刘豪丽：马立克病病毒编码的miR-M11-5p宿主靶基因的筛选与鉴定论文

本文主要研究内容

作者刘豪丽,滕蔓,李会珍,余祖华,刘金玲,丁轲,张改平,罗俊（2019）在《马立克病病毒编码的miR-M11-5p宿主靶基因的筛选与鉴定》一文中研究指出：作为α疱疹病毒的重要成员,马立克病病毒(MDV)感染鸡可引起免疫抑制及快速发作的T细胞淋巴瘤,即马立克病(MD)。此前发现MDV基因组编码大量病毒miRNA,可能在病毒复制、潜伏感染及肿瘤发生中起重要作用。基因敲除miR-M11-5p可显著增强MDV致病性及致瘤性,表明其可能是MD肿瘤抑制因子。为进一步揭示miR-M11-5p介导的调控机制,本研究利用鸡胚成纤维细胞(CEF)总RNA的cDNA为模板,通过hybrid-PCR扩增miR-M11-5p的候选宿主靶基因片段,然后连接至pMD19-T载体、转化至E.coli JM109中构建cDNA文库。对文库菌落进行PCR鉴定、测序分析以及Blast序列对比,共获得77个候选宿主靶基因,其中37个miRNA结合靶点位于候选靶基因的3′-UTR中。进一步通过双荧光素酶报告试验、miR-M11-5p过表达以及RT-qPCR分析,最终鉴定鸡MAFB、LOC776816和RFX7为miR-M11-5p的宿主靶基因。本研究为进一步阐明miR-M11-5p在MDV肿瘤发生中的调控机制奠定了重要基础。

Abstract

zuo wei αpao zhen bing du de chong yao cheng yuan ,ma li ke bing bing du (MDV)gan ran ji ke yin qi mian yi yi zhi ji kuai su fa zuo de Txi bao lin ba liu ,ji ma li ke bing (MD)。ci qian fa xian MDVji yin zu bian ma da liang bing du miRNA,ke neng zai bing du fu zhi 、qian fu gan ran ji zhong liu fa sheng zhong qi chong yao zuo yong 。ji yin qiao chu miR-M11-5pke xian zhe zeng jiang MDVzhi bing xing ji zhi liu xing ,biao ming ji ke neng shi MDzhong liu yi zhi yin zi 。wei jin yi bu jie shi miR-M11-5pjie dao de diao kong ji zhi ,ben yan jiu li yong ji pei cheng qian wei xi bao (CEF)zong RNAde cDNAwei mo ban ,tong guo hybrid-PCRkuo zeng miR-M11-5pde hou shua su zhu ba ji yin pian duan ,ran hou lian jie zhi pMD19-Tzai ti 、zhuai hua zhi E.coli JM109zhong gou jian cDNAwen ku 。dui wen ku jun la jin hang PCRjian ding 、ce xu fen xi yi ji Blastxu lie dui bi ,gong huo de 77ge hou shua su zhu ba ji yin ,ji zhong 37ge miRNAjie ge ba dian wei yu hou shua ba ji yin de 3′-UTRzhong 。jin yi bu tong guo shuang ying guang su mei bao gao shi yan 、miR-M11-5pguo biao da yi ji RT-qPCRfen xi ,zui zhong jian ding ji MAFB、LOC776816he RFX7wei miR-M11-5pde su zhu ba ji yin 。ben yan jiu wei jin yi bu chan ming miR-M11-5pzai MDVzhong liu fa sheng zhong de diao kong ji zhi dian ding le chong yao ji chu 。

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论文作者分别是来自畜牧兽医学报的刘豪丽,滕蔓,李会珍,余祖华,刘金玲,丁轲,张改平,罗俊，发表于刊物畜牧兽医学报2019年05期论文，是一篇关于马立克病病毒论文,微小论文,靶基因论文,实时荧光定量论文,畜牧兽医学报2019年05期论文的文章。本文可供学术参考使用，各位学者可以免费参考阅读下载，文章观点不代表本站观点，资料来自畜牧兽医学报2019年05期论文网站，若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权，请联系我们删除。

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