导读:本文包含了轮纹病抗性论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:氨基酸硒,苹果,轮纹病,抗性酶
轮纹病抗性论文文献综述
李敏,厉恩茂,安秀红,李燕青,李壮[1]（2019）在《氨基酸硒叶面肥提高苹果果实对轮纹病抗性作用》一文中研究指出为探索生长期喷施氨基酸硒叶面肥对苹果果实轮纹病的防治作用,以盛果期"长富2号"苹果为试材,通过田间连续喷施氨基酸硒叶面肥,调查苹果果实轮纹病的发病情况并测定果实相关抗性酶活性,明确氨基酸硒叶面肥对苹果轮纹病的防治作用。结果表明:单独喷施氨基酸硒叶面肥防治效果约20%,但与70%甲基硫菌灵配合使用的联合防治效果可达90%以上,高于单独使用杀菌剂防效,防效提高约15个百分点;同时,施用氨基酸硒叶面肥后,果实内脯氨酸含量(Pro)以及超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)和过氧化氢酶(CAT)活性明显升高,丙二醛(MDA)含量降低。综上所述,氨基酸硒叶面肥虽不能单独用于控制病害的发生和流行,但配合杀菌剂使用时,能明显提高杀菌剂的防治效果;并且氨基酸硒叶面肥可通过提高苹果脯氨酸含量和保护酶活性,同时降低膜脂过氧化产物MDA的积累来提高苹果对果实轮纹病的抗性。(本文来源于《北方园艺》期刊2019年10期）
李小静,张瑞萍,阎振立,陈迪新,张恒涛[2]（2016）在《苹果枝干轮纹病抗性的相关性及遗传规律研究》一文中研究指出使用树干分段级数加权的方法进行田间自然病情调查,并结合田间接种和离体枝条接种的方法对秦冠×富士杂交F1代进行抗病性鉴定,分析了各抗性指标的次数分布和正态分布,以及各抗性指标间的相关性,研究了苹果杂交F_1代枝干轮纹病抗性的遗传规律。结果表明,皮孔密度和大小与轮纹病抗性各指标间没有显着相关性;田间自然感病的级数加权感病高度和加权感病级数与田间接种的感病指数均呈显着正相关;苹果杂交F_1代枝干轮纹病感病指数和离体侵染率均表现广泛分离,呈偏正态分布。可见:皮孔密度和大小不宜作为枝干轮纹病抗性的直接鉴定指标;田间接种较离体接种更适合与田间自然病情调查相结合对枝干轮纹病抗性进行评价;苹果枝干轮纹病抗性是数量性状,可进一步对其进行QTL定位等研究,以期更早实现分子抗病性育种。(本文来源于《江苏农业科学》期刊2016年09期）
吕萍萍[3]（2016）在《苹果MdBAK1s基因表达载体构建、愈伤转化与苹果轮纹病抗性鉴定》一文中研究指出BAK1是植物中重要的一类激酶受体。拟南芥中的研究表明:BAK1介导植物油菜素内酯信号转导、先天性免疫反应以及病原菌致毒蛋白对植物的毒性。苹果中的MdBAK1s与拟南芥中的BAK1具有很高的相似性,而目前国内外有关BAK1在苹果抵抗重要病害中的作用及其在生长发育中的作用研究很少,为此,本研究中,我们克隆了苹果中BAK1的2个同源基因,分别命名为:MdBAK1-1、MdBAK1-2,并对其进行氨基酸序列分析。分别对愈伤组织超表达后生长量的变化,对BR处理的影响,抗病性及抑制表达后对MAPK的信号响应等问题展开了相关研究,这将为进一步研究MdBAK1s在苹果生长发育以及抗病中的作用奠定基础。主要研究结果如下:1.以嘎啦组培苗为材料克隆获得苹果中BAK1的两个同源基因,分别命名为:MdBAK1-1、MdBAK1-2,氨基酸序列分析表明:MdBAK1-1、MdBAK1-2与拟南芥BAK1的序列高度保守,相似度分别为83%、84%,其中胞内激酶区域的保守性更高,均为90%。并且都具有信号肽区域、亮氨酸拉链区域、5个亮氨酸富含区域、脯氨酸富含区、跨膜区以及胞内激酶区。2.获得了稳定超表达MdBAK1s的转基因苹果愈伤组织与转基因苹果株系,并初步观察其表型特征,发现转基因苹果植株长势较弱,部分叶片会随着生长发黄。3.应用RNA干扰的方法抑制苹果中MdBAK1s基因的表达,并获得MdBAK1s表达受抑制的转基因愈伤组织,初步观察其表型特征,发现表达受抑制的转基因愈伤组织颜色与对照相比较浅。4.研究了超表达MdBAK1s的转基因苹果愈伤组织与对照愈伤组织在不同时期生长量的差异,结果表明生长15 d后超表达MdBAK1-1的转基因苹果愈伤组织的生长量明显高于对照,是对照生长量的2.3倍。5.研究了在不同浓度BR处理下超表达MdBAK1s的转基因苹果愈伤组织与对照愈伤组织生长量的差异,结果表明当BR浓度为1.0 nmol/L时可促进苹果愈伤的生长,随着BR浓度的不断增加会抑制苹果愈伤的生长,但当BR浓度为1000 nmol/L时,超表达MdBAK1s的转基因苹果愈伤组织的生长量比普通愈伤明显减少。6.研究了超表达MdBAK1s的转基因苹果愈伤组织与对照愈伤组织对轮纹病菌的抗性,结果表明超表达MdBAK1s的转基因苹果愈伤组织更易感病。7.研究了MdBAK1s表达受抑制的转基因苹果愈伤组织与对照愈伤组织在flg22处理下响应flg22信号的指示性蛋白MAPK6的表达差异,结果表明MdBAK1s表达受抑制后,MAPK6的表达在本底水平上与对照相比变弱。(本文来源于《山东农业大学》期刊2016-05-10）
刘璟,孙洪圳,李保华,柏素花,祝军[4]（2015）在《不同苹果品种(系)枝干轮纹病抗性鉴定及机制研究》一文中研究指出通过调查接种后皮孔的发病率和病瘤直径,鉴定了51份苹果材料对枝干轮纹病的抗性,筛选出对轮纹病表现抗性的材料有鸡冠、94-9-21、94-7-13、94-1-3、94-1-42、94-2-20、94-1-13、94-1-15和95-76;比较了不同抗性品种(系)一年生枝条的皮孔组织结构和酚类物质含量,抗病品种(系)的皮孔具有封闭层,皮层细胞层数多且排列紧密,皮层内绿原酸含量显着高于感病品种(系)。表明皮孔结构和绿原酸含量与苹果枝干对轮纹病的抗性有关。(本文来源于《山东农业科学》期刊2015年06期）
张芮[5]（2015）在《苹果MdWRKY33基因在轮纹病抗性形成中的作用机制研究》一文中研究指出苹果轮纹病是制约我国苹果产业发展的重要病害之一,由致病真菌Botryosphaeria dothidea引起。该病菌不仅能够侵染枝干,导致树体衰弱,还能侵染果实,形成同心轮纹病斑致果实腐烂；同时由于该病菌的潜伏特性,使苹果轮纹病成为果实贮运期的重要病害之一,致使苹果产量和品质急剧下降,造成严重的经济损失。植物在与病原菌漫长的协同进化过程中形成了极为复杂的抗病与免疫反应机制,使其能够针对特定病原菌的入侵而相应地激发植物抗病反应。经典的植物病理学研究表明：植物抗营活体寄生菌主要依赖于水杨酸信号转导途径,而抗营腐体寄生菌主要依赖于茉莉酸／乙烯信号转导途径。轮纹病菌属于兼性寄生菌,目前对该病菌与苹果互作的分子机制研究以及该病菌入侵后引起的抗病反应的研究,报道较少。因此,开展轮纹病菌与苹果果实互作的分子机制研究,对苹果抗病基因的挖掘、轮纹病菌防治机理的丰富和抗轮纹病新品种的培育均具有重要意义。本文以易感品种‘富士’果实为试材,首先研究了轮纹病菌B.dothidea在苹果果实中的扩展方式以及对苹果果实细胞的伤害；其次研究了乙烯信号分子在苹果果实发病中的作用,发现了乙烯在苹果果实与轮纹病菌互作中作为致病因子,促进果实发病；此外还发现转录因子MdWRKY33参与调控了苹果病程相关基因MdPRs的表达,并且介导了乙烯的致毒作用。主要研究结果如下：1.运用半薄切片与扫描电镜技术研究发现,B.dothidea侵入果实细胞后,菌丝大量存在于植物细胞壁与细胞间隙中。细胞壁降解为受B.dothidea侵染的苹果果实细胞的典型受害症状；部分受害细胞发生质壁分离；核染色质浓缩并聚集于核膜上,呈典型细胞凋亡症状。2.乙烯在轮纹病发病过程中作为致毒因子促进苹果果实发病。对不同成熟度与生理状态的叁批果实,即‘富士’幼果、新鲜成熟果实与储藏果实,接种轮纹病菌后,施用乙烯抑制剂1-MCP,能够显着抑制果实发病；1-MCP对病斑的抑制作用呈现显着的浓度依赖性,1-MCP浓度越高,抑制作用越明显；相同浓度1-MCP对成熟果实病斑扩展的抑制效果最好；用外源乙烯预处理能够促进果实病斑扩展。3.在乙烯抑制剂1-MCP处理下,苹果病程相关基因MdPRs的表达进一步升高。B.dothidea能够诱导‘富士’幼果和新鲜成熟果中MdPR-5、MdPR-8和MdPR-4基因的表达,当用1-MCP处理接菌果实,病菌侵染诱导的MdPRs基因的表达进一步增强；而在储藏成熟果实中,轮纹病菌侵染却抑制了MdPRs基因的表达,1-MCP处理能够完全逆转轮纹病菌对MdPRs基因的抑制作用。此外,编码几丁质酶的MdChiB-1基因在幼果中不被轮纹病菌诱导,用1-MCP处理之后,其表达在轮纹病菌侵染下显着升高；新鲜成熟果实在1-MCP处理下,该基因的表达在轮纹病菌侵染下也进一步增强;而在储藏果实中,轮纹病菌对该基因的抑制作用被去除。因此,在1-MCP处理下,苹果病程相关基因MdPRs表达水平进一步升高,可能是增强苹果抗病能力,限制病斑扩展的重要因素。4.苹果转录因子MdWRKY33-1(MDP0000296025)的表达与病程相关基因MdPRs的表达高度协同。通过对19个转录因子做RT-PCR分析发现,B.dothidea只能诱导幼果中乙烯信号转录因子MdERF2的表达并且对幼果中MdERF3、MdERF98-3、MdERF98-6和MdERF98.7的诱导作用比对成熟果显着,1-MCP处理能抑制B.dothidea对ERFs的诱导表达；只有转录因子MdWRKY33-1的表达在接菌果实的乙烯合成和信号转导途径被抑制时,表达进一步升高,与MdPRs表达变化高度协同——在幼果中变化不大,在成熟果中表达量进一步升高,在储藏果中的表达抑制被解除；在各种激素和过氧化物等非生物胁迫下, ‘嘎啦’组培苗中的MdWRKY33-1与MdChiB-1、MdPR-5、MdPR-8、 MaPR-4这些MdPRs的表达变化也表现出了高度协同。5.MdWRKY33-1过表达能提高病程相关蛋白基因MdPRs的表达。转化苹果原生质体过表达ERFs和MdWRKY33转录因子,发现只有MdWRKY33-1能明显提高MdPRs的表达,说明MdWRKY33-1对MdPRs的表达起调控作用。6.在苹果果实中,轮纹病菌所诱导的乙烯合成途径与果实成熟过程中的乙烯合成途径不同。B.dothidea诱导的乙烯合成是通过影响MdACS5a,MdACS5b的表达来实现,与苹果果实成熟过程中乙烯的合成途径不同(MdACS1,MdACS3)。通过RT-PCR技术分析发现,负责介导由伤害胁迫引发的植物乙烯合成中的MdACS5a和MdACS5b基因的表达,能被轮纹病菌显着诱导,但轮纹病菌不能诱导负责果实成熟过程中乙烯合成与跃变的MdACS1和MdACS3的表达,说明B.dothidea诱导的果实乙烯合成与苹果果实成熟过程中的乙烯合成不同。乙烯受体基因MdERS1、MdERS2只在幼果中被B.dothidea诱导,在成熟果实中不被诱导,1-MCP处理能够抑制B.dothidea对它们的诱导作用；类似地,轮纹病菌对幼果乙烯受体基因MdETR2、乙烯转录因子MdERF98等的诱导比对成熟果显着,1-MCP处理均能显着抑制这些基因的表达,表明B.dothidea诱导的乙烯信号转导途径的调控与果实成熟进程有关。严格依赖乙烯的与果实成熟相关的MdPG1基因也能被轮纹病菌诱导,并受1-MCP显着抑制,进一步证实苹果果实响应轮纹病菌的乙烯信号转导与果实成熟进程有关。(本文来源于《山东农业大学》期刊2015-05-15）
关晔晴,吴婷,王忆,张新忠,韩振海[6]（2014）在《苹果果面结构与对轮纹病抗性的关系》一文中研究指出苹果轮纹病[Botryosphaeria dothidea(Moug.)Ces.et de Not.]是中国苹果叁大病害之一。目前国内苹果生产上的主栽品种如‘富士'、‘金冠'等均不抗轮纹病,化学防治等传统防治轮纹病的方法会导致环境污染等。因此选育和应用抗病新品种将是控制苹果轮纹病的最终有效途径。本研究中对不同苹果种质资源抗、感轮纹病果实果面结构进行了研究,进而探讨分析果面结构对轮纹病的抗病机制,为抗轮纹病遗传育种进一步研究提供了理论依据。以11份不同抗、感轮纹病种质资源‘鸡冠'、‘新红星'、‘红玉'、‘乔纳金'、‘国光'、‘美国8号'、‘葵花'、‘金红'、‘昌红富士'、‘金矮生'、‘金冠'果实为试材,选用对果实致病力较强的轮纹病菌株Ls1对其进行离体接种,接种后置于人工气候培养箱28℃恒温保湿培养,调查发病潜伏期、发病率及病斑大小,利用Duncan's新复极差法对3个抗性指标进行统计分析;并对11份种质果皮取样,扫描电镜观察果面皮孔、微裂缝及角质层蜡形态指标,利用ITEM和MATLAB软件对皮孔及微裂缝面积,角质层蜡厚度进行统计,进而分析果面结构与轮纹病抗性的关系。结果表明,11份种质从抗病到感病果面皮孔大小、微裂缝面积与发病潜伏期呈负相关,与发病率、病斑大小呈显着正相关,其中‘鸡冠'抗病性最强,果面皮孔面积最小;‘金冠'、‘金矮生'最感病,果面皮孔面积较大且有大面积的独特结构微裂缝存在:因此不同种质果面皮孔大小、微裂缝面积与对轮纹病的抗性正相关,即果面皮孔小、微裂缝面积越少越抗病。11份种质从抗病到感病角质层蜡厚度与病斑大小呈显着负相关,表明角质层蜡厚度越大越抗病;感病品种‘金冠'、‘金矮生'的角质层蜡最薄,果面覆盖大量网络状微裂缝。本结果为今后研究角质层蜡与微裂缝关系奠定了基础。(本文来源于《中国园艺学会2014年学术年会论文摘要集》期刊2014-10-23）
赵梅[7]（2013）在《梨果实对炭疽病和轮纹病抗性生理的研究》一文中研究指出为进一步了解梨果对炭疽病和轮纹病的抗性机制,本研究主要评价了不同品种梨果对炭疽病菌和轮纹病菌抗的扩展能力,并重点探讨不同抗性品种梨果接种炭疽病菌和轮纹病菌后生理生化的变化,尤其是酚类物质的变化,为进一步揭示梨炭疽病和轮纹病抗性机理提供理论依据。为顺利开展梨果实抗性生理生化研究,本研究首先对梨幼果多酚提取方法进行优化,同时利用高效液相色谱对梨果实酚类物质的成分和含量进行了系统的分析,明确酚类物质在不同梨品种中分布情况。结果表明：1、采用正交试验对梨幼果果肉多酚物质提取工艺进行优化,并利用高效液相色谱法(HPLC)测定其多酚物质组成。提取温度和乙醇浓度对梨幼果多酚得率影响较为显着,梨幼果多酚最佳提取工艺组合为：乙醇浓度60%,提取温度70℃,提取时间2h,提取料液比1：30(g/mL),依照此工艺提取梨幼果多酚得率可达到1.47mg/g；从梨幼果中鉴定出熊果苷、表儿茶素、绿原酸、香草醛等9种酚类物质,其中熊果苷含量最高,为总含量的74.1%。2、利用高效液相色谱法对12个品种梨果实中酚类物质组分及含量进行研究,在所测的12个品种中,有3个品种检测到10种酚类物质,3个品种检测到9种酚类物质,剩余6个品种检测到8种酚类物质。同一种酚类物质在不同品种中含量变化范围较大,其中香草醛最高值是最低值的44倍,咖啡酸最高值是最低值的20倍。在测定的酚类物质中,绿原酸含量最高,达到62.2%,是主要的酚类物质,其次为儿茶素、表儿茶素,分别为2.87mg/100g、1.52mg/100g,也是梨果实中重要的酚类物质。根皮苷和槲皮素含量最低,分别为0.04mg/100g、0.05mg/100g。对梨果实中各酚类物质及其总含量进行相关性分析,结果表明,绿原酸与所测酚类物质的总含量呈极显着正相关,相关系数高达0.954**,各个酚类物质之间也存在一定的相关性。3、以抗性高的品种‘红那禾’和抗性低的品种‘色尔克甫’为材料,研究其接种炭疽病菌和轮纹病菌后总酚、过氧化氢含量及四种保护酶活性的变化。研究结果发现,‘红那禾’健康果肉总酚含量是‘色尔克甫’含量的4倍之多,在接种炭疽病菌或轮纹病菌后,‘红那禾’上升幅度较小,而‘色尔克甫’上升幅度较大,但在发病期间其含量一直低于‘红那禾’：接种病菌后,‘色尔克甫’果肉中H202含量一直上升,且上升幅度较大,而‘红那禾’果肉中H202含量变化相对稳定；接菌后,‘红那禾’前期SOD活性上升速度比‘色尔克甫’迅速：‘红那禾’CAT活性受病菌的影响较小,而‘色尔克甫’CAT活性受病菌的影响较大,前期变化缓慢,后期呈现明显的下降趋势：接种炭疽病菌,‘红那禾’和‘色尔克甫’两个品种POD活性都呈现先上升后下降再上升的变化趋势,但‘红那禾’下降时间晚于‘色尔克甫’,接种轮纹病菌,‘色尔克甫’开始呈现下降趋势,后期才呈现缓慢上升的趋势,‘红那禾’呈现先上升后下降再上升的变化趋势。两个抗性不同的梨品种在接种炭疽病菌或轮纹病菌后,PPO活性总体低于对照,其中抗性低的品种更甚。由此表明,总酚、H202、四种保护酶在梨果实受病菌侵染过程中,都具有重要作用。4、以抗性高的品种‘红那禾’和抗性低的品种‘色尔克甫’为材料,研究其接种炭疽病菌和轮纹病菌后酚类物质成分和含量的变化,结果表明,‘红那禾’健康果实中酚类物质总含量及各个酚类物质含量分别比‘色尔克甫’高。其中,咖啡酸、表儿茶素、香草醛、绿原酸分别是‘色尔克甫’的5.54倍、4.71倍、3.79倍、3.65倍。抗性高的品种在接种炭疽病菌或轮纹病菌后,多种酚类物质在病害发展过程中下降较多,其与抑制病原菌的生长有密切关系。研究还发现,减少的酚类物质多数在后期含量增加,以进一步抵抗病原菌的侵害。而抗性低的品种在接种炭疽病菌和轮纹病菌后分别有3种(咖啡酸、表儿茶素、芦丁)和7种酚类物质(咖啡酸、表儿茶素、香草醛、芦丁、儿茶素、阿魏酸、绿原酸)在病害发生过程中不断增加,说明在病害发生后,这些酚类物质能够在病健交界处、病斑部位积累,对抵御病害有一定作用。所测两个品种健康果肉中均未检测到槲皮素,接种炭疽病菌和轮纹病菌后,在病健交界处和病斑部位分别检测出来。5、对101个梨品种成熟果实抗炭疽病菌和轮纹病菌扩展能力进行评价、聚类分析,并对其抗病菌扩展能力与生理指标作相关分析。聚类分析结果表明,101个梨品种果实对两种病菌抗扩展能力均可分为五类即抗扩展性强、较强、中等、较弱、弱。其中对炭疽病菌和轮纹病菌抗扩展性中等的品种最多,分别占供试品种40.6%和35.6%,而对这两种病菌抗扩展性弱的品种最少,分别占供试品种5.9%和2.0%。相关分析表明,果肉总酚含量分别与果实抗炭疽病菌和轮纹病菌的扩展能力呈极显着和显着正相关：果肉石细胞含量与果实对这两种病菌抗扩展的能力均呈正相关,其中与轮纹病达到极显着水平。(本文来源于《南京农业大学》期刊2013-06-01）
都贝贝[8]（2013）在《苹果轮纹病抗性相关miRNA的筛选》一文中研究指出miRNA是内源的非编码小RNA,主要长度在18nt-25nt,在转录水平上抑制翻译或者降解靶基因来调控mRNA的表达。miRNA在植物和动物基因的表达中都起到重要的调控作用(Unver et al.,2009),在植物中,miRNA主要与生长发育(David et al.,2004)、信号转导(Jones et al.,2006)、蛋白降解(Chen et al.,2005)和抑制环境胁迫、病菌侵染(Zhang et al.,2006)等有关。随着苹果栽培品种的不断更新,富士苹果已经成为我国的主要栽培品种。在我国苹果的主要产区,每年由于各种病害的发生,导致苹果产业遭受了巨大的经济损失。苹果轮纹病(Apple ring rot)是当前苹果生产上最严重的病害之一,而目前的主栽品种富士苹果是苹果轮纹病的易感品种。湖北海棠是一种重要的苹果砧木,对苹果轮纹病有较好的抗性。比较感病品种富士苹果和抗病品种湖北海棠的miRNA,对于研究和提高主栽品种富士苹果对苹果轮纹病的抗性有着重要的意义。主要研究成果如下：1.通过高通量测序富士苹果未经处理的茎,我们发现了165个miRNA属于49个miRNA家族,对这些已知家族的miRNA进行靶基因预测,预测结果表明靶基因大多编码转录蛋白,这一结果与其他植物中的研究结果相类似。此外,我们还预测了380个新的候选miRNA,并用半定量PCR检测了其在茎和叶中的表达,发现其表达具有组织器官的特异性。本研究发现的已知家族的miRNA和新的候选miRNA在进一步研究富士苹果生长发育中起着重要作用。2.通过高通量测序湖北海棠未经处理的茎,发现165个miRNA属于52个miRNA家族,对这些已知家族的miRNA进行靶基因预测,预测结果表明靶基因大多编码转录蛋白,这一结果与其他植物中的研究类似。此外,我们还预测了821个新的候选miRNA,并用半定量PCR检测了表达量高的新候选miRNA在茎和叶中的表达差异,发现其表达具有组织器官的特异性。本研究发现的已知家族的miRNA和新的候选miRNA为研究湖北海棠收集、保存、评价和利用提供了科学依据。3.通过高通量测序比较苹果轮纹病抗性不同品种富士苹果和湖北海棠中的miRNA,发现了11个差异表达的miRNA,与富士比其中湖北海棠9个miRNA是上调表达的,2个miRNA是下调表达的,分析了miRNA靶基因的功能,发现与植物逆境胁迫相关,这表明这些miRNA可能与苹果轮纹病抗性相关的。对进一步提高主要栽培品种富士苹果抵抗苹果轮纹病具有重要的意义。4.利用高通量测序研究被苹果轮纹病侵染的富士苹果和湖北海棠的miRNA。研究发现了24个可能与苹果轮纹病菌侵染相关的miRNA并用荧光定量PCR鉴定了其中四个的表达模式。结果显示naiRNA的表达在病菌侵染的不同时期呈动态变化,且表达量都在侵染后9h和24h时显着增加。初步鉴定,这些miRNA在苹果轮纹病的侵染过程中起着重要的作用。(本文来源于《南京农业大学》期刊2013-05-01）
吕东[9]（2012）在《湖北海棠MhRar1、MhSgt1基因转化苹果提高轮纹病抗性的研究》一文中研究指出RAR1和SGTl是植物抗性(resistance, R)基因介导的抗病防卫途径中的两个重要信号元件,在R蛋白下游和活性氧产生之间发挥作用。为探索Rarl和Sgtl类基因在异源植物体内的表达特性及其在植物抗病反应方面的功能,开展了本研究。本文研究了rDNA-ITS序列在苹果轮纹病病原菌分类鉴定中的作用,以及该序列的变异情况与菌落生物学特性、致病能力间的联系,筛选了离体条件下诱导产生苹果轮纹病分生孢子的有效途径,为转基因植株抗病性检测提供了材料。在实验室原有转化体系的基础上,采用农杆菌介导法,将从抗病性较强的湖北海棠(Malus hupehensis)中克隆的MhRarl基因和MhSgtl基因,分别转入模式植物烟草(Nicotiana tabacum)和感病苹果品种长富6号(Nagafuji No.6).并通过烟草灰霉病病原菌(Botrytis cinerea Pevs.)和苹果轮纹病病原菌[Botryosphaeria berengeriana de Notf. sp. Piricola (Nose)],对转基因植株进行侵染,以验证两种基因在烟草和苹果抗病反应中的作用。研究结果如下：1.以来自不同地区的10个苹果轮纹病菌株为研究对象,采用通用引物ITS1和ITS4对rDNA-ITS区进行PCR扩增和克隆测序,通过序列比对发现有5个菌株在ITS1区序列上存在变异的碱基。通过同源性比较和生物信息学分析,构建了系统进化树,发现10个菌株均属于轮纹病病原菌第I亚类。检测了变异菌株菌落的生长速度、产孢能力和致病效果与普通菌株的差异。发现碱基变异程度较大的菌株,其菌丝生长速度、产孢能力和侵染效果,都要优于变异较少或未发生变异的菌株。同时研究了培养基种类、pH、培养温度、光源和光照条件对菌丝体生长和分生孢子发生的影响以及刮除菌丝体对分生孢子发生的影响。综合比较后确定轮纹病菌落生长的适宜条件为25-30℃、pH5.0-7.0的马铃薯培养基,接种后在黑光灯和日光灯下交替培养有利于分生孢子囊和分生孢子的快速产生；菌丝体生长到一定程度后,刮除菌丝体对产生大量分生孢子有显着促进作用。2.用农杆菌介导法将上述两种基因分别转入烟草,抗性苗诱导率为61.02%和55.58%。对Hyg阳性株系依次进行PCR和RT-PCR检测,最终筛选出11个转MhRarl烟草株系和8个转MhSgtl株系。通过对接种病菌后离体叶片和植株进行抗病性鉴定和抗氧化酶(SODPODCAT)活性检测,发现转化两种基因的烟草的离体叶片可以表现出对灰霉病的抗性,而且被侵染后转基因植株体内叁种抗氧化酶活性和MDA含量的指标都高于对照。转化两种基因的烟草植株经自交结实产生的T1代种子同样表现出Hyg抗性,且幼苗在灰霉病侵染下生长良好,初步说明转基因特性能够稳定遗传,而且两种基因的转化具有一定的提高植株抗真菌病害的能力。3.根据实验室已有的再生和转化体系,利用农杆菌介导法将MhRarl和MhSgtl基因分别转入富士苹果,转化率为2.47%和1.53%。对Hyg阳性植株依次进行PCR和RT-PCF检测,最终筛选出6个转MhRarl苹果株系和3个转MhSgtl株系。对苹果轮纹病孢子侵染后的转基因植株,进行了体内抗氧化酶活性(SODPODCAT)和MDA含量的检测。发现苹果转基因植株在被病菌侵染后抗氧化酶活性迅速升高,而MDA变化则相对平缓,从而初步验证了两种基因在苹果中的表达特性和提高苹果抗病能力的应用潜力。(本文来源于《南京农业大学》期刊2012-05-01）
孙月丽,于秋香,徐继忠[10]（2011）在《皮孔的组织结构与苹果枝干轮纹病抗性的关系》一文中研究指出以‘鸡冠’、‘礼泉短枝’及苹果砧木的实生后代为试材,对其皮孔组织结构与抗轮纹病菌侵染能力和抗病性的相关性进行了研究。结果表明:不同抗性试材的抗侵染能力与抗病性基本一致;不同的抗性材料间的皮孔组织结构存在着差异,抗性试材皮孔开裂较晚,封闭层多导致分层明显,补充组织多,栓内层细胞排列紧密,可有效的阻碍轮纹病菌孢子的入侵。感性试材的皮孔组织结构与之相反。(本文来源于《河北农业大学学报》期刊2011年06期）
轮纹病抗性论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
使用树干分段级数加权的方法进行田间自然病情调查,并结合田间接种和离体枝条接种的方法对秦冠×富士杂交F1代进行抗病性鉴定,分析了各抗性指标的次数分布和正态分布,以及各抗性指标间的相关性,研究了苹果杂交F_1代枝干轮纹病抗性的遗传规律。结果表明,皮孔密度和大小与轮纹病抗性各指标间没有显着相关性;田间自然感病的级数加权感病高度和加权感病级数与田间接种的感病指数均呈显着正相关;苹果杂交F_1代枝干轮纹病感病指数和离体侵染率均表现广泛分离,呈偏正态分布。可见:皮孔密度和大小不宜作为枝干轮纹病抗性的直接鉴定指标;田间接种较离体接种更适合与田间自然病情调查相结合对枝干轮纹病抗性进行评价;苹果枝干轮纹病抗性是数量性状,可进一步对其进行QTL定位等研究,以期更早实现分子抗病性育种。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
轮纹病抗性论文参考文献
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