μg/L]低于肥胖组,但差异无统计学意义;白藜芦醇组[(13.59±0.07)μg/L]和运动+白藜芦醇组[(12.98±1.69)μg/L]低于肥胖组(P<0.05,P<0.01)。(4)血糖:肥胖组[(17.93±6.09)mmol/L]高于正常组[(11.64±3.57)mmol/L](P<0.01);运动组[(13.36±1.82)mmol/L]低于肥胖组(P<0.05),白藜芦醇组[(15.24±2.19)mmol/L]、运动+白藜芦醇组[(13.95±2.26)mmol/L]低于肥胖组,但差异无统计学意义。(5)胰岛素敏感性:肥胖组(0.37±0.02)低于正常组(0.39±0.02)(P<0.05);白藜芦醇组(0.38±0.01)、运动组(0.38±0.02)高于肥胖组,但差异无统计学意义,运动+白藜芦醇组(0.39±0.15)高于肥胖组(P<0.05)。上述指标(除蛋白表达外)干预各组间差异无统计学意义。结论老年肥胖大鼠内脏脂肪组织RBP4 mRNA、蛋白表达、血浆RBP4浓度及血糖均增高,胰岛素敏感性降低;运动与白藜芦醇均能降低其RBP4 mRNA、蛋白表达和血浆浓度;单纯运动能明显降低其血糖,运动结合白藜芦醇能明显提高其胰岛素敏感性。在降低蛋白表达、血浆RBP4浓度和提高胰岛素敏感性中,运动结合白藜芦醇表现出协同性。(本文来源于《卫生研究》期刊2017年04期）
蔡静波[2]（2008）在《白藜叁醇结合蛋白与血管平滑肌细胞增殖关系的研究》一文中研究指出研究背景:冠状动脉粥样硬化性心脏病(冠心病)是当今威胁人类健康的重要疾病之一。经皮冠状动脉介入治疗是目前治疗冠心病的重要手段,但是较高的术后再狭窄的发生率(15～20%),成为急需解决的临床问题。大量基础研究发现血管平滑肌细胞(VSMC)的迁移、增殖和细胞外基质的分泌是动脉粥样硬化斑块形成和再狭窄发生的重要环节。因此,要预防冠心病的发生、减少介入治疗术后再狭窄的发生率,发掘能抑制靶部位平滑肌细胞增生的新药物并阐明其作用机制非常重要。迄今为止,诸多研究均提示白藜叁醇是一种具有心血管保护作用的多酚类化合物。其中一个重要的机制是白藜叁醇可通过抑制血管平滑肌细胞的增殖来减少血管再狭窄的形成。根据白藜叁醇的化学结构特点,有学者设计了白藜叁醇亲和层析柱,并应用该装置分离、纯化了白藜叁醇结合蛋白(RTP)。该蛋白经放射配基自显影法证实可与白藜叁醇特异性结合,而用质谱分析该蛋白的氨基酸序列则证实其与醌氧化还原酶2(NQO2)有80%的同源性。白藜叁醇是否直接作用于RTP而产生抑制平滑肌细胞增殖和血管内膜增生的保护作用?RTP又是如何调控血管平滑肌细胞增殖的?这些问题目前都还没有答案,需要我们去探索研究。目的:本课题拟研究以下问题:(1)分离、纯化血管平滑肌组织中的RTP,观察RTP和NQO2的关系;(2)白藜叁醇对实验性动脉粥样硬化再狭窄形成的影响及对血管壁RTP表达的调控;(3)白藜叁醇对血管平滑肌细胞增殖的影响及对胞浆内RTP表达的调控;(4)RTP高表达和低表达对血管平滑肌细胞增殖的调控。通过上述研究,从在体、细胞和分子叁个层面来探讨白藜叁醇对RTP表达的影响及RTP对血管平滑肌细胞增殖的调控机制,为今后白藜叁醇作为冠心病血管再狭窄新的靶向治疗提供理论和实验依据。方法:1.制备白藜叁醇亲和层析柱,并从兔主动脉平滑肌组织中分离、纯化RTP,采用蛋白质电泳及western blot进行鉴定;2.雄性新西兰大白兔48只,随机分为3组,分别按以下条件喂养:(1)普通颗粒状兔饲料,(2)高胆固醇饲料,(3)高胆固醇饲料+白藜叁醇。喂养12周后,部分实验动物行右侧髂动脉球囊损伤制备再狭窄模型。继续喂养4周后,处死所有实验动物,进行以下检查:(1)血管再狭窄检查:双侧髂动脉对应部位切片、H-E染色,用Leica Qwin显微图像分析软件测量狭窄率和内膜中膜面积比;(2)用Real-time PCR检测双侧髂动脉壁RTPmRNA表达水平的改变;(3)用western blot检测双侧髂动脉壁RTP蛋白表达水平的改变。3.培养兔血管平滑肌细胞并用不同浓度(1、10和50μmol/L)白藜叁醇干预不同时间(24、48和72小时),进行以下检查:(1)用细胞计数方法观察白藜叁醇对平滑肌细胞增殖的影响;(2)用Real-time PCR检测白藜叁醇对血管平滑肌细胞中RTP mRNA表达水平的影响;(3)用western blot检测白藜叁醇对血管平滑肌细胞中RTP蛋白表达水平的影响。4.构建RTP的真核表达载体并转染大鼠血管平滑肌细胞,进行以下检测:(1)用半定量RT-PCR和western blot检测转染后平滑肌细胞中RTP的表达;(2)用BrdU细胞增殖检测试剂盒检测转染后平滑肌细胞增殖能力的改变。5.构建RTP的RNA干扰慢病毒载体并转染大鼠血管平滑肌细胞,进行以下检测:(1)用real-time PCR和western blot检测转染后平滑肌细胞中RTP的表达;(2)用BrdU细胞增殖检测试剂盒检测转染后平滑肌细胞增殖能力的改变。结果:1.利用白藜叁醇亲和层析柱可从兔血管平滑肌组织中分离、纯化一个分子量约为26kD的蛋白质,将其命名为RTP-26。该蛋白质的分子量与文献记载的NQO2分子量一致,并且在用RTP多克隆抗体,即NQO2抗体进行western blot时可以检测到该蛋白。2.在体实验结果显示白藜叁醇能够抑制动脉粥样硬化再狭窄的形成。对照组、动脉粥样硬化模型组和白藜叁醇治疗组的血管狭窄率分别为:63.04±3.33%,73.92±7.10%和28.10±5.83%(叁组间ANOVA检验,P＜0.01)。髂动脉壁RTP-26的mRNA和蛋白表达水平:白藜叁醇明显抑制了RTP-26的表达,mRNA表达较对照组降低了39%,较模型组降低了44%(叁组间ANOVA检验,P＜0.01);蛋白表达较对照组降低了35%,较模型组降低了32%(叁组间ANOVA检验,P＜0.01)。3.在细胞水平的研究发现:(1)白藜叁醇能够抑制血管平滑肌细胞的增殖,且具有浓度依赖和时间依赖的特点。(2)白藜叁醇抑制平滑肌细胞内的RTP-26 mRNA表达。1、10和50μmol/L白藜叁醇干预平滑肌细胞72小时,细胞内RTP-26 mRNA的表达分别降低了56%、62%和95%,与对照组相比有统计学差异(P＜0.01)。50μmol/L白藜叁醇干预平滑肌细胞的时间达到48和72小时时,细胞内RTP-26 mRNA的表达分别降低了53%和95%,与对照组比较有统计学差异(P＜0.01)。(3)RTP-26蛋白的表达也明显降低。10和50μmol/L白藜叁醇干预平滑肌细胞72小时,细胞内RTP-26蛋白的表达降低15%和47%,与对照组相比也有统计学差异(P＜0.05和P＜0.01)。50μmol/L白藜叁醇干预平滑肌细胞48和72小时,细胞内RTP-26蛋白的表达降低36%和58%,与对照组比较有统计学差异(P＜0.01)。所以,白藜叁醇对血管平滑肌细胞中RTP-26 mRNA和蛋白的抑制作用也呈浓度依赖和时间依赖的特点。4.RTP-26高表达载体pEGFP-N1-NQO2成功构建并转染大鼠血管平滑肌细胞,48小时后细胞内RTP-26 mRNA的表达升高1倍,且表达由绿色荧光蛋白和RTP-26组成的融合蛋白。但是,用BrdU细胞增殖检测试剂盒测试,转染pEGFP-N1-NQO2质粒的平滑肌细胞与野生型细胞比较,增殖能力没有明显变化。5.RTP-26 RNA干扰慢病毒载体Psc-NQO2构建成功后,转染血管平滑肌细胞72小时,细胞内RTP-26 mRNA的表达较野生型细胞减少74%。延长转染时间至14天,细胞内RTP-26蛋白的表达几乎检测不到。同时,用BrdU细胞增殖检测试剂盒测试,转染Psc-NQO2的平滑肌细胞与野生型细胞比较,增殖能力明显降低(P＜0.01),且与25μmol/L白藜叁醇干预72小时的平滑肌细胞的增殖能力相仿。结论:1.用白藜叁醇亲合层析柱可以从血管平滑肌中分离、纯化一个26kD的蛋白片断,即白藜叁醇结合蛋白26(RTP-26),结合文献和western blot结果,证实RTP-26即NQO2;2.高胆固醇饲料喂养新西兰大白兔12周可产生动脉粥样硬化损伤;球囊内皮剥脱术可制备再狭窄动物模型。白藜叁醇能够抑制动脉粥样硬化再狭窄的形成,这与其能够抑制血管壁内RTP-26 mRNA和蛋白的表达有关。3.白藜叁醇能够抑制体外培养的血管平滑肌细胞的增殖;白藜叁醇也能够抑制培养的平滑肌细胞胞浆内RTP-26 mRNA和蛋白的表达,且具有浓度依赖和时间依赖的特点;4.RTP-26高表达对血管平滑肌细胞的增殖无影响;5.RTP-26表达降低的血管平滑肌细胞增殖能力降低,且与白藜叁醇干预的细胞的增殖能力相仿。(本文来源于《南京医科大学》期刊2008-04-01）
白藜叁醇结合蛋白论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
研究背景:冠状动脉粥样硬化性心脏病(冠心病)是当今威胁人类健康的重要疾病之一。经皮冠状动脉介入治疗是目前治疗冠心病的重要手段,但是较高的术后再狭窄的发生率(15～20%),成为急需解决的临床问题。大量基础研究发现血管平滑肌细胞(VSMC)的迁移、增殖和细胞外基质的分泌是动脉粥样硬化斑块形成和再狭窄发生的重要环节。因此,要预防冠心病的发生、减少介入治疗术后再狭窄的发生率,发掘能抑制靶部位平滑肌细胞增生的新药物并阐明其作用机制非常重要。迄今为止,诸多研究均提示白藜叁醇是一种具有心血管保护作用的多酚类化合物。其中一个重要的机制是白藜叁醇可通过抑制血管平滑肌细胞的增殖来减少血管再狭窄的形成。根据白藜叁醇的化学结构特点,有学者设计了白藜叁醇亲和层析柱,并应用该装置分离、纯化了白藜叁醇结合蛋白(RTP)。该蛋白经放射配基自显影法证实可与白藜叁醇特异性结合,而用质谱分析该蛋白的氨基酸序列则证实其与醌氧化还原酶2(NQO2)有80%的同源性。白藜叁醇是否直接作用于RTP而产生抑制平滑肌细胞增殖和血管内膜增生的保护作用?RTP又是如何调控血管平滑肌细胞增殖的?这些问题目前都还没有答案,需要我们去探索研究。目的:本课题拟研究以下问题:(1)分离、纯化血管平滑肌组织中的RTP,观察RTP和NQO2的关系;(2)白藜叁醇对实验性动脉粥样硬化再狭窄形成的影响及对血管壁RTP表达的调控;(3)白藜叁醇对血管平滑肌细胞增殖的影响及对胞浆内RTP表达的调控;(4)RTP高表达和低表达对血管平滑肌细胞增殖的调控。通过上述研究,从在体、细胞和分子叁个层面来探讨白藜叁醇对RTP表达的影响及RTP对血管平滑肌细胞增殖的调控机制,为今后白藜叁醇作为冠心病血管再狭窄新的靶向治疗提供理论和实验依据。方法:1.制备白藜叁醇亲和层析柱,并从兔主动脉平滑肌组织中分离、纯化RTP,采用蛋白质电泳及western blot进行鉴定;2.雄性新西兰大白兔48只,随机分为3组,分别按以下条件喂养:(1)普通颗粒状兔饲料,(2)高胆固醇饲料,(3)高胆固醇饲料+白藜叁醇。喂养12周后,部分实验动物行右侧髂动脉球囊损伤制备再狭窄模型。继续喂养4周后,处死所有实验动物,进行以下检查:(1)血管再狭窄检查:双侧髂动脉对应部位切片、H-E染色,用Leica Qwin显微图像分析软件测量狭窄率和内膜中膜面积比;(2)用Real-time PCR检测双侧髂动脉壁RTPmRNA表达水平的改变;(3)用western blot检测双侧髂动脉壁RTP蛋白表达水平的改变。3.培养兔血管平滑肌细胞并用不同浓度(1、10和50μmol/L)白藜叁醇干预不同时间(24、48和72小时),进行以下检查:(1)用细胞计数方法观察白藜叁醇对平滑肌细胞增殖的影响;(2)用Real-time PCR检测白藜叁醇对血管平滑肌细胞中RTP mRNA表达水平的影响;(3)用western blot检测白藜叁醇对血管平滑肌细胞中RTP蛋白表达水平的影响。4.构建RTP的真核表达载体并转染大鼠血管平滑肌细胞,进行以下检测:(1)用半定量RT-PCR和western blot检测转染后平滑肌细胞中RTP的表达;(2)用BrdU细胞增殖检测试剂盒检测转染后平滑肌细胞增殖能力的改变。5.构建RTP的RNA干扰慢病毒载体并转染大鼠血管平滑肌细胞,进行以下检测:(1)用real-time PCR和western blot检测转染后平滑肌细胞中RTP的表达;(2)用BrdU细胞增殖检测试剂盒检测转染后平滑肌细胞增殖能力的改变。结果:1.利用白藜叁醇亲和层析柱可从兔血管平滑肌组织中分离、纯化一个分子量约为26kD的蛋白质,将其命名为RTP-26。该蛋白质的分子量与文献记载的NQO2分子量一致,并且在用RTP多克隆抗体,即NQO2抗体进行western blot时可以检测到该蛋白。2.在体实验结果显示白藜叁醇能够抑制动脉粥样硬化再狭窄的形成。对照组、动脉粥样硬化模型组和白藜叁醇治疗组的血管狭窄率分别为:63.04±3.33%,73.92±7.10%和28.10±5.83%(叁组间ANOVA检验,P＜0.01)。髂动脉壁RTP-26的mRNA和蛋白表达水平:白藜叁醇明显抑制了RTP-26的表达,mRNA表达较对照组降低了39%,较模型组降低了44%(叁组间ANOVA检验,P＜0.01);蛋白表达较对照组降低了35%,较模型组降低了32%(叁组间ANOVA检验,P＜0.01)。3.在细胞水平的研究发现:(1)白藜叁醇能够抑制血管平滑肌细胞的增殖,且具有浓度依赖和时间依赖的特点。(2)白藜叁醇抑制平滑肌细胞内的RTP-26 mRNA表达。1、10和50μmol/L白藜叁醇干预平滑肌细胞72小时,细胞内RTP-26 mRNA的表达分别降低了56%、62%和95%,与对照组相比有统计学差异(P＜0.01)。50μmol/L白藜叁醇干预平滑肌细胞的时间达到48和72小时时,细胞内RTP-26 mRNA的表达分别降低了53%和95%,与对照组比较有统计学差异(P＜0.01)。(3)RTP-26蛋白的表达也明显降低。10和50μmol/L白藜叁醇干预平滑肌细胞72小时,细胞内RTP-26蛋白的表达降低15%和47%,与对照组相比也有统计学差异(P＜0.05和P＜0.01)。50μmol/L白藜叁醇干预平滑肌细胞48和72小时,细胞内RTP-26蛋白的表达降低36%和58%,与对照组比较有统计学差异(P＜0.01)。所以,白藜叁醇对血管平滑肌细胞中RTP-26 mRNA和蛋白的抑制作用也呈浓度依赖和时间依赖的特点。4.RTP-26高表达载体pEGFP-N1-NQO2成功构建并转染大鼠血管平滑肌细胞,48小时后细胞内RTP-26 mRNA的表达升高1倍,且表达由绿色荧光蛋白和RTP-26组成的融合蛋白。但是,用BrdU细胞增殖检测试剂盒测试,转染pEGFP-N1-NQO2质粒的平滑肌细胞与野生型细胞比较,增殖能力没有明显变化。5.RTP-26 RNA干扰慢病毒载体Psc-NQO2构建成功后,转染血管平滑肌细胞72小时,细胞内RTP-26 mRNA的表达较野生型细胞减少74%。延长转染时间至14天,细胞内RTP-26蛋白的表达几乎检测不到。同时,用BrdU细胞增殖检测试剂盒测试,转染Psc-NQO2的平滑肌细胞与野生型细胞比较,增殖能力明显降低(P＜0.01),且与25μmol/L白藜叁醇干预72小时的平滑肌细胞的增殖能力相仿。结论:1.用白藜叁醇亲合层析柱可以从血管平滑肌中分离、纯化一个26kD的蛋白片断,即白藜叁醇结合蛋白26(RTP-26),结合文献和western blot结果,证实RTP-26即NQO2;2.高胆固醇饲料喂养新西兰大白兔12周可产生动脉粥样硬化损伤;球囊内皮剥脱术可制备再狭窄动物模型。白藜叁醇能够抑制动脉粥样硬化再狭窄的形成,这与其能够抑制血管壁内RTP-26 mRNA和蛋白的表达有关。3.白藜叁醇能够抑制体外培养的血管平滑肌细胞的增殖;白藜叁醇也能够抑制培养的平滑肌细胞胞浆内RTP-26 mRNA和蛋白的表达,且具有浓度依赖和时间依赖的特点;4.RTP-26高表达对血管平滑肌细胞的增殖无影响;5.RTP-26表达降低的血管平滑肌细胞增殖能力降低,且与白藜叁醇干预的细胞的增殖能力相仿。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
白藜叁醇结合蛋白论文参考文献
[1].崔嘉琴,柏友萍,吴琳,孙明明,林潺.运动与白藜芦醇对老年肥胖大鼠视黄醇结合蛋白4、血糖和胰岛素敏感性的影响[J].卫生研究.2017
[2].蔡静波.白藜叁醇结合蛋白与血管平滑肌细胞增殖关系的研究[D].南京医科大学.2008