导读:本文包含了多肽接枝聚论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:周围神经,免疫抑制剂,FK506,NGF
多肽接枝聚论文文献综述
征华勇[1]（2009）在《复合FK506/NGF/RGD多肽接枝聚（羟基乙酸-L-赖氨酸—乳酸）缓释膜应用于同种异体神经移植的实验研究》一文中研究指出一、研究背景与目的由于创伤、肿瘤等致大段周围神经缺损、变性、坏死等临床上较为常见。治疗上往往需要移植物来桥接、促进和引导神经再生。一直以来自体神经移植是修复周围神经缺损最理想的手术方法,在临床上已广泛应用,也是衡量各种神经桥接材料的“金标准”。但往往会造成供体神经支配区感觉、功能障碍,且自体神经来源有限。同种异体神经移植可以解决上述问题,但如何降低或消除免疫排斥反应并加速神经生长是临床工作者和基础科研人员所面临的难题。本实验针对上述两个难题,用RGD(精氨酸—甘氨酸—天冬氨酸Arg-Gly-Asp)高分子材料并加入FK506(免疫抑制剂)、NGF(神经生长因子)合成缓释膜外用于移植段神经周围,探讨其促进神经再生的效果。二、方法1、选取8只健康成年SD雄性大鼠,体重180～200g,在显微镜下分离并切取双侧坐骨神经,制成10mm神经段,用干燥无菌试管分装置于—196℃液氮中,保存3周,术前取出后常温复温。2、选取体重180～200g,雄性SD大鼠40只为受体,随机分为4组,每组10只。A组:单纯冷冻异体神经移植组;B组:冷冻异体神经联合应用FK506/RGD复合缓释膜移植组;C组:自体神经移植组;D组:冷冻异体神经联合应用FK506/NGF/RGD复合缓释膜移植组。用浓度为0.4%的戊巴比妥钠(40mg/kg)注入腹腔麻醉大鼠。麻醉满意后,将大鼠俯卧固定于手术板上。左股后外侧区备皮,常规术野消毒、铺巾。沿左大腿后外侧作纵行切口,切开皮肤及皮下组织。钝性分离股二头肌与半腱肌、半膜肌,充分暴露坐骨神经,在距梨状肌下缘下5mm处切断并切除坐骨神经10mm,然后移植已处理的供体神经。B组移植段神经外用FK506/RGD复合缓释膜包裹,D组外用FK506/NGF/RGD复合缓释膜包裹,缓释膜两端分别固定于神经外膜上。术后分笼喂养12周。3、术后对各组大鼠进行大体观察,于术后12周先进行神经电生理学检测,然后取双侧小腿叁头肌进行恢复率测定、最后分别在光镜和电镜下对移植段神经进行组织形态学观察及超微结构测定。叁、结果1、大体观察:术后1周内各组大鼠行动困难,精神萎靡,进食少,各组动物手术切口均未发生感染。术后第2周各组大鼠均不同程度地出现术侧小腿及部分足趾出现红肿甚至溃疡,第8周时所有大鼠足底的红肿和溃疡均消退。术后4周时各组大鼠术侧腿部肌肉出现不同程度的萎缩。术后8周时B、C、D组大鼠术侧萎缩的肌肉开始恢复,其中D组大鼠恢复最为明显。术后12周术取材时显露移植段神经,除A组与周围组织有粘连外,其余各组与周围组织界限清晰,且神经吻合口光滑,连续性良好,粗细均匀,质地柔软,显微镜下可清楚地观察到神经外膜丰富的新鲜血管。缓释膜已明显变脆、变薄。2、电生理检测:各组运动神经传导速度的测定结果经统计分析显示:四组之间有统计学差异(F=26.190,P=0.000),D组优于A、B、C组(P<0.05,差异有统计学意义);B、C组优于A组(P<0.05,差异有统计学意义);B、C两组相比较无显着性差异(P=0.348>0.05,差异无统计学意义)。3、小腿叁头肌湿重恢复率测定结果:术后12周,所有大鼠术侧即左侧小腿叁头肌均有萎缩,小腿叁头肌恢复率测定结果经统计分析显示:四组之间有统计学差异(F=19.132,P=0.000),D组优于A、B、C组(P<0.05,差异有统计学意义);B、C组优于A组(P<0.05,差异有统计学意义);B、C两组相比较无显着性差异(P=0.351>0.05,差异无统计学意义)。4、HE染色:术后12周移植段神经制作切片,HE染色显示:A组神经神经束膜比较模糊,再生神经纤维数目较少、轴突排列分布零散,走向紊乱;B、C两组神经神经束膜比较清晰,再生神经纤维数目较多、轴突排列分布比较均匀,走向基本一致;D组神经神经束膜清晰,再生神经纤维数目最多、且清晰可见,轴突排列整齐规则,分布均匀,走向一致。5、亚甲蓝髓鞘染色:术后12周,移植段神经行半薄切片,亚甲蓝髓鞘染色显示:A组神经纤维密度稀疏,大小不均匀,髓鞘厚度薄,形状各异;B、C两组神经纤维密度较大,大小相对均匀,有髓神经多;D组神经纤维密度最大,有髓神经较多,髓鞘较厚,多呈圆形。6、图像分析:术后12周,图像分析显示:四组之间的有髓神经纤维数目、轴突直径、髓鞘厚度差异均有统计学差异(F=194.918,P=0.000;F=54.342,P=0.000;F=109.294,P=0.000;),D组有髓神经纤维数目、轴突直径、髓鞘厚度均大于A、B、C组(P<0.05,差异有统计学意义);B、C组有髓神经纤维数目、轴突直径、髓鞘厚度均大于A组(P<0.05,差异有统计学意义);B、C两组有髓神经纤维数目、轴突直径、髓鞘厚度相比较均无显着性差异(P=0.058>0.05;P=0.412>0.05 P=0.219>0.05差异均无统计学意义)。7、S-100免疫组化染色:术后12周移植段神经制作切片,S-100免疫组化染色显示:A组、B组、C组、D组再生神经S-100免疫组化染色均呈阳性。其中D组阳性反应最强,B组、C组阳性反应较强,A组阳性反应最弱。8、透射电子显微镜下超微结构:术后12周,移植段神经行超薄切片,铀—铅复染色显示:A组图片视野里可见结蒂组织无定形结构中夹杂着变性神经纤维,其髓鞘厚薄不一,雪旺氏细胞器及有髓轴突稀少,部分再生轴突髓鞘馈变;B、C组图片视野里可见较多神经纤维髓鞘增厚和比较丰富的雪旺氏细胞器,正常成熟神经纤维与变性神经纤维共存,比例相当;D组图片视野里可见大量神经纤维髓鞘增厚和丰富的雪旺氏细胞器,且正常成熟神经纤维居多。四、结论通过移植段神经局部运用含有免疫抑制剂(FK506)、神经生长因子(NGF)、RGD多肽接枝聚的缓释膜,不仅能够起到抗免疫排斥反应的效果,而且在很大程度上提高了神经生长速度,其各项检测结果好于其它各实验组,甚至有些指标已经超过了自体移植组。(本文来源于《南方医科大学》期刊2009-04-05）
严琼姣,李世普,殷义霞,李娟[2]（2008）在《RGD多肽接枝聚(乳酸-羟基乙酸-L-赖氨酸)的制备与表征》一文中研究指出以3S-[4-(苄氧羰基氨基)丁基]-吗啉-2,5-二酮和丙交酯为起始原料,制备一种新型的RGD多肽接枝聚(乳酸-羟基乙酸-L-赖氨酸)共聚物(PRGD)。采用核磁共振氢谱、氨基酸分析、接触角测试、MTT实验和环境扫描电镜对其结构和性能进行表征。研究结果表明:RGD接枝量为6.9～14.3μmol/g;PRGD膜和聚乳酸(PLA)膜的水接触角分别为43.63°和62.45°;PRGD膜表面黏附的嗅鞘细胞较PLA组活性高,细胞密度大,生长状态好。PRGD较PLA具有更好的亲水性和神经细胞亲和性,有望成为一种理想的神经修复材料。(本文来源于《中南大学学报(自然科学版)》期刊2008年06期）
董能让[3]（2008）在《RGD多肽接枝聚/FK506、NGF缓释膜促进大鼠坐骨神经再生的实验研究》一文中研究指出一、背景、目的及意义实验证明:神经生长因子(nerve growth factor,NGF)能够促进损伤的大鼠坐骨神经的再生和功能恢复。他克莫司(tacrolimus,FK506)是由链霉菌产生的大环内酯类抗生素,同时,它也是一种极强的免疫抑制剂,它的免疫抑制能力是环孢素的100倍,能抑制混合淋巴细胞反应、细胞毒性T细胞增殖、IL-2、IL-3和干扰素等白细胞源性可溶性介质的产生及IL-2受体的表达。但是,它也具有促进损伤的大鼠坐骨神经的再生和功能恢复,它们在促进损伤的周围神经再生和营养神经的功能方面的关系,Lyons W E等曾作过探索,他们发现PC12细胞的FK506结合蛋白(FK506-binding proteins,FKBPs)的含量可以被NGF上调,而且FK506能够提高PC12细胞对NGF的敏感性,使产生最大轴突再生效应的NGF的浓度减少20—50倍,然后他们运用抗NGF的抗体作用于鼠感觉神经节,发现可以显着减弱FK506的促进鼠感觉神经节轴突的再生效应。周围神经损伤后,远段神经及近段数个Ranvier氏结节发生华勒(Waller)氏变性,然后雪旺细胞增殖形成Bungner氏带,再生轴突再穿过此带向远处再生,因此雪旺细胞的增殖对神经再生起很重要的作用。杨俊等发现FK506可以促进雪旺细胞增殖和分泌NGF。吴志伟等也发现在FK506培养的人胚坐骨神经组织块中,雪旺细胞迁出组织块的时间、迁移的距离和雪旺细胞的活性明显优于对照组。Hanawa H等在动物实验中观察到0.1mg/kg/day,0.32 mg/kg/day和1.0mg/kg╱day叁种不同剂量的FK506肌肉注射治疗自身免疫性心肌炎的,用药组的炎症浸润程度都比对照组轻,且FK506的免疫抑制作用呈剂量依赖关系,剂量越大,炎症浸润程度越轻。但是,吴志伟等发现在FK506培养的人胚坐骨神经组织块中,雪旺细胞迁出组织块的时间、迁移的距离和雪旺细胞的活性等方面,在0.1ug/ml、1 ug/ml和10 ug╱ml等浓度的FK506之间无明显差别。对FK506在免疫抑制作用方面表现出剂量依赖性,而在影响雪旺细胞的方面却没有这样,Gold BG等解释是免疫亲和素FK506结合蛋白—52而不是免疫亲和素FK506结合蛋白—12介导了FK506的神经营养作用,而FK506的免疫抑制作用是以FK506与FK506结合蛋白—12为基础,免疫抑制和神经营养是通过两条不同的信号传导通路介导的。Sarikcioglu L等在坐骨神经挤压伤的大鼠中,利用神经鞘内注入0.05 mg/kg/day的FK506,发现此剂量也有益于损伤神经的再生。这也证明FK506局部用药和全身用药一样都有益于损伤周围神经的再生,且可以减少用量。基于以上事实,我们拟利用RGD多肽接枝聚复合FK506和NGF制成缓释膜,使FK506能够局部缓慢释放,又利用FK506与NGF的协同作用,更好地发挥FK506的促神经生长作用,为临床上发挥FK506的促神经再生和营养作用,又尽可能减少它的免疫抑制效应提供一定的科学依据。二、方法1、将24只雄性Wistar大鼠随机分成3组,每组8只,A组:RGD多肽接枝聚复合FK506和NGF缓释膜组,B组:RGD多肽接枝聚复合FK506缓释膜组,C组:RGD多肽接枝聚膜组。2、0.4%的戊巴比妥钠,1ml/100g腹腔注射麻醉大鼠。暴露左侧坐骨神经,切断,分别以对应的膜桥接。将坐骨神经置于膜中间,暂时将神经外膜各固定一针于膜的两端,剪断坐骨神经,任其回缩形成5mm缺损,然后将膜缝制成管状。A组膜FK506与NGF的含量分别为0.48mg和2ug,B组膜FK506的含量为0.72mg,C组对照组。3、术后3个月,暴露出双侧小腿叁头肌及复合膜桥接处的再生神经,观察实验测叁头肌的情况和再生神经的粗细、复合膜质地、吸收及与周围组织粘连情况,然后将刺激电极置于导管近端的神经干上,记录电极插入小腿叁头肌,采用丹麦产的诱发电位/肌电图监测仪4000型,测量坐骨神经的运动传导速度(MNCV)、复合肌肉动作电位(CMAP)和潜伏期。4、神经电生理检测完毕,快速切下再生的神经置入2.5%的戊二醛固定;接着完整切下双侧小腿叁头肌,实验测与健侧作比计算实验测小腿叁头肌的恢复恢复率。5、术后3个月,取复合膜远端的再生神经,用2.5%戊二醛固定2h以上,1%锇酸后固定1h,Epon812树脂定向包埋,半薄切片厚1.0微米,亚甲基蓝多色染液染色,在光镜下观察并记录神经生长的情况。图像分析采用HPIAS—1000彩色病理图文报告分析系统,测定再生神经中有髓神经纤维的数目、髓鞘厚度和轴突直径,对再生神经进行形态学分析。6、术后3个月,取复合膜远端的再生神经,用2.5%戊二醛固定2h以上,1%锇酸后固定1h,Epon812树脂定向包埋,超薄切片厚60nm,醋酸双氧铀-枸橼酸铅染液染色,在电镜下观察神经髓鞘及轴突的情况。7、实验数据采用统计软件SPSS11.5处理,数据均以(?)±s表示,差异以单因素方差分析,两组间均数比较用LSD法和S-N-K法。(α=0.05)叁、结果1、大体观察:术后14天左右A组有2只足部出现溃疡,B组有1只出现溃疡,C组1只出现溃疡,均于1周后愈合;小腿叁头肌均有不同程度萎缩,A组萎缩程度较B、C组轻:膜外形完整,但变软易碎,与周围组织无明显粘连;再生神经通过缺损,A组较粗,粗细与近端神经无明显差别。2、电生理检测:术后3个月,各组MNCV、CMAP波幅及潜伏期的检测结果(表1)。A组的MNCV大于B组,差异有统计学意义(P=0.016),A组的MNCV大于C组,差异有统计学意义(P=0.000),B组大于C组,差异有统计学意义(P=0.030);A组的CMAP高于B组,差异有统计学意义(P=0.049),A组的CMAP高于C组,差异有统计学意义(P=0.000),B组高于C组,差异有统计学意义(P=0.046);A组的潜伏期小于B组,差异有统计学意义(P=0.046),A组的潜伏期小于C组,差异有统计学意义(P=0.000),B组潜伏期小于C组,差异有统计学意义(P=0.049)。3、叁头肌湿重恢复率检测:术后3个月,小腿叁头肌湿重的恢复率(表2),A组大于B组,差异有统计学意义(P=0.050);A组大于C组,差异有统计学意义(P=0.000);B组大于C组,差异有统计学意义(P=0.044)。4、光镜观察:术后3个月,A组再生神经亚甲基蓝多色染液染色,见神经纤维密集、髓鞘厚,较大的神经纤维多、神经纤维大小差别小、能看到雪旺细胞胞质区的情况少;B组再生的神经纤维较稀疏、髓鞘较薄,较大的神经纤维少、神经纤维大小差别大、能看到雪旺细胞胞质区的情况较多;C组再生的神经纤维很稀疏、髓鞘亦薄,较大的神经纤维很少、神经纤维大小差别大、能看到雪旺细胞胞质区的情况多。5、图像分析:术后3个月,A组的有髓神经纤维计数多于B组,差异有统计学意义(P=0.041),A组的有髓神经纤维计数多于C组,差异有统计学意义(P=0.000),B组的有髓神经纤维计数多于C组,差异有统计学意义(P=0.001);A组的轴突直径大于B组,差异有统计学意义(P=0.034),A组的轴突直径大于C组,差异有统计学意义(P=0.000),B组大于C组,差异有统计学意义(P=0.042);A组的髓鞘厚于B组,差异有统计学意义(P=0.046),A组的髓鞘厚于C组,差异有统计学意义(P=0.000),B组髓鞘厚于C组,差异有统计学意义(P=0.016)。6、电镜观察:术后3个月,透射电镜结果显示:A组再生有髓纤维多,髓鞘完整,髓鞘形态好,且比B组和C组厚,C组最差,再生的有髓纤维少,排列较稀疏。四、结论FK506和NGF复合膜能有效地促进损伤的鼠坐骨神经的再生,而且FK506和NGF联合应用,可以减少免疫抑制剂FK506的用量。(本文来源于《南方医科大学》期刊2008-05-21）
多肽接枝聚论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
以3S-[4-(苄氧羰基氨基)丁基]-吗啉-2,5-二酮和丙交酯为起始原料,制备一种新型的RGD多肽接枝聚(乳酸-羟基乙酸-L-赖氨酸)共聚物(PRGD)。采用核磁共振氢谱、氨基酸分析、接触角测试、MTT实验和环境扫描电镜对其结构和性能进行表征。研究结果表明:RGD接枝量为6.9～14.3μmol/g;PRGD膜和聚乳酸(PLA)膜的水接触角分别为43.63°和62.45°;PRGD膜表面黏附的嗅鞘细胞较PLA组活性高,细胞密度大,生长状态好。PRGD较PLA具有更好的亲水性和神经细胞亲和性,有望成为一种理想的神经修复材料。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
多肽接枝聚论文参考文献
[1].征华勇.复合FK506/NGF/RGD多肽接枝聚（羟基乙酸-L-赖氨酸—乳酸）缓释膜应用于同种异体神经移植的实验研究[D].南方医科大学.2009
[2].严琼姣,李世普,殷义霞,李娟.RGD多肽接枝聚(乳酸-羟基乙酸-L-赖氨酸)的制备与表征[J].中南大学学报(自然科学版).2008
[3].董能让.RGD多肽接枝聚/FK506、NGF缓释膜促进大鼠坐骨神经再生的实验研究[D].南方医科大学.2008