薯蓣皂苷酶论文-张永利

薯蓣皂苷酶论文-张永利

导读:本文包含了薯蓣皂苷酶论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献,主要关键词:盾叶薯蓣,内生菌,皂苷酶,酶解法

薯蓣皂苷酶论文文献综述

张永利[1](2014)在《产盾叶薯蓣皂苷酶内生菌的筛选及酶的初步分离》一文中研究指出薯蓣皂素为合成甾体激素类药物的重要前体物质,其本身也具有重要的生物活性。薯蓣皂素在盾叶薯蓣植物中主要以甾体皂苷的形式存在,所以传统的生产皂素的方法是用酸性水溶液将药材中的甾体皂苷水解为皂素,但是该方法会产生大量的废水,对环境造成极大的污染且难处理。酶解法温和、环保,是生产薯蓣皂素的新思路。本文以盾叶薯蓣为研究对象,对产薯蓣皂苷酶内生菌的筛选、产薯蓣皂苷酶高效菌的筛选、高效菌生长与产酶关系、薯蓣皂苷酶酶解效率进行了研究,并对薯蓣皂苷酶的提取分离进行了初步研究。主要研究结果如下:(1)采用贴片法和涂布法从盾叶薯蓣植物的根状茎中分离得到内生细菌5株,内生真菌2株。分别用添加了皂苷底物的培养基对内生菌进行固体平板培养和液体摇瓶发酵,用萃取法得到菌株发酵物的提取物;并用薄层层析法和高效液相色谱法对提取物进行薯蓣皂素检测,发现2株内生真菌(SYfx1 13.1、SYfx2 13.2)和2株内生细菌(SYbx313.3、SYbx413.4)的产物中均有薯蓣皂素。(2)用高效液相色谱法对产生的薯蓣皂素进行分析,得SYfx213.2菌转化生成的皂素含量最高,确定SYfx213.2菌为产薯蓣皂苷酶的高效菌。运用光学显微镜和扫描电镜观察高效菌的形态、结构特征,初步鉴定为曲霉属。(3)研究了SYfx213.2菌生长与产薯蓣皂苷酶之间的关系,菌体的生物生长量在第6天达到最高为2.6g/L,第8天产酶情况最好,皂素生成率为65.71%;用超声波破碎法、研磨法、硫酸铵分级沉淀法初步探索了薯蓣皂苷酶提取、分离过程,硫酸铵饱和度为60%时分离效果好。(本文来源于《西北农林科技大学》期刊2014-05-01)

赖颖,赵锦慧[2](2012)在《穿山龙薯蓣皂苷酶酶学性质研究》一文中研究指出通过对不同硫酸铵饱和度沉淀所得的牛肝中皂苷酶活力的比较,筛选出较高生物活性皂苷酶,确定了最佳硫酸铵饱和度为55%.酶性质及酶反应最适条件的研究表明:水解穿山龙皂苷的酶反应最佳底物浓度为2%、最佳酶反应时间为4h、最适反应温度为42℃、最适pH值为5.0.(本文来源于《周口师范学院学报》期刊2012年05期)

王颖,富瑶瑶,刘廷强,鱼红闪,金凤燮[3](2010)在《发酵产薯蓣皂苷酶的反应条件》一文中研究指出研究了酶法水解黄姜薯蓣皂苷分子上的糖基,使皂苷水解生成无糖基、高活性皂苷元的条件。探讨了4种菌株对薯蓣皂苷糖基的水解能力,筛选出1种薯蓣皂苷酶高产菌株Absidia sp.s00,用于水解薯蓣皂苷。通过薄层层析法分析得到薯蓣皂苷酶解最佳反应条件为40℃p、H 5.0,反应30 h。在此最佳条件下进行酶反应,1 g黄姜薯蓣皂苷底物水解后,酶解产物经分离纯化,得薯蓣皂苷元0.1 g,采用高效液相色谱检测其纯度为90%以上。(本文来源于《大连工业大学学报》期刊2010年03期)

富瑶瑶[4](2010)在《两种特异的柴胡皂苷酶和薯蓣皂苷酶特性的研究》一文中研究指出苷类是中草药的有效成分之一。但天然苷类物质并不是生理活性最佳的分子结构,皂苷口服后在体内经过肠道菌和消化系统酶的作用,转化为低糖基、次生苷被吸收而起药效。本文目的是利用生物酶法在体外将天然皂苷转化成易吸收、药效高的结构。为了得到高活性、易吸收的低糖基的柴胡皂苷及薯蓣皂苷,本文从微生物中获得了与传统糖苷酶性质不同的新型皂苷酶,并对新型柴胡皂苷酶和薯蓣皂苷酶进行了分离纯化、酶学性质、酶催化水解作用,及定向转化的研究。采用缓冲液抽提、硫铵沉淀、离子交换层析、凝胶电泳法从两种微生物Aspergillus oryzae c42和Absidia sp. d38中分别分离纯化了柴胡皂苷酶及薯蓣皂苷酶。柴胡皂苷酶被纯化了56倍,收率为1.4%;薯蓣皂苷酶被纯化了7.8倍,收率为3.6%。柴胡皂苷酶最适反应温度为40℃,最适pH为5.0;Cu++,Hg++,Ag+对酶活力有抑制作用,Ca++和Mg++对酶活力有激活作用。该酶在60℃以下、pH 4.0~7.0相对稳定。SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳测定该单亚基酶分子量约为58 kDa。薯蓣皂苷酶最适反应温度为40℃,最适pH为5.0;Cu++,Hg++对酶活力有抑制作用;Mg2+对酶活力有激活作用。该酶在50℃以下、pH 5.0~6.0相对稳定。SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳测定该单亚基酶分子量约为55 kDa。在柴胡皂苷酶的研究中发现,柴胡皂苷酶可以水解柴胡皂苷A(含有环氧醚键)和柴胡皂苷B2(不含环氧醚键)。首先将柴胡皂苷的3-O-β-D-(1→3)-Glc水解,形成3-O-β-D-Fuc-柴胡皂苷元,然后进一步水解3-O-β-D-Fuc-柴胡皂苷元的3-O-β-D-Fuc形成不带糖基的柴胡皂苷元。柴胡皂苷酶对糖基位置及苷元结构的选择性高,能较好的水解叁萜类皂苷(柴胡皂苷),对糖基种类选择性低,可以水解3-C位的Glc、Fuc等不同种类糖基;对甾体类皂苷(薯蓣皂苷)不水解。在薯蓣皂苷酶的研究中发现,薯蓣皂苷酶首先将薯蓣皂苷的两个3-O-α-L-(1→4)-Rha和3-O-α-L-(1→2)-Rha水解,生成3-O-β-Glc-薯蓣皂苷元,然后进一步水解3-O-β-D-Glc-薯蓣皂苷元的3-O-β-D-Glc生成不带糖基的薯蓣皂苷元。薯蓣皂苷酶还能将3-O-[α-L-(1→4)-Ara,α-L-(1→2)-Rha]-β-D-Glc-薯蓣皂苷元的3-O-α-L-(1→2)-Rha水解,生成3-O-α-L-Ara-β-D-Glc-薯蓣皂苷元,然后进一步水解α-L-(1→4)-Ara生成3-O-β-D-Glc-薯蓣皂苷元,最后水解3-O-β-D-Glc生成不带糖基的薯蓣皂苷元。薯蓣皂苷酶仅对甾体类皂苷(薯蓣皂苷、3-O-[α-L-(1→4)-Ara,α-L-(1→2)-Rha]-β-D-Glc-薯蓣皂苷元)具有较好的水解作用,对叁萜类皂苷(柴胡皂苷、白头翁皂苷及朱砂根皂苷)不具有水解作用。该酶糖基种类的选择性不高,可以水解Glc、Ara、Rha等不同种类糖基,但对糖基位置苷元种类具有较高的选择性,只能水解甾醇类皂苷。定向转化柴胡皂苷时,柴胡皂苷酶在底物浓度20 mg/mL,40℃,pH 5.0条件下,反应24h水解20g柴胡皂苷得粗产物23.78g。柴胡皂苷酶经60%回收后仍具有很高的酶活力,其转化率大于60%。酶解产物经硅胶柱层析法分离纯化后,回收率为79.55%,水解掉两个糖基的柴胡皂苷单体(酶解产物Ⅰ)得率为21.85%,水解掉一个糖基的柴胡皂苷单体(酶解产物Ⅱ)得率为4.45%。经HPLC测定纯度达90%左右。定向转化薯蓣皂苷时,薯蓣皂苷酶在底物浓度15 mg/mL,40℃,pH 5.0条件下,反应30h水解20g薯蓣皂苷得粗产物22.54g。薯蓣皂苷酶经60%回收后仍具有很高的酶活力,其转化率大于60%。酶解产物经硅胶柱层析法分离纯化后,回收率为91.8%,薯蓣皂苷元单体得率为20.85%,3-O-β-D-Glc-薯蓣皂苷元单体得率为39.8%;3-O-α-L-Rha-β-D-Glc-薯蓣皂苷元单体得率为12.85%。经HPLC测定纯度达90%左右。柴胡皂苷酶和薯蓣皂苷酶对糖基位置及苷元结构的选择性高,柴胡皂苷酶不水解薯蓣皂苷、薯蓣皂苷酶不水解柴胡皂苷;两种酶对糖基种类的选择性低、能够水解多种糖基;这不同于国际酶学委员会认定的“一种糖昔酶只能水解一种糖苷键”的规律;柴胡皂苷酶和薯蓣皂苷酶是新发现的特异酶。本文在证明酶法定向转化柴胡皂苷及薯蓣皂苷制备低糖基皂苷或苷元的可行性的同时,为深入研究糖苷酶由其是皂苷糖苷酶奠定了一定的实验基础。(本文来源于《延边大学》期刊2010-03-28)

薯蓣皂苷酶论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

通过对不同硫酸铵饱和度沉淀所得的牛肝中皂苷酶活力的比较,筛选出较高生物活性皂苷酶,确定了最佳硫酸铵饱和度为55%.酶性质及酶反应最适条件的研究表明:水解穿山龙皂苷的酶反应最佳底物浓度为2%、最佳酶反应时间为4h、最适反应温度为42℃、最适pH值为5.0.

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

薯蓣皂苷酶论文参考文献

[1].张永利.产盾叶薯蓣皂苷酶内生菌的筛选及酶的初步分离[D].西北农林科技大学.2014

[2].赖颖,赵锦慧.穿山龙薯蓣皂苷酶酶学性质研究[J].周口师范学院学报.2012

[3].王颖,富瑶瑶,刘廷强,鱼红闪,金凤燮.发酵产薯蓣皂苷酶的反应条件[J].大连工业大学学报.2010

[4].富瑶瑶.两种特异的柴胡皂苷酶和薯蓣皂苷酶特性的研究[D].延边大学.2010

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