酸性木聚糖酶论文-吴仁智,黄俊,芦志龙,陈小玲,陈英

酸性木聚糖酶论文-吴仁智,黄俊,芦志龙,陈小玲,陈英

导读:本文包含了酸性木聚糖酶论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献,主要关键词:日本曲霉,筛选,酸性木聚糖酶,酶学性质

酸性木聚糖酶论文文献综述

吴仁智,黄俊,芦志龙,陈小玲,陈英[1](2018)在《酸性木聚糖酶产生菌XYW5的筛选及酶学性质》一文中研究指出【目的】选育优良的产酸性木聚糖酶的微生物,考察酸性木聚糖酶的酶学性质(尤其是pH值为4.0),为实现纤维素乙醇低成本清洁生产打下基础。【方法】从广西大学农场采集土壤,富集后经产酸性木聚糖酶的培养,比较酸性木聚糖酶酶活力,选育酸性木聚糖酶高产菌株,鉴定菌种,分析酶学性质。【结果】筛选出产酸性木聚糖酶酶活力较高的菌株XYW5。扩增菌株XYW5的ITS rDNA序列,经测序分析比对,将其初步鉴定为日本曲霉Aspergillus japonicus XYW5。菌株XYW5产酸性木聚糖酶和酸性木糖苷酶的酶活力最高分别达(26. 26±0. 97)U/mL和(0.63±0.02) U/mL,比活力分别为(85.50±0.63) U/mg和(1.80±0.01) U/mg;其酸性木聚糖酶最适温度和最适pH值分别为65℃和6.5,酸性木糖苷酶最适温度和最适pH值分别为70℃和4.5;酸性木聚糖酶兼有酸性CMCase酶活力,达到8.54 U/mL。【结论】菌株XYW5所产的酸性木聚糖酶具有开发成为优良工业酸性木聚糖酶的潜力。(本文来源于《广西科学》期刊2018年06期)

焦丛蕊,杨文娟,陈晓玲,董自星,金鹏[2](2017)在《黑曲霉xynC基因编码一种低温酸性木聚糖酶》一文中研究指出木聚糖酶(xylanase,EC 3.2.1.8)可以随机切割木聚糖主链的β-1,4-糖苷键,在饲料、食品、造纸和纺织等领域具有广泛的应用。该研究通过分子克隆技术将黑曲霉CICIM F0510来源的木聚糖酶基因xyn C在毕赤酵母中进行了克隆表达,构建获得了重组菌GS115(p PIC-XynC)。在摇瓶水平上,重组菌的酶活为1.14 U/m L。酶学性质的研究表明,重组酶XynC的最适反应温度和pH分别为30℃和2.5,且它在25~40℃或pH 2.0~5.0有较好的稳定性;K+对XynC的活性有微弱的促进作用,而Ca~(2+)、Co~(2+)、Mn~(2+)、Zn~(2+)、Cu~(2+)、Fe~(3+)、Sn~(2+)、EDTA和SDS等对XynC的活性有不同程度的抑制作用。此外,该酶还可以水解戊聚糖产生聚合度为3~6的低聚木糖。这些良好的理化性质为重组酶XynC在饲料及食品等领域的应用奠定了基础。(本文来源于《食品与发酵工业》期刊2017年11期)

侯洁,李琴,熊科,徐友强,李秀婷[3](2017)在《微紫青霉酸性木聚糖酶xynA基因的克隆与序列分析》一文中研究指出基于酸性木聚糖酶在饲料及酿酒行业良好的应用前景,通过基因组步移的方法克隆得到微紫青霉酸性木聚糖酶的全长基因xynA,然后采取重迭延伸PCR技术进行内含子的切除获得xynA的cDNA序列,并对其进行了生物信息学分析。序列分析结果显示xynA基因全长720 bp,内含子63 bp,cDNA全长657 bp。推测该木聚糖酶编码信号肽28个氨基酸,成熟肽190个氨基酸;预测该蛋白为分子质量20.61 kD、等电点7.0的亲水性蛋白,且分子内不含二硫键。与其他真菌来源的GH11族耐酸性木聚糖酶进行序列比对,结果显示该酶的相应位置具有特征天冬氨酸残基Asp,且具有糖苷水解酶11族的保守区域特征以及典型的"右手半握"状结构,重组木聚糖酶基因xynA能够在大肠杆菌中成功表达,比酶活力达220.5 U/mg。(本文来源于《食品科学》期刊2017年14期)

吴仁智,黄俊,芦志龙,陈英,陆琦[4](2017)在《里氏木霉和黑曲霉产酸性木聚糖酶及酶学特性比较》一文中研究指出【目的】对黑曲霉和里氏木霉产酸性木聚糖酶的性能及所产粗酶的酶学特性进行分析比较,尤其是考察pH值为4时木聚糖酶酶活力及稳定性,从而确定潜在的较为理想的酸性木聚糖酶。【方法】将里氏木霉和黑曲霉接种至培养基进行产酶培养,比较分析两者的酸性木聚糖酶、酸性木糖苷酶的酶活力及酶学特性。【结果】黑曲霉酸性木聚糖酶和酸性木糖苷酶的酶活力最高分别达(52.36±2.61)U/mL和(0.57±0.01)U/mL,酸性木聚糖酶最适温度和pH值分别为55℃、5.0,酸性木糖苷酶最适温度和pH值分别为75℃、5.0;里氏木霉酸性木聚糖酶和酸性木糖苷酶的酶活力最高分别达(10.12±0.95)U/mL和(0.32±0.05)U/mL,酸性木聚糖酶最适温度和pH值分别为65℃、6.5,酸性木糖苷酶最适温度和pH值分别为65℃、4.5。黑曲霉和里氏木霉的酸性木聚糖酶兼有酸性CMCase酶活力,分别为(5.26±0.21)U/mL、(1.72±0.21)U/mL。【结论】黑曲霉所产酸性木聚糖酶明显比里氏木霉的更优良,是潜在的较为理想的酸性木聚糖酶。(本文来源于《广西科学》期刊2017年01期)

吴春玲,李璠,马超,袁月,范光森[5](2016)在《酸性木聚糖酶交联酶聚集体的制备条件优化》一文中研究指出交联酶聚集体法是一种新型的无载体酶固定化方法,为提高酸性木聚糖酶的稳定性,使用该法固定化微紫青霉产酸性木聚糖酶,制备无载体固定化木聚糖酶,并对其制备条件进行优化。结果表明,优选的制备条件为将质量浓度0.36 mg/m L的酸性木聚糖酶粗酶液在冰水浴中经饱和质量分数为85%的硫酸铵沉淀30 min后,于40℃,加入终体积分数为0.14%的戊二醛,交联4 h可获得较高活性的交联酶聚集体,酶活保留率达42.2%。这有助于酸性木聚糖酶更好地在工业中应用。(本文来源于《食品科学技术学报》期刊2016年05期)

周宁[6](2016)在《产酸性木聚糖酶链霉菌的鉴定、产酶条件优化及其基因克隆与表达》一文中研究指出半纤维素在秸秆中含量仅次于纤维素,是地球上第二大类可再生自然资源有机物。但大多数作为废弃物被浪费。我国拥有丰富的秸秆资源,但大多数作为废弃物被浪费,或者被焚烧对环境造成极大的威胁。如何有效利用秸秆中的半纤维素,将其转化为可利用的资源和能源是一个亟待解决的问题。植物半纤维素可被以木聚糖酶为主的半纤维素酶降解,木聚糖酶在造纸工业、食品行业、饲料添加剂等领域中显示的诸多应用价值不可小觑。本研究从土样和滩羊瘤胃内容物中分离产木聚糖酶的菌株,并对产酶水平高的菌株进行种属鉴定,同时分析其所产酶的酶学特性、产酶条件优化,并研究其所产木聚糖酶对叁种粗饲料(麦秸、玉米秸秆、苜蓿草粉)的降解效果,通过分子生物技术克隆编码木聚糖酶的基因,并将其在大肠杆菌中进行原核表达,对其重组木聚糖酶的酶学性质进行评价,为该酶作为酶制剂应用于粗纤维饲料降解提供依据。试验结果如下:1.试验采用刚果红染色法和发酵液法从滩羊瘤胃内容物及土壤中筛选到6株能够分解木聚糖的细菌,其中分离于土壤中的菌株WL003,酶活高达20.68 U/mL。通过生理生化特性及系统发育树的构建进行种属鉴定,鉴定为灰略红链霉菌,属于革兰氏阳性菌。2.菌株WL003适宜在pH为6.0、培养温度32℃、180 rpm条件下生长,发酵7 d达到产酶高峰,以麦秸(10%)为碳源、牛肉膏为氮源进行液体发酵培养,并且在发酵培养液中添加0.1%的吐温-80能够使菌株表现更好的产酶能力,经过优化酶活提高了2.46倍。粗酶液对麦秸的降解效果最好,苜蓿草粉最差。3.菌株WL003分泌的木聚糖酶最适温度为65℃,最适pH值为4.5,经30℃~55℃处理10 min,残余酶活不低于80%;经pH 3.5~11.0范围内处理1.5 h后,残余酶活不低于88%;吐温-80可激活木聚糖酶活力,Cu2+、SDS及β-巯基乙醇则极大地抑制酶活。4.克隆了灰略红链霉菌WL003木聚糖酶基因xyn130,完整的阅读框全长1320 bp,编码氨基酸439个,理论的分子量和pI分别为47.25 kDa和5.86;基因xyn130编码的蛋白为亲水性稳定蛋白,有3个糖基化位点,20个磷酸化位点。该酶属于糖苷水解酶家族GH10,Glu-170、Glu-278和Asn-343为XYN130可能的催化残基,具有GH10家族典型的(β/α)8构型。5.构建重组表达载体pET-xyn130,经转化实现其在E.coli BL21(DE3)中的分泌表达,在0.2 mmol/L IPTG条件下诱导时间为6 h,获得最高诱导酶活。重组木聚糖酶最适温度为60℃,最适pH为5.5。在30℃~75℃范围内有较好的耐热性,对于75℃以上表现不耐受;在pH 3.5~11.0范围内耐受性很好,对于pH 3.0和pH 12.0表现极不耐受;Cu2+、SDS、β-巯基乙醇、EDTA、Mn2+和Zn2+不同程度地抑制重组酶酶活,其中Cu2+表现为极强抑制,SDS强抑制。结论:采用刚果红染色法从土样选育到一株产酸性木聚糖酶的灰略红链霉菌WL003,优化后酶活提高了2.46倍,发酵液对麦秸降解效果最理想,苜蓿草粉最差。成功克隆了木聚糖酶基因xyn130(NO.KU860088),该基因全长1320 bp,连续编码439个氨基酸,理论分子量为47.25 kDa,等电点pI为5.86。成功实现木聚糖酶基因xyn130在大肠杆菌中的表达,重组酶最适温度和pH分别为60℃和5.5,SDS较大程度地抑制酶活,而Cu2+则使酶彻底失活。(本文来源于《西北农林科技大学》期刊2016-05-01)

周宁,王智伟,曹平华,王磊,陈玉林[7](2016)在《产酸性木聚糖酶链霉菌的鉴定、酶学特性及发酵工艺研究》一文中研究指出木聚糖是谷物类饲料中的主要抗营养因子。为筛选高效降解半纤维素的菌株,提高粗饲料利用率,本试验采用水解圈法从土壤中筛选出1株产木聚糖酶的细菌,经鉴定为灰略红链霉菌,命名为Streptomyces griseorubens WL003。该菌所产木聚糖酶的最适酶促反应温度和p H分别为65℃、4.5,于30~55℃处理10 min后,残余酶活不低于80%;于p H 3.5~11.0处理1.5 h,残余酶活仍保持在88%以上;Tween-80可提高木聚糖酶活力,而Cu2+、SDS及β-巯基乙醇则会较强地抑制酶活。该菌株以9%接种量接种至最适发酵培养基,碳源为10%麦秸,氮源为1.41%牛肉膏,0.1%吐温-80,初始p H为6.0,经32℃、180 r/min下培养7 d时,所产木聚糖酶活性最高,可达50.82 U/m L,为优化前2.5倍。菌株WL003对麦秸的粗纤维降解效果最好,对苜蓿草粉的粗纤维降解效果最差。证明从土样分离到的酸性木聚糖酶菌株WL003,在降解饲料粗纤维方面具有较好的应用潜力。(本文来源于《中国饲料》期刊2016年08期)

孙明哲[8](2015)在《高产耐高温酸性木聚糖酶工程菌的构建》一文中研究指出木聚糖酶(1,4-p-D-xylanase; EC3.2.1.8)是一种重要的工业用酶,在造纸工业、食品、能源、饲料以及环境等领域显示了广阔的应用前景,目前特别是在低聚木糖、木糖生产中显示了巨大应用前景。本研究从牛粪中筛选得到一株高产耐热木聚糖酶的菌株Paenibacillus sp. NF1,并应用响应面法对该菌产木聚糖酶发酵条件进行了优化,确定其最适发酵培养基组成为:玉米芯20 g/L、牛肉膏28.2 g/L、K2HPO4 5 g/L、MgSO4 0.5 g/L、NaCl 7.1 g/L、培养基初始pH 6.9;最适发酵条件为:装液量100 mL锥形瓶装液40 mL、摇床转速160 r/min、接种量2%、温度28℃。此条件下发酵72 h,木聚糖酶活力可达160.6 IU/mL,为原始发酵条件产酶量的51.4倍。同时以Paenibacillus sp. NF1基因组DNA为模板,扩增出全长为984 bp的木聚糖酶编码基因片段XynGH10。该基因在E coli BL21中成功表达。XynGH10胞外酶活为10.58 IU/mg,XynGH10的最适作用温度及pH分别为60℃和pH 6.0。进一步将XynGH10基因转化入毕赤酵母,成功构建了毕赤酵母工程菌P. pastoris GS 115(pPIC9K-XynGH10),经摇瓶诱导96 h后,发酵液中木聚糖酶活可达500 IU/mL。10 L发酵罐高密度培养,甲醇诱导72 h达到最高酶活,发酵液上清酶活2500 IU/mL,细胞湿重360 g/L,粗蛋白7.6 g/L。应用重组木聚糖酶分别酶解桦木木聚糖底物和经酸性电解水预处理的玉米芯,结果显示了较好的酶解效率。酶解桦木木聚糖18 h产物主要为低聚木糖,其中主要为木二糖和木四糖。酶解酸性电解水预处理后的玉米芯生产低聚木糖的研究显示,酶解18h后,低聚木糖(2-4聚)的得率最高达到80%,而木单糖得率仅提高3%,酶解21 h后,木单糖得率开始增加。因此,确定在应用木聚糖酶XynGH10进行低聚木糖生产时的最佳酶解时间应控制在18 h以内。主要产物为木二糖和木四糖,木单糖生成量很少,低聚木糖(2-4聚)最高得率达到了80%,显示了较好应用前景。(本文来源于《天津科技大学》期刊2015-05-01)

王雅珍,滕超,朱运平,熊科,李秀婷[9](2015)在《酸性木聚糖酶高产菌株的筛选及其液体发酵产酶条件优化》一文中研究指出为了获得能够利用玉米芯等农业废弃物作为碳源的酸性木聚糖酶高产菌株,降低产酶成本,对全国各地300余份土样进行了菌株筛选,获得1株以玉米芯作为碳源产酸性木聚糖酶青霉菌,菌株编号MA21601,初测该菌株所产木聚糖酶最适作用p H值范围4.0~4.5。通过对该菌株液体发酵条件优化,确定其最佳产酶条件是:60 mg/m L玉米芯,1.5 mg/m L硫酸铵,培养基初始p H值3.0~3.5,发酵温度25℃,转速125 r/min;发酵液终p H 1.27。菌株产酶趋势研究表明:菌株发酵第7天产木聚糖酶酶活力达到1 808 U/m L,是初筛酶活的361.6%。(本文来源于《中国食品学报》期刊2015年01期)

谢建华,李小明,罗文华[10](2014)在《高温酸性木聚糖酶的储存稳定性研究》一文中研究指出随着生物技术和酶工程技术在工业上的普遍应用,木聚糖酶应用越来越广泛。在应用过程中,由于稳定性低而导致应用效果大幅下降,从而增加木聚糖酶的应用成本。本文通过研究木聚糖酶ACPC的酶学性质,确定其最佳反应温度和最佳反应pH值分别为75℃、5.5,属于高温酸性木聚糖酶。通过单因素实验研究,该酶在pH 5.5条件下储存稳定性最好,NaCl、甘油、蔗糖和EDTA对其储存稳定性有很大的提高。通过正交实验,获得一个液体酶稳定剂:30%甘油、15%NaCl、10%蔗糖和1%EDTA,木聚糖酶在该稳定剂的保护下,25℃储存木聚糖酶的T0.9(表示酶的残余活力保持90%以上的时间)>90d,稳定剂将T0.9延长了75d以上,50℃高温储存15 d残余酶活还保留约80%以上的活力。(本文来源于《基因组学与应用生物学》期刊2014年05期)

酸性木聚糖酶论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

木聚糖酶(xylanase,EC 3.2.1.8)可以随机切割木聚糖主链的β-1,4-糖苷键,在饲料、食品、造纸和纺织等领域具有广泛的应用。该研究通过分子克隆技术将黑曲霉CICIM F0510来源的木聚糖酶基因xyn C在毕赤酵母中进行了克隆表达,构建获得了重组菌GS115(p PIC-XynC)。在摇瓶水平上,重组菌的酶活为1.14 U/m L。酶学性质的研究表明,重组酶XynC的最适反应温度和pH分别为30℃和2.5,且它在25~40℃或pH 2.0~5.0有较好的稳定性;K+对XynC的活性有微弱的促进作用,而Ca~(2+)、Co~(2+)、Mn~(2+)、Zn~(2+)、Cu~(2+)、Fe~(3+)、Sn~(2+)、EDTA和SDS等对XynC的活性有不同程度的抑制作用。此外,该酶还可以水解戊聚糖产生聚合度为3~6的低聚木糖。这些良好的理化性质为重组酶XynC在饲料及食品等领域的应用奠定了基础。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

酸性木聚糖酶论文参考文献

[1].吴仁智,黄俊,芦志龙,陈小玲,陈英.酸性木聚糖酶产生菌XYW5的筛选及酶学性质[J].广西科学.2018

[2].焦丛蕊,杨文娟,陈晓玲,董自星,金鹏.黑曲霉xynC基因编码一种低温酸性木聚糖酶[J].食品与发酵工业.2017

[3].侯洁,李琴,熊科,徐友强,李秀婷.微紫青霉酸性木聚糖酶xynA基因的克隆与序列分析[J].食品科学.2017

[4].吴仁智,黄俊,芦志龙,陈英,陆琦.里氏木霉和黑曲霉产酸性木聚糖酶及酶学特性比较[J].广西科学.2017

[5].吴春玲,李璠,马超,袁月,范光森.酸性木聚糖酶交联酶聚集体的制备条件优化[J].食品科学技术学报.2016

[6].周宁.产酸性木聚糖酶链霉菌的鉴定、产酶条件优化及其基因克隆与表达[D].西北农林科技大学.2016

[7].周宁,王智伟,曹平华,王磊,陈玉林.产酸性木聚糖酶链霉菌的鉴定、酶学特性及发酵工艺研究[J].中国饲料.2016

[8].孙明哲.高产耐高温酸性木聚糖酶工程菌的构建[D].天津科技大学.2015

[9].王雅珍,滕超,朱运平,熊科,李秀婷.酸性木聚糖酶高产菌株的筛选及其液体发酵产酶条件优化[J].中国食品学报.2015

[10].谢建华,李小明,罗文华.高温酸性木聚糖酶的储存稳定性研究[J].基因组学与应用生物学.2014

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