李璐
（连云港市第一人民医院输血科检验师江苏连云港222002）
【摘要】目的对交叉配血次侧阳性而患者的直接抗人球蛋白试验（DAT）为阴性样本的原因进行分析。方法对在交叉配血中主侧阴性次侧阳性，患者DAT阴性的3组样本，进行血型复检，对献血者样本进行不规则抗体筛查及抗体鉴定，并测定其效价。结果3份献血者样本1例检出抗-E抗体，2例检出抗-M抗体。结论对献血员血液最好加做抗体筛查实验。
【关键词】交叉配血次侧凝集直接抗人球蛋白试验（DAT)不规则抗体筛查抗体鉴定抗-E抗体抗-M抗体
【中图分类号】R392【文献标识码】A【文章编号】2095-1752（2014）05-0146-02
微柱凝胶技术具有高灵敏性和准确性，已被我国的医院广泛使用，将其应用于交叉配血可以提高输血的安全性[1]。通常情况当交叉配血出现次侧凝集时患者直接抗人球蛋白试验（DAT）会为阳性，这是由于患者自身病情因素（自身抗体及药物）的影响[2][3]，而次侧凝集且患者DAT阴性的结果则较少发生[4]。笔者对本院2010-2013年间应用微柱凝胶技术交叉配血次侧凝集而患者DAT呈阴性的3份配血样本进行了相关试验，分析其原因，现报道如下。
1材料与方法
1.1研究对象我院2010-2013年间应用微柱凝胶技术交叉配血次侧凝集而患者DAT呈阴性的3组病人血样与相应的献血员血样，分别编1组、2组、3组。
1.2仪器TD-3A型卡用离心机，FYQ型免疫微柱孵育器（长春博研科学仪器有限责任公司），KA-2200离心机（KUBOTA公司）。
1.3试剂抗人球蛋白微柱凝胶卡，反定型细胞（长春博讯生物技术有限责任公司），单克隆抗-A、抗-B、抗-RhD血型定型试剂，不规则抗体筛查细胞，谱细胞（上海血液生物医药有限责任公司）。
1.4方法本院乙二胺四乙酸钠(EDTA.K2)抗凝的患者标本应用抗人球蛋白微柱凝胶技术进行交叉配血试验，主侧阴性次侧阳性的患者做DAT试验，选取DAT阴性的患者标本与献血员标本分别做以下试验：①复查患者与献血员血型正反定型，②利用不规则抗体筛查细胞筛查献血员的不规则抗体，盐水法与微柱凝胶抗球蛋白法一同进行，③利用谱细胞进行抗体鉴定（盐水/抗人球蛋白法），④选取相应抗原的红细胞对检出的抗体进行效价测定，IgM型抗体通过盐水法，IgG型抗体通过抗人球蛋白法。以上操作均按相关试剂操作说明书和临床检验操作规程[6]进行。
2结果
2.1复查血型正反定型结果：1号患者与献血员血型正反定型均为A型RhD阳性，2号患者与献血员血型均为O型RhD阳性，3号患者血型为A型RhD阳性，献血员血型正定型为A型RhD阳性，反定型为O型，正反定型不符。
2.2供血者不规则抗体筛查结果如表1
表1交叉配血次侧阳性且患者DAT阴性的献血者不规则抗体筛查结果
献血员盐水抗人球蛋白微柱凝胶
1号0+
2号++
3号++
2.3献血者红细胞不规则抗体鉴定结果及效价如表2（谱细胞格局略）
表2献血者红细胞不规则抗体鉴定结果及效价
献血员抗体种类及性质效价
1号抗-RhE(IgG)8
2号抗-M(IgM)8
3号抗-M(IgM)64
3结论
从上述3例交叉配血次侧阳性且患者DAT阴性的检测结果表明献血者血液内存在红细胞不规则抗体，红细胞不规则抗体的存在是引发免疫性输血反应及配血困难的主要因素。目前国内大部分血站并未将献血员不规则抗体筛查做为常规检查，尽管多份调查资料显示健康献血者的不规则抗体检出率2%[5]，但这样还是对临床输血的安全性造成一定的危害。我国临床输血技术规范对血浆的输注只要求同型输注，而献血员不规则抗体的存在使得血浆输注的不安全性增加。当患者需要长期大量输血时，输入的含不规则抗体的血制品会造成病人溶血及配血困难，危害输血安全。
部分学者称IgM性质冷抗体，在临床输血中没有显著意义，只有37℃或抗人球蛋白试验出现阳性时才有意义，这种说法弱化了含有冷抗体的血制品在临床输血中的影响。笔者认为这种说法有待验证。如今低温麻醉[7]很多的应用在一些复杂的手术中，比如心脏和脑外科手术，此时如果输注含有冷抗体的血制品对术中病人有没有影响，对预后会不会有影响等等都是需要严格论证的。随着临床众多新技术的引入，相关的配套和处理措施也应该不断改进才能适应新的环境的要求。为了进一步保障输血安全，笔者认为对献血员进行不规则抗体筛查是必要的，这样可以及时发现含有不规则抗体的血液并进行处理，避免患者输入。
参考文献
[1]彭道波,兰炯采,王梁平等.用微柱凝胶试验进行交叉配血.中国输血杂志.2001,14(4):232.
[2]刘燕明,郭文敬,宫济武.微柱凝集技术检测直接抗人球蛋白试验结果分析.中国医药.2012,7(10):1282-1283.
[3]杨世英,廉维,赵宁等.抗青霉素抗体引起红细胞直接抗球蛋白试验阳性1例.中国输血杂志.2003,16(6):426-427.
[4]张慧莲,杨婷,于洋.680例交叉配血次侧凝集的结果分析.国际检验医学杂志.2011,32(9):1015-1016.
[5]夏爱军,穆士杰,张献清.健康献血者红细胞血型不规则抗体筛选在临床输血中的意义.中国输血杂志.2005,18(6):493-494.
[6]全国临床检验操作规程（第三版）.254-255.
[7]杨志遐,孙剑,王志萍.不同程度和时程低温对犬创伤性脑损伤的影响.2010,30(6).