导读:本文包含了杂交瘤单克隆抗体论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:萘,杂交瘤细胞株,单克隆抗体,HAT筛选
杂交瘤单克隆抗体论文文献综述
周勇,韩德明,马煜宁,程金平[1]（2019）在《抗萘单克隆抗体杂交瘤细胞株的构建》一文中研究指出为了构建针对石油运输泄露导致的海洋环境中萘等多环芳烃污染的免疫学快速检测方法,需获得高效稳定的分泌抗萘单克隆抗体的杂交瘤细胞株。本文以2-萘丁酸-KLH为免疫抗原免疫BALb/c小鼠,间接竞争ELISA测定小鼠血清效价,用细胞融合筛选技术筛选抗萘单克隆抗体杂交瘤细胞株,捕获ELISA测定小鼠免疫球蛋白亚型。结果显示,实验小鼠免疫血清效价最高能达到1∶80000,经过HAT筛选、复检和亚克隆后得到5个能分泌抗萘单克隆抗体的细胞株,细胞株上清液效价最高能达到1∶15625,抗萘单克隆抗体免疫球蛋白亚型均为IgG1,Kappa轻链。本方法成功构建的杂交瘤细胞株能稳定高效分泌抗萘单克隆抗体,抗体亚型符合免疫学检测的特性,为萘的ELISA检测方法建立及胶体金免疫层析(GICA)试纸条的研制提供了稳定高效的单克隆抗体源。(本文来源于《海洋环境科学》期刊2019年05期）
周勇,张佳琪,廖浩祥,马煜宁,程金平[2]（2019）在《抗DEP单克隆抗体杂交瘤细胞株的构建》一文中研究指出为构建针对水环境中邻苯二甲酸二乙酯(Diethyl phthalate,DEP)等邻苯二甲酸酯类(Phthalates,PAEs)化合物的免疫学快速检测方法,需获得高效稳定的分泌抗DEP单克隆抗体的杂交瘤细胞株.以邻苯二甲酸单乙酯(Monoethylphthalate,MEP)-BSA为免疫抗原免疫BALb/c小鼠,间接竞争ELISA测定小鼠血清效价,用细胞融合筛选技术筛选抗DEP单克隆抗体杂交瘤细胞株.结果显示,实验小鼠免疫血清效价最高能达到1:5 000,经过HAT筛选、复检和亚克隆后得到9个能分泌抗DEP单克隆抗体的细胞株,细胞株上清液效价最高能达到1:10 000,对DEP的抑制率最高能达到86.5%,且其对11种结构类似物的交叉反应率均低于0.1%,特异性较好.本研究成功构建的杂交瘤细胞株能稳定高效分泌抗DEP单克隆抗体,可为DEP的ELISA检测方法建立及胶体金免疫层析(Colloidal gold immunochromatography assay,GICA)试纸条的研制提供稳定高效的单克隆抗体源.(图8表2参23)(本文来源于《应用与环境生物学报》期刊2019年03期）
张洪杰,桑锋锋,刘阿华,李言言,王毅[3]（2017）在《分泌抗山羊γ干扰素单克隆抗体杂交瘤细胞株的制备与鉴定》一文中研究指出为筛选分泌山羊γ干扰素(IFN-γ)单克隆抗体的杂交瘤细胞,以原核表达的山羊rIFN-γ蛋白免疫Balb/c小鼠,取其脾脏细胞与SP2/0瘤细胞进行细胞融合,以间接ELISA方法筛选分泌山羊IFN-γ单克隆抗体杂交瘤细胞,采用山羊外周血淋巴细胞产生的IFN-γ包被酶标板对IFN-γ的特异性进行鉴定,用试纸条对IFN-γ单克隆抗体类别和亚型进行鉴定。结果获得了1株能特异性识别山羊IFN-γ的杂交瘤细胞3C,3C分泌的单克隆抗体能够特异性识别天然结构的山羊IFN-γ,单克隆抗体类别为IgG,轻链为κ型。(本文来源于《动物医学进展》期刊2017年12期）
时正朋,胡玉敏,陈翰卿,傅丰庆,张学光[4]（2016）在《一株特异性识别B7-H3杂交瘤单克隆抗体Y4F11的分析和鉴定》一文中研究指出目的研制小鼠抗人恶性胸水细胞表面分子的单克隆抗体(m Ab),并对其中Y4F11识别的抗原进行鉴定和验证。方法以胸水细胞为免疫原,常规免疫BALB/c小鼠、采用杂交瘤技术进行细胞融合和筛选阳性杂交瘤克隆;选取Y4F11为实验对象,采用流式细胞术分析其在初始和活化免疫细胞(T细胞、B细胞、NK细胞和单核细胞)上的结合情况;通过免疫共沉淀法获得与Y4F11特异性结合的条带、割胶、蛋白质谱测序后拼接出肽段,并进行BLAST分析比对;采用Western blot法、Dot-blot法及流式细胞术验证Y4F11与B7同源物3(B7-H3)的抗体抗原关系。结果获得78株能持续分泌识别恶性胸水细胞表面表达分子的抗体的杂交瘤细胞株,其中Y4F11与胸水细胞结合最高;Y4F11特异识别的条带相对分子质量(Mr)大小约为50 000,质谱结果经BLAST比对为B7-H3分子;继而的结合实验显示,Y4F11可以与B7-H3的转基因细胞结合,也可以与B7-H3融合蛋白有效地结合,B7-H3在免疫细胞表面表达的模式与Y4F11抗体在这些细胞上的结合一致,表明Y4F11识别的抗原分子为B7-H3。结论成功获得1株持续表达B7-H3 m Ab的杂交瘤细胞株Y4F11,为进一步研究分析B7-H3的生物学功能提供了物质基础。(本文来源于《细胞与分子免疫学杂志》期刊2016年10期）
张琳琳[5]（2016）在《杂交瘤技术制备单克隆抗体研究进展》一文中研究指出单克隆抗体广泛应用于生物医药和临床诊断等领域。本文综述杂交瘤技术制备单克隆抗体的研究进展,内容涉及实验动物和瘤细胞株的选择、免疫原和佐剂的使用,以及杂交瘤细胞的制备、筛选、克隆、培养和抗体的收集等方面的技术探索成果,旨在提供用杂交瘤技术制备单克隆抗体的基本资料。(本文来源于《生物学教学》期刊2016年08期）
凌婧,马珍妮,沈飞,谢丽倩,赵云霄[6]（2016）在《抗ADAMTS13单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立》一文中研究指出目的:建立分泌抗ADAMTS13单克隆抗体的杂交瘤细胞株,制备针对ADAMTS13不同结构域的单克隆抗体,为研究ADAMTS13功能、血栓形成的机制以及研究TTP治疗的新方法的提供有力的研究工具。方法:首先,我们构建了稳定表达截短型ADAMTS13-T7蛋白的HeLa细胞株,并扩大培养,收集无血清培养上清。通过Ni-NTA Agarose将浓缩后上清纯化,然后通过SDS-PAGE电泳后进行考马斯亮蓝染色和western blot鉴定,以全长ADAMTS13为对照。然后,我们用真核表达的截短型ADAMTS13-T7蛋白采用皮下多点注射免疫8周龄Balb/c雌性小鼠,并用纯蛋白液直接经尾静脉注射加强免疫。末次免疫后第3天眼球采血,分离上述小鼠抗血清,用ELISA方法测定免疫小鼠与ADAMTS13-T7蛋白的抗血清效价。用未免疫的正常小鼠血清作为阴性对照。用重组ADAMTS13-T7蛋白包板,ELISA检测免疫后:balb/c雌性小鼠抗血清效价。取小鼠脾脏,制成单细胞悬液与SP2/0骨髓瘤细胞以10:1的比例混合,进行细胞的融合。将融合杂交瘤细胞稀释至96孔板后置于37%、5%C02培养箱中培养。两周后观察96孔板中是否有克隆,选生长良好的克隆孔检测,阳性克隆孔扩大培养并再次检测。结果:构建了稳定表达截短型血管性血友病因子裂解蛋白酶ADAMTS13-T7的HeLa细胞株,收集上清纯化后获得重组ADA:MTS13-T7。利用真核表达的截短型ADAMTS13-T7蛋白免疫balb/c雌性小鼠,ELISA检测免疫后抗血清效价约为1:20000。利用杂交瘤技术通过融合,获得多株分泌抗重组ADAMTS13抗体的杂交瘤单克隆细胞株。将其中的30株转入液氮中冻存,以备进一步分选及功能研究。结论:使用真核表达的截短型ADAMTS13-T7蛋白,作为免疫抗原免疫ba1b/c雌性小鼠,并通过杂交瘤技术,融合获得多株分泌抗重组ADAMTS13抗体的杂交瘤单克隆细胞株,为进一步筛选出具有一定功能活性的单克隆抗体,从而为ADA:MTS13结构及功能的研究提供更多的有力工具奠定良好基础。(本文来源于《第十叁届江浙沪儿科学术会议暨2016年浙江省医学会儿科学学术年会论文汇编》期刊2016-07-21）
雷喜梅,陈静,杨盼盼,赵永祥,王晓梦[7]（2016）在《分泌抗猪流行性腹泻病毒中国变异株S蛋白单克隆抗体杂交瘤细胞系的建立》一文中研究指出以纯化的猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)中国变异株(CH/ZMDZY/11)S蛋白N端高变区(22-380aa)重组蛋白为抗原免疫BALB/C小鼠,以纯化CH/ZMDZY/11全病毒及带His标签的重组蛋白分别为筛选抗原,利用淋巴瘤杂交技术获得了一株稳定分泌抗S蛋白特异性单克隆抗体细胞株,命名为2D1。该株杂交瘤细胞诱生小鼠产生的腹水抗体效价为1∶3 200,免疫球蛋白类型为IgM。ELISA检测该单抗与PEDV流行株及PEDV CV777疫苗株全病毒的反应显着差异,可区分流行毒株和疫苗毒株;但该单抗用于Western blot不能区分PEDV流行株和疫苗株。ELISA及Western blot试验结果显示,该单抗有较好的PEDV特异性,可用于检测PEDV。(本文来源于《中国兽医学报》期刊2016年02期）
陈伯祥,杨明,贺泂杰,李杰[8]（2015）在《抗山羊痘病毒P32蛋白杂交瘤细胞的构建及其单克隆抗体的制备》一文中研究指出本研究旨在以纯化的山羊痘病毒P32蛋白为免疫原,构建杂交瘤细胞株,制备P32蛋白单克隆抗体。用纯化的P32蛋白免疫BALB/C小鼠后,按常规方法进行细胞融合,构建抗山羊痘病毒P32蛋白的杂交瘤细胞,制备P32蛋白单克隆抗体,获得4株能识别重组蛋白且特异性强无交叉反应的杂交瘤细胞株,腹水抗体效价均在10~5以上。山羊痘病毒P32蛋白杂交瘤细胞株的构建及单克隆抗体的制备为进一步开展检测方法研究提供了材料。(本文来源于《中国动物检疫》期刊2015年12期）
孙剑峰,杨明,陈伯祥,贺泂杰,李杰[9]（2015）在《山羊痘病毒ORF122蛋白杂交瘤细胞的构建及其单克隆抗体的制备》一文中研究指出本研究旨在以纯化的山羊痘病毒ORF122蛋白为免疫抗原,构建杂交瘤细胞株,制备ORF122蛋白单克隆抗体。用纯化的ORF122蛋白免疫BALB/c小鼠后,按通用的方法进行细胞融合,构建抗山羊痘病毒ORF122蛋白的杂交瘤细胞,制备ORF122蛋白单克隆抗体,获得6株能识别重组蛋白且特异性强无交叉反应的杂交瘤细胞株,腹水抗体效价均在104以上。山羊痘病毒ORF122蛋白杂交瘤细胞株的构建及单克隆抗体的制备,为山羊痘病毒的进一步研究提供了生物材料。(本文来源于《中兽医学杂志》期刊2015年10期）
王亚楠,王淑云,张海棠,王自良[10]（2014）在《抗重金属Cd~(2+)单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立及其免疫学特性鉴定》一文中研究指出旨在制备抗Cd2+高效价、敏感、特异的单克隆抗体(Cd2+mAb)。用异硫氰酸苄基乙二胺四乙酸(ITCBE)鳌合Cd2+合成Cd-ITCBE半抗原、异硫氰酯法制备免疫抗原Cd-ITCBE-BSA和包被抗原CdITCBE-OVA,紫外分光光度法(UV)、SDS-PAGE和电感耦合等离子体原子发射光谱法(ICP-AES)进行鉴定;用Cd-ITCBE-BSA免疫Balb/C小鼠细胞融合技术建立抗Cd2+的单克隆抗体(Cd2+mAb)杂交瘤细胞株、体内诱生腹水法制备Cd2+mAb并鉴定其免疫学特性。结果表明,人工抗原偶联成功,Cd-ITCBE-BSA和CdITCBE-OVA中载体蛋白与Cd2+的质量浓度分别为7.1g/L、191.7mg/L和6.7g/L、130.1mg/L;筛选出1A3、2B7、2E10、4F3 4株杂交瘤细胞,其中2E10株间接ELISA效价细胞培养上清为1∶(1.28×103),腹水为1∶(5.12×105),同种型为IgG1/κ,亲和常数(Ka)为7.58×108 L/moL,对Cd2+的半数抑制质量浓度(IC50)为16.3μg/L,与Hg2+的交叉反应率(CR%)为18.6%,与其他化合物无交叉反应。(本文来源于《西北农业学报》期刊2014年11期）
杂交瘤单克隆抗体论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
为构建针对水环境中邻苯二甲酸二乙酯(Diethyl phthalate,DEP)等邻苯二甲酸酯类(Phthalates,PAEs)化合物的免疫学快速检测方法,需获得高效稳定的分泌抗DEP单克隆抗体的杂交瘤细胞株.以邻苯二甲酸单乙酯(Monoethylphthalate,MEP)-BSA为免疫抗原免疫BALb/c小鼠,间接竞争ELISA测定小鼠血清效价,用细胞融合筛选技术筛选抗DEP单克隆抗体杂交瘤细胞株.结果显示,实验小鼠免疫血清效价最高能达到1:5 000,经过HAT筛选、复检和亚克隆后得到9个能分泌抗DEP单克隆抗体的细胞株,细胞株上清液效价最高能达到1:10 000,对DEP的抑制率最高能达到86.5%,且其对11种结构类似物的交叉反应率均低于0.1%,特异性较好.本研究成功构建的杂交瘤细胞株能稳定高效分泌抗DEP单克隆抗体,可为DEP的ELISA检测方法建立及胶体金免疫层析(Colloidal gold immunochromatography assay,GICA)试纸条的研制提供稳定高效的单克隆抗体源.(图8表2参23)
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
杂交瘤单克隆抗体论文参考文献
[1].周勇,韩德明,马煜宁,程金平.抗萘单克隆抗体杂交瘤细胞株的构建[J].海洋环境科学.2019
[2].周勇,张佳琪,廖浩祥,马煜宁,程金平.抗DEP单克隆抗体杂交瘤细胞株的构建[J].应用与环境生物学报.2019
[3].张洪杰,桑锋锋,刘阿华,李言言,王毅.分泌抗山羊γ干扰素单克隆抗体杂交瘤细胞株的制备与鉴定[J].动物医学进展.2017
[4].时正朋,胡玉敏,陈翰卿,傅丰庆,张学光.一株特异性识别B7-H3杂交瘤单克隆抗体Y4F11的分析和鉴定[J].细胞与分子免疫学杂志.2016
[5].张琳琳.杂交瘤技术制备单克隆抗体研究进展[J].生物学教学.2016
[6].凌婧,马珍妮,沈飞,谢丽倩,赵云霄.抗ADAMTS13单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立[C].第十叁届江浙沪儿科学术会议暨2016年浙江省医学会儿科学学术年会论文汇编.2016
[7].雷喜梅,陈静,杨盼盼,赵永祥,王晓梦.分泌抗猪流行性腹泻病毒中国变异株S蛋白单克隆抗体杂交瘤细胞系的建立[J].中国兽医学报.2016
[8].陈伯祥,杨明,贺泂杰,李杰.抗山羊痘病毒P32蛋白杂交瘤细胞的构建及其单克隆抗体的制备[J].中国动物检疫.2015
[9].孙剑峰,杨明,陈伯祥,贺泂杰,李杰.山羊痘病毒ORF122蛋白杂交瘤细胞的构建及其单克隆抗体的制备[J].中兽医学杂志.2015
[10].王亚楠,王淑云,张海棠,王自良.抗重金属Cd~(2+)单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立及其免疫学特性鉴定[J].西北农业学报.2014