本文主要研究内容
作者林伟东,隋修锟,王召阳,贾红,房立春,王海春,朱良全,鑫婷（2019）在《牛分枝杆菌MarP蛋白的表达纯化及其单克隆抗体制备》一文中研究指出：为制备能够特异性识别牛分枝杆菌（M.bovis）抗酸蛋白酶（MarP）的特异性单克隆抗体（MAb）,本研究利用大肠杆菌表达系统表达了MarP蛋白的胞浆区,并以β-casein为底物、DTT为抑制剂检测MarP的丝氨酸蛋白酶活性。以具有活性的MarP蛋白免疫小鼠,取脾细胞与SP2/0细胞融合,并加入饲养层细胞轻轻摇匀分装于96孔培养板,置于37℃、5%CO2培养箱内培养10 d,通过IFA和间接ELISA筛选阳性细胞株进行亚克隆,制备能分泌针对MarP MAb的杂交瘤细胞株,并通过Western blotting和ELISA检测MAb与重组表达和天然的MarP蛋白的反应性。结果显示,重组表达的MarP具有良好的丝氨酸蛋白酶活性,能够在12 h内将30μg的β-casein酶解完全,DTT能够抑制MarP的酶活性。具有活性的MarP蛋白免疫小鼠后,获得5株针对MarP的MAb,均能够特异性识别重组和牛分枝杆菌天然表达的MarP蛋白的线性表位,而不与大肠杆菌（E.coli）和耻垢分枝杆菌（M.smegmatis）的蛋白反应。本研究成功制备了MarP蛋白及MAb,为进一步研究MarP的作用底物及其在牛分枝杆菌抗酸胁迫中作用机制提供了必备材料。
Abstract
wei zhi bei neng gou te yi xing shi bie niu fen zhi gan jun （M.bovis）kang suan dan bai mei （MarP）de te yi xing chan ke long kang ti （MAb）,ben yan jiu li yong da chang gan jun biao da ji tong biao da le MarPdan bai de bao jiang ou ,bing yi β-caseinwei de wu 、DTTwei yi zhi ji jian ce MarPde si an suan dan bai mei huo xing 。yi ju you huo xing de MarPdan bai mian yi xiao shu ,qu pi xi bao yu SP2/0xi bao rong ge ,bing jia ru si yang ceng xi bao qing qing yao yun fen zhuang yu 96kong pei yang ban ,zhi yu 37℃、5%CO2pei yang xiang nei pei yang 10 d,tong guo IFAhe jian jie ELISAshai shua yang xing xi bao zhu jin hang ya ke long ,zhi bei neng fen bi zhen dui MarP MAbde za jiao liu xi bao zhu ,bing tong guo Western blottinghe ELISAjian ce MAbyu chong zu biao da he tian ran de MarPdan bai de fan ying xing 。jie guo xian shi ,chong zu biao da de MarPju you liang hao de si an suan dan bai mei huo xing ,neng gou zai 12 hnei jiang 30μgde β-caseinmei jie wan quan ,DTTneng gou yi zhi MarPde mei huo xing 。ju you huo xing de MarPdan bai mian yi xiao shu hou ,huo de 5zhu zhen dui MarPde MAb,jun neng gou te yi xing shi bie chong zu he niu fen zhi gan jun tian ran biao da de MarPdan bai de xian xing biao wei ,er bu yu da chang gan jun （E.coli）he chi gou fen zhi gan jun （M.smegmatis）de dan bai fan ying 。ben yan jiu cheng gong zhi bei le MarPdan bai ji MAb,wei jin yi bu yan jiu MarPde zuo yong de wu ji ji zai niu fen zhi gan jun kang suan xie pai zhong zuo yong ji zhi di gong le bi bei cai liao 。
论文参考文献
论文详细介绍
论文作者分别是来自中国畜牧兽医的林伟东,隋修锟,王召阳,贾红,房立春,王海春,朱良全,鑫婷，发表于刊物中国畜牧兽医2019年06期论文，是一篇关于牛分枝杆菌论文,抗酸论文,抗酸蛋白酶论文,单克隆抗体论文,丝氨酸蛋白酶论文,中国畜牧兽医2019年06期论文的文章。本文可供学术参考使用，各位学者可以免费参考阅读下载，文章观点不代表本站观点，资料来自中国畜牧兽医2019年06期论文网站，若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权，请联系我们删除。
标签：牛分枝杆菌论文; 抗酸论文; 抗酸蛋白酶论文; 单克隆抗体论文; 丝氨酸蛋白酶论文; 中国畜牧兽医2019年06期论文;