导读:本文包含了胰岛素合成与分泌论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:miR-96,Sox6基因,胰岛素,胰岛β细胞
胰岛素合成与分泌论文文献综述
杨靖,吴丽,周灵芝,赵志波,项孙敏[1]（2019）在《MiR-96靶向调控Sox6促进小鼠β细胞胰岛素合成与分泌》一文中研究指出目的探索miR-96对小鼠胰岛β细胞胰岛素合成与分泌的影响及其作用机制。方法将小鼠胰岛β细胞系(MIN6细胞)分为四组,通过脂质体LipfectamineTM2000介导将miR-96 mimics、mimicsNC、miR-96 inhibitor、inhibitor NC瞬时转染至4组细胞,荧光定量PCR和ELISA方法分别检测Ins1、Ins2mRNA的表达及细胞上清液中的胰岛素浓度,生物信息学分析miR-96与Sox6 3UTR的结合关系,荧光素酶报告基因检测miR-96与Sox6的结合情况,Western blot检测Sox6蛋白水平。结果与对照组比较,miR-96 mimics能增加葡萄糖刺激下MIN6细胞胰岛素的合成与分泌(P <0.01),而miR-96 inhibitor可下调胰岛素的合成与分泌(P <0.01)。miR-96与Sox6 3UTR的553-561位点结合。过表达miR-96可显着抑制Sox6荧光素酶活性及MIN6细胞中Sox6蛋白的表达。结论 miR-96靶向沉默Sox6进而促进β细胞胰岛素的合成与分泌。(本文来源于《实用医学杂志》期刊2019年02期）
黄莎[2]（2018）在《热应激通过胰岛素介导的PI3K/Akt信号调控仔猪睾丸支持细胞乳酸合成及分泌》一文中研究指出严重热应激对雄性动物的生殖功能有明显的负面影响。支持细胞产生的乳酸不仅是生精细胞最重要的代谢底物,而且还可以增强生精细胞抗凋亡的能力。因此,乳酸在保护雄性动物免受热应激对其生殖功能产生的不利影响方面发挥着重要作用。热应激能增加动物机体的基础胰岛素分泌量,提高胰岛素敏感性。PI3K/Akt在胰岛素介导的葡萄糖代谢过程中发挥着重要作用。温和型热应激(以下简称热应激)能增加支持细胞乳酸的合成和分泌,但热应激是否通过胰岛素介导的PI3K/Akt信号调控支持细胞乳酸合成及分泌目前还不清楚。本实验以21日龄仔猪的睾丸为实验材料,建立体外培养的支持细胞热应激模型。首先,用不同浓度的胰岛素(5~200 nM)处理支持细胞24 h,通过CCK-8试剂盒检测细胞活性,用乳酸测试试剂盒测乳酸分泌量,筛选出合适的胰岛素浓度作为后续试验所用浓度。用筛选出的胰岛素浓度(100 nM)处理细胞0~36 h,测各个时间点细胞分泌的乳酸量,筛选出合适的处理时间。其次,细胞热处理(43℃,30 min)后恢复2 h,再用100 nM胰岛素处理24 h,用定量PCR检测INSR、IGF1R、IRS1、IRS2 mRNA的表达,用western blot检测细胞中PI3K和Akt的磷酸化水平并检测乳酸分泌量。最后,先用PI3K抑制剂预处理细胞2 h,再先后进行热处理和胰岛素处理,分析GLUT3、MCT1、LDHA的表达以及LDH活性和乳酸分泌量的变化。实验结果如下:1.100 nM胰岛素处理细胞24 h,支持细胞乳酸分泌达到顶峰,此时与对照组相比增加了133.3%(P<0.01);当胰岛素浓度为200 nM时,支持细胞乳酸分泌有所下降(P<0.01)。胰岛素(100 nM)处理细胞6 h,细胞分泌的乳酸量没有显着的变化(P>0.05);随着处理时间的延长,支持细胞乳酸的分泌量逐渐增多,处理24 h时乳酸分泌增加最显着。胰岛素对支持细胞乳酸具有时间-剂量依赖性。2.热应激和胰岛素均能显着增加支持细胞的乳酸分泌,二者的共同作用较单独作用显着,分别比单独热处理组、胰岛素组增加了21.19%(P<0.01)、4.21%(P<0.05)。3.热应激增加了IGF1R、IRS2 mRNA的表达,但对INSR、IRS1 mRNA的表达没有显着的影响(P>0.05)。热处理与胰岛素共同作用时,能显着增加INSR、IGF1R、IRS1、IRS2 mRNA的表达,但对IGF1R的影响程度较INSR大,对IRS2 mRNA的表达的影响程度较IRS1大(P<0.01)。4.与对照相比,热处理显着增加了PI3K和Akt的磷酸化水平。在热处理条件下添加胰岛素显着促进了PI3K和Akt的磷酸化,较单独热处理其PI3K和Akt的磷酸化水平分别增加了41.54%(P<0.01)、10.99%(P<0.05)。5.PI3K抑制剂显着抑制了热处理、胰岛素、热应激与胰岛素联合作用条件下乳酸分泌相关基因(SLC2A3、LDHA、MCT1)及其对应蛋白(GLUT3、LDHA、MCT1)(P<0.05),降低了乳酸脱氢酶的活性(P<0.01),减少了支持细胞乳酸的分泌。综上所述,热应激主要通过上调IGF1R和IRS2的表达,进而激活PI3K/Akt信号通路,上调GLUT3、MCT1、LDHA蛋白表达,促进乳酸的合成;且在这一过程中,热应激和胰岛素具有协同作用。这为临床上缓解并治疗热应激对雄性生殖的不利影响提供了理论依据。(本文来源于《西南大学》期刊2018-04-10）
王梦蕊,雷治海[3]（2016）在《猪侧脑室注射NMS对胰岛素合成与分泌的影响》一文中研究指出神经介素S(NMS)具有调节动物的摄食、能量代谢、神经内分泌和生殖等多种生物学功能。本试验主要从NMS抑制摄食的作用入手,研究其对胰岛素合成和分泌的影响。将12头猪随机分为(对照组、NMS组和SHU9119+NMS组)3组,每组4头,分别侧脑室注射生理盐水、NMS和SHU9119+NMS,采血后用放射免疫法测定了血清中胰岛素的含量,NMS组及SHU9119+NMS组均显示注射NMS后血清中胰岛素持续升高,其中NMS组为叁者中最高,SHU9119+NMS组次之。结果表明,侧脑室注射NMS可使体内血清胰岛素的含量增加,SHU9119预处理可拮抗NMS对胰岛素的这种作用;实时荧光定量PCR方法研究胰岛素mRNA表达,结果显示:2个试验组的胰岛素mRNA表达量较对照组均明显降低,注射NMS的试验组最低,而加入了拮抗剂SHU9119显示胰岛素mRNA表达量有所回升。试验结果表明猪侧脑室注射NMS可能抑制胰腺组织内胰岛素的合成,并引起血清中胰岛素含量的升高。NMS通过调节胰岛素的合成和分泌,从而对摄食、能量代谢调控都有重要的影响。(本文来源于《畜牧与兽医》期刊2016年06期）
慕开达,王琛[4]（2015）在《microRNAs对胰岛素合成、分泌及其信号通路影响的研究进展》一文中研究指出microRNAs是一种长度在19~23个核苷酸左右的非编码小分子RNA,通过抑制靶mRNA的表达或翻译,调控人体30%以上基因的表达。microRNAs的表达异常可导致多种疾病,包括糖尿病。胰岛素是人体唯一降血糖激素,其分泌不足及作用缺陷会引起T2DM。胰岛β细胞中有多种microRNAs表达,这些microRNAs可调节胰岛素的合成与分泌,影响胰岛β细胞增殖。另外,胰岛素靶组织上的microRNAs可通过调节胰岛素信号通路影响胰岛素的作用。由于microRNAs具有组织特异性,并且在不同疾病中会有相应的表达改变,因此,其有作为多种疾病的生物标记及治疗靶点的"潜力"。(本文来源于《中国糖尿病杂志》期刊2015年01期）
叶开和,王婧茹,马锦锦,王小康,张晓琦[5]（2014）在《番石榴酸对INS-1胰岛β细胞增殖、胰岛素合成与分泌的促进作用及其机制分析》一文中研究指出目的考察番石榴酸(guavenoic acid,GA)对INS-1胰岛β细胞增殖、细胞内胰岛素含量及分泌功能的影响,并探讨其可能的作用机制。方法培养INS-1胰岛β细胞,给予GA(0.3、1、3、10、30 nmol·L-1),并设空白对照组、溶媒对照组(0.1%DMSO)、分泌模型组及阳性药组(150 nmol·L-1格列苯脲含1‰DMSO),药物作用48 h。应用MTT法检测药物对INS-1的影响。使用酸醇提取液提取细胞中胰岛素,用放射免疫法检测药物对I细胞增殖NS-1细胞内胰岛素含量的影响。分别用5.6、16.7 mmol·L-1葡萄糖干预细胞1 h建立基础胰岛素分泌模型(BIS)、高糖刺激胰岛素分泌模型(GSIS),用放射免疫法测定药物对INS-1细胞胰岛素分泌的影响,结果以总蛋白量校正。荧光定量PCR法检测药物对INS-1细胞内胰岛素基因、PDX-1、MafA mRNA表达的影响。结果与溶媒对照组比较,GA能明显地促进INS-1胰岛细胞的增殖(P<0.01)并能明显增加INS-1细胞内胰岛素含量(P<0.01),0.3~30 nmol·L-1GA对BIS及GSIS均有明显促进作用(P<0.05或P<0.01),0.3~30 nmol·L-1GA明显地上调Insulin mRNA的相对表达(P<0.01)。3、30 nmol·L-1GA明显地上调PDX-1 mRNA的相对表达(P<0.01)。3、30 nmol·L-1GA能明显地上调MafA mRNA的相对表达(P<0.01)。结论 GA能促进INS-1胰岛β细胞增殖;增加细胞内胰岛素含量与分泌量,可能与其上调Insulin、PDX-1、MafA基因表达有关。(本文来源于《中国药理学通报》期刊2014年12期）
陈娟[6]（2014）在《KISS-54和Isl-1调节胰岛素合成及分泌的机理》一文中研究指出已有的研究表明,LIM 同源域转录因子 Isl-1(Insulin gene enhancer binding protein 1,Isl-1)直接结合在胰岛素启动子上促进其转录,对胰岛素的分泌和胰岛的发育具有重要调控作用。kisspeptin54(27-54)(KISS-54)是一种多肽类激素,能影响胰岛素的分泌,但我们尚不清楚KISS-54和Isl-1在调节胰岛素分泌方面是否具有协同作用。为此,本研究以小鼠胰腺和胰岛p细胞系NIT为研究对象,研究了 KISS-54和Isl-1调节胰岛素合成与分泌的功能及相关机理。取得的研究结果如下:1.免疫荧光双染结果显示 KISS-54 受体 GPR54(G protein coupled receptor 54,GPR54)和Isl-1共定位于胰岛β细胞。Western blot结果显示Isl-1和GPR54蛋白在胰岛和NIT细胞均高表达。2.在体外培养的NIT细胞中添加KISS-54后,利用Western blot和放射性免疫法检测KISS-54对Isl-1表达和胰岛素分泌的影响。结果显示KISS-54显着下调Isl-1的表达和胰岛素的分泌。添加KISS-54后不同时间点检测胰岛素的降解情况,结果显示KISS-54对胰岛素的降解没有明显影响。提示KISS-54是通过其它途径而非降解胰岛素来影响胰岛素的分泌。3.KISS-54处理NIT细胞3 h后检测MafA、Ngn3、Pdx1、Pax4和Nkx6.1这几种胰岛关键转录因子的基因表达变化。结果显示,除了MafA基因水平显着上升外,其余转录因子均无明显变化。说明KISS-54特异性下调Isl-1的表达。4.证明了他莫昔芬诱导Isl-1MCM/F小鼠中Isl-1基因敲除后,小鼠的体重、胰腺重量、日食量均无明显变化。由此说明Isl-1敲除小鼠的下丘脑-饮食轴活动并未受损。对Isl-1诱导敲除小鼠及对照小鼠的糖代谢情况进行了比较,结果显示Isl-1诱导敲除小鼠的糖代谢受损。5.同时注射KISS-54至Isl-1诱导敲除小鼠和对照鼠6 h后检测胰岛素基因表达。结果显示在Isl-1诱导敲除小鼠中KISS-54对胰岛素基因的表达没有明显影响。体外添加他莫昔芬诱导分离的Isl-1MCM/F及对照小鼠胰岛中Isl-1敲除,注射KISS-54后检测胰岛素的分泌也得到类似于体内的结果。这些结果说明KISS-54抑制胰岛素合成和分泌的过程依赖于转录因子Isl-1。6,培养的NIT细胞系中添加KISS-54及不同信号通路抑制剂后检测Isl-1的表达,结果显示KISS-54通过PKC-ERK信号通路来调节Isl-1的表达。7.体外培养的NIT细胞添加或小鼠体内注射胰岛素后检测kisspeptin的合成和分泌情况,结果显示胰岛素抑制kisspeptin的合成和分泌。在培养的NIT细胞系中添加胰岛素及不同信号通路抑制剂后检测kisspeptin的合成和分泌,结果显示胰岛素通过JAK-PI3K信号通路抑制kisspeptin的合成和分泌。综上所述,本文证明了 KISS-54对胰岛素分泌的调节功能依赖于转录因子Isl-1,即Isl-1介导KISS-54调节胰岛素的分泌;KISS-54通过PKC-ERK信号通路抑制Isl-1的表达进而抑制胰岛素的分泌。另外,胰岛素通过自分泌或旁分泌方式反馈抑制kisspeptin的合成和分泌,这一过程依赖于JAK-PI3K信号通路。这些结果为进一步的研究生理代谢异常导致的糖尿病提供了重要的实验资料,并为防治糖尿病的深入研究提供了可能的分子靶点。(本文来源于《中国农业大学》期刊2014-11-01）
钱晶[7]（2014）在《游离脂肪酸受体GPR40对胰腺β细胞胰岛素合成分泌的调控及配体不依赖受体内吞机制的研究》一文中研究指出游离脂肪酸作为人体重要的营养物质,同时又是重要的信使物质,通过G蛋白偶联受体(GPCRs)起调节代谢等生理作用。最近研究表明,长链脂肪酸亚油酸是胰岛p细胞高表达的GPR40受体的内源性配体,可以通过GPR40呈葡萄糖依赖性的促进胰岛素合成和分泌。此外GPR40还能辅助DPP-IV抑制剂促进胰岛素的分泌。本文为了解析GPR40增强胰岛素分泌的机制,采用cAMP响应元件(CRE)荧光素酶报告系统检测到在细胞水平上游离脂肪酸和forskolin共孵育会显着提高荧光素酶活性,其小分子激动剂GW9508也有同样效果,并能被特异拮抗剂GW1100抑制。此外,PDE的普遍抑制剂IBMX和两种异构体抑制剂MMPX,Rolipram证实了PDE1能协助亚油酸介导的荧光素酶活性提高,而非PDE4。进一步的Gs小肽拮抗实验证实亚油酸和forskolin协同介导的荧光素酶活性的提高并不通过Gs蛋白,而Gq的特异性抑制剂UBO-QIC能显着地抑制这种GPR40介导的CREB活性增强。PKC抑制剂和cAMP ELISA检测验证了Gq/PKC/CREB通路而非cAMP的激活来协助cAMP/PKA通路发挥增效作用,并且PKC通过磷酸化CREB的Ser133,121位点来激活转录,8-CPT-cAMP也证实了cAMP是该通路中重要的一环。用艾塞那肽取代forskolin发现,亚油酸同样有协同艾塞那肽增强荧光素强度的作用,并且通过Gq/PKC/CREB信号通路来协同GLP-1R/Gs/PKA通路。将细胞水平的实验在SD大鼠上重复后,发现亚油酸同样协同forskolin或exentin-4来促进胰岛素的分泌,相比于单独作用得到显着提高。用PKC抑制剂Go6983和Gq抑制剂UBO-QIC处理后能显着抑制胰岛素的分泌,在敲除Gq亚基的小鼠上也同样抑制了亚油酸和forskolin或exendin-4激起的胰岛素分泌。因此亚油酸能协同forskolin和exentin-4促进胰岛素的分泌,随后我们发现利拉鲁肽侧链带有棕榈酸修饰,而棕榈酸是GPR40的内源性配体,利拉鲁肽和艾塞那肽对于激活GLP-1R具有相同的活性,将侧链用做亚油酸修饰发现能激活GPR40,并也能激活GLP-1R。在同时转染GPR40和GLP-1R的细胞株中,利拉鲁肽活性提高了20%。我们的研究为有效地治疗糖尿病提供了新的思路。在稳定表达GPR40-EGFP的HEK293细胞中,GPR40具有配体依赖型内吞和配体不依赖型内吞两种方式。不仅在HEK293细胞中,在β-TC-6,GPR40内源性细胞中过表达GPR40也发现有配体不依赖型内吞的存在。用FITC-anti-Flag抗体标记GPR40受体的实验表明在荧光显微镜下观察到的GPR40大量聚集在胞质内不是由于受体高表达所致,而是由于配体不依赖型内吞造成的。Arrestin-3和GRK2敲除实验发现配体依赖型内吞依赖于GRK2和arrestin-3,而配体不依赖内吞则不依赖GRKs和arrestins。此外,GPR40配体依赖型内吞能与Rab4/Rab5共定位,而配体不依赖型内吞及再循环则不经过Rab4通路,而能同Rab5共定位。由于脂肪酸家族具有高度同源性,因此该发现能运用到其他脂肪酸家族成员。并且受体经历不同的内吞途径,如果能找到与配体不依赖型内吞相关的结合蛋白,则可以用来筛选阻断自激活内吞行为的化合物。(本文来源于《浙江大学》期刊2014-06-01）
余盼[8]（2014）在《双酚A对胰岛素合成、分泌功能的影响及相关机制研究》一文中研究指出双酚A (BisphenolA)是广泛存在于环境中的内分泌干扰物,常作为塑化剂用于婴儿奶瓶、食品包装等塑料制品中。大量动物实验研究表明,在人体接触限制剂量内的BPA即可引起动物糖代谢紊乱,血液中胰岛素含量异常。糖尿病已成为全球高发的慢性疾病之一,严重危害人类健康,增加国民经济负担。其中,2型糖尿病占90%以上,胰岛素抵抗、胰岛素分泌不足伴有或不伴有胰腺p细胞功能障碍为其主要病理特征。血液中胰岛素水平与胰腺p细胞胰岛素的合成与分泌功能密切相关。胰岛素的合成和分泌受诸多因素的调节,血糖是其最主要的调节因素。当机体摄食后,血液中葡萄糖浓度升高,经胰腺p细胞的Glut2转运至胞内进行代谢,一方面生成ATP激活离子通道引发细胞的电活动,促进胰岛素分泌。另一方面激活一系列转录因子等,引起胰岛素合成的变化。目前对于2型糖尿病的治疗以降血糖为主,促胰岛素分泌药物的使用是主要治疗方法之一。葡萄糖刺激下的胰岛素分泌(GSIS)是一个典型的刺激分泌偶联过程,涉及诸多离子通道的参与。去极化过程中KATP通道在胰岛素分泌过程中发挥重要作用,其作为2型糖尿病药物的靶点,已在临床上使用近70年。而对于复极化过程中起重要作用的Kv通道,是否同样具有调节胰岛素分泌的作用呢?因此,本文旨在研究Kv2.1通道是否在GSIS过程中发挥调节胰岛素分泌的作用,并就其机制进行探讨。此外,亦研究了体外低剂量BPA暴露对胰岛素合成和分泌能力的影响,从细胞膜上Glut2及离子通道的角度,阐述胰岛素合成和分泌能力变化的机制。在体外分离的小鼠胰岛p细胞上,应用Kv2.1特异性抑制剂GxTx-lE,通过全细胞膜片钳技术观察Kv2.1在胰腺β细胞膜上Kv电流中的比重；接着应用GxTx-1E抑制Kv2.1后,利用放射免疫、激光共聚焦等分别测定了高糖、低糖刺激下胰岛素分泌及胞内钙浓度的变化。此外,将体外分离的小鼠胰岛暴露于低剂量BPA后,利用RT-PCR的方法测定了胰岛中胰岛素的mRNA及胰岛素摄取、分泌相关的Glut2、KATP、Cav、Kv的mRNA表达变化。同时利用全细胞膜片钳技术,观察BPA对Kv电流的影响。结果显示,Kv2.1为胰腺p细胞的Kv电流的主要成分,占80%以上；500nM、1μM的GxTx-1E抑制Kv2.1后可促进高糖刺激下(16.7mM)胰岛素分泌的增多(p<0.05),而低糖(3.3mM)刺激下无此作用；同时,抑制Kv2.1(500nM)可引起胰岛胞内钙振荡幅度增加,振荡频率加快。低剂量BPA (100nM)暴露24hr后,胰岛细胞中胰岛素mRNA表达水平升高(p<0.05), Glut2的mRNA表达量下降(p<0.05),离子通道KATP表达无明显变化,表达于胰腺p细胞上主要的5种Cav通道及Kv2.1的mRNA表达量均升高(p<0.05)。低剂量BPA (10nM、100nM)暴露后,高糖刺激下胰岛素分泌增多(p<0.05),而低糖作用下无明显变化。此外,BPA (10nM、100nM、500nM)对胰腺p细胞Kv电流的大小无明显作用。以上结果表明,抑制Kv通道,尤其是Kv2.1可促进高糖刺激下的胰岛素分泌,可能与Kv2.1参与调节胞内钙振荡的振幅、频率相关；低剂量BPA促进胰岛素合成,其调节可能涉及多种因素的综合作用,除目前所认同的与调节ERa相关之外,可能还与Glut2相关。较长时间低剂量BPA作用,可能导致细胞内Cav、Kv2.1等离子通道的表达变化,进而对胰岛素的分泌产生影响,而BPA对胰腺p细胞分泌功能的影响,可能与Kv通道的电活动无关。(本文来源于《南京医科大学》期刊2014-04-01）
王瑞,张冰荫,李莉,李媛媛,杨元元[9]（2012）在《亚砷酸钠对NIT-1细胞胰岛素合成与分泌的影响》一文中研究指出目的观察亚砷酸钠(NaAsO2)对胰岛β细胞NIT-1胰岛素合成与分泌的影响。方法体外培养NIT-1细胞,NaAsO2处理后,以MTT法检测细胞的增殖活性,用ELISA测定胰岛素分泌情况,RT-PCR法检测胰岛素mRNA的表达。结果 (1)当NaAsO2浓度大于4μmol/L时抑制细胞增殖,细胞增殖抑制率随NaAsO2浓度的增加及作用时间的延长而增加。(2)作用24h,8μmol/L组不同浓度葡萄糖刺激的胰岛素分泌和胰岛素mRNA表达均明显减少(P<0.05);作用48h,4μmol/L组和8μmol/L组不同浓度葡萄糖刺激的胰岛素分泌和胰岛素mRNA表达均明显减少(P<0.05),而且8μmol/L组对高糖(16.5mmol/L)刺激的胰岛素分泌与基础(5.5mmol/L)胰岛素分泌差异无统计学意义。结论砷(As)对NIT-1细胞胰岛素分泌和胰岛素基因表达的影响与作用时间和剂量有关,胰岛素合成与分泌障碍可能是(As)影响胰岛β细胞功能进而引发糖尿病的机制之一。(本文来源于《中国糖尿病杂志》期刊2012年10期）
王瑞,张冰荫,李莉,李媛媛,杨元元[10]（2011）在《亚砷酸钠对NIT-1细胞胰岛素合成与分泌的影响》一文中研究指出近年大量流行病调查结果显示,长期接触砷可以导致糖尿病的发生增多。而砷对胰岛β细胞功能的影响及其机制尚不十分清楚。本研究初步观察了不同剂量NaAsO_2作用不同时间对NIT-1细胞胰岛β细胞系的细胞活性和葡萄糖刺激的胰岛素分泌的变化;并采用RT-PCR方法检测胰岛素mRNA的表达变化。结果显示:当NaAsO_2浓度大于4μmol/L时抑制NIT-1细胞增殖,抑制率随NaAsO_2浓度的增加及作用时间的延长而增加。当NaAsO_2大于或等于8μmol/L,作用24 h,抑制不同浓度葡萄糖刺激的胰岛素分泌和胰岛素mRNA表达(P<0.05);而NaAsO_2浓度为4μmol/L需作用48 h(P<0.05),而且当NaAsO_2浓度为8μnol/L时对高糖(16.5 mmol/L)刺激的胰岛素分泌与基础(5.5 mmol/L)胰岛素分泌不再有明显差异。上述结果提示:砷对NIT-1细胞胰岛素分泌和胰岛素基因表达的影响与作用时间、剂量有关,胰岛素合成与分泌的障碍可能是砷影响胰岛β细胞功能进而引发糖尿病的机制之一。(本文来源于《中国解剖学会2011年年会论文文摘汇编》期刊2011-08-08）
胰岛素合成与分泌论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
严重热应激对雄性动物的生殖功能有明显的负面影响。支持细胞产生的乳酸不仅是生精细胞最重要的代谢底物,而且还可以增强生精细胞抗凋亡的能力。因此,乳酸在保护雄性动物免受热应激对其生殖功能产生的不利影响方面发挥着重要作用。热应激能增加动物机体的基础胰岛素分泌量,提高胰岛素敏感性。PI3K/Akt在胰岛素介导的葡萄糖代谢过程中发挥着重要作用。温和型热应激(以下简称热应激)能增加支持细胞乳酸的合成和分泌,但热应激是否通过胰岛素介导的PI3K/Akt信号调控支持细胞乳酸合成及分泌目前还不清楚。本实验以21日龄仔猪的睾丸为实验材料,建立体外培养的支持细胞热应激模型。首先,用不同浓度的胰岛素(5~200 nM)处理支持细胞24 h,通过CCK-8试剂盒检测细胞活性,用乳酸测试试剂盒测乳酸分泌量,筛选出合适的胰岛素浓度作为后续试验所用浓度。用筛选出的胰岛素浓度(100 nM)处理细胞0~36 h,测各个时间点细胞分泌的乳酸量,筛选出合适的处理时间。其次,细胞热处理(43℃,30 min)后恢复2 h,再用100 nM胰岛素处理24 h,用定量PCR检测INSR、IGF1R、IRS1、IRS2 mRNA的表达,用western blot检测细胞中PI3K和Akt的磷酸化水平并检测乳酸分泌量。最后,先用PI3K抑制剂预处理细胞2 h,再先后进行热处理和胰岛素处理,分析GLUT3、MCT1、LDHA的表达以及LDH活性和乳酸分泌量的变化。实验结果如下:1.100 nM胰岛素处理细胞24 h,支持细胞乳酸分泌达到顶峰,此时与对照组相比增加了133.3%(P<0.01);当胰岛素浓度为200 nM时,支持细胞乳酸分泌有所下降(P<0.01)。胰岛素(100 nM)处理细胞6 h,细胞分泌的乳酸量没有显着的变化(P>0.05);随着处理时间的延长,支持细胞乳酸的分泌量逐渐增多,处理24 h时乳酸分泌增加最显着。胰岛素对支持细胞乳酸具有时间-剂量依赖性。2.热应激和胰岛素均能显着增加支持细胞的乳酸分泌,二者的共同作用较单独作用显着,分别比单独热处理组、胰岛素组增加了21.19%(P<0.01)、4.21%(P<0.05)。3.热应激增加了IGF1R、IRS2 mRNA的表达,但对INSR、IRS1 mRNA的表达没有显着的影响(P>0.05)。热处理与胰岛素共同作用时,能显着增加INSR、IGF1R、IRS1、IRS2 mRNA的表达,但对IGF1R的影响程度较INSR大,对IRS2 mRNA的表达的影响程度较IRS1大(P<0.01)。4.与对照相比,热处理显着增加了PI3K和Akt的磷酸化水平。在热处理条件下添加胰岛素显着促进了PI3K和Akt的磷酸化,较单独热处理其PI3K和Akt的磷酸化水平分别增加了41.54%(P<0.01)、10.99%(P<0.05)。5.PI3K抑制剂显着抑制了热处理、胰岛素、热应激与胰岛素联合作用条件下乳酸分泌相关基因(SLC2A3、LDHA、MCT1)及其对应蛋白(GLUT3、LDHA、MCT1)(P<0.05),降低了乳酸脱氢酶的活性(P<0.01),减少了支持细胞乳酸的分泌。综上所述,热应激主要通过上调IGF1R和IRS2的表达,进而激活PI3K/Akt信号通路,上调GLUT3、MCT1、LDHA蛋白表达,促进乳酸的合成;且在这一过程中,热应激和胰岛素具有协同作用。这为临床上缓解并治疗热应激对雄性生殖的不利影响提供了理论依据。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
胰岛素合成与分泌论文参考文献
[1].杨靖,吴丽,周灵芝,赵志波,项孙敏.MiR-96靶向调控Sox6促进小鼠β细胞胰岛素合成与分泌[J].实用医学杂志.2019
[2].黄莎.热应激通过胰岛素介导的PI3K/Akt信号调控仔猪睾丸支持细胞乳酸合成及分泌[D].西南大学.2018
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