导读:本文包含了无机焦磷酸酶论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:芒果,PPase,基因克隆,表达载体构建
无机焦磷酸酶论文文献综述
白蓓蓓,荆永琳,蔡秉宇,蓝丽,王佳[1]（2019）在《芒果无机焦磷酸酶基因的克隆及其表达载体构建》一文中研究指出无机焦磷酸酶(inorganic pyrophosphatase,PPase)催化焦磷酸(PPi)水解为2个无机正磷酸(Pi),是蔗糖合成途径中的调控关键节点之一。本研究根据已经报道的PPase基因的序列设计兼并引物,采用3′RACE和5′RACE方法,从贵妃芒果的果实中克隆得到了一个芒果PPase基因,将其命名为MiPPase,其全长cDNA序列为1014 bp,开放阅读框为837bp,编码278个氨基酸,分子量为30.85ku,等电点为4.68。通过系统发育分析发现该基因编码的蛋白与红花烟草具有较近的亲缘关系。为深入探究MiPPase基因在蔗糖代谢过程中的作用,本研究成功构建出pGreenII62-SK-MiPPase基因过量表达载体,为后续研究MiPPase基因在芒果果实蔗糖合成的作用机理提供理论依据。(本文来源于《热带作物学报》期刊2019年02期）
刘东让,肖栋,侯喜林[2]（2018）在《普通白菜无机焦磷酸酶基因BcPPase的克隆及表达分析》一文中研究指出植物无机焦磷酸酶(pyrophosphatase,PPase)是一种以无机焦磷酸(pyrophosphate,PPi)为底物的水解酶。通过无机焦磷酸酶来改变PPi的含量可以实现糖代谢途径的调控,从而调控植物的生长发育。为研究普通白菜无机焦磷酸酶基因BcPPase(Brassicarapasubsp.chinensisinorganic pyrophosphatase)的结构和表达特征,通过RACE技术,从普通白菜品种‘苏州青’叶片克隆到BcPPase的全长cDNA序列;采用RT-qPCR分析该基因在植物不同组织中及在盐、低温和高温处理下的表达模式;用SDS-PAGE技术分析该基因的原核表达特征。BcPPase基因的克隆及表达分析,为下一步蛋白水平研究和转基因功能研究提供了条件,也将为高产、优质普通白菜新品种的选育提供重要的理论依据。以普通白菜‘苏州青’为试验材料。人工气候箱中培养,每日22℃光照培养16 h,16℃暗培养8 h,相对湿度85%±5%。待催芽28 d(5～6片真叶)后,分别用100 mmol·L~(-1) Na Cl、16℃/12℃(昼/夜)及32℃/28℃(昼/夜)对选出的植株进行处理。组织特异性表达分析使用的材料取自普通白菜植株苗期(催芽后28d)的根、茎、叶。胁迫处理表达分析分别在处理后2、6、12、24和48 h进行取样。每个样取3个重复。上述材料取样后立即在液氮中冰冻,保存在–70℃冰箱中。序列分析结果发现BcPPase的cDNA全长为1 062 bp,其中开放阅读框长度为636 bp,共编码212个氨基酸;预测其编码蛋白质化学式为C_(1109)H_(174)7)N_(297)O_(320)S_8,相对分子质量为24.6×10~3 Da,理论等电点pI是5.91,属于酸性蛋白,不稳定指数为47.97,属于不稳定蛋白,脂肪指数为92.83;该蛋白属于亲水性蛋白,总平均疏水指数(GRAVY)为–0.426;该蛋白无信号肽,并且不存在跨膜区域;该蛋白二级结构为α螺旋、延伸链和无规则卷曲,分别占28.77%和23.58%和47.64%;该基因在起始密码子ATG之前有A,符合Koza规律;在3′端有poly(A)尾,这些都符合有效翻译的基因全长cDNA的特征;氨基酸同源性的系统进化分析表明,普通白菜BcPPase基因与同科植物的进化关系相近。RT-qPCR表达分析表明,BcPPase在普通白菜根、茎、叶中均有表达,其中叶中表达量最高,茎中最少;盐、低温和高温处理均能诱导BcPPase的表达,且表达量在盐处理6 h后达到峰值,温度处理12 h后达到峰值。原核表达载体经1.0 mmol·L~(-1) IPTG诱导4、6、8 h后表达出相对分子质量约为24×10~3 D的融合蛋白。(本文来源于《中国园艺学会2018年学术年会论文摘要集》期刊2018-10-17）
张春蕊,王艳敏,张玉,王玉成,杨传平[3]（2016）在《刚毛柽柳液泡膜H~+转运无机焦磷酸酶ThVP3的克隆与表达分析》一文中研究指出通过对刚毛柽柳转录组的分析,获得并克隆了1个H~+-PPase基因cDNA全长,命名为ThVP3。序列分析结果表明:ThVP3全长3 500 bp,包含2 406 bp完整的开放读码框,618的5'非编码区和476 bp的3'非编码区。该cDNA编码1个801个氨基酸的多肽,等电点为5.67,推测分子质量为84.86 k D。通过与其他物种的氨基酸多序列比对及系统进化树分析,发现ThVP3氨基酸序列与AtVP2(拟南芥)一致性达88%,属于Ⅱ型VP成员。ThVP3基因有15个跨膜区,并具有高度保守的3个结构域(CS1,CS2,CS3)。相对荧光定量RT-PCR结果表明,ThVP3在高盐及干旱胁迫下均呈现为表达上调,但在各胁迫时间点和不同组织中的表达模式有所差异,0.4 mol/L Na Cl胁迫处理下,地下部分3 h达到最大值后有不同程度的降低,地上部分24 h达到最大值,与地下部分比,地上部分呈现较高的表达量;20%(w/v)PEG 6000胁迫处理下,地下部分在3 h和12 h达到峰值,地上部分表达量逐渐升高,24 h达到最大值后逐渐降低,96 h达到第2个峰值。ThVP3的表达受盐旱胁迫的诱导,推测其可能在柽柳的胁迫应答中起着重要的作用。(本文来源于《分子植物育种》期刊2016年10期）
陈果果,孙梅好[4]（2016）在《球形红细菌无机焦磷酸酶的寡聚化及酶活性分析》一文中研究指出球形红细菌(Rhodobacter sphaeroides)是一种重要的微生物资源,其无机焦磷酸酶(PPase)属于Ⅱ型可溶性焦磷酸酶.通过原核表达和纯化,得到了正常型Rs PPase和突变型Rs PPasemono,进一步进行了寡聚化和酶活性分析.结果表明:突变型Rs PPasemono为单聚体,在钴离子存在条件下会导致谷胱甘肽S-转移酶(glutathione sulfotransferase,GST)标签进行蛋白酶切,且去标签后的Rs PPasemono催化效率较高(Kcat/Km(PPi)=12.64L·μmol-1·min-1),相对于Rs PPase-GST提高了12倍;在无钴离子存在条件下仍能进行蛋白酶切,且保持催化效率(Kcat/Km(PPi)=0.34 L·μmol-1·min-1).(本文来源于《浙江师范大学学报(自然科学版)》期刊2016年02期）
张许[5]（2015）在《无机焦磷酸酶（PPA1）在脂肪细胞分化过程中的功能研究》一文中研究指出脂肪组织是调节机体能量平衡的一个重要器官,成人脂肪细胞存在每年约10%的更新,且BMI越高对脂肪细胞更新的速率需求越高,脂肪细胞分化异常与机体胰岛素抵抗及2型糖尿病的发生密切相关。线粒体是细胞内进行氧化磷酸化和能量供应的主要场所,脂肪细胞线粒体的功能也与脂肪细胞的分化及更新有着紧密的联系。无机焦磷酸酶(Inorganic Pyrophosphatase,PPA1)是一种催化一分子无机焦磷酸转化为两分子磷酸盐离子的酶,近年来诸多研究表明PPA1与细胞的高能量代谢状况相关,也与细胞的活化关系密切。实验室前期研究发现PPA1在脂肪组织中表达丰度较其他组织要高,且在高脂喂养的2型糖尿病小鼠中发现PPA1表达的改变与文献报道中脂肪细胞数目的变化有着相同的趋势,因此本研究对PPA1在脂肪细胞分化的作用进行了初步的探讨。在细胞水平,我们在3T3-L1前体脂肪细胞中考察了PPA1对脂肪细胞分化的影响。结果显示,PPA1在3T3-L1脂肪细胞分化过程中表达量逐渐升高,并且其表达量随着细胞分化效率的提高进一步升高;干扰PPA1可以明显抑制3T3-L1脂肪细胞的成脂能力、分化后期的胰岛素敏感性和细胞因子的表达,且这种影响与细胞的增殖状况无关。我们通过透射电镜对细胞的形态进行观察,发现在分化前期,干扰PPA1使细胞线粒体出现嵴溶解和肿胀的现象,而在分化后期,PPA1干扰组细胞的线粒体数目与对照组相比较多但是形态短小。通过进一步对调控线粒体分裂融合的基因进行检测,我们发现调控线粒体融合相关基因Mfn1、Mfn2以及调控线粒体分裂相关基因Drp1的表达均下降,说明干扰PPA1打乱了线粒体分裂融合的平衡。在此基础上我们检测了线粒体功能,发现与线粒体呼吸链、线粒体转运、脂肪酸代谢以及叁羧酸循环相关基因的表达也有不同程度的下降。在动物水平,我们对干扰了PPA1同源基因Nurf38的果蝇模型进行研究发现,干扰Nurf38使果蝇幼虫体长缩短,脂肪体细胞脂滴减小、核浆比例增大,体内甘油叁酯含量降低。在对成蝇进行的考察中发现,干扰Nurf38使成蝇产率降低,其中雄性成蝇的产率只有对照组的1/2。对这些雄性成蝇进行低糖饥饿实验,干扰Nurf38组的果蝇较早出现死亡并且死亡率高,抗饥饿能力大大降低。综上所述,我们在细胞层面与动物水平对PPA1基因在脂肪分化过程中的作用进行了研究,并对其可能的机制进行了初步探讨,为PPA1基因功能的研究及应用提供了参考。(本文来源于《南京医科大学》期刊2015-05-01）
秦新民,万珊,李惠敏,覃屏生,张渝[6]（2015）在《沙田柚无机焦磷酸酶基因的cDNA克隆及序列分析》一文中研究指出植物自交不亲和性是植物生殖过程中普遍存在的一种现象,是植物特异性识别并拒绝自身花粉或亲缘关系很相近的花粉的一种遗传机制。无机焦磷酸酶(inorganic pyrophosphatase,IPPase)在植物生长发育方面起重要作用。该研究根据沙田柚花柱消减文库中EST序列(无机焦磷酸酶基因内部片段),设计了2对特异引物5'-GSP1,5'-n GSP1,3'-GSP2 and 3'-n GSP2,通过SMART-RACE PCR技术从所构建的沙田柚花柱抑制性消减文库中克隆了沙田柚无机焦磷酸酶基因的c DNA全长序列,利用Blastn、DNAman和Expasy软件对所克隆的基因进行同源性分析,以及基因编码的氨基酸的分子量、等电点、疏水性等理化性质分析。结果表明:IPPase基因c DNA全长为1 136 bp(Gen Bank登录号为KF990474),开放阅读框(ORF)全长为654 bp,共编码217个氨基酸,包括170 bp 5'UTR和312 bp的3'UTR;编码的蛋白质的分子量为24.4 k Da,等电点为5.96;蛋白结构域分析显示沙田柚IPPase与焦磷酸酶具有相同的保守结构域;对沙田柚IPPase蛋白质序列进行疏水性分析,结果表明沙田柚IPPase基因编码的肽链中疏水性最大值约为3.21,最小值约为-2.98,属于亲水性蛋白,无跨膜区域;Blastn搜索的结果显示,沙田柚IPPase基因序列与多种植物的IPP基因高度同源;序列分析表明,沙田柚IPPase基因核苷酸的同源性与毛果杨(Populus trichocarpa)和橡胶树(Hevea brasiliensis)IPPase基因均为87%;氨基酸序列与克莱门柚(Citrus clementina)无机焦磷酸酶完全一致。该研究结果可为深入研究无机焦磷酸酶在沙田柚自交不亲和中的作用机理提供基础。(本文来源于《广西植物》期刊2015年06期）
吴群峰[7]（2014）在《日本血吸虫无机焦磷酸酶（SjPPase）的结构功能研究》一文中研究指出背景：无机焦磷酸酶（Inorganic pyrophosphatase, PPase）是一类催化无机焦磷酸盐(PPi)水解生成磷酸盐的蛋白质。PPi是生物大分子（如DNA，RNA，蛋白质和糖原等）生物合成过程的副产物，PPi的水解反应将在热力学上促进生物大分子的合成。另外，PPi也是硫酸盐还原反应的一个产物，PPi的水解反应促进了硫酸盐的利用，为半胱氨酸、及甲硫氨酸等的合成提供硫源。目的：建立日本血吸虫无机焦磷酸酶重组表达与纯化方法，研究其分子性质并解析其晶体结构，为阐明其结构功能关系、研究其在血吸虫病防治上的应用奠定坚实的基础。方法：分子克隆SjPPase基因至pET-28a质粒，将重组质粒导入大肠杆菌BL21（DE3），IPTG诱导表达SjPPase重组蛋白；超声裂解菌体，上清经6×His-Tag特异性结合Ni-NTA柱与弱阴离子DEAE柱两步分离、纯化获取高纯度蛋白。使用比色法测定反应产物磷酸盐（Pi）在不同时间的浓度来计算SjPPase的酶学活性，以及抑制剂的抑制活性。利用Cross-linking反应对SjPPase溶液状态下的聚集行为进行研究；采用Native-PAGE电泳探索SjPPase与一些小分子之间的相互作用。运用ELISA法测定SjPPase作为血吸虫病诊断抗原的敏感性和特异性。应用气液扩散法进行SjPPase蛋白酶的晶体生长并收集其X-Ray衍射数据，解析并分析其晶体结构。结果：制备得到了纯度较高（>95%）的SjPPase重组蛋白；测定了其不同温度和pH时的酶学活性，其中最适温度和pH分别在60℃和7.0附近；测定了抑制剂NaF，MDP以及IDP的抑制活性，它们的半抑制浓度IC50依次为1.92mM、3.72mM和4.97mM；在溶液状态下，SjPPase分子是以二聚体聚集形成的多聚体形式存在；研究结果显示，Mg2+和SjPPase分子中的半胱氨酸对于维持SjPPase结构的稳定性非常重要，在SjPPase分子中存在底物结合的非活性中心位点；解析并分析了SjPPase的空间结构及其与功能的基本关系。(本文来源于《赣南师范学院》期刊2014-06-03）
王磊[8]（2014）在《嗜热无机焦磷酸酶的重组表达及催化特性分析》一文中研究指出无机焦磷酸酶（Inorgainic pyrophosphatase, PPase, EC3.6.1.1）在控制生物体内无机焦磷酸浓度过程中起重要的作用。它催化一分子的焦磷酸脂转化成两分子正磷酸盐离子。这是一个高放能的反应，因此该反应可以偶联到一些不利于生物转化的过程中，推动热力学平衡向生物合成方向进行。在生物体内，NTP/dNTP参与核酸的生物合成会生成副产物焦磷酸盐，体内存在的焦磷酸盐会在焦磷酸酶的催化作用下分解，减少焦磷酸累积可能造成的负面效应。PCR利用嗜热酶模拟体内核酸复制的体外反应，伴随dNTP的参入，焦磷酸的累积会不会影响到DNA聚合酶的扩增效率，外源使用焦磷酸酶是否可以提高PCR扩增的效率？这些问题都有待澄清和分析。本研究通过构建PPase基因的原核表达载体，优化表达条件，纯化得到rPPase，并分析其催化特性。本研究利用嗜热菌基因组DNA成功克隆了无机焦磷酸酶基因，测序后经BLASTN比对属于T. thermophilus PPase的CDS区域。同时成功构建了原核表达载体pET28a-PPase，通过对rPPase在大肠杆菌（E. Coli） BL21Star（DE3）中表达，rPPase目标蛋白大小约为20.3kDa。并利用Talon resin成功纯化得到rPPase的纯酶液，达到理想的纯化效果。最适合的培养条件为：37℃下IPTG浓度0.8mmol/L诱导表达8h。每升培养的菌液可以生产约50mg的目标蛋白。经生化特性分析，其比活力为140U/mg。该酶最适pH值为8.0，最适反应温度为65℃。其动力学参数Km为1.69×10-2mol/L，Vmax为13.16mol-1·L·s-1。通过半定量PCR和实时定量PCR研究发现，添加无机焦磷酸（PPi）的体系中，对不同DNA聚合酶的PCR扩增均呈现抑制作用，但抑制程度不同，在PCR体系中添加rPPase，DNA聚合酶均能恢复其扩增效率。实时定量PCR检测表明，在低浓度模板条件下rPPase对IProof，Pfu，Pfu turbo，S-KT，S-KOD五种DNA聚合酶的扩增效率有明显的增强作用，并能增加PCR产量。因此可以做为这五种DNA聚合酶的增效剂。焦磷酸抑制是降低这五种DNA聚合酶扩增效率的关键因素之一。本研究通过构建重组表达体系，体外研究其催化特性，初步验证其作为PCR增强剂的可行性，为焦磷酸酶在商业化的应用提供了理论依据。同时，也为体外研究生物体内的焦磷酸盐代谢奠定了基础。(本文来源于《西北农林科技大学》期刊2014-05-01）
曹红荣,徐云侠,丁淑琴,钟政荣,罗庆礼[9]（2013）在《日本血吸虫无机焦磷酸酶的克隆表达及蛋白特征分析》一文中研究指出目的克隆并原核表达日本血吸虫无机焦磷酸酶(SjIPP),分析SjIPP的蛋白特征。方法以日本血吸虫成虫cDNA为模板,克隆SjIPP,重组入pET28a质粒,并将重组质粒转化入E.coli BL21,用SDS-PAGE和Western blot法鉴定重组蛋白的表达和特异性,进一步分析SjIPP的蛋白特征和同源性。结果克隆和表达出的SjIPP均与预测的分子量大小一致,Western blot法结果显示,重组蛋白可被小鼠抗His-tag单克隆抗体特异性识别。生物信息学分析表明,SjIPP为胞内蛋白,含有多个磷酸化位点,B细胞表位丰富,且与人和小鼠的IPP高度同源。结论成功克隆表达出SjIPP,为进一步利用SjIPP奠定基础。(本文来源于《安徽医科大学学报》期刊2013年12期）
朱家红[10]（2013）在《橡胶树可溶性无机焦磷酸酶基因的克隆及表达调控》一文中研究指出天然橡胶是一种以聚异戊二烯为主要成分的天然高分子化合物,它的生物合成包括聚异戊二烯链的起始、延伸和终止叁个不同的生化过程。在延伸过程中,每延伸1个异戊二烯基,就要释放1分子焦磷酸(PPi),PPi的累积会抑制橡胶的生物合成,焦磷酸酶对PPi的及时水解,对橡胶的生物合成和橡胶产量具有重要的调控作用。本研究克隆了3个橡胶树可溶性无机焦磷酸酶基因,并对它们的分子特征和表达调控进行了相关的研究,旨在更深入的揭示橡胶树中可溶性无机焦磷酸酶的功能和作用机制。主要研究结果如下：克隆了3个橡胶树可溶性无机焦磷酸酶基因HbSIP1、HbSIP2和HbSIP3,分别编码216、215和216个氨基酸。3个基因编码区均包含8个外显子和7个内含子,内含子的剪接符合GT-AG原则。生物信息学分析表明,HbSIP1、HbSIP2和HbSIP3与其他植物中的可溶性无机焦磷酸酶均具有较高的同源性,具有典型的植物可溶性无机焦磷酸酶结构特征,含有24个特别保守的氨基酸残基(其中15个与蛋白的活性密切相关)和一个二价金属离子结合序列。构建了3个基因的原核表达载体pGEX-HbSIP1/2/3,并在大肠杆菌中表达获得了融合蛋白GST-HbSIP21/2/3。对3个融合蛋白GST-HbSIP1/2/3进行了纯化,纯化的蛋白都具有水解PPi的活性,且活性明显依赖Mg2+的存在；GST-HbSIP1/2/3的最适PH值分别为7.5、8.0和7.5；Km值分别为98.4μM、194.7μM和138.6μM。荧光定量PCR结果显示,HbSIP1/2/3在橡胶树叶、皮、花和胶乳中均有表达,其中HbSIP1和HbSIP3在胶乳中表达量显着高于其他组织。乙烯(ET)、茉莉酸(JA)、高温、低温、聚乙二醇(PEG)和H2O2等处理均能上调HbSIP1的表达,而水杨酸(SA)和脱落酸(ABA)则下调HbSIP1的表达；HbSIP2在ET、JA、SA、PEG和H2O2等处理下表达上调,在高温处理下表达下调,而在ABA和低温处理下表达无明显变化；JA/SA、PEG和H202能上调HbSIP3的表达,高温和低温都能下调HbSIP3的表达,而ET处理后HbSIP3表达基本稳定。分别分离了HbSIPl/2/3的起始密码子ATG上游2297bp/1482bp和844bp的启动子序列,其中HbSIP15'端非编码区中存在一个1499bp的内含子。3个基因的启动子序列中均存在多个典型的真核生物启动子基本元件、应答激素和胁迫信号元件及转录因子结合元件。构建了分别含HbSIP1/2/3启动子序列1196bp、791bp和844bp的植物表达载体pCAMBI1381-P1/P2/P3,转基因植株的GUS活性检测表明P2和P3可以驱动GUS的表达。通过酵母单杂交初步筛选获得调控HbSIP1的转录因子1个(HbZF-HD)、调控HbSIP2的转录因子3个(HbGATA、HbWRKY和HbbHLH)、调控HbSIP3的转录因子2个(HbZF和HbMyb2)。荧光定量PCR结果表明6个转录因子在橡胶树叶、皮、花和胶乳中均有表达。通过酵母双杂交初步筛选获得与HbSIP1/2/3互作的蛋白41个,这些蛋白涉及蛋白合成、蛋白修饰与活性调节、胶乳基础代谢、橡胶生物合成、物质转运及信号转导等过程。双分子荧光互补实验进一步证HbSIP1/2/3均能与橡胶延伸因子互作。(本文来源于《海南大学》期刊2013-11-01）
无机焦磷酸酶论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
植物无机焦磷酸酶(pyrophosphatase,PPase)是一种以无机焦磷酸(pyrophosphate,PPi)为底物的水解酶。通过无机焦磷酸酶来改变PPi的含量可以实现糖代谢途径的调控,从而调控植物的生长发育。为研究普通白菜无机焦磷酸酶基因BcPPase(Brassicarapasubsp.chinensisinorganic pyrophosphatase)的结构和表达特征,通过RACE技术,从普通白菜品种‘苏州青’叶片克隆到BcPPase的全长cDNA序列;采用RT-qPCR分析该基因在植物不同组织中及在盐、低温和高温处理下的表达模式;用SDS-PAGE技术分析该基因的原核表达特征。BcPPase基因的克隆及表达分析,为下一步蛋白水平研究和转基因功能研究提供了条件,也将为高产、优质普通白菜新品种的选育提供重要的理论依据。以普通白菜‘苏州青’为试验材料。人工气候箱中培养,每日22℃光照培养16 h,16℃暗培养8 h,相对湿度85%±5%。待催芽28 d(5～6片真叶)后,分别用100 mmol·L~(-1) Na Cl、16℃/12℃(昼/夜)及32℃/28℃(昼/夜)对选出的植株进行处理。组织特异性表达分析使用的材料取自普通白菜植株苗期(催芽后28d)的根、茎、叶。胁迫处理表达分析分别在处理后2、6、12、24和48 h进行取样。每个样取3个重复。上述材料取样后立即在液氮中冰冻,保存在–70℃冰箱中。序列分析结果发现BcPPase的cDNA全长为1 062 bp,其中开放阅读框长度为636 bp,共编码212个氨基酸;预测其编码蛋白质化学式为C_(1109)H_(174)7)N_(297)O_(320)S_8,相对分子质量为24.6×10~3 Da,理论等电点pI是5.91,属于酸性蛋白,不稳定指数为47.97,属于不稳定蛋白,脂肪指数为92.83;该蛋白属于亲水性蛋白,总平均疏水指数(GRAVY)为–0.426;该蛋白无信号肽,并且不存在跨膜区域;该蛋白二级结构为α螺旋、延伸链和无规则卷曲,分别占28.77%和23.58%和47.64%;该基因在起始密码子ATG之前有A,符合Koza规律;在3′端有poly(A)尾,这些都符合有效翻译的基因全长cDNA的特征;氨基酸同源性的系统进化分析表明,普通白菜BcPPase基因与同科植物的进化关系相近。RT-qPCR表达分析表明,BcPPase在普通白菜根、茎、叶中均有表达,其中叶中表达量最高,茎中最少;盐、低温和高温处理均能诱导BcPPase的表达,且表达量在盐处理6 h后达到峰值,温度处理12 h后达到峰值。原核表达载体经1.0 mmol·L~(-1) IPTG诱导4、6、8 h后表达出相对分子质量约为24×10~3 D的融合蛋白。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
无机焦磷酸酶论文参考文献
[1].白蓓蓓,荆永琳,蔡秉宇,蓝丽,王佳.芒果无机焦磷酸酶基因的克隆及其表达载体构建[J].热带作物学报.2019
[2].刘东让,肖栋,侯喜林.普通白菜无机焦磷酸酶基因BcPPase的克隆及表达分析[C].中国园艺学会2018年学术年会论文摘要集.2018
[3].张春蕊,王艳敏,张玉,王玉成,杨传平.刚毛柽柳液泡膜H~+转运无机焦磷酸酶ThVP3的克隆与表达分析[J].分子植物育种.2016
[4].陈果果,孙梅好.球形红细菌无机焦磷酸酶的寡聚化及酶活性分析[J].浙江师范大学学报(自然科学版).2016
[5].张许.无机焦磷酸酶（PPA1）在脂肪细胞分化过程中的功能研究[D].南京医科大学.2015
[6].秦新民,万珊,李惠敏,覃屏生,张渝.沙田柚无机焦磷酸酶基因的cDNA克隆及序列分析[J].广西植物.2015
[7].吴群峰.日本血吸虫无机焦磷酸酶（SjPPase）的结构功能研究[D].赣南师范学院.2014
[8].王磊.嗜热无机焦磷酸酶的重组表达及催化特性分析[D].西北农林科技大学.2014
[9].曹红荣,徐云侠,丁淑琴,钟政荣,罗庆礼.日本血吸虫无机焦磷酸酶的克隆表达及蛋白特征分析[J].安徽医科大学学报.2013
[10].朱家红.橡胶树可溶性无机焦磷酸酶基因的克隆及表达调控[D].海南大学.2013