导读:本文包含了免疫胶体金试纸条论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:布鲁菌,BCSP31,免疫层析,胶体金试纸条
免疫胶体金试纸条论文文献综述
郭健,张月,王?舸,孙嘉慧,李艳[1]（2019）在《鹿布鲁菌病免疫胶体金检测试纸条的研制》一文中研究指出利用SUMO-BCSP31重组大肠杆菌表达并纯化了布鲁菌BCSP31重组蛋白,并利用该蛋白研制了布鲁菌免疫胶体金检测试纸条。以BCSP31蛋白作为检测抗原,通过间接法研制胶体金试纸条检测鹿血清抗体。该试纸条与大肠杆菌、沙门菌、小肠结肠炎耶尔森菌和绿脓杆菌无交叉反应;检测阳性血清最大稀释倍数为1∶640,证明试纸条具有良好的特异性和敏感性。临床上对420只鹿进行检测,比对试纸条与虎红平板凝集试验(RBT)检测结果:阳性符合率为100%,阴性符合率为96%,Kappa值为0.73,两种方法符合率较高;比对试纸条与cELISA检测结果:阳性符合率为81%,阴性符合率为100%,Kappa值为0.88,两种方法符合率高。该试纸条简便快捷,具有较高准确性,可用于鹿布鲁菌病的现场初筛检测。(本文来源于《畜牧与兽医》期刊2019年11期）
马志宏,杨明,郭慧琳,陈伯祥,张登基[2]（2019）在《鸽Ⅰ型副黏病毒免疫胶体金诊断试纸条的制备》一文中研究指出采用柠檬酸钠还原法制备胶体颗粒,胶体金用抗鸽Ⅰ型副黏病毒(PPMV-1)F蛋白单克隆抗体标记并纯化,包被于玻璃纤维膜。再将纯化的抗PPMV-1 F蛋白单克隆抗体和羊抗鼠的二抗包被在NC膜作为检测线和质控线,组装成PPMV-1快速检测试纸条,建立一种快速、简便的检测PPMV-1的胶体金免疫层析方法。结果表明,所研制PPMV-1胶体金免疫层析快速检测试纸条,准确性高,且不与鸡传染性支气管炎病毒、鸡减蛋综合征病毒、鸡马立克病毒等发生交叉反应;批间和批内的重复性较好;灵敏度高,试纸条可以检测血凝效价≥23的病毒液;试纸条置4℃避光密封干燥保存1年,37℃放置10 d,对其性能没有任何影响。试纸条与HA、HI试验检测方法相比,检测棉拭子的符合率为97.5%,检测病料的符合率为100%。所研制的PPMV-1试纸条在鸽Ⅰ型副黏病毒检测诊断方面具有快速、灵敏、特异、简便等特点,具有良好的开发应用前景。(本文来源于《中兽医医药杂志》期刊2019年05期）
杨宁宁,刘志科,王震,陈创夫,石峰[3]（2018）在《鸡沙门氏菌免疫胶体金试纸条的建立及初步应用》一文中研究指出目的:建立一种适合基层现场的鸡沙门氏菌病抗体的免疫胶体金试纸条。方法:本试验以鸡沙门氏菌的基因组为模板,利用PCR方法扩增invA基因并进行原核表达后,用Ni-NTA纯化InvA融合蛋白,Western blotting和ELISA进行分析;采用30 nm的胶体金溶液标记山羊抗鸡IgY,并对金标抗体的浓度和pH值进行优化;在NC膜上分别包被InvA融合蛋白和鸡IgY,作为检测线和质控线,评估其特异性、灵敏性和稳定性。最后用该方法对临床的195份血清进行检测,平板凝集试验验证其准确性。结果:构建的重组质粒pMD19-T-invA在大肠杆菌BL21中成功高效表达,获得的蛋白纯度较高,经Western(本文来源于《中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第二十四次学术研讨会、中国病理生理学会动物病理生理学专业委员会第二十叁次学术研讨会、中国实验动物学会实验病理学专业委员会第叁次学术研讨会、中国兽医病理学家第叁次学术研讨会论文集》期刊2018-07-27）
寇金华,杨正涛,刘维建,高珺珊,李建华[4]（2018）在《猪弓形虫感染免疫胶体金试纸条的制备与初步应用》一文中研究指出制备1种检测猪弓形虫血清循环抗原的免疫胶体金试纸条。利用柠檬酸叁钠还原法制备40nm的胶体金溶液,标记抗弓形虫表面抗原SAG3(surface antigen 3,SAG3)单克隆抗体(Anti-A-SAG3-7),用另1株抗弓形虫表面抗原SAG3单克隆抗体(Anti-A-SAG3-23)与羊抗小鼠IgG抗体分别包被于硝酸纤维素膜(NC膜)上的检测线和质控线,制备并优化免疫胶体金试纸条检测条件。胶体金溶液的最适pH值为加入4μL 0.2 mol/L K2CO3时的pH值。Anti-A-SAG3-7的最适标记量为12μg。最佳NC膜为Millipore 135。T、C线抗体最佳包被质量浓度均为0.25g/L,T、C线抗体最佳包被体积均为8μL。试纸条的灵敏度达1∶160,与猪囊虫阳性血清无交叉反应。稳定性试验表明,该试纸条置于室温至少可保存1个月有效,置于4℃可保存3个月有效。对广东某地区、吉林某地区猪场的各94份猪待检血清进行检测,分别有17,10份为阳性血清,样品阳性率为18.08%,10.63%。本研究制备的胶体金试纸条具有操作简单,敏感特异等优点,适合临床基层单位对猪弓形虫病的早期诊断及流行病学调查。(本文来源于《中国兽医学报》期刊2018年01期）
王华俊,刘宇,蒋薇,赵雪丽,曹伟伟[5]（2016）在《大片形吸虫免疫胶体金检测试纸条的研制及初步应用》一文中研究指出为建立一种快速、简便、适应现场应用的水牛大片形吸虫检测方法,本试验利用抗大片形吸虫ES抗原单克隆抗体杂交瘤细胞株7D1和7D4分别制备和纯化得到单克隆抗体7D1和7D4;采用柠檬酸叁钠还原法制备颗粒大小为30 nm胶体金,再用胶体金标记纯化单克隆抗体7D1,在硝酸纤维素膜的质控带和检测带处分别包被羊抗鼠IgG二抗和单克隆抗体7D4,经反应条件优化,组装成了大片形吸虫免疫检测试纸条。经测试该检测试纸条对ES抗原的检测下限为0.94μg/mL,与胰扩盘吸虫、前后盘吸虫、支原体、弓形虫、伊氏锥虫VSG抗原均无交叉反应,特异性较好。采集广西地区334份水牛新鲜粪样并用试纸条检测,阳性率为38.62%。结果表明,试纸条方法操作简单、快速、易于判定,特异性好,敏感性高,适合基层大面积普查和现场检测检测大片形吸虫。(本文来源于《中国畜牧兽医学会生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第十二次学术研讨会论文集》期刊2016-10-19）
郑卫峰[6]（2016）在《IBV双抗体夹心ELISA检测方法的建立及免疫胶体金试纸条的研制》一文中研究指出本试验用辣根过氧化物酶(Horseradish Peroxidase,HRP)对单克隆抗体11C10进行标记,将单克隆抗体2D6包被于酶标板上,建立了用抗体2D6和11C10夹心检测鸡传染性支气管炎病毒(Infectious Bronchitis Virus, IBV)的酶联免疫吸附检测方法(enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA),并对建立的ELISA方法中各步反应的条件进行了优化。通过验证结果显示,建立的双抗体夹心ELISA检测方法检测鸡传染性支气管炎病毒时检测结果呈阳性而在检测其他鸡的传染病病毒时结果呈阴性;将鸡传染性支气管炎病毒尿囊液稀释160倍后,建立的双抗体夹心ELISA检测方法仍能够检测得到。运用双抗体夹心的原理,制备了粒径为25nm的胶体金溶液,用胶体金溶液标记纯化过的单克隆抗体11C10后将其吸附于玻璃纤维膜上作为金标垫;将单克隆抗体2D6和羊抗鼠二抗印迹于层析膜上做检测线和质控线：将金标垫、层析膜和吸水纸等按顺序组装研制了检测鸡传染性支气管炎病毒的胶体金免疫层析快速检测试纸条。并对试纸条制备过程中金标抗体稀释液、金标抗体稀释度、包被抗体稀释度和羊抗鼠二抗稀释度等条件进行了优化,初步研制出能够快速检测鸡传染性支气管炎病毒的试纸条,试纸条能够检测稀释80倍后的病毒尿囊液且检测其他病毒结果呈阴性。用研制的试纸条和双抗体夹心ELISA方法同时检测55份疑似感染IB的鸡口咽拭子样品,结果表明,鸡传染性支气管炎病毒免疫胶体金诊断试纸条检测结果与双抗体夹心ELISA检测结果符合率较高达到92.73%,具有操作方便并且现场结果显示快速的优点,在IBV的临床快速检测方面具有重要意义。(本文来源于《山西农业大学》期刊2016-06-01）
穆昱[7]（2016）在《鹿黏膜病免疫胶体金诊断试纸条的研制及应用》一文中研究指出鹿黏膜病(Deer mucosal disease,DMD)是由牛病毒性腹泻/黏膜病病毒(Bovine virus diarrhea/mucosal disease virus,BVD/MDV)引起的一种以怀孕母鹿流产、产死胎或畸形胎、仔鹿严重腹泻为主要特征的多临床症状传染病。目前,该疾病在国内广泛流行,严重影响养鹿业的健康发展。现阶段,对于鹿黏膜病的诊断方法主要包括:病原的分离鉴定、琼脂扩散试验、中和试验、酶联免疫吸附试验、聚合酶链式反应等。以上这些检测方法均存在检出时间长、检测需要专业的实验室条件及相关实验人员和检测仪器设备等条件,不利于基层临床样品的快速检测。因此,急需建立一种简便、快捷、特异、现场应用的鹿黏膜病诊断方法。本实验首先通过Bac-to-Bac表达系统,表达出鹿源BVD/MDV的保护性抗原E2蛋白,经Western Blot分析、直接免疫荧光检测表明该蛋白具有良好的抗原性。将纯化的E2蛋白免疫Balb/c小鼠,经细胞融合,阳性杂交瘤细胞筛选、亚克隆,成功筛选出2株稳定分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为1F11和1B11,收集腹水并纯化获得2株单抗1F11和1B11,经Western Blot和间接免疫荧光检测表明所制备的2株单抗均能够与E2蛋白和鹿源BVD/MDV发生特异性的反应。采用柠檬酸钠还原法制备20nm胶体金溶液,通过优化胶体金试纸条的各项参数,最终确定胶体金颗粒与1F11单抗结合的最佳p H为7,最佳的单抗结合浓度为14.4μg/m L,并将1F11单抗标记在20nm胶体金分子上作为金标抗体,1B11单抗作为检测线抗体(浓度1.5mg/m L),羊抗鼠Ig G作为质控线抗体(浓度1mg/m L)。选用聚酯纤维素膜(RB65)和玻璃纤维塑膜(DL68)组合,最终制备了鹿黏膜病免疫胶体金诊断试纸条。实验表明,该试纸条具有良好的特异性,对于BVD/MDV病原的检测灵敏度可达103TCID50/m L。应用免疫胶体金试纸条和传统的RT-PCR法共同检测50份采集于吉林某鹿场仔鹿腹泻的粪便样品,均检测出阳性样品10份,且两种方法检测结果一致。研究结果表明,本实验制备的免疫胶体金诊断试纸条可作为一种快速、灵敏、特异的诊断方法应用于鹿黏膜病的临床现场病原检测,该方法的研制丰富了国内外鹿黏膜病的现场诊断手段,对于该传染病的快速诊断、流行病学调查和种鹿群的净化具有重要的临床应用价值。(本文来源于《吉林大学》期刊2016-06-01）
李游[8]（2016）在《中囊病病毒免疫胶体金检测试纸条研制》一文中研究指出蜜蜂囊状幼虫病是由囊状幼虫病病毒(Sacbrood virus,SBV)引起的一类蜜蜂传染病,而感染中华蜜蜂的囊状幼虫病病毒则被称为中华蜜蜂囊状幼虫病病毒,简称中囊病病毒(Chinese Sacbrood virus,CSBV)。囊状幼虫病对中华蜜蜂的危害尤其严重,感病幼虫的死亡率很髙,且其对成年蜜蜂的采集及哺育行为也有一定影响。但目前没有适用于生产实践的检测方法。本研究以中囊病病毒江西株为研究对象,通过克隆获得了中囊病病毒江西分离株结构蛋白基因vp1、vp3的核苷酸及氨基酸序列,分析了SBV的系统进化关系;并且,对CSBV江西株的vp3基因进行了原核表达,在此基础上制备了CSBV江西株vp3单克隆抗体;同时,以CSBV江西株vp1基因的氨基酸序列为依据,设计并合成了多肽抗原,并以此作为抗原制备了CSBV江西株vp1多克隆抗体;最后,以制得的单抗与多抗为基础,结合双抗体夹心法,采用胶体金免疫层析技术初步研制了中囊病胶体金检测试纸条。主要结果有:1.克隆得到的CSBV江西株vp1基因核苷酸序列大小为973 bp,编码324个氨基酸;vp3基因核苷酸序列大小为1070 bp,编码356个氨基酸。2.CSBV江西株vp1、vp3基因序列分析表明:CSBV江西株vp1基因与其它分离株的相似性较vp3基因低,这说明vp3基因较为保守;基于SBV全基因组、vp1基因以及SBV基因保守区段进行分析,并推断:SBV病毒株的宿主特异性及其地理分布差异都决定着其遗传多样性,且东、西方蜜蜂SBV可能发生交叉感染,但还需进一步试验验证。3.制备了CSBV江西株单克隆与多克隆抗体,并在此基础上应用胶体金免疫技术,采用单抗与多抗的双抗体夹心法初步研制了针对中囊病病毒的胶体金快速检测试纸。试纸条检测结果表明:所制试纸能检测出幼虫体内的SBV病毒。(本文来源于《江西农业大学》期刊2016-05-01）
夏武强,胡叶军,孙琛,张美珍,王伟萍[9]（2016）在《甲基睾酮免疫胶体金试纸条的研制及在水产品中的应用》一文中研究指出通过研究胶体金免疫层析技术,建立了一种快速检测水产品中甲基睾酮含量的方法。将待测样品中的甲基睾酮和试纸条检测线上包被的人工抗原(MT-BSA)竞争性结合金标结合垫上包被的胶体金-甲基睾酮单抗聚合物,根据检测线呈现的红色线条深浅来判定样品的阴阳性。结果显示:试纸条上MT-BSA抗原工作浓度为1.0mg/m L,羊抗鼠二抗工作浓度为1.5 mg/m L,试纸条的最低检测限达到10μg/kg,与甲基睾酮类似物的交叉反应率低;使用甲醇提取,4倍PBST稀释,整个检测所需时间仅10~15 min,适用于大规模样品筛选。(本文来源于《淡水渔业》期刊2016年01期）
王华俊,陈汉忠,谢彩华[10]（2015）在《大片形吸虫病免疫胶体金诊断试纸条的研制》一文中研究指出大片形吸虫(Fasciola gigantica)病是由大片形吸虫感染引起的寄生虫病,呈全球性分布。动物感染大片形吸虫后引起急性、慢性疾病,或呈隐性经过,给全球经济动物的生产造成巨大经济损失;同时,大片形吸虫病也是一种食源性人畜共患寄生虫病,严重威胁人类健康,人大片形吸虫病将作为公共卫生问题重新引起人们的重视。该病的防治、净化依赖有效、快捷、易于判定的检测方法,为此本研究将采用免疫学技术和胶体金层析技术建立一种新的大片形吸虫病诊断和检测方法。利用本实验室保存的杂交瘤细胞株7D1和7D4分别制备和纯化得到抗大片形吸虫分泌排泄抗原单克隆抗体,同时制备和纯化大片形吸虫分泌抗原;利用柠檬酸叁钠还原法制备胶体金,再用胶体金标记纯化的抗大片形吸虫ES抗原单克隆抗体7D1,在硝酸纤维素膜的质控带(C线)和检测带(T线)处分别包被羊抗鼠Ig G二抗和抗大片形吸虫ES抗原单克隆抗体7D4,经反应条件优化,组装成了大片形吸虫免疫诊断试纸条。经测试该诊断试纸条对ES抗原的检测下限为0.94μg/m L,与胰扩盘吸虫、前后盘吸虫、支原体、弓形虫、伊氏锥虫VSG抗原均无交叉反应,特异性较好。分别用诊断试纸条和双抗体夹心ELISA方法检测19份阳性粪样上清和35份阴性粪样上清,试纸条的总符合率为87.04%,ELISA为94.44%.利用研制的试纸条,对采集于广西地区水牛的334份新鲜样本进行了调查检测,阳性率为38.62%。结果证明该试纸条方法操作简单、快速、易于判定,特异性好,敏感性高,适合基层大面积普查和现场检测诊断大片形吸虫病,本检测方法的建立为大片形吸虫病的诊断和流行病学调查提供了新的方法。(本文来源于《第十届全国免疫学学术大会汇编》期刊2015-11-14）
免疫胶体金试纸条论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
采用柠檬酸钠还原法制备胶体颗粒,胶体金用抗鸽Ⅰ型副黏病毒(PPMV-1)F蛋白单克隆抗体标记并纯化,包被于玻璃纤维膜。再将纯化的抗PPMV-1 F蛋白单克隆抗体和羊抗鼠的二抗包被在NC膜作为检测线和质控线,组装成PPMV-1快速检测试纸条,建立一种快速、简便的检测PPMV-1的胶体金免疫层析方法。结果表明,所研制PPMV-1胶体金免疫层析快速检测试纸条,准确性高,且不与鸡传染性支气管炎病毒、鸡减蛋综合征病毒、鸡马立克病毒等发生交叉反应;批间和批内的重复性较好;灵敏度高,试纸条可以检测血凝效价≥23的病毒液;试纸条置4℃避光密封干燥保存1年,37℃放置10 d,对其性能没有任何影响。试纸条与HA、HI试验检测方法相比,检测棉拭子的符合率为97.5%,检测病料的符合率为100%。所研制的PPMV-1试纸条在鸽Ⅰ型副黏病毒检测诊断方面具有快速、灵敏、特异、简便等特点,具有良好的开发应用前景。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
免疫胶体金试纸条论文参考文献
[1].郭健,张月,王?舸,孙嘉慧,李艳.鹿布鲁菌病免疫胶体金检测试纸条的研制[J].畜牧与兽医.2019
[2].马志宏,杨明,郭慧琳,陈伯祥,张登基.鸽Ⅰ型副黏病毒免疫胶体金诊断试纸条的制备[J].中兽医医药杂志.2019
[3].杨宁宁,刘志科,王震,陈创夫,石峰.鸡沙门氏菌免疫胶体金试纸条的建立及初步应用[C].中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第二十四次学术研讨会、中国病理生理学会动物病理生理学专业委员会第二十叁次学术研讨会、中国实验动物学会实验病理学专业委员会第叁次学术研讨会、中国兽医病理学家第叁次学术研讨会论文集.2018
[4].寇金华,杨正涛,刘维建,高珺珊,李建华.猪弓形虫感染免疫胶体金试纸条的制备与初步应用[J].中国兽医学报.2018
[5].王华俊,刘宇,蒋薇,赵雪丽,曹伟伟.大片形吸虫免疫胶体金检测试纸条的研制及初步应用[C].中国畜牧兽医学会生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第十二次学术研讨会论文集.2016
[6].郑卫峰.IBV双抗体夹心ELISA检测方法的建立及免疫胶体金试纸条的研制[D].山西农业大学.2016
[7].穆昱.鹿黏膜病免疫胶体金诊断试纸条的研制及应用[D].吉林大学.2016
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[9].夏武强,胡叶军,孙琛,张美珍,王伟萍.甲基睾酮免疫胶体金试纸条的研制及在水产品中的应用[J].淡水渔业.2016
[10].王华俊,陈汉忠,谢彩华.大片形吸虫病免疫胶体金诊断试纸条的研制[C].第十届全国免疫学学术大会汇编.2015