乳腺生长抑制因子论文-黄焰

乳腺生长抑制因子论文-黄焰

导读:本文包含了乳腺生长抑制因子论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献,主要关键词:乳腺癌,乳腺珠蛋白,乳腺生长抑制因子,血清学检测

乳腺生长抑制因子论文文献综述

黄焰[1](2008)在《乳腺珠蛋白和乳腺生长抑制因子的克隆表达及血清学研究》一文中研究指出目的乳腺珠蛋白(mammaglobin,又名人乳腺珠蛋白,humanmammaglobin,hMAM)是近年来发现的一个与乳腺上皮生长有关的组织特异性蛋白,而乳腺生长抑制因子(mammastatin)是十余年前发现的一个乳腺组织特异性的生长抑制性蛋白。两种蛋白已被证实可以在血清中被检测。目前有关这两种乳腺组织特异蛋白的血清ELISA研究报道不多,其对乳腺癌的潜在诊断意义还不十分清楚。本课题的目的是通过克隆表达、抗体制备而建立两种指标的血清ELISA检测方法,并对乳腺癌患者和健康查体正常对照的血清样品进行检测,初步探讨mammaglobin和mammastatin的血清表达规律,以及对乳腺癌的诊断意义。方法我们用BioSun生物软件对mammaglobin和mammastatin氨基酸序列进行分析,确定表位序列,用PCR合成法获得mammaglobin全长基因和mammastatin表位基因,构建表达载体,转化于大肠杆菌HB101,获得重组抗原后,应用杂交瘤技术制备抗mammaglobin的单克隆抗体;mammastatin重组抗原免疫大耳白兔,获得抗血清,分别建立双抗体夹心ELISA检测方法,并对乳腺癌患者和健康查体正常对照血清样品进行检测。结果1、用PCR合成法获得乳腺珠蛋白全长基因,成功构建了两个连接不同质粒的乳腺珠蛋白原核表达载体pBVIL1/Mammaglobin和pGEX-4T-2/ Mammaglobin,并获得高效表达。pGEX-4T-2/Mammaglobin免疫小鼠后,获得了两株稳定分泌抗体的杂交瘤细胞株,分别为1E12、4B11。用4B11株包被酶联板,用1E12株标记生物素,建立了稳定的双抗体夹心酶联吸附(ELISA)血清检测技术,对127例乳腺癌和133例正常对照血清进行检测,结果显示,乳腺珠蛋白mammaglobin血清表达水平在乳腺癌组(平均OD值:0.645±0.223)显着高于正常对照组(平均OD值:0.255±0.109),P=0.0001,差异有统计学意义。对127例乳腺癌亚组分析结果显示,乳腺癌患者血清mammaglobin蛋白表达水平与病人年龄、肿瘤大小、临床分期、腋窝淋巴结转移及ER状态之间未见统计学意义的差异(P>0.05)。2、用PCR合成法获得乳腺生长抑制因子表位基因,成功构建了两个连接不同质粒的表达载体pBVIL1—Mammastatin(12a)和pBVIL6—Mammastatin(4a),并获得高效表达。用pBVIL1—Mammastatin(12a)及pBVIL6—Mammastatin(4a)重组抗原分别免疫大耳白兔,获得抗血清,前者包被酶联板,后者标记辣根过氧化物酶,建立了稳定的双抗体夹心ELISA检测方法。对95例乳腺癌和95例正常对照血清检测结果显示,mammastatin蛋白在乳腺癌患者血清中存在低水平表达(平均OD值0.135),而在健康查体妇女血清中表达水平相对较高(平均OD值0.261),二者差异显着(P<0.01);95例乳腺癌患者亚组分析结果显示,血清mammastatin蛋白表达水平与病人年龄、肿瘤大小、临床分期、腋窝淋巴结转移及ER状态之间未见统计学意义的差异(P>0.05)。结论本文证实了可以通过简便无创的ELISA方法检测血清mammaglobin和mammastatin蛋白,并发现两种因子在乳腺癌患者和正常对照血清中的表达存在显着差异,但与预后等因素无关。初步结果提示这两种指标可能对乳腺癌的早期鉴别诊断有意义。(本文来源于《中国人民解放军军事医学科学院》期刊2008-05-15)

黄焰,宋晓国,张贺秋,王国华,王刚乐[2](2008)在《乳腺生长抑制因子mammastatin表位抗原的克隆表达及初步血清学测定》一文中研究指出目的:获得重组乳腺生长抑制因子(mammastatin)表位抗原蛋白,制备抗血清,以测定正常人及乳腺癌患者血清中mammastatin存在水平。方法:用BioSun生物软件对mammastatin氨基酸序列进行分析,确定表位序列,PCR逐步延伸法合成表位基因,构建pBVIL1-mammastatin和pBVIL6-mammastatin表达质粒,转化于大肠杆菌HB101中进行表达,经纯化后免疫大耳白兔,制备抗血清,用双抗体夹心法检测乳腺癌及正常人的血清。结果:重组mammastatin抗原在大肠杆菌中获得了高效表达,并获得了兔多抗血清。用双抗体夹心法检测,显示95例正常对照血清mammastatin表达水平显着高于95例乳腺癌(平均D值,正常组0.261,乳腺癌组0.135,Wilcoxon秩和检验P=0.000<0.01,差异显着)。结论:正常人血清中乳腺生长抑制因子mammastatin存在水平显着高于乳腺癌患者。(本文来源于《军事医学科学院院刊》期刊2008年02期)

乳腺生长抑制因子论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

目的:获得重组乳腺生长抑制因子(mammastatin)表位抗原蛋白,制备抗血清,以测定正常人及乳腺癌患者血清中mammastatin存在水平。方法:用BioSun生物软件对mammastatin氨基酸序列进行分析,确定表位序列,PCR逐步延伸法合成表位基因,构建pBVIL1-mammastatin和pBVIL6-mammastatin表达质粒,转化于大肠杆菌HB101中进行表达,经纯化后免疫大耳白兔,制备抗血清,用双抗体夹心法检测乳腺癌及正常人的血清。结果:重组mammastatin抗原在大肠杆菌中获得了高效表达,并获得了兔多抗血清。用双抗体夹心法检测,显示95例正常对照血清mammastatin表达水平显着高于95例乳腺癌(平均D值,正常组0.261,乳腺癌组0.135,Wilcoxon秩和检验P=0.000<0.01,差异显着)。结论:正常人血清中乳腺生长抑制因子mammastatin存在水平显着高于乳腺癌患者。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

乳腺生长抑制因子论文参考文献

[1].黄焰.乳腺珠蛋白和乳腺生长抑制因子的克隆表达及血清学研究[D].中国人民解放军军事医学科学院.2008

[2].黄焰,宋晓国,张贺秋,王国华,王刚乐.乳腺生长抑制因子mammastatin表位抗原的克隆表达及初步血清学测定[J].军事医学科学院院刊.2008

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