导读:本文包含了重复结构域论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:DNA结合蛋白,核酸检测,分子诊断,食源性致病菌
重复结构域论文文献综述
李晓然,张若鸿,杨洋,郭云昌[1]（2019）在《锌指蛋白结构域、转录激活效应蛋白和成簇规律间隔短回文重复技术检测病原体研究进展》一文中研究指出目前一些研究已利用锌指蛋白结构域(zinc finger-domain proteins,ZFPs),转录激活效应蛋白(transcription activator-like effectors,TALEs)和成簇规律间隔短回文重复(clustered regularly interspaced short palindromic repeats,CRISPR)编辑的DNA、RNA结合蛋白来检测病原体核酸。随着有不同靶位点和活性的新型CRISPR相关酶的出现,该领域又开发了DNA内切酶靶向CRISPR非特异性报告探针(DNA endonuclease-targeted crispr trans reporter,DETECTR),高特异性和灵敏性的酶解锁报告探针(specific high-sensitivity enzymatic reporter unlocking,SHERLOCK)等技术,用于检测病原体核酸的新诊断技术越来越可靠。随着食品安全问题频繁发生,人们对快速精确检测食源性致病菌的方法越加关注。本文就ZFPs,TALEs和CRISPR技术的研究进展以及在食源性致病菌检测方面的应用进行了介绍,对其面临的机遇与挑战进行了讨论。(本文来源于《卫生研究》期刊2019年05期）
廖鑫[2]（2019）在《锚蛋白重复结构域蛋白6调控结直肠癌细胞增殖作用机制的研究》一文中研究指出目的结直肠癌是现今世界常见的消化道恶性肿瘤之一,严重危害人类健康。结直肠癌已成为世界范围内癌症患者死亡的主要原因,在西方国家,结直肠癌是癌症死亡的第二原因。最新报告显示,在亚洲地区结直肠癌的发生呈上升趋势。结直肠癌是我国癌症死亡的第五大原因,在经济发达的城市,这个比例甚至更高。目前,结直肠癌的治疗方式包括手术治疗、放化疗,其中以手术治疗为主,但仍有20-30%的患者出现病情复发。为此,研究结直肠癌的肿瘤特异性标志物,为临床的诊断和治疗提供新的靶点和新思路,具有重要的理论及现实意义。Diversin又被称作锚蛋白重复结构域蛋白6(ankyrin repeat domain protein 6,ANKRD6),前期研究结果显示Diversin在非小细胞肺癌,乳腺癌,膀胱癌组织中表达水平显着高于癌旁组织。我们课题组前期研究发现Diversin在非小细胞肺癌中过度表达,在肿瘤发生发展中起促进作用,同时基因芯片结果显示目的基因ANKRD6在细胞上调控细胞周期:G1-S期检查点。目前Diversin在人类结直肠癌中的表达情况及意义尚不清楚,其是否具有调控肿瘤细胞增殖的作用及分子机制等都有待于进一步探讨,本次研究旨在探讨Diversin在结直肠癌细胞增殖中的作用,及对其分子机制进行初步探索。方法收集沈阳医学院附属中心医院2010-2012年经手术切除,病理证实为结直肠癌的蜡块标本作为研究对象。本研究经沈阳医学院当地机构伦理委员会审查批准进行。我们收集了来自相同患者的癌及癌旁组织标本,通过免疫组化的方法检测Diversin在结直肠癌组织和癌旁组织中的表达水平。为了进一步研究Diversin对细胞增殖的作用,我们使用人结直肠癌细胞HCT116感染Diversin过表达慢病毒(LV-ANKRD6)及阴性对照慢病毒(LV-NC)和人结直肠癌细胞LOVO细胞感染Diversin敲低慢病毒(LV-ANKRD6-RNAi)及阴性对照组慢病毒(LV-siNC),采用MTS,流式细胞术,蛋白印记法对比检测Diversin上调和下调对结直肠癌细胞增殖,细胞周期及相关蛋白表达活化的影响。结果免疫组化结果显示,Diversin在人类结直肠癌组织中高表达,并与恶性肿瘤分化,临床分期和淋巴结转移显着相关(P<0.05)。然而,Diversin过表达与年龄,性别,肿瘤部位之间没有统计学差异。MTS结果显示Diversin的过表达促进了结直肠癌细胞的增殖活力(P<0.05),而下调Diversin的表达抑制结直肠癌细胞增殖。流式细胞术测量细胞周期阶段的分布显示,与对照组细胞相比,具有Diversin过表达的HCT116细胞中G1期细胞的百分比降低,而S期细胞的百分比显着增加(G1:64.26%vs 47.42%,S:14.53%vs 36.89%,P<0.05),而在Diversin敲低的LOVO细胞中G1期细胞的百分比增加,S期细胞百分比减少(G1:30.15%vs 81.8%,S:52.80%vs 9.14%,P<0.05)。蛋白印记结果显示Diversin过表达的结直肠癌细胞HCT116中P21,P27蛋白表达水平降低,cyclinD,CDK4和cyclinE,CDK2的表达活性增加。同时,β-catenin蛋白表达水平没有明显变化,而p-JNK/JNK比率升高。而在Diversin下调的结直肠癌细胞LOVO中P21,P27蛋白表达水平显着增加,cyclinD,CDK4和cyclinE,CDK2的表达水平下降。同时,β-catenin蛋白表达水平没有显着变化,而p-JNK/JNK比率下降。结论Diversin在人类结直肠癌组织中高表达,与恶性肿瘤分化,临床分期和淋巴结转移呈正相关。Diversin通过P21,P27,cyclinE,CDK2,cyclinD,CDK4,p-JNK调控CRC细胞增殖,我们推测Diversin可能是通过G1-S检查点和非经典JNK通路发挥作用。(本文来源于《沈阳医学院》期刊2019-03-01）
范俊华,韩李春,张湘莲,张君红,吕小平[3]（2018）在《非酒精性脂肪性肝病小鼠肝组织WD重复结构域35 mRNA及蛋白的表达情况及其意义》一文中研究指出目的探讨非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)小鼠肝组织WD重复结构域35(WDR35)mRNA及蛋白的表达情况及其意义。方法选择健康雄性昆明小鼠36只,随机分为对照组和模型组,各18只,分别给予普通饲料、蛋氨酸-胆碱缺乏饲料喂养,分别于4周、8周和12周后各组取6只小鼠处死,检测血清ALT、AST、白细胞介素-6(IL-6)水平,光镜下观察肝脏组织病理学变化并计算NAFLD活动度积分(NAS),检测肝组织WDR35 mRNA及蛋白表达水平。结果镜下可见模型组肝组织出现不同程度脂肪沉积、炎症细胞浸润伴有空泡细胞形成,提示造模成功;各时间点模型组NAS均高于对照组,且随时间延长而升高(P<0.05)。各时间点模型组血清ALT、AST、IL-6水平及肝组织WDR35 mRNA相对表达水平高于对照组(均P<0.05),肝组织WDR35蛋白表达水平亦较对照组增加。结论 NAFLD小鼠肝脏组织中WDR35 mRNA以及蛋白的表达均增加,WDR35可能因与炎症因子相互作用而在NAFLD的发生中发挥重要作用。(本文来源于《广西医学》期刊2018年15期）
周林裕,包春燕,胡骁,代永庆,包志军[4]（2018）在《富含亮氨酸重复序列免疫球蛋白样结构域1(LRIG1)增强顺铂诱导的人垂体瘤细胞凋亡》一文中研究指出目的探讨富含亮氨酸重复序列免疫球蛋白样蛋白结构域1(LRIG1)在人垂体瘤组织中表达情况,并观察过表达LRIG1后对顺铂(DDP)诱导的垂体瘤细胞增殖、凋亡的影响。方法采用免疫组织化学染色法检测45例垂体瘤患者肿瘤组织及瘤旁组织中的LRIG1表达,分析LRIG1阳性表达与患者临床病理指标的相关性。选取原代分离培养的人垂体瘤细胞,采用脂质体介导的基因转染技术将LRIG1基因过表达质粒p EGFP-N1-LRIG1转染进细胞中,筛选LRIG1过表达的细胞,同时选取转染空质粒p EGFP-N1的细胞作为对照组。两组细胞均经20μg/m L DDP诱导48 h,流式细胞术检测细胞凋亡情况,平板克隆实验检测细胞的增殖能力,Western blot法检测细胞中凋亡相关蛋白BAX、胱天蛋白酶3(caspase-3)和Bcl2的相对表达量。结果垂体瘤患者肿瘤组织中LRIG1阳性率显着低于瘤旁组织,且LRIG1在侵袭性肿瘤表达显着降低。与对照组相比,过表达LRIG1后,DDP诱导的细胞凋亡率显着增加、细胞增殖显着降低、BAX、caspase-3的水平显着增加,而Bcl2水平显着降低。结论过表达LRIG1增加DDP诱导的人垂体瘤细胞凋亡并抑制其增殖。(本文来源于《细胞与分子免疫学杂志》期刊2018年01期）
崔俊,夏军[5]（2015）在《富含亮氨酸重复结构域蛋白3炎症小体在高血压大鼠主动脉夹层模型形成中的作用》一文中研究指出目的建立高血压大鼠主动脉夹层(AD)模型,探讨富含亮氨酸重复结构域蛋白(NLRP)3炎症小体在高血压促AD形成中的作用及相关分子机制。方法 40只雌性SD大鼠(3周龄,体质量60g左右)随机分为4组,每组10只:对照组:正常喂食饮水;β-氨基丙腈(BAPN)组(AD模型组):0.25%BAPN喂食;醋酸去氧皮质酮(DOCA)组:0.25%BAPN喂食,并皮下注射DOCA油剂;左旋硝基精氨酸甲酯(l-NAME)组:0.25%BAPN喂食,饮含l-NAME水。记录各组大鼠饮水、体质量及血压;动物死亡后(对照组大鼠为处死,模型组为自然死亡)分离主动脉行Masson叁色染色及EVG染色,分别观察主动脉内胶原纤维、弹力纤维的变化情况,行免疫组化染色观察主动脉中NLRP3炎症小体相关蛋白[NLRP3、Caspase-1、白细胞介素1β(IL-1β)]的表达情况,采用实时聚合酶链反应及Western blot法分别检测主动脉内NLRP3炎症小体相关蛋白的基因及蛋白表达情况。结果与对照组比较,BAPN喂养2周后大鼠体质量明显减轻,DOCA组大鼠饮水量明显增加。DOCA组、l-NAME组大鼠血压较BAPN组明显升高[干预第2周平均动脉压:(95.4±10.1)、(110.0±9.9)比(70.4±2.9)mm Hg;干预第3周平均动脉压:(128.4±13.8)、(118.5±8.1)比(76.4±5.3)mm Hg,均P<0.01]。Masson叁色染色显示:DOCA组、l-NAME组大鼠主动脉中胶原纤维较BAPN组明显增多(均P<0.05)。EVG染色显示:DOCA组、l-NAME组大鼠主动脉中弹力纤维较BAPN组明显增多(均P<0.05),且排列更加紊乱,断裂情况更加严重。免疫组化显示:与BAPN组比较,DOCA组、l-NAME组大鼠主动脉中NLRP3炎症小体相关蛋白表达增加(NLRP3:6.63±0.51、6.78±0.47比3.32±0.39;Caspase-1:5.22±0.45、6.19±0.31比3.36±0.30;IL-1β:5.51±0.53、5.80±0.40比3.18±0.35;均P<0.05)。与BAPN组比较,DOCA组及l-NAME组大鼠主动脉内NLRP3炎症小体相关蛋白在基因水平、蛋白水平的表达显着增加(均P<0.05)。结论 NLRP3炎症小体参与高血压促大鼠AD的形成。(本文来源于《中华高血压杂志》期刊2015年12期）
颜亮,罗滔,蔡军伟,毕志斐,胡巢凤[6]（2013）在《NALP3富含亮氨酸重复序列结构域识别人细胞周期蛋白H和禽冠状病毒蛋白》一文中研究指出目的:寻找与NALP3富含亮氨酸重复序列(leucine-rich repeat,LRR)结构域相互作用的蛋白质分子。方法:克隆NALP3富含亮氨酸重复序列(NALP3-LRR)结构域的DNA序列并经测序检验。应用酵母双杂交技术,构建以NALP3-LRR结构域为诱饵基因的酵母双杂交载体,对人胚肺cDNA文库进行杂交筛选,经酵母回交实验验证蛋白质在酵母细胞内的相互作用并对阳性克隆的DNA进行序列测定和生物信息学分析。将筛选到的阳性克隆进一步用免疫共沉淀实验验证NALP3-LRR结构域与阳性蛋白之间相互作用的可靠性。结果:成功克隆NALP3-LRR结构域的DNA序列并经测序检验正确。用酵母双杂交技术对人胚肺cDNA文库进行酵母杂交筛选共获得4个阳性克隆。免疫共沉淀实验证实能与NALP3-LRR结构域发生相互作用的阳性蛋白是人细胞周期蛋白H和禽传染性支气管炎病毒株Cal99的ORF1a。结论:NALP3的富含亮氨酸重复序列结构域能与人细胞周期蛋白H和禽冠状病毒蛋白发生相互作用。(本文来源于《中国病理生理杂志》期刊2013年01期）
张贺翠,杨昆,朱利泉,杨永军,薛丽琰[7]（2011）在《利用酵母双杂交系统鉴定羽衣甘蓝臂重复蛋白(ARC1)与结球甘蓝S位点受体激酶(SRK)激酶结构域的相互作用》一文中研究指出S位点受体激酶(SRK)和臂重复蛋白(ARC1)是芸薹属植物自交不亲和反应的两种重要的信号元件,SRK-ARC1之间的互作决定着自交不亲和反应的进程。本研究利用PCR技术获得结球甘蓝(Brassicaoleracea var.capitata)SRK激酶结构域(SRKJ)的编码区以及羽衣甘蓝(B.oleracea var.acephala)ARC1基因不同片段长度的基因组DNA与编码区,分别构建以pGBKT7为载体的长度依次递减的ARC1a、ARC1b、ARC1c和ARC1d的重组"诱饵"质粒和以pGADT7为载体的SRKJ的重组猎物质粒,并将重组质粒转化酵母菌株进行蛋白质相互作用检测。结果显示:羽衣甘蓝ARC1存在5个连续的臂重复区,与结球甘蓝ARC1的氨基酸序列一致性达到98%;构建的重组表达载体在酵母细胞中无毒性和自激活作用产生;3个实验组Y2HGold[pGBKT7-ARC1a]×Y187[pGADT7-SRKJ]、Y2HGold[pGBKT7-ARC1c]×Y187[pGADT7-SRKJ]和Y2HGold[pGBKT7-ARC1d]×Y187[pGADT7-SRKJ]同时激活了4种报告基因AUR1-C、MEL1、HIS3和ADE2;表明羽衣甘蓝ARC1与结球甘蓝的SRK激酶结构域能够发生相互作用,且互作的区域位于连续的臂重复区,其与结球甘蓝ARC1的氨基酸差异不足以引起互作区正确构象的改变。研究结果为芸薹属植物自交不亲和反应的分子机理提供新内容。(本文来源于《农业生物技术学报》期刊2011年06期）
周青,施海明[8]（2010）在《FIH与锚蛋白重复序列结构域》一文中研究指出缺氧诱导因子抑制因子(FIH)是体内调节缺氧诱导因子1(HIF-1)转录活性的主要因子之一。近年FIH研究中最引人注意的是一组含有锚蛋白重复序列结构域的底物蛋白质,这组蛋白普遍存在并参与多种生理功能,其含多个FIH羟化位点,但具有不完全羟化及优势底物的特征,又与FIH、HIF-1之间存在错综复杂的关系。(本文来源于《医学综述》期刊2010年21期）
吴田,谢从华[9]（2010）在《烟草富含锚蛋白重复结构域基因Nbar的克隆及序列分析》一文中研究指出根据1个已报道的马铃薯富含锚蛋白重复结构域基因Star的全长cDNA序列,分别在含有起始密码子和终止密码子处设计基因特异引物,从感染了晚疫病原菌的本氏烟草叶片cDNA中克隆得到1个新的基因Nbar。此基因包含1个最大为1 539 bp的阅读框,与Star的碱基一致性达到90%。该基因编码513个氨基酸,序列中存在6个锚蛋白重复结构域和1个环指结构域。Nbar已提交GenBank,登录号为1231763。(本文来源于《西南林学院学报》期刊2010年01期）
杨静,蔡艳,黄河,李芳,伍赶球[10]（2008）在《神经系统富亮氨酸重复超家族成员LRRN3 C端结构域蛋白的原核表达和纯化》一文中研究指出神经系统富亮氨酸重复超家族成员LRRN3是一种重要的膜蛋白,与神经系统发生发育和损伤后修复密切相关.运用多聚酶链式反应(PCR)方法,获得长555bp的DNA序列,扩增产物克隆至pET21质粒中,构建Mal和His融合表达质粒,在大肠杆菌中诱导表达融合蛋白,经Ni+-NTA agarose亲和层析纯化获得融合蛋白,并以Western blotting鉴定,为进一步研究LRRN3基因的结构和功能奠定了基础.(本文来源于《生命科学研究》期刊2008年03期）
重复结构域论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的结直肠癌是现今世界常见的消化道恶性肿瘤之一,严重危害人类健康。结直肠癌已成为世界范围内癌症患者死亡的主要原因,在西方国家,结直肠癌是癌症死亡的第二原因。最新报告显示,在亚洲地区结直肠癌的发生呈上升趋势。结直肠癌是我国癌症死亡的第五大原因,在经济发达的城市,这个比例甚至更高。目前,结直肠癌的治疗方式包括手术治疗、放化疗,其中以手术治疗为主,但仍有20-30%的患者出现病情复发。为此,研究结直肠癌的肿瘤特异性标志物,为临床的诊断和治疗提供新的靶点和新思路,具有重要的理论及现实意义。Diversin又被称作锚蛋白重复结构域蛋白6(ankyrin repeat domain protein 6,ANKRD6),前期研究结果显示Diversin在非小细胞肺癌,乳腺癌,膀胱癌组织中表达水平显着高于癌旁组织。我们课题组前期研究发现Diversin在非小细胞肺癌中过度表达,在肿瘤发生发展中起促进作用,同时基因芯片结果显示目的基因ANKRD6在细胞上调控细胞周期:G1-S期检查点。目前Diversin在人类结直肠癌中的表达情况及意义尚不清楚,其是否具有调控肿瘤细胞增殖的作用及分子机制等都有待于进一步探讨,本次研究旨在探讨Diversin在结直肠癌细胞增殖中的作用,及对其分子机制进行初步探索。方法收集沈阳医学院附属中心医院2010-2012年经手术切除,病理证实为结直肠癌的蜡块标本作为研究对象。本研究经沈阳医学院当地机构伦理委员会审查批准进行。我们收集了来自相同患者的癌及癌旁组织标本,通过免疫组化的方法检测Diversin在结直肠癌组织和癌旁组织中的表达水平。为了进一步研究Diversin对细胞增殖的作用,我们使用人结直肠癌细胞HCT116感染Diversin过表达慢病毒(LV-ANKRD6)及阴性对照慢病毒(LV-NC)和人结直肠癌细胞LOVO细胞感染Diversin敲低慢病毒(LV-ANKRD6-RNAi)及阴性对照组慢病毒(LV-siNC),采用MTS,流式细胞术,蛋白印记法对比检测Diversin上调和下调对结直肠癌细胞增殖,细胞周期及相关蛋白表达活化的影响。结果免疫组化结果显示,Diversin在人类结直肠癌组织中高表达,并与恶性肿瘤分化,临床分期和淋巴结转移显着相关(P<0.05)。然而,Diversin过表达与年龄,性别,肿瘤部位之间没有统计学差异。MTS结果显示Diversin的过表达促进了结直肠癌细胞的增殖活力(P<0.05),而下调Diversin的表达抑制结直肠癌细胞增殖。流式细胞术测量细胞周期阶段的分布显示,与对照组细胞相比,具有Diversin过表达的HCT116细胞中G1期细胞的百分比降低,而S期细胞的百分比显着增加(G1:64.26%vs 47.42%,S:14.53%vs 36.89%,P<0.05),而在Diversin敲低的LOVO细胞中G1期细胞的百分比增加,S期细胞百分比减少(G1:30.15%vs 81.8%,S:52.80%vs 9.14%,P<0.05)。蛋白印记结果显示Diversin过表达的结直肠癌细胞HCT116中P21,P27蛋白表达水平降低,cyclinD,CDK4和cyclinE,CDK2的表达活性增加。同时,β-catenin蛋白表达水平没有明显变化,而p-JNK/JNK比率升高。而在Diversin下调的结直肠癌细胞LOVO中P21,P27蛋白表达水平显着增加,cyclinD,CDK4和cyclinE,CDK2的表达水平下降。同时,β-catenin蛋白表达水平没有显着变化,而p-JNK/JNK比率下降。结论Diversin在人类结直肠癌组织中高表达,与恶性肿瘤分化,临床分期和淋巴结转移呈正相关。Diversin通过P21,P27,cyclinE,CDK2,cyclinD,CDK4,p-JNK调控CRC细胞增殖,我们推测Diversin可能是通过G1-S检查点和非经典JNK通路发挥作用。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
重复结构域论文参考文献
[1].李晓然,张若鸿,杨洋,郭云昌.锌指蛋白结构域、转录激活效应蛋白和成簇规律间隔短回文重复技术检测病原体研究进展[J].卫生研究.2019
[2].廖鑫.锚蛋白重复结构域蛋白6调控结直肠癌细胞增殖作用机制的研究[D].沈阳医学院.2019
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[9].吴田,谢从华.烟草富含锚蛋白重复结构域基因Nbar的克隆及序列分析[J].西南林学院学报.2010
[10].杨静,蔡艳,黄河,李芳,伍赶球.神经系统富亮氨酸重复超家族成员LRRN3C端结构域蛋白的原核表达和纯化[J].生命科学研究.2008