刘奠忠魏聪杨莉郭永灿
(泸州医学院口颌面修复重建和再生实验室;泸州医学院附属口腔医院检验科四川泸州646000)
【摘要】目的：探讨测量不确定度在临床常规生化检验中的应用。方法：使用日立7080型生化分析仪和迈克试剂及配套标准品、郎道质控品等，测定常规生化检测指标测量不确定度。结果：各常规生化指标测量不确定度为：总蛋白为4.22%，白蛋白为4.47%，总胆红素为6.89%，直接胆红素为14.7%，尿素氮为10.69%，肌酐为5.87%，尿酸为7.18%，葡萄糖为8.42%，结论：测量不确定度(U%)可反映检测结果的准确性及分散性，在临床应用中有重要价值。
【关键词】临床生化检验测量不确定度标准差百分变异系数
【中图分类号】R446.1【文献标识码】A【文章编号】1672-5085（2014）26-018-02
临床检验的主要任务就是对人体标本的各种特性进行赋值。所赋值的准确性、可靠性及其分散性都会直接影响到疾病的诊断、治疗方案的确定及疗效的观察。测量不确定度是表征合理地赋予被测量之值的分散性，反映测量结果相联系的参数［1］。不确定度评估一般包括识别不确定度来源、量化不确度分量、合并标准不确定度、计算扩展不确定度等步骤。本文基于对测量不确定度相关知识的理解和认识，为反映本实验室检测质量，现参照相关测量不确定度的方法要求，对本室8项生化检验项目进行不确定度(U％)的评估。
1资料与方法
1.1仪器与试剂日立7080检测系统，迈克试剂与配套校准品，该检测系统配套具有溯源性。本次评价包括常规开展的8个生化检测项目：总胆红素(T-Bil)、直接胆红素(D-Bil)、总蛋白(TP)、白蛋白(Alb)、血糖(Glu)、尿素（BUN）、肌酐（Crea)、尿酸（Ua)、，所有项目都使用迈克试剂，按试剂说明书进行操作。评定过程中的质控品采用Rondox。
1.2检测程序保证仪器性能良好，设备操作与保养严格按照本室SOP文件执行；校准、室内和室间质控品的测量过程严格按照项目SOP文件执行。
1.3方法总胆红素(T-Bil)为重氮法、直接胆红素(D-Bil)为重氮法，总蛋白(TP)为双缩脲终点法；白蛋白(Alb)为溴甲酚紫终点法；尿素氮(BUN)为脲酶比色法；肌酐(Cr)为酶法；尿酸(uA)为尿酸酶比色法；葡萄糖(Glu)为氧化酶法。
1.4(U％)来源(1)批内因素；(2)批间因素；(3)偏倚因素。
1.5扩展不确定度(U％)的计算［2］其中CV1=批内变异，CV2=批间变异，CV3=偏倚变异，2=95％置信水平包含因子。
2结果
2.1批内重复性（CVw）将患者血清样本均匀分为20份，对选择的14个项目在一个分析批内进行重复测定，并计算其均值、变异系数（CV％），结果见表1。
2.2批间重复性（CVb）选定每天测定的Rondox质控品项目，收集20次数据并计算其变异系数（CV％）,结果见表1。
2.3项目测定偏倚（CVbias）以定值质控血清重复测定3次取平均值，计算百分差值及偏倚Cv(bias)，△=相对差值平均值，Sc=相对差值标准差。结果见表1。
2.4校准品赋值不确定度（CVref）校准品赋值不确定度由厂家提供，结果见表1。
表1生化检验项目(U％)计算值
备注：CVw是指批内重复性（n=20d）；CVb是指批间重复性（n=20d）；CV3是指偏倚变异；CVref校准品赋值的不确定度；U%是指扩展不确定度。
3讨论
随着我国对国外实验室管理规范的不断认识及实验室认可不断开展，量值溯源、测量不确定度等概念受到了越来越多专家学者的关注［3］。不确定度的含义是指由于测量误差的存在，对被测量值的不能肯定的程度，也表明该结果的可信赖程度，是测量结果质量的指标。因此，不确定度是建立在误差理论上的一个新概念，是对经典误差理论和评定方法的最新发展［4］。测量仪器、测量程序、测量条件、测量方法、数据处理方法等与不确定度的测量关系非常紧密，但却与重复条件下具体测量结果数值的大小没有任何关系，也就是说测量在重复条件下进行时，即使测量结果不同，但不确定度却是相同的，但其存在的误差也是不同的。对于测量结果的修正，一般可通过测量误差来进行，但不确定度就无法对测量结果进行修正。测量所得的误差是有不确定度存在的，评定所得的不确定度也会有误差的存在。而掌握二者的区别与联系，有利于对两个指标的有效应用。
不确定度在临床生化检验中的来源主要为检测程序规定的失误、操作人员因经验、能力造成的差异偏差、不正确的标本采集、环境条件对测量过程的影响、校准物的赋值以及仪器有限的分辨力等因素，而对于各分量的评定，可促使实验室中标准化操作的加强、检测方法的改进、检测原理的认识以及人员的培训等环节的有效落实，对实验室服务质量的改进非常有利。当估计(U％)时，分析人员应熟悉分析过程和条件影响因素，并考虑它们对不确定度的意义。包括分析前因素：样本运输，加入保护剂，离心，基质效应和样本稀释等。然而在许多情况下，通过适当的措施，可将它们对总的不确定度的影响降到最大分量的1／3。
不确定度评估的前提是实验室必须具备有效的质量保证和控制措施，确保过程稳定和在控。这些措施通常包括合格的操作人员，对设备和试剂的正确维护和校准，使用经过确认的分析方法，使用适当的参考、文件化的测量程序，使用规定的内部质量控制程序，参加水平测试项目，甚至通过ISO17025进行实验认可。在这种状态下，运用实验室室间、室内方法确认的研究数据，分析影响测定的分量来评估(U％)［5-6］。这样，对一个被测量的整体方法性能参数评价中得到的离散度，可涵盖日常对该被测量的一次检测结果的(U％)。这也是本文(U％)的计算方法的根据。我室临床生化检验批内CV％、批间CV％及偏倚CV％均符合本省临床检验中心室内、室问质量控制要求，也符合“常规分析项目总分析不精密度(CV％)和不准确度的推荐和临时质量规范”［7］要求。所以，本文中测量不确定度值基本反映本室实验条件下检测结果的准确性和分散性。
参考文献
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