导读:本文包含了骨骼肌肌钙蛋白论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:小尾寒羊,杜泊羊,cTnC蛋白,ssTn,I蛋白
骨骼肌肌钙蛋白论文文献综述
孙艳[1]（2016）在《小尾寒羊叁个慢型骨骼肌肌钙蛋白的基因克隆、结构特征及组织表达分析》一文中研究指出慢型骨骼肌肌钙蛋白基因主要包括肌钙蛋白C 1基因(Troponin C type 1,TNNC1)、肌钙蛋白I 1基因(Troponin I type 1,TNNI1)和肌钙蛋白T 1基因(Troponin T type 1,TNNT1),它们对骨骼肌的收缩、骨骼肌肌肉纤维特性及多种疾病的发生有密切关系。目前,有关绵羊的TNNC1、TNNI1和TNNT1基因的全长核酸序列未见报道。本试验采用RT-PCR、RACE、生物信息学分析、荧光定量PCR等技术方法,克隆了小尾寒羊TNNC1、TNNI1和TNNT1基因的全长序列,预测分析了其对应蛋白的序列和特性,构建了其在小尾寒羊和杜泊羊多种组织的表达谱,从分子水平上探索了小尾寒羊叁个基因的主要结构和表达特性。主要结果如下:(1)克隆测序得到了小尾寒羊TNNC1、TNNI1和TNNT1基因的cDNA序列,其中TNNI1包含两个5′端有区别的序列,并分别命名为TNNI1a和TNNI1b。得到的TNNC1、TNNI1a和TNNT1基因的全长cDNA序列及TNNI1b基因的部分cDNA序列已提交至GenBank,并分别获得登录号为KR153938、KT218688、KT218689及KT218690。相应的编码氨基酸长度分别为161、187、194和263个氨基酸。(2)cTnC蛋白为偏酸性蛋白,且结构比较稳定,亲水性比较好,流动性比较大;ssTnI蛋白两种亚型均为偏碱性蛋白,且结构相对不稳定,亲水性比较好;ssTnT蛋白为偏酸性蛋白,流动性一般,结构不是很稳定,但亲水性比较好,流动性比较大。cTnC、ssTnI和ssTnT蛋白均没有跨膜结构域,含有多个磷酸化位点,无任何N-糖基化位点,预测为非分泌性蛋白质。二级结构主要以α-螺旋和无规则卷曲为主。(3)多物种氨基酸序列比对结果显示:cTnC蛋白的氨基酸序列在本试验分析的物种中高度保守。ssTnI两亚型蛋白和ssTnT蛋白的氨基酸序列均与试验中其它哺乳动物的保守性比较高,而与试验中其它的非哺乳动物的保守性相对较差。系统进化树结果显示:绵羊的cTnC蛋白最先与野猪、家牛和山羊聚到一类;绵羊的ssTnI蛋白最先与山羊和家牛聚到一类;绵羊的ssTnT蛋白最先与野猪和家牛聚到一类。上述结果表明小尾寒羊中的cTnC、ssTn I和ssTnT蛋白均与试验中的其它哺乳动物的关系比较近。(4)TNNC1、TNNI1和TNNT1基因在小尾寒羊和杜泊羊的多种组织中的表达情况不同,然而,这几个基因的表达模式却存在一定的共性。TNNC1、TNNI1和TNNT1基因均在肋间肌、股二头肌和背最长肌中高表达,且其表达量均为肋间肌>股二头肌>背最长肌。小尾寒羊和杜泊羊中TNNI1a基因在每个组织中的表达量都高于TNNI1b基因在各组织中的表达量。此外,TNNC1、TNNI1和TNNT1基因在小尾寒羊和杜泊羊两品种羊中的表达量也存在明显的区别。特别的,TNNI1a在小尾寒羊肋间肌中的表达量显着高于其在杜泊羊中的表达量(p<0.05)。叁个基因对应的蛋白均在背最长肌、肋间肌、股二头肌中存在表达,此外,在两品种羊的心肌中,cTnC蛋白也存在表达,而ssTn I和ssTnT蛋白则不存在表达。综上所述,本试验成功克隆了小尾寒羊的TNNC1、TNNI1和TNNT1基因,并对其展开了较为系统的研究。从分子水平探索上述基因的特性及功能,为后续基因功能的研究和分子育种提供基本的理论依据。(本文来源于《山东农业大学》期刊2016-04-28）
张镭,孙俊红,李永强,喻永敏,路健[2]（2013）在《骨骼肌肌钙蛋白I的研究进展及法医学应用展望》一文中研究指出骨骼肌肌钙蛋白I(skeletal troponin I)是骨骼肌特有的蛋白质,在骨骼肌收缩过程中起主要调节作用。当骨骼肌细胞受损时,其快速释放进入血液循环,血液中骨骼肌肌钙蛋白I的浓度发生变化,测定其浓度有望成为检测骨骼肌损伤的新方法。该指标敏感性高、特异性强的诊断意义日益凸显。同时,骨骼肌肌钙蛋白I在法医学损伤时间推断方面可能有良好的应用前景。(本文来源于《中国法医学杂志》期刊2013年04期）
杨芳,郑洪新,朱辉,林庶如,王剑[3]（2011）在《补肾、健脾、活血法对糖皮质激素诱导骨质疏松症大鼠骨密度、骨骼肌肌钙蛋白影响的比较研究》一文中研究指出目的:观察中医不同治法对糖皮质激素诱导骨质疏松症大鼠骨密度、肌钙蛋白的影响,探讨中医防治骨质疏松症的作用机制。方法:将120只雌雄各半的大鼠随机分为正常对照组、模型对照组、补肾中药组、健脾中药组、活血化瘀中药组和骨疏康中药组6个组。用地塞米松肌注造模。实验结束后,腹主动脉取血处死大鼠,用酶联免疫法测定大鼠骨骼肌肌钙蛋白,用双能X线骨密度仪对大鼠离体股骨上1/3骨密度。结果:①与正常组比较,模空组大鼠离体股骨上1/3骨密度显着降低(P<0.01);与模空组比较,各治疗组大鼠股骨上1/3骨密度均有不同程度的升高,其中以补肾中药组升高程度最为显着(P<0.01),其余各治疗组骨密度较模空组升高程度比较无统计学意义。②与正常组比较,其他各组大鼠骨骼肌的肌钙蛋白显着降低(P<0.01);与模空组比较,补肾组大鼠骨骼肌的肌钙蛋白均明显升高(P<0.01);补肾组大鼠骨骼肌的肌钙蛋白升高最为明显,明显高于其他各组,具有显着性差异(P<0.01);活血组大鼠骨骼肌的肌钙蛋白升高程度最低,与正常组、补肾组比较具有显着统计学差异(P<0.01),与模空组、健脾组比较具有统计学意义(P<0.05);健脾组和骨疏康组升高程度也比较明显,但二者比较无统计学意义。结论:补肾、健脾方法对骨质疏松症大鼠的骨密度和肌钙蛋白具有一定调节作用。(本文来源于《辽宁中医杂志》期刊2011年05期）
徐秋良,张庆莉,唐光武,陈玉林[4]（2010）在《绵羊骨骼肌快速肌钙蛋白(TnCf)电子克隆及RT-PCR验证》一文中研究指出传统的基因克隆有两种方法:一是建立包含目的基因的cDNA文库,根据基因的保守序列设计DNA探针,采用低严谨度的杂交获得目的基因;再者是根据基因的保守序列设计兼并引物,应用PCR技术获得目的基因,这两种方法在操作上有一定的技术难度。我们应用生物信息技术采用电子克隆的方法获得绵羊骨骼肌快速肌钙蛋白基因(TnCf)全编码序列,并用RT-PCR进行验证,结果表明:在TnCf开放阅读框483个碱基中,电子克隆与RT-PCR结果有4个碱基差异,说明电子克隆是基因克隆可靠的生物信息学辅助方法。(本文来源于《郑州牧业工程高等专科学校学报》期刊2010年01期）
孟宪荣,周蕾蕾,栗绍文,周祖涛,毕丁仁[5]（2009）在《猪骨骼肌肌钙蛋白Ⅰ基因的表达及其单克隆抗体的制备》一文中研究指出猪骨骼肌肌钙蛋白Ⅰ是猪肉所特有的一种蛋白质,可以作为一种耐热种类标志蛋白来区分于其他熟肉制品的肉种类来源。本研究根据TNNI1 cDNA序列(AY282922)设计合成了一对引物TnI-SPI/TnI-SP2,利用RT-PCR方法成功克隆到到猪TnI-S4基因(登录号为EU7327 36),该基因大小为546bp,编码1 87个氨基酸。同时构建了该基因的原核表达载体(pKG-TnI-slow和pET-32a-TnI-slow),在E.coli BL21(DB3)中表达发现表达产物分子量大小为47KD和41KD的蛋白条带,与预期融合蛋白GST-TnI-SLOW和HIS-TnI-SLOW的分子量大小一致。Western-blotting分析进一步表明表达产物GST-TnI-SLOW融合蛋白具有良好的免疫活性。利用纯化的GST-Tnl-SLOW融合蛋白,本研究还制备了抗猪慢骨骼肌亚型肌钙蛋白Ⅰ单克隆抗体,特异性试验表明该单抗对熟猪肉样品显示阳性,而与其它动物肉样品没有明显的交叉反应性。本实验研究结果为今后检测猪肉的夹心ELISA方法的确立奠定了基础。(本文来源于《中国畜牧兽医学会2009学术年会论文集（上册）》期刊2009-10-11）
周蕾蕾[6]（2009）在《猪骨骼肌肌钙蛋白Ⅰ基因的表达及其单克隆抗体的制备》一文中研究指出肉种类掺假不仅违反了食品标识法、公平交易法和消费者保护法,还有宗教因素(回教和印度教),而且肉产品中含有未知种类还可能产生食物过敏和中毒,对消费者有着潜在的危害。目前在肉制品零售市场上,肉种类掺假是一个普遍存在的现象,尤其是熟肉制品的掺假发生率更高。由于价值低,颜色和组织相似,猪肉是价格较高的牛肉的潜在的掺假资源。目前生肉鉴别方法已经比较成熟,而熟肉制品的鉴别方法比较复杂,蛋白质在加热期间会有所变化,如蛋白质变性、蛋白质的溶解度降低以及丧失抗原性,所以鉴别加工处理过的肉品种类是比较困难的。因此免疫分析法鉴定加热过的肉品种类或检测其掺假情况,必须以具有种属专一性的耐热性抗原或热稳定性肌肉蛋白质(thermostable muscle proteins,TSMPs)作为指标。据国外大量文献报道,猪骨骼肌肌钙蛋白Ⅰ(Porcine skeletal muscle troponinⅠ,PsTnI)是猪肉所特有的一种蛋白质,可以作为一种耐热种类标志蛋白(thermostable species marker protein),区分于其他熟肉制品的肉种类来源。本试验运用原核表达系统获得重组猪骨骼肌肌钙蛋白Ⅰ,分别制备兔抗猪慢骨骼肌亚型肌钙蛋白Ⅰ多克隆抗体和抗猪慢骨骼肌亚型肌钙蛋白Ⅰ单克隆抗体,为今后建立检测熟猪肉的夹心ELISA检测方法提供可靠的生物学材料,尤其是检测价值较高的牛肉制品中的掺假猪肉奠定良好的基础。本研究的主要内容包括:1.猪骨骼肌TnI-fast/slow基因的克隆与表达根据GenBank中收录的Sus scrofa troponinⅠ(TNNI2)cDNA序列(DQ091303)和Sus scrofa troponinⅠ(TNNI1)cDNA序列(AY282922)分别设计合成了引物TnI-FP1/TnI-FP2和TnI-SP1/TnI-SP2,然后提取猪骨骼肌总RNA,利用RT-PCR方法扩增到TnI-fast和TnI-slow基因并克隆到pMD18-T载体上,对所得到的重组质粒进行酶切分析及序列测定,BLAST比对结果:同源性达99%。分别构建了TnI-fast和TnI-slow基因的原核表达质粒(pKG-TnI-fast、pKG-TnI-slow和pET-32a-TnI-fast),并在E.coli BL21(DE3)中成功获得了表达,对表达产物进行SDS-PAGE电泳分析,分别出现了分子量大小为47KD、47KD和41KD的蛋白条带,与预期融合蛋白GST-TnI-FAST、GST-TnI-SLOW和HIS-TnI-SLOW的分子量大小一致。而且Western-blotting分析表明表达产物GST-TnI-FAST和GST-TnI-SLOW融合蛋白具有良好的生物学活性,为今后的研究奠定了坚实的基础。2.兔抗猪慢骨骼肌亚型肌钙蛋白Ⅰ多克隆抗体的制备与纯化将纯化的重组蛋白GST-TnI-SLOW作为免疫原,通过设计好的免疫程序,成功制备了兔抗重组蛋白GST-TnI-SLOW的高免血清。对所得高免血清分别采用饱和硫酸铵粗提和Sephadex G-200过柱纯化,最后得到了纯化的兔抗重组蛋白GST-TnI-SLOW IgG。3.抗猪慢骨骼肌亚型肌钙蛋白Ⅰ单克隆抗体的制备与纯化将纯化的融合蛋白GST-TnI-SLOW免疫BALB/c小鼠,制备免疫脾细胞,经过细胞融合,分别用纯化好的GST和HIS-TnI-SLOW作为筛选抗原进行双向负筛选和双向正筛选,成功获得了叁株能稳定分泌抗TnI-SLOW蛋白的单克隆抗体的杂交瘤细胞细胞株3C8,3H10,4H9。经小鼠腹腔接种获得的单抗效价均较高,3株针对HIS-TnI-SLOW的ELISA效价均在1:6.4×10~5以上,通过辛酸硫酸铵法提纯获得了纯度较高的单克隆抗体。采用夹心ELISA方法来验证抗猪慢骨骼肌肌钙蛋白Ⅰ(Porcine SkeletalTnI-SLOW McAb)单克隆抗体的特异性。实验结果表明夹心ELISA对100℃,30min处理过的猪肉样本显示阳性,而与其它动物肌肉样品没有明显的交叉反应性。证明本试验研制的针对猪慢骨骼肌亚型肌钙蛋白Ⅰ单克隆抗体和多克隆抗体具有动物种属特异性。(本文来源于《华中农业大学》期刊2009-06-01）
张镭,孙俊红,路健,王亚方,王英元[7]（2009）在《大鼠骨骼肌挫伤后骨骼肌肌钙蛋白I mRNA的表达变化》一文中研究指出目的应用实时荧光定量PCR技术检测大鼠骨骼肌挫伤后肌钙蛋白I mRNA(sTnI mRNA)表达情况,分析其与挫伤的关系。方法建立大鼠骨骼肌挫伤模型,分别在挫伤后0.5h,1h,6h,12h,18h取材。提取挫伤肌肉中的总RNA,逆转录合成cDNA第一条链,以cDNA作为模板,通过特异性上下游引物荧光定量PCR检测cDNA的拷贝数,选取管家基因核糖体蛋白L32为参比基因,对扩增结果进行相对定量分析。结果大鼠骨骼肌挫伤后0.5h、1h、6h、12h、18h的sTnI mRNA表达量分别为正常组的66.7%、46.6%、31.9%、18.5%和15.3%,呈时序性表达下调趋势。结论大鼠骨骼肌挫伤后0.5h内sTnI mRNA的表达即开始下调,18h内sTnI mRNA的表达有一定的时间规律性,可望作为临床诊断骨骼肌损伤的指标之一。(本文来源于《中国现代医生》期刊2009年13期）
马学华,赵瑞虹,刘忠英,胡秀丽[8]（2008）在《兔骨骼肌肌钙蛋白C的提取纯化》一文中研究指出目的研究出一种提取骨骼肌肌钙蛋白C(sTnC)的新方法。方法兔骨骼肌经匀浆、离心后上DEAE-Sephadex A25层析柱、Sephadex G75层析柱及Butyl Sepharose层析柱以获得sTnC纯品。结果终产品出现了指状吸收光谱,其吸收峰位于253nm、259nm、265nm、269nm、276nm。采用Diol-150色谱柱进行HPLC分析,出现单一峰。SDS-PAGE分析,得到一条电泳带,计算其分子量为19KD。本实验sTnC的产率为50mg/100g兔骨骼肌,提取周期缩短至6天。结论该方法不仅简化了sTnC的提取纯化步骤,缩短了提取周期,而且使其产率大大提高。(本文来源于《中国实验诊断学》期刊2008年07期）
张彦伟,刘杨,蒯锦霞,王英元[9]（2008）在《大鼠骨骼肌肌钙蛋白I与死亡及离体时间的相关性探讨》一文中研究指出目的研究大鼠骨骼肌肌钙蛋白I(sTnI)在体和离体两种情况下的降解规律及其相互间的异同,探讨较晚期死后经过时间的推断方法。方法以大鼠骨骼肌组织为研究对象,利用免疫印迹(Westernblot)结合图像分析技术半定量检测不同死亡(离体)时间内大鼠sTnI的含量,观察其与死亡(离体)时间的关系及相互间的异同。结果大鼠sTnI的含量随死亡(离体)时间延长而逐渐下降,且与死亡(离体)时间的对数值均呈近似的线性关系,但在体情况下要比离体情况下降解慢。结论sTnI有望用于推断较晚期死后经过时间;sTnI在体与离体条件下的降解情况并不完全一致。(本文来源于《中西医结合心脑血管病杂志》期刊2008年04期）
张彦伟[10]（2008）在《大鼠心肌和骨骼肌肌钙蛋白I降解与死亡时间关系的研究》一文中研究指出目的研究大鼠心肌肌钙蛋白I(Cardiac troponin I, cTnI)和骨骼肌肌钙蛋白I(Skeletal troponin I, sTnI)在体和离体两种情况下的降解规律并进行比较,探讨根据cTnI及sTnI降解情况推断死亡时间的可行性,为死亡时间(Postmortem interval,PMI)推断的研究提供新的思路和方法,为法医实践中PMI的推断提供科学依据。方法将健康SD大鼠10只按在体和离体二种处置方式随机平均分为2组,每组5只。将10只大鼠用机械性窒息法致死,取离体组大鼠心肌及骨骼肌组织置于保湿盒内与在体组大鼠尸体一起放入人工气候箱中,恒温30℃,湿度恒定为40%保存。分别于取材后0、24、48、72、96和120h提取离体及在体组织中的蛋白质,应用免疫印迹(Western blot)法结合图像分析技术半定量检测当时死亡及离体时间的大鼠cTnI、sTnI含量。用死后120h时cTnI或sTnI的含量占死亡即刻cTnI或sTnI的含量的百分数来表示cTnI及sTnI降解的相对速度。将所得数据进行统计学分析,寻找随着PMI的延长各含量参数的变化规律,计算各参数与PMI的相关系数,求出回归方程。最后根据分析结果比较在体和离体cTnI或sTnI降解规律之间的异同。结果1、在体及离体情况下大鼠cTnI与sTnI的含量均随死亡或离体时间延长而逐渐下降,且与死亡或离体时间的对数值有很强的线性关系。2、在体情况下cTnI与sTnI的降解比离体情况慢。3、在体和离体两种情况下sTnI均比cTnI降解慢。结论1、cTnI和sTnI有望用于推断五天以内的死后经过时间。2、cTnI和sTnI在离体与在体条件下的降解情况并不完全一致,离体时的降解速度要比在体时快。3、sTnI较cTnI更适用于推断PMI。(本文来源于《山西医科大学》期刊2008-02-14）
骨骼肌肌钙蛋白论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
骨骼肌肌钙蛋白I(skeletal troponin I)是骨骼肌特有的蛋白质,在骨骼肌收缩过程中起主要调节作用。当骨骼肌细胞受损时,其快速释放进入血液循环,血液中骨骼肌肌钙蛋白I的浓度发生变化,测定其浓度有望成为检测骨骼肌损伤的新方法。该指标敏感性高、特异性强的诊断意义日益凸显。同时,骨骼肌肌钙蛋白I在法医学损伤时间推断方面可能有良好的应用前景。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
骨骼肌肌钙蛋白论文参考文献
[1].孙艳.小尾寒羊叁个慢型骨骼肌肌钙蛋白的基因克隆、结构特征及组织表达分析[D].山东农业大学.2016
[2].张镭,孙俊红,李永强,喻永敏,路健.骨骼肌肌钙蛋白I的研究进展及法医学应用展望[J].中国法医学杂志.2013
[3].杨芳,郑洪新,朱辉,林庶如,王剑.补肾、健脾、活血法对糖皮质激素诱导骨质疏松症大鼠骨密度、骨骼肌肌钙蛋白影响的比较研究[J].辽宁中医杂志.2011
[4].徐秋良,张庆莉,唐光武,陈玉林.绵羊骨骼肌快速肌钙蛋白(TnCf)电子克隆及RT-PCR验证[J].郑州牧业工程高等专科学校学报.2010
[5].孟宪荣,周蕾蕾,栗绍文,周祖涛,毕丁仁.猪骨骼肌肌钙蛋白Ⅰ基因的表达及其单克隆抗体的制备[C].中国畜牧兽医学会2009学术年会论文集（上册）.2009
[6].周蕾蕾.猪骨骼肌肌钙蛋白Ⅰ基因的表达及其单克隆抗体的制备[D].华中农业大学.2009
[7].张镭,孙俊红,路健,王亚方,王英元.大鼠骨骼肌挫伤后骨骼肌肌钙蛋白ImRNA的表达变化[J].中国现代医生.2009
[8].马学华,赵瑞虹,刘忠英,胡秀丽.兔骨骼肌肌钙蛋白C的提取纯化[J].中国实验诊断学.2008
[9].张彦伟,刘杨,蒯锦霞,王英元.大鼠骨骼肌肌钙蛋白I与死亡及离体时间的相关性探讨[J].中西医结合心脑血管病杂志.2008
[10].张彦伟.大鼠心肌和骨骼肌肌钙蛋白I降解与死亡时间关系的研究[D].山西医科大学.2008