导读:本文包含了入核转运论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:importinβ1,核转运受体蛋白,入核转运,病毒复制
入核转运论文文献综述
胡焱,熊建民,赵佳福,嵇辛勤,段志强[1]（2017）在《Importin β1介导的病毒蛋白入核转运在病毒复制中作用的研究进展》一文中研究指出核转运受体蛋白importinβ1是输入蛋白importinβ家族重要成员之一,它是一种相对保守的、广泛分布于真核生物细胞内的核转运受体蛋白。许多研究表明,importinβ1能直接识别和结合含有不同类型核定位信号的病毒蛋白并转运其入核,此过程对病毒的整个复制和致病进程起着十分重要的作用。该文主要从importinβ1的结构特征、介导的病毒蛋白入核转运机制以及在病毒复制中的作用、药物阻断importinβ1参与的病毒复制等研究方面进行综述,以期为后续研究病毒蛋白细胞核定位的分子机制和功能以及抗病毒治疗提供参考。(本文来源于《中国细胞生物学学报》期刊2017年08期）
李瑞沙,洪强,周树敏,张红莉,李杨[2]（2017）在《植物细胞质介导GFP-NLS蛋白入核转运的HeLa细胞系统的建立》一文中研究指出细胞核作为细胞中重要的遗传物质存储、复制和转录的结构,涉及大量信息和物质的传输活动,尤其是蛋白质的入核转运一直以来都是研究的热点问题之一。本研究证明,植物细胞质可以有效应用于动物细胞体系研究蛋白质入核转运。本文利用病毒SV40抗原蛋白中的核定位信号(nuclear localization signal,NLS)标记绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP),通过拟南芥细胞质的介导,利用He La细胞核建立研究蛋白质入核转运的半细胞体系。结果显示,植物细胞质结合NLS片段能改变GFP在He La细胞核内外的分布,实现对目标蛋白入核过程的介导,使GFP-NLS最后定位于细胞核内。这也意味着通过He La细胞建立起的半细胞体系能为蛋白质入核转运研究提供一个有效的研究体系。(本文来源于《中国生物化学与分子生物学报》期刊2017年01期）
段志强,嵇辛勤,许厚强,赵佳福,许海旭[3]（2017）在《KPNB1和Ran蛋白共同介导新城疫病毒基质蛋白的入核转运》一文中研究指出【目的】鉴定与新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)基质蛋白(matrix protein,M)入核相关的细胞蛋白,以阐明NDV M蛋白细胞核定位的分子机制。【方法】从鸡胚成纤维细胞中分别克隆核转运受体蛋白KPNA1–KPNA6和KPNB1基因,将其构建到真核表达载体,并与表达NDV M蛋白的重组真核表达载体分别共转染HEK-293T细胞,通过免疫共沉淀方法鉴定与NDV M蛋白相互作用的核转运受体蛋白。另外,将M蛋白与Ran蛋白突变体或与M蛋白互作的核转运受体蛋白缺失体分别共表达,通过荧光共定位确定M蛋白入核转运相关的细胞蛋白。【结果】构建的重组真核表达载体在HEK-293T细胞中能够正确表达;通过间接免疫荧光观察发现,重组蛋白中除Myc-KPNA2蛋白定位在细胞质外,其它核转运受体蛋白均与M蛋白表现出相同的细胞核定位。免疫共沉淀试验结果表明,M蛋白与KPNA1蛋白和KPNB1蛋白均存在相互作用。进一步通过荧光共定位观察发现,M蛋白与KPNA1蛋白缺失体(DN-KPNA1)共表达不改变M蛋白的细胞核定位,而与KPNB1蛋白缺失体(DN-KPNB1)共表达后导致M蛋白变为细胞质定位,说明M蛋白入核转运需要KPNB1蛋白的参与。另外,将M蛋白与Ran蛋白突变体Ran-Q69L共表达,荧光观察发现M蛋白同样由细胞核定位变为细胞质定位,说明M蛋白入核转运还需要Ran蛋白的辅助。【结论】KPNB1和Ran蛋白共同介导NDV M蛋白的入核转运,其过程是KPNB1蛋白首先和M蛋白发生相互作用并形成复合物,然后通过Ran蛋白的辅助作用完成入核转运。(本文来源于《微生物学报》期刊2017年01期）
王殿丽[4]（2008）在《JC病毒VP2蛋白的抗原抗体制备及核定位信号与入核转运受体的鉴定》一文中研究指出目的:JC病毒属于人类多瘤病毒属,是一种重要的机会感染性疾病病原体。JC病毒广泛分布于人群中,有80﹪的成人血清学检测为阳性[1]。当免疫力低下时,JC病毒会引发多灶性脑白质病(PML)[2]。然而,JC病毒的临床检测,以及它的包膜蛋白VP2入核的机制和入核转运受体并不清楚。本研究拟通过原核表达、抗体制备、核定位信号鉴定和入核转运受体的鉴定几个方面初步阐释JC病毒的小包膜蛋白VP2基因在PML发生发展过程中的生物学功能。方法:(1)构建原核表达载体pET-32a(+)-VP2,转化BL21宿主菌后经IPTG诱导,获得了带有组氨酸标签的重组融合蛋白的优化表达。(2)利用Ni+亲和柱纯化表达蛋白并免疫BALB /c小白鼠,获得抗VP2多克隆抗体。以纯化VP2为抗原,利用Western blot和ELISA法对多克隆抗体进行特异性和效价检测。(3)构建重组绿色荧光表达载体pEGFP-C1-VP2,转染7402细胞,24hr后观察各截短体的亚细胞定位情况。(4)表达纯化pGEX-2T-importin(importinα1、3、5、7和imporinβ)的GST融合蛋白。(5)通过GST-pull down方法,寻找并确定VP2的入核转运受体。结果:(1)通过PCR方法从病人的脑脊液中获得VP2的目的片段,并成功构建了pET-32a(+)-VP2原核表达载体。pET-32a(+)-VP2原核表达载体在IPTG的诱导作用下,成功表达融合蛋白通过Ni+亲和层析法获得了融合蛋白纯品。(2)用纯化的VP2融合蛋白免疫BALB/c小鼠,成功制备了高效价,高特异性的鼠抗VP2多克隆抗体。通过ELISA法表明多克隆抗体效价>1:160,000, Western blot检测证明多克隆抗体的特异性良好。(3)通过PCR方法获得了VP2截短体的目的片段,成功构建了VP2各截短体的绿色荧光表达载体;将构建好的VP2各截短体绿色荧光表达载体转染7402人肝癌细胞,通过各截短体的亚细胞定位分析出了VP2蛋白的核定位信号为946-972段。(4)成功表达纯化了五个pGEX-2Timportin融合蛋白。(5)通过GST-pull down实验,分析发现VP2能够与入核转运受体蛋白importinα1、importinα3结合,从而被转运入细胞核,发挥它的生理和生化作用。结论:1.我们成功构建了pET-32a(+)- Vp2原核表达载体,在IPTG的诱导下,成功表达纯化了VP2融合蛋白。这就为抗体的制备以及研究VP2蛋白与其它蛋白的相互作用做了物质上的准备。2.将VP2蛋白免疫BALB/c小鼠,制备了高效价、高特异性的鼠抗VP2多克隆抗体。这对于VP2抗原的检测,以及免疫组化奠定了基础。3.成功的鉴定出VP2的核定位信号,通过构建四个pEGFP-C1-Vp2绿色荧光载体,脂质体转染7402细胞株,在荧光显微镜下观察pEGFP-C1-Vp2各截短体的亚细胞定位。这是第一次鉴定出VP2的核定位信号,为进一步的研究提供了信息。4.通过GST-pull down方法,我们成功的鉴定出VP2的入核转运受体为importinα1、importinα3。初步阐明了VP2入核过程中参与的入核转运受体。(本文来源于《大连医科大学》期刊2008-05-01）
周鸣,李小玲,李桂源[5]（2006）在《蛋白质入核转运的机制和研究进展》一文中研究指出细胞核膜是由外膜和内膜组成的磷脂双分子层结构,同时镶嵌一些核孔复合体(NPC).核孔复合体是胞浆和胞核之间主动和被动转运的生理屏障.核内功能蛋白在胞浆内合成后通过核孔复合体进入胞核,这个过程除了需要NPC上核孔蛋白、胞浆内核转运受体和RanGTP等蛋白的参与外,货物蛋白本身的结构特征在其入核转运过程中亦发挥重要作用.本文着重就蛋白入核转运的机制及近年来取得的相关进展进行综述.(本文来源于《中国生物化学与分子生物学报》期刊2006年10期）
刘健,刘晓莉,王培勇,何作云,肖颖彬[6]（2004）在《外源性钙调素入核转运及其在大鼠心肌肥厚时的变化》一文中研究指出目的 探讨大鼠心肌细胞核对外源性钙调素入核转运的调节机制及其在大鼠心肌肥厚时的变化。方法 制备腹主动脉缩窄心肌肥厚大鼠模型、差速离心提纯心肌细胞核、酶学方法测定钙 ATP酶活性、荧光分光光度计测定荧光标记钙调素向细胞核转入量。结果 离体纯化的大鼠心肌细胞核在ATP存在下 ,外源性钙调素经核孔向核内转运量具有显着钙离子浓度依赖性 ,随核外钙离子浓度的增加而递增 (P <0 0 5 )。在钙离子浓度为 10 -3 mol/L时 ,钙 ATP酶抑制剂thapsigargin (5μmol/L)、兰尼碱受体拮抗剂钌红 (rutheniumred ,5 0 μmol/L)和IP3 受体拮抗剂肝素 (10 μg/ml)使外源性钙调素的细胞核孔转运分别降低 90 %、2 0 %和 89% (P <0 0 5 )。腹主动脉缩窄术后 4周大鼠心肌显着肥厚 ,伴有明显的血流动力学异常 ,与对照组相比 ,腹主动脉缩窄心肌肥厚大鼠外源钙调素入核转运明显减少 (P <0 0 5 ) ,心肌细胞核钙 ATP酶活性显着下降 (P <0 0 0 1)。结论 外源性钙调素入核转运可能受核外钙离子浓度和核钙摄取、释放系统所调节 ,心肌肥厚时 ,钙调素入核转运减少、心肌细胞核钙 ATP酶活性下降 ,可能在相对稳定核功能紊乱的调节中起负性反馈作用。(本文来源于《中华心血管病杂志》期刊2004年10期）
刘琦,罗阳,姜莉,周伟强,满晓辉[7]（2004）在《CDK2蛋白质分子结构与其入核转运过程关系的初步分析(英文)》一文中研究指出应用重组技术构建野生型及缺失型CDK2基因的真核表达载体 ,分别使野生型及缺失型CDK2蛋白与增强型绿色荧光蛋白 (Enhanced greenFluorescentProtein ,EGFP)形成融合蛋白。通过脂质体介导的方法将载体转染人宫颈癌细胞系HeLa和中华仓鼠卵巢细胞系CHO ,经过细胞周期同步化处理后于荧光显微镜下观察EGFP的亚细胞定位以示踪野生型及缺失型CDK2基因的表达。结果表明 ,野生型CDK2基因的表达产物定位于细胞核 ,而两种缺失型CDK2基因分别编码的CDK2蛋白N 端 1～ 2 0 1及 98～ 2 98多肽均主要定位于细胞质。以上结果提示 ,CDK2蛋白序列中不含有与核定位直接相关的信号 ,其入核过程可能是由其N 端 1～ 97及 2 0 2～ 2 98多肽范围内的部分氨基酸共同形成高级结构 ,并依赖此高级结构与其他含有入核信号的蛋白形成复合物 ,从而被带动进入细胞核的。(本文来源于《遗传学报》期刊2004年05期）
王培勇,刘健,唐朝枢[8]（2002）在《大鼠心肌细胞核钙调素入核转运与核钙调节关系的探讨》一文中研究指出最近发现,钙调素作为细胞内钙受体,除了调节胞浆的多种功能之外,可能还参与胞浆信号向核内快速传递。本研究观察大鼠心肌细胞核对钙调素的入核转运与钙浓度的关系,并初步探讨其调节机制。大鼠心肌细胞核采用差速离心和密度梯度离心分离提纯。用荧光分光光度计测定荧光标记钙调素向细胞核转入量发现,大鼠心肌细胞核对核外的CaM向核孔转运量具有[Ca~(2+)]浓度依赖性,随核外[Ca~(2+)]浓度的增加而增加(P<0.001),在[Ca~(2+)]浓度为10~(-3)mol/L时,ryanodine受体的拮抗剂rutheniumred和cADP ribose受体拮抗剂8-Br cADP ribose显着抑制CaM的细胞核孔转运(分别降低20％和18％,P<0.05),而IP_3受体拮抗剂heparin和Ca~(2+)-ATPase抑制剂thapsigargin抑制CaM的细胞核孔转运更显着(分别降低90％和89％,P<0.001)。上述结果表明心肌细胞核对CaM的向核转运,受核外[Ca~(2+)]和核钙摄取、释放所调节。(本文来源于《细胞生物学杂志》期刊2002年02期）
入核转运论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
细胞核作为细胞中重要的遗传物质存储、复制和转录的结构,涉及大量信息和物质的传输活动,尤其是蛋白质的入核转运一直以来都是研究的热点问题之一。本研究证明,植物细胞质可以有效应用于动物细胞体系研究蛋白质入核转运。本文利用病毒SV40抗原蛋白中的核定位信号(nuclear localization signal,NLS)标记绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP),通过拟南芥细胞质的介导,利用He La细胞核建立研究蛋白质入核转运的半细胞体系。结果显示,植物细胞质结合NLS片段能改变GFP在He La细胞核内外的分布,实现对目标蛋白入核过程的介导,使GFP-NLS最后定位于细胞核内。这也意味着通过He La细胞建立起的半细胞体系能为蛋白质入核转运研究提供一个有效的研究体系。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
入核转运论文参考文献
[1].胡焱,熊建民,赵佳福,嵇辛勤,段志强.Importinβ1介导的病毒蛋白入核转运在病毒复制中作用的研究进展[J].中国细胞生物学学报.2017
[2].李瑞沙,洪强,周树敏,张红莉,李杨.植物细胞质介导GFP-NLS蛋白入核转运的HeLa细胞系统的建立[J].中国生物化学与分子生物学报.2017
[3].段志强,嵇辛勤,许厚强,赵佳福,许海旭.KPNB1和Ran蛋白共同介导新城疫病毒基质蛋白的入核转运[J].微生物学报.2017
[4].王殿丽.JC病毒VP2蛋白的抗原抗体制备及核定位信号与入核转运受体的鉴定[D].大连医科大学.2008
[5].周鸣,李小玲,李桂源.蛋白质入核转运的机制和研究进展[J].中国生物化学与分子生物学报.2006
[6].刘健,刘晓莉,王培勇,何作云,肖颖彬.外源性钙调素入核转运及其在大鼠心肌肥厚时的变化[J].中华心血管病杂志.2004
[7].刘琦,罗阳,姜莉,周伟强,满晓辉.CDK2蛋白质分子结构与其入核转运过程关系的初步分析(英文)[J].遗传学报.2004
[8].王培勇,刘健,唐朝枢.大鼠心肌细胞核钙调素入核转运与核钙调节关系的探讨[J].细胞生物学杂志.2002
标签：importinβ1; 核转运受体蛋白; 入核转运; 病毒复制;