导读:本文包含了肝细胞转运体论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:叁磷酸腺苷结合盒转运子B亚族成员11,叁磷酸腺苷结合盒转运体C亚族成员2,代谢组学,胆结石
肝细胞转运体论文文献综述
唐乾利,吕震,俞渊,王兵,李辉[1]（2016）在《大黄灵仙胶囊调控胆结石小鼠肝细胞转运蛋白表达及胆汁代谢谱的机制研究》一文中研究指出目的通过Western blot法和气相色谱-质谱(GC-MS)联用技术观察大黄灵仙胶囊对小鼠胆结石肝细胞转运蛋白表达及胆汁代谢谱的影响,探讨其可能机制。方法将50只雄性C57BL/6小鼠随机分为正常对照组(N组)、模型组(M组)、熊去氧胆酸(UDCA)对照组(U组)、药物对照组(Y组)及大黄灵仙胶囊治疗组(D组),每组10只。N组和Y组小鼠普通饲料喂养,M、U、D组给予高脂、高热量、高胆固醇饲料诱导胆囊结石的形成。同时U组每天给予130mg/kg UDCA溶液灌胃;Y组和D组每天给予大黄灵仙胶囊汤药13g/kg灌胃,N组和M组给予相同体积的生理盐水灌胃。干预8周后,观察小鼠成石率,利用Western blot法观察肝胆管侧膜细胞转运蛋白叁磷酸腺苷结合盒转运子B亚族成员11(ATP binding cassette subfamily B member 11,Abcb11)和叁磷酸腺苷结合盒转运体c2(ATP binding cassette subfamily C member 2,Abcc2)变化,GC-MS技术检测小鼠胆汁代谢组学特征。结果造模期间因灌胃操作不慎,U组1只小鼠挣扎时灌胃针扎破小鼠食管导致死亡。M组成石率为100.00%,高于N组和Y组(均为0.00%,χ2=20.00,P<0.01);与M组比较,U组及D组成石率降低(44.44%,χ2=7.54,P=0.011;30.00%,χ2=10.77,P=0.003)。经红外光谱分析检测后在2939、1 446、1 382、1 056cm-1处可见胆固醇特有吸收峰。5组小鼠Abcb11和Abcc2转运蛋白总体比较差异有统计学意义(F=41.89;P<0.01;F=90.01,P<0.01)。与N组比较,M组Abcb11和Abcc2表达降低(P<0.01);与M组比较,U、Y、D组转运蛋白Abcb11和Abcc2表达均升高(P<0.01)。与其他组比较,模型组小鼠胆汁内源性代谢物丙氨酸、柠檬酸、赖氨酸、蛋氨酸、苯丙氨酸、酪氨酸、胆固醇、LDL、甘油、苹果酸及丙酮浓度升高,乳酸、谷氨酰、胺甘氨酸、胆碱及牛磺酸浓度降低,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论大黄灵仙胶囊具有稳定肝胆管侧膜细胞转运蛋白表达、改变或改善病理性胆汁的分泌及其代谢物的作用,从而达到防治胆结石的目的。(本文来源于《中国中西医结合杂志》期刊2016年08期）
陈涛[2]（2016）在《基于LC-MS/MS绝对定量人肝细胞中药物转运体及其应用》一文中研究指出目的本研究旨在探讨药物转运蛋白绝对表达量与其生物功能相关性,可为新药研发和临床安全用药研究提供新的方法。研究方法选取药物转运体OATP1B1、OATP1B3、OATP2B1和NTCP作为研究对象。首先优化药物转运体膜蛋白的样品前处理过程,其中包括膜蛋白的提取、增溶剂的选择和胰蛋白酶与蛋白的比率;然后人工合成能代表人肝细胞中OATP1B1、OATP1B3、OATP2B1和NTCP蛋白的特异性肽段标准品,将相应的稳定性同位素标记的肽段作为内标,优化色谱条件和质谱条件,采用多监测反应模式,建立同时测定OATP1B1、OATP1B3、OATP2B1和NTCP的分析方法,并进行方法学验证,运用该方法测定23个冻存的人肝细胞药物转运体的表达水平。通过叁明治培养的人肝细胞对底物氘代牛磺胆酸钠和瑞舒伐他汀的摄取实验,测出不同批次的肝细胞对这两个底物整体的转运活性。再通过稳定转染人OATP1B1、OATP1B3、OATP2B1和NTCP基因的HEK293细胞对底物氘代牛磺胆酸钠和瑞舒伐他汀的摄取实验,测定出相应的Km和Vmax值。最后将测定得到的转运体表达水平与转运体活性相结合,预测转运体介导的对氘代牛磺胆酸钠和瑞舒伐他汀的摄取清除,并研究转运体表达和活性相关性。通过丹红注射液对细胞摄取瑞舒伐他汀的抑制实验,研究丹红注射液对药物转运体OATPs和NTCP的作用,并分析丹红注射液与瑞舒伐他汀联合使用时是否会产生药物间相互作用。研究结果使用膜蛋白提取试剂盒提取膜蛋白时重复性好;月桂酸钠作为转运体膜蛋白的增溶剂,其增溶效果比脱氧胆酸钠增溶效率更高,并且对特异性肽段的离子化无抑制作用;转运体蛋白酶水解时胰蛋白酶与蛋白的最佳比例为1:5。建立同时测定人肝细胞中四种药物转运体OATP1B1、OATP1B3、OATP2B1和NTCP的LC-MS/MS分析方法,其定量下限、精密度和准确度均符合大分子的生物分析方法规定。OATP1B1、OATP1B3和OATP2B1均在0.2-50nM范围内线性良好,(r>0.995)。测定出23个批次中国人肝细胞中的OATP1B1、OATP1B3、OATP2B1和NTCP蛋白表达平均值分别为4.74、1.39、3.02和3.69 fmol/μg,并发现不同个体之间蛋白表达有很大的差异。在底物摄取实验中,结合转运体蛋白定量,发现这四种转运体在对氘代牛黄胆酸钠和瑞舒伐他汀的肝细胞转运过程中,NTCP分别占整个摄取的89%和68%。又通过人肝细胞模型测定了这两个底物体外整体摄取活性,并比较了这两个底物肝细胞主动摄取清除率预测值跟测定值间的差异,结果显示线性回归相关系数为0.74和0.66;在spearman相关性分析中,spearman秩相关系数rs分别为0.1319和0.3604,均呈正相关。丹红注射液对瑞舒伐他汀在OATP1B1、OATP1B3、OATP2B1和NTCP细胞中摄取都有一定的抑制作用,IC50分别为0.38mL/100m L,0.14 m L/100m L,0.72 m L/100m L和>3.2 m L/100mL,其中对OATP1B3的抑制效果最强,对NTCP的抑制效果最弱。同时用人肝细胞模型考察了丹红注射液对瑞舒伐他汀整体肝摄取的抑制效果,测得IC50=0.85m L/100mL,提示丹红注射液与瑞舒伐他汀联合使用时有药物相互作用的风险。(本文来源于《广东药科大学》期刊2016-03-01）
吴学钦,程红球,林哲绚,韩溟[3]（2015）在《二价金属离子转运体1在肝细胞癌中的表达及意义》一文中研究指出目的检测肝细胞癌组织中二价金属离子转运体1(DMT1)的表达,探讨其临床及病理学意义。方法收集1999年7月-2011年7月汕头大学医学院第二附属医院肝细胞癌患者手术切除标本存档蜡块中的肝癌标本57例,设为肝癌组织组,另有7例尸检的正常肝组织和8例肝内胆管结石肝组织蜡块作为正常对照组。采用免疫组化SP法检测15例正常肝组织及57例肝细胞癌组织中DMT1的表达。不同分化程度肝细胞癌组织DMT1的比较采用单因素方差分析,率的比较采用χ2检验;DMT1的表达与肿瘤大小的相关性采用Pearson相关性分析。结果正常对照组的肝组织DMT1呈阴性或弱阳性,阳性率20%(3/5),肝癌组织组阳性率78.9%(45/57),其中强阳性率15.8%(9/57);两组阳性率差异有统计学意义(P<0.01);不同癌组织分化程度的患者DMT1的表达差异有统计学意义(F=4.011,P<0.05),DMT1的阳性表达率在不同临床分期及肿瘤是否有血管浸润的患者中的差异均无统计学意义(P值均>0.05)。相关分析显示DMT1的表达强度与肿瘤的大小无相关性(r=-0.047,P>0.05)。结论肝细胞癌组织DMT1阳性表达率显着升高且与肿瘤分化程度密切相关,有助于肝癌的临床病理分级。(本文来源于《临床肝胆病杂志》期刊2015年11期）
朱蓉,马越鸣[4]（2014）在《肝细胞药物转运体研究进展》一文中研究指出肝细胞药物转运体包括摄取转运体和外排转运体,可影响药物在肝的分布和清除过程。肝细胞药物转运体包括有机阴离子转运体、有机阳离子转运体、有机阴离子转运多肽和钠离子/牛磺胆酸共转运多肽4个转运体家族的肝细胞摄取转运体,以及多药耐药蛋白、多药耐药相关蛋白、乳癌耐药蛋白和胆盐外排泵4个转运体家族的肝细胞外排转运体。肝细胞转运体的主要研究方法包括基因敲除动物、离体肝灌流、肝切片、原代肝细胞和转染细胞等,肝细胞药物转运体研究在药物组织分布、相互作用及药物毒性研究中得到较多的应用。(本文来源于《中国药理学与毒理学杂志》期刊2014年05期）
郭岑,赫蕾,姚丹,潘国宇,王广基[5]（2013）在《d-Penicillamine2,5-enkephalin作为底物考察叁明治大鼠原代肝细胞的转运体功能研究》一文中研究指出目的:通过液相色谱-串联质谱(LC/MS/MS)法测定d-Penicillamine2,5-enkephalin(DP-DPE)在肝细胞和Hank's缓冲液中的浓度,研究DPDPE作为底物用于"叁明治"培养大鼠原代肝细胞(SCRH)的转运体功能。方法:将SCRH与溶于Hank's缓冲液的DPDPE共温孵,采用LC/MS/MS法测定细胞内蓄积的和外排到缓冲液中的DPDPE浓度,用于评价模型药物α-萘异硫氰酸酯(ANIT)对参与DPDPE摄取的Oatp和负责DPDPE外排的Mrp2的转运功能的影响。结果:建立的样品处理和测定方法能够满足体外转运实验需要的灵敏度和线性范围,在Hank's缓冲液中线性范围为0.5～50ng/mL(r2=0.9995),在细胞基质中线性范围为0.1～5ng/well(r2=0.9997),样品处理操作简便。日内日间精密度(RSD)均小于15%;提取回收率大于65%。ANIT可抑制DPDPE在SCRH胆管侧的外排及基底侧的摄取,对基底侧外排无显着影响。结论:该分析方法选择性好,灵敏度高,操作简便,并成功地用于将DPDPE作为探针底物研究SCRH模型上转运体的功能。(本文来源于《中国临床药理学与治疗学》期刊2013年05期）
杨渊,刘新民,肖芳,李鹏,邹悦[6]（2012）在《六价铬对肝细胞内活性氧和腺苷酸转运体1转录水平的影响》一文中研究指出目的探讨重金属六价铬[Cr(Ⅵ)]的体外肝毒性。方法 L-02肝细胞经Cr(Ⅵ)0,2,4,8,16和32μmol·L~(-1)分别染毒12,24或36 h后,采用逆转录-荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)和荧光光度法分别对腺苷酸转运体1(ANT1)mRNA表达水平和活性氧簇(ROS)水平进行检测。结果 Cr(Ⅵ)32μmol·L~(-1)处理细胞12和24 h后,ROS水平明显升高,而处理36 h后,ROS水平明显下降。Cr(Ⅵ)2～32μmol·L~(-1)处理细胞12和24 h后,细胞内ANT1 mRNA呈明显低表达水平,而处理36 h后,细胞内ANT1 mRNA表达水平明显增高,达正常对照组的2倍左右。结论 Cr(Ⅵ)在早期(12,24 h)可使L-02肝细胞内ROS水平升高,发生氧化应激,在后期(36 h)可诱导ANT1 mRNA表达水平升高,发生能量代谢应激,可能是Cr(Ⅵ)诱导细胞线粒体损伤的分子毒性机制之一。(本文来源于《第二届世界天然药物和传统药物药理学学术会议论文摘要》期刊2012-11-06）
杨渊,刘新民,肖芳,李鹏,邹悦[7]（2012）在《六价铬对肝细胞内活性氧和腺苷酸转运体1转录水平的影响》一文中研究指出目的探讨重金属六价铬[Cr(Ⅵ)]的体外肝毒性。方法 L-02肝细胞经Cr(Ⅵ)0,2,4,8,16和32μmol.L-1分别染毒12,24或36 h后,采用逆转录-荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)和荧光光度法分别对腺苷酸转运体1(ANT1)mRNA表达水平和活性氧簇(ROS)水平进行检测。结果 Cr(Ⅵ)32μmol.L-1处理细胞12和24 h后,ROS水平明显升高,而处理36 h后,ROS水平明显下降。Cr(Ⅵ)2～32μmol.L-1处理细胞12和24 h后,细胞内ANT1 mRNA呈明显低表达水平,而处理36 h后,细胞内ANT1 mRNA表达水平明显增高,达正常对照组的2倍左右。结论 Cr(Ⅵ)在早期(12,24 h)可使L-02肝细胞内ROS水平升高,发生氧化应激,在后期(36 h)可诱导ANT1 mRNA表达水平升高,发生能量代谢应激,可能是Cr(Ⅵ)诱导细胞线粒体损伤的分子毒性机制之一。(本文来源于《中国药理学与毒理学杂志》期刊2012年05期）
唐清[8]（2011）在《肝细胞转运蛋白的表达及ABCB4基因突变在婴儿胆汁淤积性肝炎发病机制中的探讨》一文中研究指出第一部分肝细胞转运蛋白和法尼醇受体在婴儿胆汁淤积性肝炎肝组织中的表达及其意义目的研究MDR3、BSEP、MRP2和FXR蛋白在婴儿胆汁淤积性肝炎肝组织中的表达及其临床意义。方法2000年1月至2009年10月收治的婴儿胆汁淤积性肝炎患儿22例为病例组,收集临床资料,进行肝组织活检;肝移植供体10例,为正常对照组。采用免疫组化法检测MDR3、BSEP、MRP2和FXR蛋白在正常对照组及病例组肝组织中的表达。应用Leica Qwin软件进行定量分析。并对各蛋白的表达水平与肝功能指标的关系进行统计。结果正常对照组和病例组肝组织MDR3、BSEP和MRP2蛋白表达位于肝细胞膜,FXR蛋白表达位于肝细胞核。与正常对照组比较,病例组肝组织MDR3蛋白表达增强,MRP2和FXR蛋白表达降低,BSEP蛋白表达无改变。正常对照组和病例组肝组织MDR3蛋白A值分别为0.11±0.03和0.13±0.02,病例组MDR3蛋白A值显着增高( t = - 2.239 , P <0.05);BSEP蛋白A值分别为0.07±0.01和0.08±0.02,两组比较无差异(t = -1.625, P> 0.05);MRP2蛋白A值分别为0.17±0.04和0.11±0.05,病例组MRP2蛋白A值显着降低(t= 3.418, P <0.05);FXR蛋白A值分别为0.15±0.06和0.09±0.02,病例组FXR蛋白A值显着降低(t= 7.676, P<0. 001)。MRP2蛋白A值与血清ALT水平呈负相关(r=-0.488,P<0.05),与血清TB、DB、γ-GT水平无相关(P >0.05);MDR3和FXR蛋白A值与血清TB、DB、γ-GT、ALT水平均无相关性(P >0.05)。结论与正常肝组织相比,婴儿胆汁淤积性肝炎患儿肝组织中MRP2和FXR蛋白表达下降,MDR3蛋白表达增强,BSEP无变化。MDR3表达增强有利于增强磷脂的转运,与过高的胆盐结合,减轻肝损害,有可能是机体的适应反应。MRP2蛋白表达下降可因减少胆汁流而加重胆汁淤积。MRP2蛋白表达水平越低,血清ALT越高,肝损害越严重。MRP2蛋白表达的下调可能与FXR蛋白表达抑制相关。肝细胞转运蛋白表达的变化可能在婴儿胆汁淤积性肝炎的胆汁淤积的发病起到了一定的作用。第二部分UDCA对婴儿胆汁淤积性肝炎ABCB4和FXR mRNA表达的影响目的分析UDCA治疗前后婴儿胆汁淤积性肝炎ABCB4和FXRmRNA的差异性表达,探讨ABCB4和FXRmRNA表达变化对婴儿胆汁淤积性肝炎的影响以及与UDCA的关系。方法选择2008年7月至2010年7月确诊为婴儿胆汁淤积性肝炎患儿58例,随机分为2组,UDCA治疗组28例,常规治疗组30例;正常对照组30例。提取外周血总RNA,逆转录为cDNA。应用SYBR Green I实时荧光定量RT-PCR的方法检测ABCB4、FXRmRNA在婴儿胆汁淤积性肝炎患儿和正常健康儿的表达。采用2-△△CT法进行相对定量分析。结果婴儿胆汁淤积性肝炎患儿应用UDCA治疗后TB、DB、ALT和γ-GT显着降低(P<0.05)。与常规治疗组比较,UDCA治疗组TB、DB下降值显着增高(P<0.05),ALT和γ-GT的下降值无差别(P>0.05)。与正常对照组比较,婴儿胆汁淤积性肝炎患儿ABCB4mRNA的表达水平增高了4.53倍,FXR mRNA的表达无差异(P>0.05)。与UDCA治疗前比较,UDCA治疗后婴儿胆汁淤积性肝炎患儿ABCB4 mRNA表达水平增加了2.04倍,FXR mRNA的表达水平无显着差异(P>0.05)。ABCB4 mRNA的表达量与血清TB、DB、ALT和γ-GT水平无相关性(P>0.05)。结论UDCA有较好的利胆作用,可以改善婴儿胆汁淤积性肝炎的症状及实验室指标。UDCA可以上调ABCB4 mRNA的表达。与正常健康婴儿比较,婴儿胆汁淤积性肝炎ABCB4mRNA的相对表达量增高,为机体适应性代偿反应;FXRmRNA的相对表达量不变,未能证实FXR对ABCB4基因的转录调节作用。第叁部分婴儿胆汁淤积性肝炎ABCB4基因突变的分析目的研究婴儿胆汁淤积性肝炎是否存在ABCB4基因突变,探讨分析ABCB4基因突变与婴儿胆汁淤积性肝炎的易感性和临床特征的关系。方法病例组婴儿胆汁淤积性肝炎100例,正常对照组149例,提取外周血基因组DNA,对病例组的ABCB4基因全部28个外显子以及侧翼内含子进行聚合酶链反应和直接测序,正常对照组针对病例组检出有突变的外显子进行检测,分析各突变位点的基因型和等位基因频率在病例组和对照组中的分布及基因型与肝功能各指标的关系。结果共发现ABCB4基因5个外显子突变,均为SNP位点,其中rs2109505不符合Hardy-weinberg平衡,rs2302387、rs1202283、rs8187791、rs2230028符合Hardy-weinberg平衡。本研究健康人群rs2302387位点以G/G基因型最常见;rs1202283位点以G/A基因型最常见;rs8187791位点以C/C基因型为主,T等位基因罕见;rs2230028位点以A/A基因型最常见,无G/G基因型。本研究健康人群rs8187791位点的基因型及等位基因频率的分布与各地区人群无明显差别,rs2302387、rs1202283和rs2230028位点的基因型及等位基因频率的分布与我国北京汉族及日本人群相近,部分与欧洲人群有差异,与非洲人群呈显着性差异(P<0.05)。rs2302387、rs1202283、rs8187791和rs2230028的基因型及等位基因频率在病例组和正常对照组的分布无显着性差异(P>0.05)。病例组rs2302387、rs1202283、rs8187791和rs2230028位点各基因型的肝功能指标比较无显着差异(P>0.05)。各单倍型在病例组和对照组的分布频率无差异(P>0.05)。结论ABCB4基因突变与婴儿胆汁淤积性肝炎易感性无关。首次报道ABCB4基因rs2302387、rs1202283、rs8187791、rs2230028位点在广西南宁地区人群中的分布情况。其中rs8187791位点基因型及等位基因频率的分布无明显地域差别。rs2302387、rs1202283、rs2230028叁个位点多态性频率分布与北京及日本亚洲人群分布较一致,与欧洲及非洲人群分布有差异。(本文来源于《广西医科大学》期刊2011-05-01）
曹云海[9]（2011）在《利福平对小鼠肝细胞胆汁酸转运体Bsep和Mrp2表达与定位的影响》一文中研究指出目的本研究在建立利福平(rifampicin,RIF)致小鼠肝损伤动物模型的基础上,探讨RIF对肝细胞胆汁酸转运体胆汁酸输出泵( Bsep)和多药抵抗相关蛋白-2(Mrp2)表达和定位影响。方法为建立利福平致小鼠肝损伤的动物模型,选取80只雌性ICR小鼠随机分为4组,RIF 1w组:经灌胃给予RIF(200 mg/(kg·d))连续1周,于末次给药后6 h取材;RIF6 h组:单次灌胃给予RIF(200 mg/kg)后6小时取材;RIF 6 h对照组(CON 6 h)与RIF 1w对照组(CON 1w):经灌胃给予等容积生理盐水,每组20只。末次给药后6小时收集全血并处死小鼠,留取肝脏,检测血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、总胆汁酸(TBA)、总胆红素(TB)和结合胆红素(DB);肝脏组织中TBA;光镜观察小鼠病理改变。为探讨肝细胞胆汁酸转运体相关基因表达与完整性改变在利福平致小鼠肝内胆汁淤积中的作用,48只雌性ICR小鼠随机分为4组,RIF 1w组:经灌胃给予利福平(200 mg/(kg·d))连续1周,于末次给药后6小时取材;RIF6 h组:单次灌胃给予利福平(200 mg/kg)后6小时取材;RIF 6 h对照组(CON 6 h)与RIF 1w对照组(CON 1w):经灌胃给予等容积生理盐水。末次给药后禁食6小时处死,留取肝脏标本。采用RT-PCR技术检测肝细胞胆汁酸转运体Bsep和Mrp2 mRNA水平;采用免疫荧光技术检测肝细胞毛细胆管膜侧的胆汁酸转运体Bsep和Mrp2定位及完整性。结果给予利福平1周后,小鼠血清TB由1.25±0.69上升至65.73±12.08,上升近70倍,DB由0.77±0.40上升至53.33±12.43,上升约80倍,ALP由110.2±13.8上升至279.5±80.4,上升约1.5倍,TBA由3.15±0.89上升至13.54±6.51,上升约5倍并伴有血清ALT和AST轻度升高;肝脏组织TBA由0.15±0.04上升至0.30±0.19,上升约2倍;肝脏组织HE染色显示肝细胞出现脂肪变性、轻度坏死和炎症。单次给予利福平6小时后血清TB, DB, ALP,ALT,AST和TBA显着上升,但未观察到小鼠肝脏组织病理发生改变。无论单次给予利福平(200 mg/kg),还是连续给予利福平(200 mg/(kg·d))1周,Bsep和Mrp2 mRNA表达水平均无明显变化。给予利福平(200 mg/kg·d)1周后,Bsep和Mrp2蛋白条带完整性受损,出现扭曲、断裂和不完整的荧光条带,胞浆内Bsep和Mrp2荧光强度明显增强,提示Bsep和Mrp2发生细胞内陷;单次给予利福平(200 mg/kg)后6 h,Bsep和Mrp2荧光条带出现变形、扭曲和不完整等改变。免疫荧光强度定量分析显示,给予利福平(200 mg/kg·d)1周后,Bsep和Mrp2荧光强度明显下降;进一步观察发现,单次给予利福平(200 mg/kg)后6小时,Bsep和Mrp2荧光强度即明显下降。结论利福平通过改变肝细胞胆汁酸转运体的定位引起小鼠肝内胆汁淤积,未见利福平引起的肝内胆汁淤积与肝细胞转运体蛋白基因表达有明显的关联。(本文来源于《安徽医科大学》期刊2011-03-15）
黄涛,宫东伟,周进学,董子明[10]（2011）在《肝细胞癌组织中叁磷酸腺苷结合盒转运体G2和CD133蛋白的表达》一文中研究指出目的:检测人肝细胞癌(HCC)组织中干细胞标志物叁磷酸腺苷结合盒转运体G2(ABCG2)和CD133蛋白的表达。方法:采用免疫组织化学法检测48例HCC及癌旁正常肝组织中ABCG2和CD133蛋白的表达,并分析其表达情况与临床病理特征的关系。结果:ABCG2蛋白阳性表达率在HCC和癌旁肝组织中分别为47.9%(23/48)和22.9%(11/48),差异有统计学意义(χ2=10.083,P<0.001);ABCG2蛋白表达与HCC分化程度(χ2=5.298,P=0.021)、包膜是否受侵(χ2=15.068,P<0.001)和有无门静脉癌栓(χ2=17.146,P<0.001)有关。CD133蛋白阳性表达率在HCC和癌旁肝组织中分别为27.1%(13/48)和0%,差异有统计学意义(χ2=11.077,P<0.001);CD133蛋白表达与HCC分化程度(χ2=6.553,P=0.010)、包膜是否受侵(χ2=24.382,P<0.001)和有无门静脉癌栓(χ2=16.032,P<0.001)有关。结论:HCC组织中ABCG2和CD133蛋白异常表达可能与HCC的发生发展及浸润转移有关。(本文来源于《郑州大学学报(医学版)》期刊2011年01期）
肝细胞转运体论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的本研究旨在探讨药物转运蛋白绝对表达量与其生物功能相关性,可为新药研发和临床安全用药研究提供新的方法。研究方法选取药物转运体OATP1B1、OATP1B3、OATP2B1和NTCP作为研究对象。首先优化药物转运体膜蛋白的样品前处理过程,其中包括膜蛋白的提取、增溶剂的选择和胰蛋白酶与蛋白的比率;然后人工合成能代表人肝细胞中OATP1B1、OATP1B3、OATP2B1和NTCP蛋白的特异性肽段标准品,将相应的稳定性同位素标记的肽段作为内标,优化色谱条件和质谱条件,采用多监测反应模式,建立同时测定OATP1B1、OATP1B3、OATP2B1和NTCP的分析方法,并进行方法学验证,运用该方法测定23个冻存的人肝细胞药物转运体的表达水平。通过叁明治培养的人肝细胞对底物氘代牛磺胆酸钠和瑞舒伐他汀的摄取实验,测出不同批次的肝细胞对这两个底物整体的转运活性。再通过稳定转染人OATP1B1、OATP1B3、OATP2B1和NTCP基因的HEK293细胞对底物氘代牛磺胆酸钠和瑞舒伐他汀的摄取实验,测定出相应的Km和Vmax值。最后将测定得到的转运体表达水平与转运体活性相结合,预测转运体介导的对氘代牛磺胆酸钠和瑞舒伐他汀的摄取清除,并研究转运体表达和活性相关性。通过丹红注射液对细胞摄取瑞舒伐他汀的抑制实验,研究丹红注射液对药物转运体OATPs和NTCP的作用,并分析丹红注射液与瑞舒伐他汀联合使用时是否会产生药物间相互作用。研究结果使用膜蛋白提取试剂盒提取膜蛋白时重复性好;月桂酸钠作为转运体膜蛋白的增溶剂,其增溶效果比脱氧胆酸钠增溶效率更高,并且对特异性肽段的离子化无抑制作用;转运体蛋白酶水解时胰蛋白酶与蛋白的最佳比例为1:5。建立同时测定人肝细胞中四种药物转运体OATP1B1、OATP1B3、OATP2B1和NTCP的LC-MS/MS分析方法,其定量下限、精密度和准确度均符合大分子的生物分析方法规定。OATP1B1、OATP1B3和OATP2B1均在0.2-50nM范围内线性良好,(r>0.995)。测定出23个批次中国人肝细胞中的OATP1B1、OATP1B3、OATP2B1和NTCP蛋白表达平均值分别为4.74、1.39、3.02和3.69 fmol/μg,并发现不同个体之间蛋白表达有很大的差异。在底物摄取实验中,结合转运体蛋白定量,发现这四种转运体在对氘代牛黄胆酸钠和瑞舒伐他汀的肝细胞转运过程中,NTCP分别占整个摄取的89%和68%。又通过人肝细胞模型测定了这两个底物体外整体摄取活性,并比较了这两个底物肝细胞主动摄取清除率预测值跟测定值间的差异,结果显示线性回归相关系数为0.74和0.66;在spearman相关性分析中,spearman秩相关系数rs分别为0.1319和0.3604,均呈正相关。丹红注射液对瑞舒伐他汀在OATP1B1、OATP1B3、OATP2B1和NTCP细胞中摄取都有一定的抑制作用,IC50分别为0.38mL/100m L,0.14 m L/100m L,0.72 m L/100m L和>3.2 m L/100mL,其中对OATP1B3的抑制效果最强,对NTCP的抑制效果最弱。同时用人肝细胞模型考察了丹红注射液对瑞舒伐他汀整体肝摄取的抑制效果,测得IC50=0.85m L/100mL,提示丹红注射液与瑞舒伐他汀联合使用时有药物相互作用的风险。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
肝细胞转运体论文参考文献
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