导读:本文包含了转基因配子体论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:裙带菜配子体,基因工程,启动子,荧光蛋白
转基因配子体论文文献综述
任宝永[1]（2011）在《裙带菜配子体转基因研究》一文中研究指出本文以裙带菜配子体为材料,从转化方法、筛选标记的选择、功能基因稳定转化和内源启动子克隆四个方面对裙带菜的基因工程进行了深入研究。建立了稳定的遗传转化体系,进一步充实了大型海藻转基因的研究,为裙带菜的育种工作提供了新的手段,使得利用裙带菜生产外源活性物质成为可能。本文具体的研究结果为:1.利用基因枪法将荧光标记基因(EGFP)载体导入裙带菜配子体中,通过共聚焦荧光显微镜观察,找到了表达绿色荧光蛋白的配子体,实现了EGFP基因在裙带菜配子体中的瞬间表达,确定了基因枪法的转化条件,验证了所用表达质粒载体在裙带菜配子体转基因研究中的有效性。2.利用基因枪法将鲎素多肽基因(tac)和草丁膦抗性基因(bar)导入配子体,通过草丁膦筛选和配子体恢复生长,挑选到抗性克隆,PCR检测显示有60%的抗性克隆含有bar基因,由此证明bar基因是裙带菜配子体基因工程有效的筛选标记。此外,利用PCR方法从转化组中扩增出tac基因,成功构建了转化鲎素多肽(tac)基因的配子体。3.在鲎素多肽基因成功转化的基础上,利用基因枪法将溶栓药物瑞替普酶基因(rt-pa)和草丁膦抗性基因(bar)导入裙带菜配子体中,筛选后获得抗性克隆配子体。通过PCR检测和基因组DNA-southern杂交实验,证明rt-pa基因已整合进配子体基因组DNA,实现了外源药物蛋白基因在裙带菜配子体基因组中的稳定整合。4.根据lhcf基因在藻类基因组中的保守性设计引物,扩增了裙带菜配子体的lhcf基因部分序列。在此基础上,以基因组步移法得到了其上游调控序列,并利用生物信息学分析了其上游的调控区和启动子区,为裙带菜配子体基因工程选择内源启动子、高效启动外源基因表达的研究做了铺垫。(本文来源于《中国科学院研究生院（海洋研究所）》期刊2011-04-18）
邓祥元[2]（2009）在《转基因海带配子体的制备与高效增殖》一文中研究指出海带具有很高的营养价值和经济社会价值。自20世纪90年代以来,本实验室在借鉴高等植物基因工程原理和方法的基础上,根据海带自身特点,建立了海带遗传转化体系(海带孢子体表达系统),它的基本原理是利用基因枪法转化海带配子体,经孤雌或受精途径再生幼孢子体后,用氯霉素筛选幼孢子体获得转基因海带,然后进行海上安全栽培和转基因产品的检测与提取。目前该表达系统已成功实现报告基因(β-半乳糖苷酶基因,lacZ)和功能基因(乙肝表面抗原基因,HBsAg)的稳定表达。由于海带孢子体表达系统需经孢子体再生和海上栽培等阶段,周期较长,而且转基因安全性问题也在一定程度上制约其研究与应用。因此,我们在海带孢子体表达系统的基础上又建立和优化了海带配子体表达系统,并成功实现了报告基因(绿色荧光蛋白基因,GFP)的瞬间表达和功能基因(瑞替普酶基因,rt-PA)的稳定表达。虽然海带配子体表达系统能避免转基因安全性问题,周期较短,但在表达量和生物量积累方面,与孢子体表达系统相比还有较大差距。本文首先在海带配子体表达系统中成功实现了人酸性成纤维细胞生长因子基因(hafgf)和鲎素基因(tac)的稳定表达,制备了转基因海带配子体,然后将光生物反应器培养技术应用于转基因海带配子体的高效增殖,以期解决阻碍海带配子体表达系统发展的量的问题,并为转基因海带配子体的大规模培养提供试验依据和技术支持。本文的研究结果为:1、人酸性成纤维细胞生长因子基因和鲎素基因可以稳定整合到海带配子体基因组中,实现转基因产物的表达。2、根据转基因海带配子体的生长特点,研制开发了一套培养体积为300 ml的鼓泡式光生物反应器,它具有操作简便、成本低廉、适合海带配子体生长等特点。随后将培养体系扩大到2.5 L,并研究了光对转基因海带配子体生长的影响,试验结果显示,转基因海带配子体在光强为30μE m~(-2) s~(-1)时即可达到光饱和生长,最优光周期为14:10 LD,而且蓝光可促进转基因海带配子体的生长。3、在前期研究工作的基础上,为改善反应器内的传质条件,我们又设计研制了2.5 L气升式光生物反应器用于转基因海带配子体的高效增殖。研究发现,气升式光生物反应器较鼓泡式光生物反应器能明显地改善反应器内的传质状态,实现转基因海带配子体更高密度的培养(生物量可达到1,990 mg L~(-1)),是一套高密度悬浮培养转基因海带配子体的有效装置和设备。(本文来源于《中国科学院研究生院（海洋研究所）》期刊2009-03-08）
高江涛[3]（2005）在《光生物反应器高效增殖转基因海带配子体细胞的初步研究》一文中研究指出海带基因工程技术日趋成熟并走向应用,转基因海带配子体的高密度增殖是其能否走向应用的关键技术之一。基于安全性的问题,将光生物反应器等生化工程技术用于其培养增殖,是实现转基因海带良种化、规模化及产业化的关键。迄今为止,国内外关于转基因海藻高密度增殖的研究鲜有报道。 本文以转 rt-PA 海带雌配子体为实验研究对象,实验研究分为叁部分。首先,摇瓶悬浮培养配子体细胞,考察配子体细胞的生长特性。其次,根据配子体生长特点,开发了一种 300 ml 的鼓泡式光生物反应器。它具有操作方便、适合海带配子体生长等特点。通过对本系统运行参数的优化实验,我们得到其最适的培养条件为:初始密度为 126 mg l~(-1),通气量为 1.2 l air min~(-1)l~(-1) (vvm),光密度为:30 μE m~(-2) s~(-1),氮和磷浓度为:1.5 mM 和 0.17 mM,培养时间为 20 天。在此培养条件下转基因海带配子体的最大生物量为 1,120 mg l~(-1)。最后,在此基础上,实验体系扩大到 2500 ml 并研究了不同光照方式对配子体细胞生长的影响,实验发现,具有光周期和光强梯度增加的光照方式明显促进配子体细胞的丝状生长 。 上述实验结果将为转基因海带的产业化提供理论依据和技术支持。(本文来源于《中国科学院研究生院（海洋研究所）》期刊2005-05-01）
王宏芝,刘建平[4]（2002）在《获得转基因植物的新途径——以植物雄配子体为受体的转化技术》一文中研究指出以雄配子体为受体的转化技术(Male Germ Line Transformation)是近几年新发展起来的植物转化技术。此方法以游离的单细胞小孢子为受体,通过目前广泛使用的基因转移技术将外源基因导入到小孢子,转化的小孢子在体外培养至成熟并用来进行活体授粉。这样,外源基因就通过受精过程而传递到子代的种子中,直接获得了转基因种子。目前,雄配子体转化体系已成功地在烟草上建立。与常规的转化方法相比,这种方法具有不产生嵌合体转基因植株、体外培养时间短,变异少、对基因型依赖性小等优点。(本文来源于《21世纪作物科技与生产发展学术讨论会论文集》期刊2002-04-01）
转基因配子体论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
海带具有很高的营养价值和经济社会价值。自20世纪90年代以来,本实验室在借鉴高等植物基因工程原理和方法的基础上,根据海带自身特点,建立了海带遗传转化体系(海带孢子体表达系统),它的基本原理是利用基因枪法转化海带配子体,经孤雌或受精途径再生幼孢子体后,用氯霉素筛选幼孢子体获得转基因海带,然后进行海上安全栽培和转基因产品的检测与提取。目前该表达系统已成功实现报告基因(β-半乳糖苷酶基因,lacZ)和功能基因(乙肝表面抗原基因,HBsAg)的稳定表达。由于海带孢子体表达系统需经孢子体再生和海上栽培等阶段,周期较长,而且转基因安全性问题也在一定程度上制约其研究与应用。因此,我们在海带孢子体表达系统的基础上又建立和优化了海带配子体表达系统,并成功实现了报告基因(绿色荧光蛋白基因,GFP)的瞬间表达和功能基因(瑞替普酶基因,rt-PA)的稳定表达。虽然海带配子体表达系统能避免转基因安全性问题,周期较短,但在表达量和生物量积累方面,与孢子体表达系统相比还有较大差距。本文首先在海带配子体表达系统中成功实现了人酸性成纤维细胞生长因子基因(hafgf)和鲎素基因(tac)的稳定表达,制备了转基因海带配子体,然后将光生物反应器培养技术应用于转基因海带配子体的高效增殖,以期解决阻碍海带配子体表达系统发展的量的问题,并为转基因海带配子体的大规模培养提供试验依据和技术支持。本文的研究结果为:1、人酸性成纤维细胞生长因子基因和鲎素基因可以稳定整合到海带配子体基因组中,实现转基因产物的表达。2、根据转基因海带配子体的生长特点,研制开发了一套培养体积为300 ml的鼓泡式光生物反应器,它具有操作简便、成本低廉、适合海带配子体生长等特点。随后将培养体系扩大到2.5 L,并研究了光对转基因海带配子体生长的影响,试验结果显示,转基因海带配子体在光强为30μE m~(-2) s~(-1)时即可达到光饱和生长,最优光周期为14:10 LD,而且蓝光可促进转基因海带配子体的生长。3、在前期研究工作的基础上,为改善反应器内的传质条件,我们又设计研制了2.5 L气升式光生物反应器用于转基因海带配子体的高效增殖。研究发现,气升式光生物反应器较鼓泡式光生物反应器能明显地改善反应器内的传质状态,实现转基因海带配子体更高密度的培养(生物量可达到1,990 mg L~(-1)),是一套高密度悬浮培养转基因海带配子体的有效装置和设备。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
转基因配子体论文参考文献
[1].任宝永.裙带菜配子体转基因研究[D].中国科学院研究生院（海洋研究所）.2011
[2].邓祥元.转基因海带配子体的制备与高效增殖[D].中国科学院研究生院（海洋研究所）.2009
[3].高江涛.光生物反应器高效增殖转基因海带配子体细胞的初步研究[D].中国科学院研究生院（海洋研究所）.2005
[4].王宏芝,刘建平.获得转基因植物的新途径——以植物雄配子体为受体的转化技术[C].21世纪作物科技与生产发展学术讨论会论文集.2002