导读:本文包含了型鸭肝炎论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:血清3型鸭甲型肝炎病毒,TaqMan实时荧光定量PCR
型鸭肝炎论文文献综述
范鑫,吴凤瑶,卢凤英,晁锦,张敬峰[1]（2019）在《血清3型鸭甲型肝炎病毒TaqMan RT-qPCR检测方法的建立及初步应用》一文中研究指出根据GenBank中已发布的血清3型鸭甲型肝炎病毒(DHAV-3)基因序列,针对VP1基因序列的保守区域设计一对引物及一条特异性TaqMan探针建立了DHAV-3的TaqMan荧光定量检测方法(TaqMan RT-qPCR)。通过对反应条件和反应体系的优化,建立的TaqMan RT-qPCR方法在6.39×10~8～6.39×10~0拷贝/μL范围内具有良好的线性关系,R2值为0.999。该方法能特异地检测出DHAV-3,与血清1型鸭甲型肝炎病毒(DHAV-1)及其他常见鸭病病原无交叉反应,且组内和组间重复性试验变异系数均小于1%。用普通RT-PCR方法和建立的TaqMan RT-qPCR方法,对63份临床疑似鸭肝炎的肝组织样品进行检测,结果 RT-PCR方法检出DHAV-3的阳性率是34.92%(22/63),TaqMan RT-qPCR方法检出的阳性率是41.27%(26/63);对49份DHAV-3感染康复鸭的肛拭子样品进行检测,RT-PCR和TaqMan RT-qPCR方法检出阳性率分别为22.45%(11/49)和85.71%(42/49);用TaqMan RT-qPCR方法和鸡胚半数致死量法(ELD_(50))对DHAV-3(SD70株)鸡胚病毒含量进行检测比较,两种方法检测结果呈正相关。结果表明所建立的TaqMan RT-qPCR检测方法特异性好,灵敏度高,为DHA-3快速诊断和流行病学调查提供技术手段。(本文来源于《中国家禽》期刊2019年16期）
周珊,汪铭书,程安春,赵新新,贾仁勇[2]（2018）在《1型鸭肝炎病毒诱导鸭胚成纤维细胞自噬的研究》一文中研究指出引言1型鸭肝炎病毒(DHAV-1)属于小RNA病毒科禽肝病毒属,DHAV-1能否激活感染细胞自噬途径从而诱导鸭胚成纤维细胞(DEF)发生自噬的研究资料较为缺乏~([1-4]),此项工作有利于解析DHAV-1感染细胞与细胞自噬的关系。材料与方法用DHAV-1感染原代DEF,透射电镜观察自噬小体的形成与结构。将pE GFP-LC3转染至DEF,再(本文来源于《中国畜牧兽医学会2018年学术年会禽病学分会第十九次学术研讨会论文集》期刊2018-11-21）
李娴妍,李明朔,韩跃松,陈义旺,童艳梅[3]（2018）在《Ⅰ型和Ⅲ型鸭肝炎病毒双重RT-PCR检测方法的建立与优化》一文中研究指出为了快速鉴别诊断Ⅰ型和Ⅲ型鸭肝炎病毒(DHV),根据NCBI中发表的DHV毒株序列设计2对特异性引物,针对西南大学荣昌校区疾病快速诊断中心保存的DHV-Ⅰ型和DHV-Ⅲ型毒株进行了RT-PCR双重检测方法的建立及条件的优化试验。结果表明:所建立的方法可同时对两种血清型的DHV分别扩增出440 bp和642 bp的特异性条带,灵敏性可以达到18.7×10-1ng/μL;利用该方法对鸭瘟病毒、小鹅瘟病毒、鸭圆环病毒、番鸭细小病毒、鸭副黏病毒、新型鸭肝炎病毒进行扩增,扩增结果均为阴性。说明所建立的双重RT-PCR检测方法特异性好,具有较高的灵敏性,可用于DHV-Ⅰ型和DHV-Ⅲ型的鉴别诊断。(本文来源于《黑龙江畜牧兽医》期刊2018年14期）
顾玲玲,吴萌,朱善元,王安平[4]（2018）在《Ⅰ型鸭甲型肝炎病毒VP1基因在昆虫细胞中的表达及鉴定》一文中研究指出为在昆虫细胞中表达Ⅰ型鸭甲型肝炎病毒(DHAV-Ⅰ)的主要结构蛋白VP1,根据GenBank已发表的DHAV-ⅠSH株VP1基因序列,设计1对特异性引物,通过RT-PCR扩增VP1基因,将其克隆至杆状病毒转移载体pFastBac1,获得重组杆状病毒转移载体p FB-VP1,将其转化E.coli DH10Bac感受态细胞,经抗性、蓝白斑筛选及PCR鉴定后,构建重组穿梭质粒rBacmid-VP1。在脂质体介导下将重组质粒rBacmid-VP1转染昆虫细胞Sf 9,制备含有DHAV-ⅠVP1基因的重组杆状病毒rBac-VP1。Western blot结果显示,表达的重组蛋白VP1大小约27 ku,能与DHAV-ⅠVP1多克隆抗体发生特异性反应;间接免疫荧光检测结果显示,重组蛋白VP1能与DHAV-Ⅰ全病毒阳性血清发生特异性反应,细胞内出现较强的荧光。以上结果表明,在昆虫细胞中成功表达了具有免疫原性的DHAV-Ⅰ主要结构蛋白VP1。(本文来源于《河南农业科学》期刊2018年01期）
徐丽晶,赵丽丽,刘海燕,王怡平,陈洪岩[5]（2018）在《Ⅰ型鸭肝炎病毒和鸭瘟病毒一步法二重RT-PCR检测方法的建立》一文中研究指出为了建立一种能同时检测Ⅰ型鸭肝炎病毒(duck hepatitis virus typeⅠ,DHV-Ⅰ)和鸭瘟病毒(duck plague virus,DPV)的检测方法,根据Gen Bank中DHV-Ⅰ和DPV的基因保守序列,设计合成两对特异性引物,扩增得到DHV-Ⅰ和DPV片段,大小分别为399 bp和232 bp。据此建立了双重PCR检测方法,并将反应条件进行了优化。结果显示,该方法特异性强,能同时扩增出DHV-Ⅰ和DPV目的条带,而对其他常见的水禽病病原的扩增结果均为阴性。该方法灵敏度高,最低能检出5.3 pgⅠ型鸭肝炎病毒和2.7 pg鸭瘟病毒的RNA或DNA。采用该方法对在江苏省徐州地区所采集的166份鸭肛拭子进行检测,DHV-Ⅰ阳性率为1.2%;DPV阳性率为26%。同时,利用该方法对建立的DHV-Ⅰ和DPV雏鸭感染模型的肝组织和肝组织接种的鸭胚尿囊液进行检测,结果均为阳性,与常规PCR和RT-PCR检测结果一致。上述结果表明。本研究建立的一步法二重RT-PCR方法可以用于DHV-Ⅰ和DPV快速准确的诊断。(本文来源于《中国兽医科学》期刊2018年04期）
吴植,顾玲玲,朱善元,王安平[6]（2017）在《Ⅰ型鸭甲型肝炎病毒3C基因在昆虫细胞的表达与检测》一文中研究指出利用杆状病毒表达系统进行Ⅰ型鸭甲型肝炎病毒蛋白水解酶3C基因的表达研究。首先通过PCR方法扩增出3C基因,亚克隆至杆状病毒转移载体p Fast Bac1中,获得重组转座载体p FB-3C,随后将该重组质粒转化感受态细胞DH10Bac进行同源重组,经蓝白斑筛选及PCR鉴定后,获得重组杆状病毒穿梭质粒r Bacmid-3C,将其在脂质体介导下转染sf9昆虫细胞,获得重组杆状病毒r Bac-3C,并进行重组蛋白表达的检测。间接免疫荧光结果,鸭抗全病毒阳性血清能够与重组蛋白发生特异性结合。结果表明,DHAV-Ⅰ3C蛋白在sf9昆虫细胞中获得了成功表达。(本文来源于《江苏农业科学》期刊2017年23期）
赵丽丽,刘海燕,徐丽晶,王怡平,陆涛峰[7]（2017）在《Ⅰ型鸭肝炎病毒和鸭瘟病毒一步法PCR检测方法的建立》一文中研究指出目的为了建立快速检测Ⅰ型鸭肝炎病毒和鸭瘟病毒PCR方法。方法根据NCBI公布的来自我国不同省份的的Ⅰ型鸭肝炎病毒和鸭瘟病毒的基因序列,找出其保守序列,设计合成两对引物,在一个PCR反应管中进行PCR反应,并进行条件优化。结果该方法敏感性高,最低能检出5.3pg Ⅰ型鸭肝炎病毒和2.7pg鸭瘟病毒的RNA或DNA模板。其特异性强,对番鸭细小病毒(MDPV),鹅细小病毒(GPV),新城疫病毒(NDV)和流感病毒(AIV),鸭减蛋综合征病毒(EDSV),禽网状内皮组织增生症病毒(REV),鸭坦布苏病毒(DTMUV),禽呼肠弧病毒(ARV)8种病毒的检测均为阴性,Ⅰ型鸭肝炎病毒和鸭瘟病毒检测结果为阳性。用建立的方法检测了江苏徐州采集的100份样品,Ⅰ型鸭肝炎病毒和鸭瘟病毒的阳性率分别为1.2%和26%。结论建立了Ⅰ型鸭肝炎病毒和鸭瘟病毒一步法PCR检测方法。(本文来源于《第十叁届中国实验动物科学年会论文集》期刊2017-09-26）
张阿娥[8]（2017）在《Ⅰ型鸭肝炎病毒变异株感染雏番鸭的临床症状及病理学变化》一文中研究指出为研究Ⅰ型鸭肝炎病毒变异株感染雏番鸭的临床症状及病理变化,采用Ⅰ型鸭肝炎病毒变异株(VFY株)感染雏番鸭,观察感染雏番鸭的临床症状及其死亡时组织病理学变化。结果表明:Ⅰ型鸭肝炎病毒变异株感染雏鸭24 h时开始死亡,死亡高峰期为48～72 h,死亡率60%;发病雏番鸭短时间内停止运动,蹲伏并半闭眼,打盹,死前抽搐,双脚做划水样,死亡鸭呈角弓反张姿势。感染雏番鸭肝、肾、脾、胰、脑的组织病理变化分别表现为出血性、坏死性肝炎,肾小管变性及异嗜性白细胞浸润,坏死性脾炎,胰脏局灶性坏死及异嗜性粒细胞浸润和神经细胞的变性坏死。(本文来源于《福建畜牧兽医》期刊2017年05期）
郑文卿,宋敏训,李建亮,黄兵,李玉峰[9]（2017）在《表达1型和3型鸭甲型肝炎病毒VP1基因重组新城疫病毒的构建及其免疫原性》一文中研究指出为进一步研发安全有效的鸭甲型肝炎病毒(DHAV)多价疫苗,本研究以新城疫病毒(NDV)LaSota弱毒疫苗株为载体,构建出共表达DHAV-1和-3型VP1基因的重组病毒rLS-1VP1-2A-3VP1,并对其毒力、生物学特性进行鉴定。通过间接免疫荧光试验(IFA)验证DHAV-1和-3型VP1蛋白在细胞内能够有效表达。利用Western blot进一步验证重组病毒产生的中和抗体能和DHAV-1和DHAV-3VP1表达蛋白发生较强的反应。重组病毒rLS-1VP1-2A-3VP1保持了原重组疫苗株rLS-RFP对鸡胚的高滴度生长适应和低致病的特性。将重组病毒rLS-1VP1-2A-3VP1免疫种鸭1次,通过中和试验检测该重组病毒能够在鸭体内产生针对DHAV-1和DHAV-3的中和抗体,平均效价分别为1∶18.17和1∶16.60。本研究结果表明重组病毒rLS-1VP1-2A-3VP1具有作为鸭肝炎重组病毒活载体疫苗用于种鸭的潜力。(本文来源于《中国兽医学报》期刊2017年09期）
王安平,朱善元,王永娟,吴双,左伟勇[10]（2017）在《Ⅰ型鸭甲型肝炎病毒VP3基因在昆虫细胞中的表达与鉴定》一文中研究指出为在昆虫细胞中表达Ⅰ型鸭甲型肝炎病毒(Duck hepatitis A virus type-I,DHAV-I)SH株的主要结构蛋白VP3,首先根据DHAV-I SH株VP3基因序列设计1对引物,RT-PCR方法扩增出VP3基因,克隆至杆状病毒表达载体p Fast Bac1,获得重组杆状病毒转移载体p FB-VP3,将其转化到DH10Bac感受态细胞中,经抗性和蓝白斑筛选,获得重组穿梭质粒r Bacmid-VP3,在脂质体介导下转染昆虫细胞Sf9,获得重组杆状病毒r Bac-VP3。间接免疫荧光结果显示重组蛋白获得了正确表达,能与鸭抗全病毒阳性血清发生特异性反应。Western blot结果显示表达的重组蛋白分子量约为27 000。表明,DHAV-I SH株的主要结构蛋白VP3在昆虫细胞中获得了成功表达,为VP3结构蛋白的功能研究及相关亚单位疫苗的研制奠定了基础。(本文来源于《江苏农业学报》期刊2017年03期）
型鸭肝炎论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
引言1型鸭肝炎病毒(DHAV-1)属于小RNA病毒科禽肝病毒属,DHAV-1能否激活感染细胞自噬途径从而诱导鸭胚成纤维细胞(DEF)发生自噬的研究资料较为缺乏~([1-4]),此项工作有利于解析DHAV-1感染细胞与细胞自噬的关系。材料与方法用DHAV-1感染原代DEF,透射电镜观察自噬小体的形成与结构。将pE GFP-LC3转染至DEF,再
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
型鸭肝炎论文参考文献
[1].范鑫,吴凤瑶,卢凤英,晁锦,张敬峰.血清3型鸭甲型肝炎病毒TaqManRT-qPCR检测方法的建立及初步应用[J].中国家禽.2019
[2].周珊,汪铭书,程安春,赵新新,贾仁勇.1型鸭肝炎病毒诱导鸭胚成纤维细胞自噬的研究[C].中国畜牧兽医学会2018年学术年会禽病学分会第十九次学术研讨会论文集.2018
[3].李娴妍,李明朔,韩跃松,陈义旺,童艳梅.Ⅰ型和Ⅲ型鸭肝炎病毒双重RT-PCR检测方法的建立与优化[J].黑龙江畜牧兽医.2018
[4].顾玲玲,吴萌,朱善元,王安平.Ⅰ型鸭甲型肝炎病毒VP1基因在昆虫细胞中的表达及鉴定[J].河南农业科学.2018
[5].徐丽晶,赵丽丽,刘海燕,王怡平,陈洪岩.Ⅰ型鸭肝炎病毒和鸭瘟病毒一步法二重RT-PCR检测方法的建立[J].中国兽医科学.2018
[6].吴植,顾玲玲,朱善元,王安平.Ⅰ型鸭甲型肝炎病毒3C基因在昆虫细胞的表达与检测[J].江苏农业科学.2017
[7].赵丽丽,刘海燕,徐丽晶,王怡平,陆涛峰.Ⅰ型鸭肝炎病毒和鸭瘟病毒一步法PCR检测方法的建立[C].第十叁届中国实验动物科学年会论文集.2017
[8].张阿娥.Ⅰ型鸭肝炎病毒变异株感染雏番鸭的临床症状及病理学变化[J].福建畜牧兽医.2017
[9].郑文卿,宋敏训,李建亮,黄兵,李玉峰.表达1型和3型鸭甲型肝炎病毒VP1基因重组新城疫病毒的构建及其免疫原性[J].中国兽医学报.2017
[10].王安平,朱善元,王永娟,吴双,左伟勇.Ⅰ型鸭甲型肝炎病毒VP3基因在昆虫细胞中的表达与鉴定[J].江苏农业学报.2017