导读:本文包含了微粒皮肤论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:移植物,水凝胶类,设备安全性,生物相容性材料
微粒皮肤论文文献综述
陈斌,王晓辉,李睿智,史梦柔,李东风[1]（2019）在《微粒皮移植联合医用自凝集水凝胶修复家兔全层皮肤缺损的实验研究》一文中研究指出目的评价自凝集水凝胶(医用可注射聚羧甲基葡萄糖胺凝胶)的皮内刺激反应,以及该材料与微粒皮移植联用对全层皮肤缺损的疗效。方法依据国家标准GB/T 16886.10—2005,对该材料进行皮内刺激反应安全性评价。麻醉家兔背部,切除3.5 cm×3.5 cm全层皮肤。切下的皮肤裁剪成1 mm×1 mm的微粒皮,将微粒皮在创面上摆放,滴洒水凝胶原液于创面。通过凝胶自凝完成微粒皮固定,用制备好的异体兔脱细胞真皮紧密覆盖创面、缝合。观察4周,修复创面做病理观察。结果自凝集水凝胶无潜在的皮内刺激。凝胶联合微粒皮移植术4周后伤口完全愈合且有毛发生长,病理切片可见皮肤创面修复,炎症细胞浸润较轻。结论自凝集水凝胶对局部皮肤组织无刺激。凝胶联合微粒皮移植可促使创面皮肤组织的修复再生。(本文来源于《中国现代医学杂志》期刊2019年12期）
刘彤[2]（2019）在《重组人胶原蛋白水凝胶和人工真皮分别作为微粒皮移植覆盖物修复全层皮肤缺损的实验研究》一文中研究指出研究背景烧伤和创伤导致的大面积全层皮肤缺损,会引起一系列危及生命的严重后果,因此,快速修复缺损创面至关重要。目前,自体刃厚皮肤移植仍是修复烧伤导致的大面积皮肤缺损的标准治疗方法。大面积烧伤患者自体皮源缺乏,往往需要通过将刃厚皮处理成微粒皮来扩大植皮的扩展比例,但这是以牺牲创面愈合质量为代价的。胶原蛋白是细胞外基质的重要组成成分,与合成材料相比,在促进创面愈合方面具有更优良的生物特性。目前,胶原蛋白大多是从动物结缔组织提取而来,存在一定的病毒隐患,且成本高产量低。将人类胶原蛋白基因导入基因工程菌,通过基因工程技术获取的重组人胶原蛋白安全性高,成本低,能大规模产业化生产。此外,重组胶原蛋白增加了亲水基团,水溶性提高,可制备出胶原蛋白浓度较高的水凝胶。而水凝胶材料的保水性能又能为创面提供湿润的愈合环境,从而加快创面愈合速度,改善愈合质量。由于具备优良的生物特性,胶原蛋白也是制备人工真皮的主要材料。人工真皮主要用来充当真皮修复过程中引导细胞迁移增殖和胶原排列的支架,帮助完成真皮的重构和血管化,可加快创面愈合速度,改善创面愈合后皮肤弹性、柔软性及机械耐磨性。但目前人工真皮用于全层创面修复需要经过2次手术,增加了病人的痛苦和负担。本研究首先以重组人胶原蛋白为原料制备水凝胶并进行相关性能检测,并选用以猪肌腱胶原蛋白为原料的皮耐克作为人工真皮的代表,然后将该水凝胶和人工真皮皮耐克两种胶原材料分别作为微粒皮移植覆盖物用于修复大鼠全层皮肤缺损创面,并进行创面愈合速度和愈合质量的疗效评价。目的本研究拟制备以重组人胶原蛋白为原料的水凝胶,选用以猪肌腱胶原蛋白为原料的皮耐克作为人工真皮的代表,探索该水凝胶和人工真皮皮耐克分别作为微粒皮移植覆盖物修复全层皮肤缺损创面的治疗效果,为临床修复全层皮肤缺损创面提供参考。方法1.重组人胶原蛋白水凝胶的制备及表征1.1以DMEM/F12培养基配制浓度为10%的胶原蛋白溶液,通过海藻酸盐与Ca2+反应交联得到胶原蛋白水凝胶;1.2观察胶原蛋白溶液成胶后的状态;扫描电镜观察水凝胶微观结构;1.3对水凝胶体外溶胀和降解性能进行检测;1.4将水凝胶包埋在大鼠皮下,观察体内降解速度。2.重组人胶原蛋白水凝胶对部分创面愈合相关细胞的影响2.1CCK-8法评价水凝胶浸提液对Ha Ca T细胞、人成纤维细胞、HUVEC3种细胞的毒性;2.2细胞划痕实验和Transwell实验评价水凝胶浸提液对3种细胞迁移能力的影响。3.重组人胶原蛋白水凝胶与人工真皮皮耐克作为微粒皮覆盖物修复大鼠全层皮肤缺损创面的疗效评价3.1创面愈合速度制备SD大鼠全层皮肤缺损创面模型,移植微粒皮后分别以胶原蛋白水凝胶、人工真皮皮耐克、凡士林纱布作为覆盖物修复创面,以凡士林纱布组作为对照,比较创面愈合速度。3.2创面愈合质量3.2.1创面真皮层形成术后第7天,14天,21天,35天进行创面取材。HE和Masson染色比较各组创面真皮层形成情况,并与正常皮肤组织比较;3.2.2创面基底膜形成Ⅳ型胶原蛋白免疫组化染色比较各组创面基底膜形成情况,并与正常皮肤组织比较;3.2.3创面胶原蛋白沉积通过苦味酸天狼猩红染色、RT-q PCR、WB检测术后第35天创面上皮化后各组胶原蛋白沉积情况,并与正常皮肤组织比较;3.2.4创面TGFβ1、TGFβ3、α-SMA的表达通过免疫组化染色、RT-q PCR、WB检测术后第35天创面上皮化后各组TGFβ1、TGFβ3、α-SMA的表达情况。3.3促进创面愈合的机制研究3.3.1创面细胞增殖速度Ki67免疫组化染色比较各组创面细胞增殖情况,并与正常皮肤组织比较;3.3.2创面毛细血管新生CD31免疫组化染色比较各组创面毛细血管新生情况;3.3.3创面VEGF的表达通过免疫组化染色、RT-q PCR、WB检测早期各组创面VEGF表达情况。3.4 HE和Masson染色观察胶原蛋白水凝胶和人工真皮皮耐克分别作为微粒皮覆盖物时促进全层创面修复的过程。结果1.重组人胶原蛋白水凝胶的制备及表征成功制备出浓度为10%的胶原蛋白水凝胶;电镜下可观察到多孔海绵状结构;在60min达到溶胀平衡,最大溶胀度为1800%;在体外5-6天时降解速度最快,7天降解完全;在体内5天降解约40%,10天降解约80%,15天降解完全。2.重组人胶原蛋白水凝胶对部分创面愈合相关细胞的影响水凝胶浸提液对3种细胞毒性作用均较小,可促进Ha Ca T细胞增殖,成纤维细胞存活率在90%以上,HUVEC存活率在70%以上;细胞划痕实验和Transwell实验均证实水凝胶浸提液可促进3种细胞的迁移。3.重组人胶原蛋白水凝胶与人工真皮皮耐克作为微粒皮覆盖物修复大鼠全层皮肤缺损创面的疗效评价3.1创面愈合速度术后7天、14天、21天水凝胶和皮耐克覆盖微粒皮组创面愈合率均高于凡士林纱布组,差异有统计学意义,水凝胶组与皮耐克组无差异。3.2创面愈合质量3.2.1创面真皮层形成术后21天,水凝胶和皮耐克覆盖微粒皮组均有真皮组织形成,第35天真皮组织较为成熟,与正常皮肤相近,而凡士林纱布组第35天为致密胶原沉积的瘢痕组织;3.2.2创面基底膜形成术后21天,水凝胶和皮耐克覆盖微粒皮组均有连续的Ⅳ型胶原蛋白阳性基底膜样结构形成,第35天基底膜逐渐连续,而凡士林纱布组第35天仍无基底膜形成;3.2.3创面胶原蛋白沉积苦味酸天狼猩红染色、RT-q PCR、WB证实术后35天,水凝胶和皮耐克覆盖微粒皮组创面胶原沉积均少于凡士林纱布组,差异有统计学意义,水凝胶组与皮耐克组无差异;3.2.4创面TGFβ1、TGFβ3、α-SMA的表达免疫组化染色、RT-q PCR、WB证实术后35天,水凝胶和皮耐克覆盖微粒皮组创面TGFβ1、α-SMA表达水平均低于凡士林纱布组,TGFβ3表达水平均高于凡士林纱布组,差异有统计学意义。3.3促进创面愈合的机制研究3.3.1创面细胞增殖速度术后7天、14天、21天水凝胶和皮耐克覆盖微粒皮组创面Ki67阳性(提示高增殖活性)细胞数量均高于凡士林纱布组,差异有统计学意义,水凝胶组与皮耐克组无差异;3.3.2创面毛细血管新生术后7天,皮耐克覆盖微粒皮组创面CD31阳性新生毛细血管数量高于水凝胶组和凡士林纱布组,差异有统计学意义;3.3.3创面VEGF的表达免疫组化染色、RT-q PCR、WB证实皮耐克覆盖微粒皮组术后7天创面VEGF表达水平高于水凝胶组和凡士林纱布组,差异有统计学意义。3.4通过对术后7天、14天、21天、35天创面HE和Masson染色的动态观察证实,水凝胶和皮耐克覆盖微粒皮组促进创面愈合的速度较凡士林纱布组快。结论综合本课题全部研究,我们得到如下结论:1、成功制备出重组人胶原蛋白水凝胶,具有较好的吸水保水性能和合适的降解速率,且上述性能均可以通过调节原料成分比例和交联程度进行调整,制备过程简单,成本低;2、将水凝胶浸提液作用于Ha Ca T细胞、成纤维细胞、HUVEC,证明其对上述3种细胞的毒性作用均不明显,还可促进Ha Ca T细胞增殖和上述3种细胞迁移;3、将胶原蛋白水凝胶和人工真皮皮耐克分别作为微粒皮移植覆盖物修复大鼠全层皮肤缺损创面,以凡士林纱布作为对照,证明二者均可以加快创面细胞增殖速度、促进早期创面毛细血管新生、促进早期创面VEGF的表达,从而促进创面愈合;促进真皮组织和基底膜形成,从而提高创面愈合质量;降低TGFβ1和α-SMA的表达水平,增高TGFβ3的表达水平,从而预防创面过度收缩和减轻瘢痕增生。并首次证明人工真皮皮耐克作为微粒皮覆盖物一步法修复全层皮肤缺损创面的可行性。综上所述,本研究制备的胶原蛋白水凝胶,以及将人工真皮皮耐克作为微粒皮覆盖物一步法修复全层皮肤缺损创面的治疗方法,都为临床全层皮肤缺损创面的修复提供了新的思路。(本文来源于《中国人民解放军海军军医大学》期刊2019-05-20）
陈旭,覃凤均,于东宁,孙永华[3]（2019）在《微粒皮肤移植术的历史、现状和未来》一文中研究指出微粒皮肤移植术已在我国应用33年,到目前为止,这项技术依然是大面积深度烧伤特别是Ⅲ度烧伤面积大于80%总体表面积患者的最佳治疗方法之一。本文回顾和分析了微粒皮肤移植术的发明历史、优点和不足、方法的改进,并提出了微粒皮肤移植术的现实意义和对这项技术今后发展的展望。(本文来源于《中华损伤与修复杂志(电子版)》期刊2019年01期）
栗申,郭素娟[4]（2018）在《邮票皮、meek微型皮与微粒皮叁种植皮方式在修复大面积皮肤缺损创面中的疗效对比研究》一文中研究指出目的对比邮票皮、meek微型皮与微粒皮叁种植皮方式在修复大面积皮肤缺损创面中的疗效。方法选取2015年9月~2017年9月我院收治132例大面积皮肤烧伤患者为研究对象,按照对创面修复所用植皮方式的不同将所选患者分为:邮票植皮组、meek植皮组以及微粒植皮组,每组均44例。运用叁种不同植皮方式对患者进行植皮治疗,比较叁组患者的植皮成活率、创面愈合时间、1%烧伤面积(1%TBSA)治疗费用以及一期创面愈合率、死亡率、康复效果等。结果 (1)叁组植皮成活率、创面愈合时间、1%TBSA治疗费用均存在明显差异(P<0.001);邮票植皮组植皮成活率明显高于meek植皮组,meek植皮组明显高于微粒植皮组(P<0.001);邮票植皮组创面愈合时间明显低于meek植皮组,meek植皮组明显低于微粒植皮组(P<0.001);邮票植皮组1%TBSA治疗费用明显低于meek植皮组,meek植皮组明显低于微粒植皮组(P<0.001);(2)叁组一期创面愈合率、死亡率以及康复药效,康复效果均存在差异(P<0.05);邮票植皮一期创面愈合率高于meek植皮、meek植皮高于微粒植皮(P<0.05);邮票植皮与meek植皮死亡率比较无明显差异(P>0.05),但均低于微粒植皮(P<0.05);邮票植皮与meek植皮康复效果比较无明显差异(P>0.05),但均高于微粒植皮(P<0.05)。结论叁种植皮方式对大面积皮肤损伤患者修复效果均不尽相同。因此,临床需结合患者自身情况以及多方面因素进行综合评价,选择最适合患者的植皮方式。(本文来源于《四川解剖学杂志》期刊2018年02期）
刘韬[5]（2018）在《对比Meek植皮技术与微粒皮肤移植技术修复大面积深度烧伤创面的疗效差异》一文中研究指出目的比较分析大面积深度烧伤创面应用Meek植皮技术和微粒皮肤移植技术的应用效果,进而为临床相关病例的治疗提供参考。方法将80例患者分为对照组和观察组,各40例,对照组采用微粒皮肤移植技术,观察组采用Meek植皮技术,回顾分析两组患者的手术指标以及植皮成活率。结果观察组手术时间、皮肤愈合时间指标低于对照组上述指标;观察组的植皮成功率高于对照组。结论大面积深度烧伤创面修复中采用Meek植皮技术相对于微粒皮肤移植技术,能够快速完成手术,促进患者愈合,提高植皮成功率,从而改善患者的皮肤状态,值得临床应用。(本文来源于《世界最新医学信息文摘》期刊2018年42期）
黎鸿章,银西洋,刘攀,邱波,杨坤[6]（2018）在《Meek植皮技术与微粒皮肤移植技术修复大面积烧伤创面的比较研究》一文中研究指出目的 探讨Meek植皮技术与微粒皮肤移植技术修复大面积烧伤创面的临床疗效。方法 选取2016年1月至2017年3月我院收治的大面积烧伤患者56例,按随机数字表法分为两组,对照组共28例患者,行微粒皮肤移植术,观察组共28例患者,行Meek植皮术,比较两组手术时间、创面愈合时间及治疗费用,术后随访6个月,观察两组植皮成活率。结果 与对照组相比,观察组手术时间更短、创面愈合时间缩短、治疗费用降低,组间比较差异具有统计学意义(P<0.05)。观察组皮肤瘢痕良好,对照组皮肤表面有明显瘢痕,其中观察组植皮成活率为96.43%,略高于对照组的82.14%,但两组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 采取Meek植皮术治疗大面积烧伤的临床效果较微粒皮肤移植术更有优势,可缩短创面修复时间,提高植皮成活率。(本文来源于《锦州医科大学学报》期刊2018年02期）
杨华生,闻丽珍,黎晓丽,谭丽霞,吴维刚[7]（2018）在《基于经皮给药研究制川乌与白芍配伍对大鼠皮肤及肝微粒体中CYP450活性的影响》一文中研究指出目的:研究经皮给予制川乌-白芍药对后,配伍药对大鼠皮肤、肝脏药物代谢酶的影响,以探讨制川乌-白芍药对的配伍机制。方法:大鼠连续经皮给药制川乌、白芍、制川乌与白芍配伍凝胶剂14 d后,采用探针底物与皮肤、肝微粒体体外孵育,通过高效液相色谱法(HPLC)检测皮肤微粒体中1种探针底物及肝微粒体中4种探针底物的浓度,计算代谢速率,考察各给药组大鼠皮肤、肝微粒体CYP450酶活性的变化。结果:与空白组比较,白芍、制川乌对大鼠皮肤微粒体中的CYP3A4酶具有明显的抑制作用(P<0.05);与白芍单用组比较,制川乌与白芍配伍给药使大鼠皮肤微粒体中的CYP3A4酶活性显着下降(P<0.05);与制川乌组比较,制川乌与白芍配伍给药使大鼠皮肤中微粒体的CYP3A4酶的活性显着增加(P<0.05)。与空白组比较,白芍、制川乌对大鼠肝微粒体中的CYP3A4、CYP1A2、CYP2E1、CYP2D6酶都具有明显的抑制作用(P<0.05);与制川乌组、白芍组比较,制川乌与白芍配伍使大鼠肝微粒体中CYP3A4、CYP1A2、CYP2E1、CYP2D6酶活性均明显增加(P<0.05)。结论:制川乌、白芍均为CYP3A4、CYP1A2、CYP2E1、CYP2D6药酶的抑制剂,两药配伍可引起大鼠皮肤、肝微粒体中药酶活性的改变而致活性成分的代谢速度改变,这可能是制川乌与白芍配伍发挥"增效减毒"的作用机制之一。(本文来源于《中国医院药学杂志》期刊2018年01期）
刘聃,王晓娟[8]（2017）在《异种脱细胞真皮联合皮肤微粒应用于供皮区创面的研究》一文中研究指出目的探讨异种脱细胞真皮联合皮肤微粒应用于供皮区创面的临床效果。方法将44例患者按照随机数字法随机分成治疗组和对照组。治疗组患者供皮区创面采用皮肤微粒结合异种脱细胞真皮基质敷料覆盖方法;对照组创面采用单层油纱覆盖方法。观察创面愈合时间、创面形成水疱情况以及瘙痒情况。结果治疗组供皮区创面愈合时间短于对照组。治疗组患者出现水疱、感觉瘙痒以及疼痛的比例低于对照组。结论异种脱细胞真皮联合皮肤微粒应用于供皮区创面是一种有效的促进供皮区创面愈合的手术方法。(本文来源于《成都医学院学报》期刊2017年05期）
陈茜[9]（2017）在《Meek皮肤移植与微粒皮肤移植修复大面积深度烧伤创面效果与临床应用价值的Meta分析》一文中研究指出背景:大面积深度烧伤病人大部分皮肤被破坏,烧伤创面暴露于外界,急需自体皮肤移植,但这类病人的自体移植皮源匮乏,Meek植皮与微粒皮植皮是救治这类烧伤病人的主要手段,近十年以来,关于Meek植皮术的临床疗效陆续被报道,但是与微粒皮植皮的临床对照研究的优劣势存在争议,这些研究大部分样本量小,缺乏说服力。目的:Meek植皮术与微粒皮植皮术在修复大面积深度烧伤创面的临床疗效及应用价值进行系统性评价。方法:用计算机以“Meek micrografting technique”AND“microskin graft methods”等为检索词检索PubMed(1990/2016-10)、Ovid(1966/2016-10)、Elsevier(1988/2016-10)、SPRINGER(1995/2016-10)、The Cochrane Library(1978/2016-10)数据库,以“Meek植皮”和“微粒皮”及“烧伤/burn”为关键检索词检索万方数据库(1982/2016)、维普中文科技期刊数据库(1979/2016)和中国知网数据库(CNKI,1979/2016),并挑选并收集与Meek植皮术与微粒皮植皮术相关治疗大面积深度烧伤创面的临床对照研究(CCT)。评价纳入研究的文献质量,关键资料收集后,使用RevMan 5.1软件行Meta分析。结果与结论:共纳入8个临床对照研究,包含302例大面积烧伤患者。相比于微粒皮植皮组,Meek植皮组在皮片存活率显着增加,在创面愈合时间、皮片融合时间、手术操作时间及1%烧伤面积治疗费用均明显降低,表明Meek植皮术比微粒皮植皮术更能明显增加皮片存活率并促进创面愈合,缩短手术操作时间,并且减少治疗费用,在临床应用价值更加有优势。(本文来源于《南昌大学》期刊2017-06-01）
何仁亮[10]（2017）在《治疗慢性皮肤溃疡的疗效分析》一文中研究指出为了探讨自体微粒皮培植表皮化在皮肤慢性溃疡创面修复中的应用，我们先利用美宝湿润烧伤膏（MEBO）培养肉芽，然后取韧厚皮剪成微粒皮粒后种植于肉芽中，用MEBO培植微粒皮直至其表皮化修复创面，取得了满意疗效。由于缺乏诱导表皮生长发育的微环境，体外(本文来源于《健康报》期刊2017-01-10）
微粒皮肤论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
研究背景烧伤和创伤导致的大面积全层皮肤缺损,会引起一系列危及生命的严重后果,因此,快速修复缺损创面至关重要。目前,自体刃厚皮肤移植仍是修复烧伤导致的大面积皮肤缺损的标准治疗方法。大面积烧伤患者自体皮源缺乏,往往需要通过将刃厚皮处理成微粒皮来扩大植皮的扩展比例,但这是以牺牲创面愈合质量为代价的。胶原蛋白是细胞外基质的重要组成成分,与合成材料相比,在促进创面愈合方面具有更优良的生物特性。目前,胶原蛋白大多是从动物结缔组织提取而来,存在一定的病毒隐患,且成本高产量低。将人类胶原蛋白基因导入基因工程菌,通过基因工程技术获取的重组人胶原蛋白安全性高,成本低,能大规模产业化生产。此外,重组胶原蛋白增加了亲水基团,水溶性提高,可制备出胶原蛋白浓度较高的水凝胶。而水凝胶材料的保水性能又能为创面提供湿润的愈合环境,从而加快创面愈合速度,改善愈合质量。由于具备优良的生物特性,胶原蛋白也是制备人工真皮的主要材料。人工真皮主要用来充当真皮修复过程中引导细胞迁移增殖和胶原排列的支架,帮助完成真皮的重构和血管化,可加快创面愈合速度,改善创面愈合后皮肤弹性、柔软性及机械耐磨性。但目前人工真皮用于全层创面修复需要经过2次手术,增加了病人的痛苦和负担。本研究首先以重组人胶原蛋白为原料制备水凝胶并进行相关性能检测,并选用以猪肌腱胶原蛋白为原料的皮耐克作为人工真皮的代表,然后将该水凝胶和人工真皮皮耐克两种胶原材料分别作为微粒皮移植覆盖物用于修复大鼠全层皮肤缺损创面,并进行创面愈合速度和愈合质量的疗效评价。目的本研究拟制备以重组人胶原蛋白为原料的水凝胶,选用以猪肌腱胶原蛋白为原料的皮耐克作为人工真皮的代表,探索该水凝胶和人工真皮皮耐克分别作为微粒皮移植覆盖物修复全层皮肤缺损创面的治疗效果,为临床修复全层皮肤缺损创面提供参考。方法1.重组人胶原蛋白水凝胶的制备及表征1.1以DMEM/F12培养基配制浓度为10%的胶原蛋白溶液,通过海藻酸盐与Ca2+反应交联得到胶原蛋白水凝胶;1.2观察胶原蛋白溶液成胶后的状态;扫描电镜观察水凝胶微观结构;1.3对水凝胶体外溶胀和降解性能进行检测;1.4将水凝胶包埋在大鼠皮下,观察体内降解速度。2.重组人胶原蛋白水凝胶对部分创面愈合相关细胞的影响2.1CCK-8法评价水凝胶浸提液对Ha Ca T细胞、人成纤维细胞、HUVEC3种细胞的毒性;2.2细胞划痕实验和Transwell实验评价水凝胶浸提液对3种细胞迁移能力的影响。3.重组人胶原蛋白水凝胶与人工真皮皮耐克作为微粒皮覆盖物修复大鼠全层皮肤缺损创面的疗效评价3.1创面愈合速度制备SD大鼠全层皮肤缺损创面模型,移植微粒皮后分别以胶原蛋白水凝胶、人工真皮皮耐克、凡士林纱布作为覆盖物修复创面,以凡士林纱布组作为对照,比较创面愈合速度。3.2创面愈合质量3.2.1创面真皮层形成术后第7天,14天,21天,35天进行创面取材。HE和Masson染色比较各组创面真皮层形成情况,并与正常皮肤组织比较;3.2.2创面基底膜形成Ⅳ型胶原蛋白免疫组化染色比较各组创面基底膜形成情况,并与正常皮肤组织比较;3.2.3创面胶原蛋白沉积通过苦味酸天狼猩红染色、RT-q PCR、WB检测术后第35天创面上皮化后各组胶原蛋白沉积情况,并与正常皮肤组织比较;3.2.4创面TGFβ1、TGFβ3、α-SMA的表达通过免疫组化染色、RT-q PCR、WB检测术后第35天创面上皮化后各组TGFβ1、TGFβ3、α-SMA的表达情况。3.3促进创面愈合的机制研究3.3.1创面细胞增殖速度Ki67免疫组化染色比较各组创面细胞增殖情况,并与正常皮肤组织比较;3.3.2创面毛细血管新生CD31免疫组化染色比较各组创面毛细血管新生情况;3.3.3创面VEGF的表达通过免疫组化染色、RT-q PCR、WB检测早期各组创面VEGF表达情况。3.4 HE和Masson染色观察胶原蛋白水凝胶和人工真皮皮耐克分别作为微粒皮覆盖物时促进全层创面修复的过程。结果1.重组人胶原蛋白水凝胶的制备及表征成功制备出浓度为10%的胶原蛋白水凝胶;电镜下可观察到多孔海绵状结构;在60min达到溶胀平衡,最大溶胀度为1800%;在体外5-6天时降解速度最快,7天降解完全;在体内5天降解约40%,10天降解约80%,15天降解完全。2.重组人胶原蛋白水凝胶对部分创面愈合相关细胞的影响水凝胶浸提液对3种细胞毒性作用均较小,可促进Ha Ca T细胞增殖,成纤维细胞存活率在90%以上,HUVEC存活率在70%以上;细胞划痕实验和Transwell实验均证实水凝胶浸提液可促进3种细胞的迁移。3.重组人胶原蛋白水凝胶与人工真皮皮耐克作为微粒皮覆盖物修复大鼠全层皮肤缺损创面的疗效评价3.1创面愈合速度术后7天、14天、21天水凝胶和皮耐克覆盖微粒皮组创面愈合率均高于凡士林纱布组,差异有统计学意义,水凝胶组与皮耐克组无差异。3.2创面愈合质量3.2.1创面真皮层形成术后21天,水凝胶和皮耐克覆盖微粒皮组均有真皮组织形成,第35天真皮组织较为成熟,与正常皮肤相近,而凡士林纱布组第35天为致密胶原沉积的瘢痕组织;3.2.2创面基底膜形成术后21天,水凝胶和皮耐克覆盖微粒皮组均有连续的Ⅳ型胶原蛋白阳性基底膜样结构形成,第35天基底膜逐渐连续,而凡士林纱布组第35天仍无基底膜形成;3.2.3创面胶原蛋白沉积苦味酸天狼猩红染色、RT-q PCR、WB证实术后35天,水凝胶和皮耐克覆盖微粒皮组创面胶原沉积均少于凡士林纱布组,差异有统计学意义,水凝胶组与皮耐克组无差异;3.2.4创面TGFβ1、TGFβ3、α-SMA的表达免疫组化染色、RT-q PCR、WB证实术后35天,水凝胶和皮耐克覆盖微粒皮组创面TGFβ1、α-SMA表达水平均低于凡士林纱布组,TGFβ3表达水平均高于凡士林纱布组,差异有统计学意义。3.3促进创面愈合的机制研究3.3.1创面细胞增殖速度术后7天、14天、21天水凝胶和皮耐克覆盖微粒皮组创面Ki67阳性(提示高增殖活性)细胞数量均高于凡士林纱布组,差异有统计学意义,水凝胶组与皮耐克组无差异;3.3.2创面毛细血管新生术后7天,皮耐克覆盖微粒皮组创面CD31阳性新生毛细血管数量高于水凝胶组和凡士林纱布组,差异有统计学意义;3.3.3创面VEGF的表达免疫组化染色、RT-q PCR、WB证实皮耐克覆盖微粒皮组术后7天创面VEGF表达水平高于水凝胶组和凡士林纱布组,差异有统计学意义。3.4通过对术后7天、14天、21天、35天创面HE和Masson染色的动态观察证实,水凝胶和皮耐克覆盖微粒皮组促进创面愈合的速度较凡士林纱布组快。结论综合本课题全部研究,我们得到如下结论:1、成功制备出重组人胶原蛋白水凝胶,具有较好的吸水保水性能和合适的降解速率,且上述性能均可以通过调节原料成分比例和交联程度进行调整,制备过程简单,成本低;2、将水凝胶浸提液作用于Ha Ca T细胞、成纤维细胞、HUVEC,证明其对上述3种细胞的毒性作用均不明显,还可促进Ha Ca T细胞增殖和上述3种细胞迁移;3、将胶原蛋白水凝胶和人工真皮皮耐克分别作为微粒皮移植覆盖物修复大鼠全层皮肤缺损创面,以凡士林纱布作为对照,证明二者均可以加快创面细胞增殖速度、促进早期创面毛细血管新生、促进早期创面VEGF的表达,从而促进创面愈合;促进真皮组织和基底膜形成,从而提高创面愈合质量;降低TGFβ1和α-SMA的表达水平,增高TGFβ3的表达水平,从而预防创面过度收缩和减轻瘢痕增生。并首次证明人工真皮皮耐克作为微粒皮覆盖物一步法修复全层皮肤缺损创面的可行性。综上所述,本研究制备的胶原蛋白水凝胶,以及将人工真皮皮耐克作为微粒皮覆盖物一步法修复全层皮肤缺损创面的治疗方法,都为临床全层皮肤缺损创面的修复提供了新的思路。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
微粒皮肤论文参考文献
[1].陈斌,王晓辉,李睿智,史梦柔,李东风.微粒皮移植联合医用自凝集水凝胶修复家兔全层皮肤缺损的实验研究[J].中国现代医学杂志.2019
[2].刘彤.重组人胶原蛋白水凝胶和人工真皮分别作为微粒皮移植覆盖物修复全层皮肤缺损的实验研究[D].中国人民解放军海军军医大学.2019
[3].陈旭,覃凤均,于东宁,孙永华.微粒皮肤移植术的历史、现状和未来[J].中华损伤与修复杂志(电子版).2019
[4].栗申,郭素娟.邮票皮、meek微型皮与微粒皮叁种植皮方式在修复大面积皮肤缺损创面中的疗效对比研究[J].四川解剖学杂志.2018
[5].刘韬.对比Meek植皮技术与微粒皮肤移植技术修复大面积深度烧伤创面的疗效差异[J].世界最新医学信息文摘.2018
[6].黎鸿章,银西洋,刘攀,邱波,杨坤.Meek植皮技术与微粒皮肤移植技术修复大面积烧伤创面的比较研究[J].锦州医科大学学报.2018
[7].杨华生,闻丽珍,黎晓丽,谭丽霞,吴维刚.基于经皮给药研究制川乌与白芍配伍对大鼠皮肤及肝微粒体中CYP450活性的影响[J].中国医院药学杂志.2018
[8].刘聃,王晓娟.异种脱细胞真皮联合皮肤微粒应用于供皮区创面的研究[J].成都医学院学报.2017
[9].陈茜.Meek皮肤移植与微粒皮肤移植修复大面积深度烧伤创面效果与临床应用价值的Meta分析[D].南昌大学.2017
[10].何仁亮.治疗慢性皮肤溃疡的疗效分析[N].健康报.2017