导读:本文包含了上皮间质化论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:肺腺癌,TTF-1,上皮间质化,EGFR-TKI
上皮间质化论文文献综述
吕昕,周林水,陈瑞琳,杨珺超,王真[1]（2019）在《shRNA干扰TTF-1基因对肺腺癌细胞EGFR-TKI敏感性及细胞上皮间质化的影响》一文中研究指出目的探讨甲状腺转录因子(TTF-1)对肺腺癌细胞表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂(EGFR-TKI)药物敏感性及细胞上皮间质化的影响。方法将培养后的肺腺癌HCC827细胞分为空载体组、阴性质粒转染(NC-sh RNA)组和阳性质粒转染(TTF-1-sh RNA)组,通过sh RNA干扰技术抑制细胞中的TTF-1基因表达,用流式细胞仪测定转染前后细胞凋亡率和细胞周期变化。不同浓度的吉非替尼(10、20、40、60μmol/ml)作用各组细胞72h,CCK-8法检测细胞生长抑制率。5ng/ml转化生长因子-β1(TGF-β1)作用各组细胞48h,细胞出现上皮间质化,Western blot法测定TTF-1、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)表达。结果与NC-sh RNA组、空载体组比较,TTF-1-sh RNA组细胞凋亡率明显增加,G0/G1相百分比升高,S相和G2/M相百分比降低(均P<0.05);不同浓度吉非替尼作用后,每组细胞的生长抑制率均随药物浓度的增加而升高,不同浓度比较差异有统计学意义(P<0.05)。同一浓度时,3组细胞生长抑制率之间的差异有统计学意义(P<0.05);TTF-1-sh RNA组较NC-sh RNA组、空载体组均明显为高,差异均有统计学意义(均P<0.05);而空载体组与NC-sh RNA组比较,仅在吉非替尼20μmol/ml差异有统计学意义(P<0.05)。TGF-β1作用前后,与空载体组和NC-sh RNA组比较,TTF-1-sh RNA组细胞TTF-1、α-SMA蛋白表达水平均为低,E-cadherin蛋白表达水平均为高,差异均有统计学意义(均P<0.05)。与TGF-β1作用前比较,TGF-β1作用后NC-sh RNA组和空载体组TTF-1蛋白表达水平均下降,E-cadherin蛋白表达水平均下降,差异均有统计学意义(均P<0.05)。与NC-sh RNA组、空载体组比较,TTF-1-sh RNA组TGF-β1作用前后细胞E-cadherin、α-SMA蛋白变化不明显,差异无统计学意义(P>0.05)。结论sh RNA干扰TTF-1基因可增加肺腺癌HCC827细胞对EGFR-TKI药物敏感性,并部分抑制细胞上皮间质化。(本文来源于《浙江医学》期刊2019年22期）
王红梅,孙冬霞,王芳,王俊兰,张伟伟[2]（2019）在《miRNA-448对非小细胞肺癌细胞增殖、转移及上皮间质化的影响》一文中研究指出目的检测microRNA-448(miRNA-448)在非小细胞肺癌(NSCLC)组织及细胞系中表达情况,并观察其对细胞增殖、迁移、侵袭及上皮间质化(EMT)的影响。方法采用荧光实时定量PCR(qRT-PCR)法检测NSCLC组织及细胞系中miR-448的表达情况。对肺癌细胞株A549转染miR-448模拟物(mimics)和抑制剂(inhibitor),并应用细胞计数试剂盒-8检测不同时间细胞增殖活性,Transwell试验测定miR-448模拟物或抑制剂对A549细胞迁移及侵入的影响。Western blot测定E-钙黏蛋白、N-钙黏蛋白和波形蛋白表达,并检测miR-448对NSCLC细胞与内皮细胞的黏附性影响。结果qRT-PCR结果显示,与对照组相比,NSCLC组织及细胞系中miR-448的表达水平明显降低,在A549细胞系中miR-448下调最为显着(P<0.05)。A549细胞转染miR-448模拟物或抑制剂后可导致细胞增殖率随时间增加逐渐降低或升高(P <0.05)。在模拟物组,细胞迁移能力明显加强(P <0.05),相反,A549细胞中,miR-448抑制剂会显着抑制此能力(P <0.05)。与此类似,A549细胞侵袭能力可因miR-448过表达或低表达而增加或降低。miR-448模拟物可显着提高A549细胞中E-cadherin蛋白表达,而N-cadherin和vimentin蛋白水平显着下降,且A549细胞与内皮细胞黏附能力降低(P值均<0.05),而抑制剂则产生相反作用(P值均<0.05)。结论在NSCLC组织及细胞中miR-448呈低表达,其过表达可抑制NSCLC细胞增殖、转移及EMT过程,而miR-448低表达可促进细胞增殖、转移及EMT。(本文来源于《标记免疫分析与临床》期刊2019年10期）
孙书豪,巩发海,彭根远,陈托,李海[3]（2019）在《CXCL10/CXCR3轴对结直肠癌SW480、SW620细胞侵袭及上皮间质化的影响》一文中研究指出目的明确CXCL10/CXCR3轴对于结直肠癌SW480、SW620细胞迁移、浸润功能的影响。探讨CXCL10/CXCR3对于结直肠癌SW480、SW620细胞上皮间质转化(EMT)的影响。方法抑制CXCR3的SW480、SW620细胞经CXCL10刺激后,采用Transwell实验方法测定细胞迁移、浸润能力的改变,Western blot测定细胞EMT相关蛋白表达量的变化。结果趋化因子CXCL10可以促进肿瘤细胞SW480和SW620的迁移浸润(P<0.01),而当抑制趋化因子受体CXCR3时,这种促肿瘤迁移、浸润的能力明显减弱(P<0.01)。趋化因子CXCL10可以促进SW480、SW620间质细胞标志物例如N-钙黏素(N-cadherin)和波形蛋白(Vimentin)的表达(P<0.01),可以抑制SW620细胞上皮细胞标志物E-钙黏素(E-cadherin)的表达(P<0.01),而对SW480细胞的E-cadherin无明显的影响。病毒转染抑制CXCR3受体后,CXCL10的这种促进间质细胞标志物N-cadherin和Vimentin的表达能力消失甚至逆转,并且促进SW480和SW620细胞系上皮细胞标志物E-cadherin的表达(P<0.01)。结论 CXCL10有促进肿瘤细胞迁移、浸润的作用,促进结直肠肿瘤细胞间质细胞标志物的表达,同时抑制上皮细胞标志物的表达。(本文来源于《宁夏医科大学学报》期刊2019年06期）
巩发海,杨宝,孙书豪,陈托,彭根远[4]（2019）在《SPP1对人结直肠癌细胞侵袭、转移及上皮间质化的影响》一文中研究指出目的探究分泌磷蛋白1(SPP1)在不同结直肠癌细胞系中的表达情况及SPP1对结直肠癌细胞上皮间质化(Epithelial-Mesenchymal transition,EMT)影响的机制。方法通过Western blot检测SPP1在正常结肠上皮细胞株(NCM460)、原位结肠癌细胞株(HCT116)、原发性结直肠腺癌细胞株(HT29)、原位直肠腺癌细胞株(SW480)、淋巴结转移结肠癌细胞株(SW620)等不同结直肠癌细胞株中的表达。SPP1沉默慢病毒转染HCT116,SPP1过表达慢病毒转染NCM460,利用Transwell、划痕实验分析转染后细胞的侵袭、迁移能力。Western blot检测慢病毒转染后HCT116和NCM460细胞中EMT通路关键蛋白的表达。结果 Western blot结果显示,与NCM460细胞相比,SPP1在HCT116、HT29、SW480、SW620细胞中均表达上调(P<0.01)。转染后两种细胞的Transwell侵袭实验和划痕实验结果显示,上调SPP1表达使细胞侵袭及迁移能力增强(P均<0.01),沉默SPP1表达使细胞侵袭及迁移能力降低(P均<0.01);Western blot结果显示,上调细胞的SPP1水平使snail1、N-cadherin、Vimentin等蛋白表达上调(P<0.05),E-cadherin蛋白表达下调(P<0.05),激活EMT通路;下调细胞SPP1水平使snail1、N-cadherin、Vimentin等蛋白表达下调(P<0.05),E-cadherin蛋白表达上调(P<0.05),抑制EMT通路。结论 SPP1在结直肠癌细胞中表达上调,其表达水平影响NCM460、HCT116细胞的EMT及侵袭、迁移能力。(本文来源于《宁夏医科大学学报》期刊2019年06期）
帅煜[5]（2019）在《ATF5对鼻咽癌放疗抵抗细胞上皮间质化的影响》一文中研究指出目的:观察X线对鼻咽癌HONE-1细胞形态、增殖、侵袭及克隆形成等功能和转录激活因子5(Activating transcription factor 5,ATF5)等蛋白表达的影响,再比较复发鼻咽癌组织和初发鼻咽癌组织ATF5蛋白表达水平差异,初步探讨ATF5参与鼻咽癌细胞放射抵抗的可能机制,为提高鼻咽癌放疗敏感性提供理论依据。方法:采用X射线常规分割照射鼻咽癌HONE-1细胞建立放疗抵抗细胞株HONE-1R;通过克隆形成实验、多靶单击模型拟合生存曲线及增殖实验鉴定HONE-1R细胞;显微镜观察并记录鼻咽癌细胞形态学变化;采用免疫组织化学法检测6例同一初发和复发鼻咽癌患者的原发灶组织及鼻咽正常组织中ATF5蛋白的表达水平;免疫细胞化学法检测X线对HONE-1细胞ATF5、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)蛋白表达水平的影响;细胞免疫荧光法检测X线对HONE-1细胞ATF5蛋白的细胞定位及表达变化;再构建、包装shRNA-ATF5慢病毒载体,用qRT-PCR验证shRNA-ATF5的干扰效率;克隆形成实验检测X线及shRNA-ATF5对HONE-1细胞和HONE-1R细胞克隆形成能力;多靶单击模型拟合生存曲线分析X线及shRNA-ATF5对两种鼻咽癌细胞接受2Gy X线照射后存活分数(Survival fraction at 2Gy,SF2)值的影响;CCK-8法增殖实验和Transwell小室实验分别检测X线和shRNA-ATF5对两种鼻咽癌细胞生存率、迁移力和侵袭力的影响情况。结果:(1)X线能促进鼻咽癌HONE-1细胞ATF5蛋白水平显着增加,且随X线照射剂量的增加而增加(P均<0.05),其亚细胞定位由细胞浆转向于细胞核。(2)鼻咽癌HONE-1R细胞克隆形成率显着大于鼻咽癌HONE-1细胞(P<0.05),HONE-1R细胞SF2值是HONE-1细胞的1.712倍;经0~10Gy X线常规分割照射的HONE-1R和HONE-1细胞,HONE-1R细胞生存率显着高于HONE-1细胞的生存率(P<0.05);HONE-1R细胞迁移力、侵袭能力均较HONE-1细胞显着增加(P<0.05)。(3)鼻咽癌组织ATF5蛋白表达水平显着高于鼻咽正常组织表达水平(P均<0.05),亚细胞主要定位于细胞浆;局部复发鼻咽癌组织ATF5蛋白表达水平显着高于初发鼻咽癌组织(P=0.032),且亚细胞主要定位于细胞核。(4)X线能促进鼻咽癌HONE-1细胞发生上皮间质化(Epithelial-mesenchymal transition,EMT)且呈剂量依赖性诱导EMT分子标志物(E-cadherin、N-cadherin)表达改变;(5)shRNA-ATF5能显着下调HONE-1R细胞ATF5 mRNA表达水平(P<0.05),降低HONE-1R细胞克隆形成率(P<0.05),削弱HONE-1R细胞存活率、迁移力和侵袭力(P均<0.05),抑制HONE-1R放射抗拒性(P<0.05),且显着上调HONE-1R细胞E-cadherin蛋白表达(P<0.05),下调HONE-1R细胞N-cadherin蛋白表达(P<0.05)。结论:(1)ATF5参与HONE-1细胞放射抵抗,且HONE-1放射抵抗细胞发生EMT变化。(2)ATF5沉默可逆转鼻咽癌放疗抵抗细胞的EMT表型,增加鼻咽癌放疗抵抗细胞的放疗敏感性,提示ATF5蛋白可能通过介导EMT参与鼻咽癌放疗抵抗。(本文来源于《遵义医科大学》期刊2019-05-01）
袁超[6]（2019）在《Wnt/β-catenin信号调控IL-17A介导的巨噬细胞极化对肺脏上皮细胞间质化特性的影响》一文中研究指出背景:肺纤维化(Pulmonary fibrosis,PF)是由多种原因引起的一种严重的慢性肺间质性疾病。主要特征是早期的弥漫性肺泡炎和肺泡持续损伤,后期成纤维细胞大量病理性增殖,伴随细胞外基质(Extracellularmatrix,ECM)异常性汇聚,导致肺结构破坏,最终导致肺纤维化。炎症已被认为是肺纤维化的最初原因,并且上皮-间充质转化(Eβithelial-mesenchymal transition,EMT)是促进肺纤维化进程的重要发病机理。巨噬细胞是一类专业的免疫细胞,在维持免疫稳态方面具有重要作用。在肺纤维化过程中,巨噬细胞也发挥着重要作用,根据所处的微环境以及外界刺激极化为两种不同的功能状态,即经典活化的巨噬细胞(M1)和替代活化的巨噬细胞(M2)而发挥其免疫调控作用。Wnt信号是机体维持组织稳定和损伤修复的关键信号通路,在免疫调节中起着非常重要的作用。白介素17A(IL-17A)是一种能够诱导巨噬细胞极化的的免疫调节剂,并且与宿主防御和各种免疫相关疾病有关。有研究表明,Wnt信号和IL-17都在肺纤维化进程中异常活化。目的:本研究探讨Wnt/β-catenin信号的活化对IL-17A诱导的巨噬细胞极化的调控作用机制,及其对肺脏上皮细胞间质化特性的影响。方法:1、使用含有Wnt配体Wnt3a的条件培养基、Wnt/β-catenin信号抑制剂XAV939以及IL-17A对小鼠巨噬细胞RAW264.7进行预处理,通过扫描电子显微镜对巨噬细胞表面形态进行观察,免疫印迹检测巨噬细胞Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白β-catenin、active-β-catenin(ABC)、TCF-4、Cyclin D1和c-Myc;巨噬细胞极化标志蛋白iNOS以及Argl;巨噬细胞调控因子p-STAT1和p-STAT3以及其下游分子p21、BCL-XL和信号通路调控因子SOCS3;炎症信号通路MAPK相关蛋白p-JNK、p-p38以及p53进行检测。荧光定量PCR方法检测巨噬细胞极化相关标志分子MCP-1、Fizz1以及Ym-1基因表达水平,酶联免疫吸附实验(ELISA)检测细胞培养上清中炎症因子IL-6、IL-10和TNF-α的分泌情况进行检测,运用流式细胞术对巨噬细胞极化相关膜标志分子CD86和CD206进行检测。2、通过分离原代小鼠气管上皮细胞,构建气液相肺脏上皮细胞培养模型,利用该模型与巨噬细胞共培养,使用含有Wnt配体Wnt3a的条件培养基、XAV939、IL-17A以及IL-17A抗体,运用免疫印迹法对上皮细胞全蛋白提取物中上皮-间充质转化标志蛋白α-SMA、Collagen Ⅰ和Vimentin进行检测。结果:1、IL-17A 处理 RAW264.7 细胞后,Wnt/β-catenin 信号通路中 β-catenin、ABC、TCF-4、Cyclin D1和c-Myc均出现表达上调,表明IL-17A能够有效激活Wnt/β-catenin信号,并且IL-17A显示出协同增强Wnt3a激活的Wnt/β-catenin信号的能力。2、Wnt/β-catenin信号的激活能够抑制IL-17A诱导的I型极化,减缓IL-17A对巨噬细胞Ⅱ型极化的抑制。分子机制研究表明,Wnt/β-catenin信号的激活可以部分的减少p-STAT3的表达以抑制IL-17A诱导的巨噬细胞M1型极化,同时增加p-STAT1的表达来减缓IL-17A抑制的巨噬细胞M2型极化。同时,Wnt/β-catenin信号可以通过与IL-17A相互协同来激活p38 MAPK信号通路。3、在EMT过程中,Wnt 3a能够抑制肺脏上皮细胞间质化相关Vimentin和α-SMA的表达,并且能够有效抑制IL-17A诱导的Vimentin表达;IL-17A抗体对Vimentin表达没有明显作用,但能够诱导α-SMA的表达。而Wnt3a和IL-17A均能诱导上皮细胞Collagen Ⅰ的表达。说明Wnt/β-catenin信号的激活能够减缓IL-17A导致的EMT进程。结论:IL-17A能够有效激活Wnt/β-catenin信号,且与Wnt3a相互协同;Wnt/β-catenin信号通路的活化可下调p-STAT3的表达来抑制IL-17A诱导的巨噬细胞M1型极化,上调p-STAT1的表达来减缓IL-17A抑制的巨噬细胞M2型极化,并通过与IL-17A相互协同激活p38 MAPK信号通路。此外,Wnt3a能够减缓IL-17A导致的EMT进程。综上所述,Wnt/β-catenin信号能够抑制IL-17A介导的巨噬细胞M1极化,缓解抑制的M2型极化以减缓肺脏上皮细胞的EMT进程。(本文来源于《宁夏大学》期刊2019-04-01）
郑世勤[7]（2019）在《大蒜素对胆管癌细胞上皮间质化的影响研究》一文中研究指出目的:旨在探讨大蒜素对胆管癌细胞上皮间质化的影响及其作用机制,为大蒜素应用于胆管癌的治疗提供理论依据。方法:采用MTT法检测大蒜素对人胆管癌RBE细胞的增殖抑制作用,将其作用24h后IC_(50)数值作为大蒜素给药浓度,将其分为空白对照组、大蒜素组(IC_(50))、TGF-b_1组(10ng/mL)和大蒜素+TGF-b_1组(IC_(50)+10ng/mL);采用划痕实验和Transwell小室试验分别检测大蒜素作用于RBE细胞24h后迁移及侵袭能力;采用Western blot分别检测各组EMT相关蛋白分子(E-Cadherin、N-Cadherin、Vimentin、Snail)及NF-kB信号通路相关蛋白表达水平。结果:大蒜素以剂量依赖性方式抑制RBE细胞增殖,24h的IC_(50)约为130.7μmol/L;划痕实验显示大蒜素作用24h后,与空白对照组(28.19%±0.66%)及TGF-b_1组(49.22%±0.27%)迁移率相比,大蒜素组(9.25%±0.36%)及大蒜素+TGF-b_1组(13.91%±0.75%)均下降(P<0.05);Transwell小室实验显示大蒜素作用24h后,与空白对照组(33.48%±0.04%)及TGF-b_1组(40.21%±0.12%)侵袭率相比,大蒜素组(6.59%±0.06%)及大蒜素+TGF-b_1组(9.40%±0.05%)亦均下降(P<0.05);Western实验显示,与空白对照组相比,大蒜组中E-Cadherin表达增加,而Snail、N-Cadherin、Vimentin、NF-kB及p-NF-kB表达减少(P<0.05);与TGF-b_1组相比,大蒜素+TGF-b_1组的Snail、N-Cadherin、Vimentin、NF-kB及p-NF-kB表达下降,且E-Cadherin表达升高(P<0.05)。结论:大蒜素可抑制人胆管癌RBE细胞的增殖。大蒜素能够通过阻断NF-kB信号通路,进而下调Snail、N-Cadherin、Vimentin和上调E-Cadherin蛋白表达抑制人胆管癌细胞上皮间质化的发生。大蒜素亦能抑制TGF-b_1诱导的人胆管癌细胞发生上皮间质化,这对于抗胆管癌药物的研发具有一定的潜在价值。(本文来源于《南京医科大学》期刊2019-03-01）
郑世勤,王晓松,陈双,严展鹏,张秀华[8]（2019）在《大蒜素对TGF?β_1诱导人胆管癌细胞上皮间质化的影响及机制》一文中研究指出目的胆管癌的转移机制可能与上皮间质化(EMT)有关。文章旨在探讨大蒜素对TGF?β_1诱导的人胆管癌细胞上皮间质化的影响及其作用机制,为大蒜素应用于胆管癌的治疗提供理论依据。方法采用MTT法检测不同浓度大蒜素对人胆管癌RBE细胞的增殖抑制作用,以24h的IC50确定为大蒜素给药浓度,将其分为空白对照组、大蒜素组(130.7μmol/L)、TGF?β_1组(10ng/mL)及大蒜素+TGF?β_1组(130.7μmol/L+10ng/mL);采用划痕实验和Transwell小室试验分别检测24h后RBE细胞的迁移及侵袭能力;Western blot分别检测各组EMT相关蛋白E?钙黏蛋白(E?Cadherin)、N?钙黏蛋白(N?Cadherin)、Vimentin、Snail及核因子?κB(NF?κB)信号通路表达情况。结果与空白对照组及TGF?β_1组迁移率(28.19%±0.66%、49.22%±0.27%)比较,大蒜素组及大蒜素+TGF?β_1组(9.25%±0.36%、13.91%±0.75%)均下降(P<0.05);与空白对照组及TGF?β_1组侵袭率(33.48%±0.04%、40.21%±0.12%)比较,大蒜素组及大蒜素+TGF?β_1组(6.59%±0.06%、9.40%±0.05%)亦均明显下降(P<0.05);与空白对照组相比,大蒜组的E?Cadherin蛋白表达上调(P<0.05),而N?Cadherin、Vimentin、Snail、NF?κB及p?NF?κB蛋白表达下调(P<0.05);与TGF?β_1组相比,大蒜素+TGF?β_1组的E?Cadherin蛋白表达上调(P<0.05),N?Cadherin、Vimentin、Snail、NF?κB及p?NF?κB蛋白表达下调(P<0.05)。结论大蒜素可抑制TGF?β_1诱导的人胆管癌细胞发生上皮间质化,其机制可能与阻断NF?κB信号通路有关。(本文来源于《医学研究生学报》期刊2019年02期）
余伟,马达,刘礼军,张志标[9]（2018）在《Sox5促进胰腺癌细胞迁移侵袭和上皮间质化》一文中研究指出目的:探讨Sox5对胰腺癌细胞迁移侵袭和上皮间质化的影响。方法:人正常胰腺细胞HPDE6-C7(HPDE6-C7组)、胰腺癌细胞PANC-1(PANC-1组)和AsPC-1(AsPC-1组)正常培养至对数生长期,采用qRT-PCR法和Western blot法分别检测各组细胞中Sox5mRNA和蛋白水平。将shSox5、shControl、pcDNA 3.1-Sox5和载体pcDNA 3.1以脂质体法转染胰腺癌细胞PANC-1,分别标记为shSox5组、shControl组、pcDNA 3.1-Sox5组和Scrambled组,采用qRT-PCR法检测各组细胞中Sox5、E-cadherin、N-cadherin、Vimetin、Snail和Twist1的mRNA表达;Western blot检测各组细胞中Sox5、E-cadherin、N-cadherin、Vimetin、Snail和Twist1的蛋白表达;Transwell法检测各组细胞的迁移和侵袭。结果:与HPDE6-C7组相比,PANC-1组和AsPC-1组中Sox5mRNA和蛋白水平均升高(P<0.01);与shControl组比较,shSox5组Sox5、N-cadherin、Vimetin、Snail和Twist1的mRNA和蛋白以及细胞迁移和侵袭水平均显着降低(P<0.01),E-cadherin mRNA和蛋白水平均显着升高(P<0.01);与Scrambled组比较,pcDNA-3.1-Sox5组Sox5、N-cadherin、Vimetin、Snail和Twist1的mRNA和蛋白以及细胞迁移和侵袭水平均显着升高(P<0.01),E-cadherin mRNA和蛋白水平均显着降低(P<0.01)。结论:Sox5可促进胰腺癌细胞迁移、侵袭和EMT,将为胰腺癌的靶点治疗提供新靶标。(本文来源于《微循环学杂志》期刊2018年04期）
刘检,邓海峰,徐斌,蒋敬庭[10]（2018）在《趋化因子受体6在食管癌组织的表达及对食管癌细胞上皮间质化的影响》一文中研究指出目的 :探讨趋化因子受体6在食管癌组织的表达及其对食管癌细胞EMT的影响。方法:应用免疫组化技术检测99例食管鳞癌和11例食管正常组织中CCR6、E-cadherin和Vimentin的表达,分析其与临床病理特征的相关性。应用qRT-PCR检测人食管癌细胞株ECA-109、TE-1及正常食管细胞株HEEC中CCR6的表达。应用CCK-8、划痕和Transwell实验测定CCR6对食管癌细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响。应用qRT-PCR和Western blot实验测定CCR6-CCL20趋化作用对食管癌细胞EMT的影响。结果:CCR6在食管癌细胞株中高表达与食管癌细胞中低表达,差异有统计学意义(8.00±1.23、4.57±1.12比1.00±0.32,P<0.001)。CCR6在淋巴结转移组和未转移组的阳性表达率分别为87.1%和63.8%(P=0.020);在TNM分期级别高组和级别低组的阳性表达率分别为87.9%和62.5%(P=0.038)。食管癌细胞经CCL20刺激后,增殖能力显着降低,差异有统计学意义(0.35±0.02比0.49±0.03,0.38±0.033比0.48±0.04,P<0.05)。ECA-109划痕24h后,CCL20组的愈合速度显着升高,差异有统计学意义(1.34±0.02比1.00±0.04,P<0.01),封闭CCR6,愈合速度明显降低(1.36±0.06比1.00±0.04,P<0.05),TE-1细胞无统计学意义。ECA-109细胞Transwell实验结果显示:CCL20组细胞穿膜数量显着增高,差异有统计学意义(401.33±20.00比239.33±21.18,P<0.01);封闭CCR6后,穿膜细胞数量显着降低(311.33±12.12比401.33±20.00,P<0.05),TE-1细胞无统计学意义。CCL20刺激后,ECA-109中E-cadherin的mRNA和蛋白表达显着降低、Vimentin的表达显着升高;封闭CCR6,E-cadherin的mRNA和蛋白表达显着升高、Vimentin表达显着降低,TE-1细胞差异无统计学意义。结论:CCR6在食管癌淋巴结转移患者中呈高表达,CCR6及CCR6-CCL20趋化轴参与调控肿瘤细胞的增殖、侵袭和迁移,可能参与调节食管癌细胞EMT的发生。(本文来源于《第十叁届全国免疫学学术大会摘要汇编》期刊2018-11-07）
上皮间质化论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的检测microRNA-448(miRNA-448)在非小细胞肺癌(NSCLC)组织及细胞系中表达情况,并观察其对细胞增殖、迁移、侵袭及上皮间质化(EMT)的影响。方法采用荧光实时定量PCR(qRT-PCR)法检测NSCLC组织及细胞系中miR-448的表达情况。对肺癌细胞株A549转染miR-448模拟物(mimics)和抑制剂(inhibitor),并应用细胞计数试剂盒-8检测不同时间细胞增殖活性,Transwell试验测定miR-448模拟物或抑制剂对A549细胞迁移及侵入的影响。Western blot测定E-钙黏蛋白、N-钙黏蛋白和波形蛋白表达,并检测miR-448对NSCLC细胞与内皮细胞的黏附性影响。结果qRT-PCR结果显示,与对照组相比,NSCLC组织及细胞系中miR-448的表达水平明显降低,在A549细胞系中miR-448下调最为显着(P<0.05)。A549细胞转染miR-448模拟物或抑制剂后可导致细胞增殖率随时间增加逐渐降低或升高(P <0.05)。在模拟物组,细胞迁移能力明显加强(P <0.05),相反,A549细胞中,miR-448抑制剂会显着抑制此能力(P <0.05)。与此类似,A549细胞侵袭能力可因miR-448过表达或低表达而增加或降低。miR-448模拟物可显着提高A549细胞中E-cadherin蛋白表达,而N-cadherin和vimentin蛋白水平显着下降,且A549细胞与内皮细胞黏附能力降低(P值均<0.05),而抑制剂则产生相反作用(P值均<0.05)。结论在NSCLC组织及细胞中miR-448呈低表达,其过表达可抑制NSCLC细胞增殖、转移及EMT过程,而miR-448低表达可促进细胞增殖、转移及EMT。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
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