本文主要研究内容
作者张晓元,郝荣华,刘飞,袁丹丹,陈勉,凌沛学（2019）在《密码子优化提高海藻糖合成酶基因在大肠杆菌中的表达水平》一文中研究指出：目的优化灰色链霉菌海藻糖合成酶(Trehalose synthase,TreS)基因密码子,提高海藻糖合成酶大肠杆菌基因工程菌株表达水平。方法基于大肠杆菌基因组密码子偏好数据表对tres基因进行密码子优化得基因tres1。基因工程法构建分别含tres及tres1基因的表达载体pET-26b(+)-tres和pET-26b(+)-tres1,CaCl2法转入大肠杆菌BL21(DE3)获得表达海藻糖合成酶的大肠杆菌基因工程菌株,采用异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,对摇瓶发酵粗酶液进行十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析及酶活性测定以确定表达水平。结果 1707 bp海藻糖合成酶tres基因共优化碱基序列268 bp,优化后序列的GC含量由65.8%降低至54.4%,密码子适应指数(CAI)由0.37提升至0.97,SDS-PAGE及酶活性分析表明,含pet-26b(+)-tres1表达载体的大肠杆菌基因工程菌株海藻糖合成酶蛋白表达量高,酶活性比含pet-26b(+)-tres工程菌提高60.3%以上。结论密码子优化可有效提高海藻糖合成酶TreS蛋白在大肠杆菌中的表达,为海藻糖合成酶的异源高效表达提供了重要参考。
Abstract
mu de you hua hui se lian mei jun hai zao tang ge cheng mei (Trehalose synthase,TreS)ji yin mi ma zi ,di gao hai zao tang ge cheng mei da chang gan jun ji yin gong cheng jun zhu biao da shui ping 。fang fa ji yu da chang gan jun ji yin zu mi ma zi pian hao shu ju biao dui tresji yin jin hang mi ma zi you hua de ji yin tres1。ji yin gong cheng fa gou jian fen bie han tresji tres1ji yin de biao da zai ti pET-26b(+)-treshe pET-26b(+)-tres1,CaCl2fa zhuai ru da chang gan jun BL21(DE3)huo de biao da hai zao tang ge cheng mei de da chang gan jun ji yin gong cheng jun zhu ,cai yong yi bing ji liu dai ban ru tang gan (IPTG)you dao biao da ,dui yao ping fa jiao cu mei ye jin hang shi er wan ji liu suan na ju bing xi xian an ning jiao dian yong (SDS-PAGE)fen xi ji mei huo xing ce ding yi que ding biao da shui ping 。jie guo 1707 bphai zao tang ge cheng mei tresji yin gong you hua jian ji xu lie 268 bp,you hua hou xu lie de GChan liang you 65.8%jiang di zhi 54.4%,mi ma zi kuo ying zhi shu (CAI)you 0.37di sheng zhi 0.97,SDS-PAGEji mei huo xing fen xi biao ming ,han pet-26b(+)-tres1biao da zai ti de da chang gan jun ji yin gong cheng jun zhu hai zao tang ge cheng mei dan bai biao da liang gao ,mei huo xing bi han pet-26b(+)-tresgong cheng jun di gao 60.3%yi shang 。jie lun mi ma zi you hua ke you xiao di gao hai zao tang ge cheng mei TreSdan bai zai da chang gan jun zhong de biao da ,wei hai zao tang ge cheng mei de yi yuan gao xiao biao da di gong le chong yao can kao 。
论文参考文献
论文详细介绍
论文作者分别是来自食品与药品的张晓元,郝荣华,刘飞,袁丹丹,陈勉,凌沛学，发表于刊物食品与药品2019年01期论文，是一篇关于海藻糖合成酶论文,密码子论文,海藻糖论文,基因表达论文,食品与药品2019年01期论文的文章。本文可供学术参考使用，各位学者可以免费参考阅读下载，文章观点不代表本站观点，资料来自食品与药品2019年01期论文网站，若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权，请联系我们删除。
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