分子克隆文库论文-何沙娥

分子克隆文库论文-何沙娥

导读:本文包含了分子克隆文库论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献,主要关键词:毛竹,纤维素合成,cDNA文库,基因克隆

分子克隆文库论文文献综述

何沙娥[1](2009)在《毛竹笋cDNA文库构建及纤维素合成酶基因(PeCesA11和PeCesA12)的分子克隆》一文中研究指出毛竹(Phyllostachys edulis)是中国分布范围最广、经济价值最高的材用和笋用竹种。竹子生长快速,可为生物质能源开发提供大量纤维素原料。竹纤维特殊的结构特征,使其具有独特的优良特性。大量开发利用竹纤维和竹纤维优良的基因资源,不但可以解决竹笋老化问题,还可以为生物能源和优良纤维植物品种开发做出巨大贡献。为了探讨竹笋快速老化及竹纤维生物合成的基本过程,本文拟以毛竹笋为试材,以cDNA文库构建为切入点,采用大规模PCR筛选,进而分离得到与纤维素合成相关的基因。在此基础上,开展与纤维素合成相关基因的空间表达及基因表达与纤维素含量关系的研究。通过上述研究得到以下主要结果:(1)以毛竹笋为植物材料,采用Gateway技术,构建了第一个毛竹笋全长cDNA文库。质量检测结果表明:毛竹笋全长cDNA文库滴度为1.7×10~6 cfu mL~(-1),文库总容量为8.5×10~6 cfu。平均插入片段大小约为1.5 kb,阳性克隆率为96%。说明所构建的文库完全符合目的基因分离筛选和表达建库的要求,可为进一步开展与毛竹纤维素合成相关基因的克隆及纤维素合成机理的探讨等研究奠定重要的基础。(2)采用PCR对文库进行筛选,获得两个纤维素合成酶亚基的基因,均含有完整阅读框(ORF)。通过核酸序列比对发现,这两个基因与某些已知的绿竹、水稻、玉米、小麦和大麦的纤维素合成酶(CesA)基因同源性极高,命名为PeCesA11 (GenBank FJ799713)和PeCesA12。通过进一步分析发现:PeCesA11和PeCesA12编码的氨基酸序列均具有植物纤维素合成酶典型的结构特征:Zn指结构域、保守区、可变区和跨膜区。(3)以毛竹Actin基因为内参,运用Q-RT PCR方法对PeCesA11和PeCesA12基因在毛竹笋基部、笋上部、根、茎、叶中的相对表达量进行测定。结果发现,在毛竹不同部位,PeCesA11和PeCesA12基因相对于Actin基因的表达量有一定差异,其中在笋基部的相对表达量最高,其次为根、茎、叶,在笋上部的相对表达量最低。(4)采用莫尔式盐法测定了毛竹笋基部、笋上部和根、茎、叶中的纤维素含量。结果显示,毛竹笋上部的纤维素含量极低,约为2.9%,茎中纤维素含量最高,达到了48.45%,笋基部、根和叶中的含量分别为27.89%、46.45%、23.98%。各部位纤维素含量的高低与PeCesA11和PeCesA12基因表达量有一定程度的关联。本实验克隆了两个毛竹纤维素合成酶相关基因,为分析竹纤维素生物合成的途径及竹纤维基因资源的开发和利用提供了理论基础,对于农作物包括林木纤维素基因工程遗传改良、生物质能源的开发,都具有重要科学意义。(本文来源于《浙江林学院》期刊2009-06-01)

唐清[2](1999)在《大鼠APKD基因分子克隆研究(Ⅱ)大鼠基因组文库中APKD基因同源顺序的克隆——筛选与鉴定》一文中研究指出以人APKD基因探针218Ep6在大鼠基因组文库中筛选到阳性克隆pM1,经充分鉴定证实含有探针的同源顺序(本文来源于《西南民族学院学报(自然科学版)》期刊1999年01期)

唐清[3](1998)在《大鼠APKD基因的分子克隆研究Ⅰ.大鼠基因组文库的构建》一文中研究指出以质粒PBR322为载体、BamHI部分酶切片段(4~10kb)为目的片段成功构建了大鼠基因组文库并进行了鉴定,文库总重组子数为3.2×107,插入比例95%,为大鼠APKD基因的克隆筛选以及有关大鼠基因的其它一些研究奠定了基础.(本文来源于《西南民族学院学报(自然科学版)》期刊1998年01期)

汪世平,易新元,周汩波,沈国励,张顺科[4](1997)在《日本血吸虫cDNA文库中抗卵分子克隆的免疫筛选及鉴定》一文中研究指出本文采用具有明显抗卵胚发育和抗雌虫生殖双重作用的免疫血清对SjcDNA文库进行免疫筛选,共鉴定阳性克隆102个,进一步复筛后对其中6个克隆以自动DNA测序仪对。DNA插入子测序,测序资料经基因数据库GCG软件处理。表明C40克隆类似于Sm铁蛋白基因,C31克隆类似于N.forntalis的PEPCK酶基因.C21为Sj热休克蛋白70基因,C29为副肌球蛋白基因,C30和C35克隆分别为印壳蛋白基因和钙网硬蛋白基因·上述6个基因克隆的同源程度分别为74.7%、57.1%、80.1%、86.4%、96.4%和80.6%。(本文来源于《中国人兽共患病杂志》期刊1997年06期)

分子克隆文库论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

以人APKD基因探针218Ep6在大鼠基因组文库中筛选到阳性克隆pM1,经充分鉴定证实含有探针的同源顺序

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

分子克隆文库论文参考文献

[1].何沙娥.毛竹笋cDNA文库构建及纤维素合成酶基因(PeCesA11和PeCesA12)的分子克隆[D].浙江林学院.2009

[2].唐清.大鼠APKD基因分子克隆研究(Ⅱ)大鼠基因组文库中APKD基因同源顺序的克隆——筛选与鉴定[J].西南民族学院学报(自然科学版).1999

[3].唐清.大鼠APKD基因的分子克隆研究Ⅰ.大鼠基因组文库的构建[J].西南民族学院学报(自然科学版).1998

[4].汪世平,易新元,周汩波,沈国励,张顺科.日本血吸虫cDNA文库中抗卵分子克隆的免疫筛选及鉴定[J].中国人兽共患病杂志.1997

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