王婷:谷氨酸棒状杆菌CRISPR-Cpf1/ssDNA基因组编辑系统优化论文

王婷:谷氨酸棒状杆菌CRISPR-Cpf1/ssDNA基因组编辑系统优化论文

本文主要研究内容

作者王婷,马洪坤,赵桂红,蔡柠匀,张德志,陈宁(2019)在《谷氨酸棒状杆菌CRISPR-Cpf1/ssDNA基因组编辑系统优化》一文中研究指出:谷氨酸棒状杆菌作为重要的微生物细胞工厂,基因组修饰已经成为调节目标代谢物的首要途径。为了提高基因定点突变的编辑效率,建立了高效省时的CRISPR-Cpf1/ssDNA基因组编辑系统。利用卡那霉素抗性作为筛选标记,构建了1株严谨的单链模式菌M-1,用于验证与统计编辑效率。首先,采用强启动子Ptuf,优化了切割效率;其次,利用重组酶Rec T和合理长度与添加量的ssDNA,优化了重组效率。实验结果显示:在启动子Ptuf和Rec T的双重作用下,采用滞后链(70 bp、12. 5μg)优化组合方式,使基因编辑效率提升至(80±5. 7)%。由Rec T介导的CRISPR-Cpf1/ssDNA基因组编辑系统可在很大程度上加快谷氨酸棒状杆菌代谢工程改造。

Abstract

gu an suan bang zhuang gan jun zuo wei chong yao de wei sheng wu xi bao gong an ,ji yin zu xiu shi yi jing cheng wei diao jie mu biao dai xie wu de shou yao tu jing 。wei le di gao ji yin ding dian tu bian de bian ji xiao lv ,jian li le gao xiao sheng shi de CRISPR-Cpf1/ssDNAji yin zu bian ji ji tong 。li yong ka na mei su kang xing zuo wei shai shua biao ji ,gou jian le 1zhu yan jin de chan lian mo shi jun M-1,yong yu yan zheng yu tong ji bian ji xiao lv 。shou xian ,cai yong jiang qi dong zi Ptuf,you hua le qie ge xiao lv ;ji ci ,li yong chong zu mei Rec The ge li chang du yu tian jia liang de ssDNA,you hua le chong zu xiao lv 。shi yan jie guo xian shi :zai qi dong zi Ptufhe Rec Tde shuang chong zuo yong xia ,cai yong zhi hou lian (70 bp、12. 5μg)you hua zu ge fang shi ,shi ji yin bian ji xiao lv di sheng zhi (80±5. 7)%。you Rec Tjie dao de CRISPR-Cpf1/ssDNAji yin zu bian ji ji tong ke zai hen da cheng du shang jia kuai gu an suan bang zhuang gan jun dai xie gong cheng gai zao 。

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  • 论文详细介绍

    论文作者分别是来自食品与发酵工业的王婷,马洪坤,赵桂红,蔡柠匀,张德志,陈宁,发表于刊物食品与发酵工业2019年19期论文,是一篇关于谷氨酸棒状杆菌论文,优化论文,基因组编辑论文,食品与发酵工业2019年19期论文的文章。本文可供学术参考使用,各位学者可以免费参考阅读下载,文章观点不代表本站观点,资料来自食品与发酵工业2019年19期论文网站,若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权,请联系我们删除。

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