李成:银杏种子糖蛋白N-糖链分析及其致敏性研究论文

李成:银杏种子糖蛋白N-糖链分析及其致敏性研究论文

本文主要研究内容

作者李成(2019)在《银杏种子糖蛋白N-糖链分析及其致敏性研究》一文中研究指出:银杏(Ginkgo biloba L.)是一种药食同源的植物,具有抗氧化、抗疲劳、延缓衰老等作用。然而,银杏种仁具有致敏性,其中的糖蛋白是潜在的过敏原。研究表明,过敏反应是由于糖蛋白上N-糖链与体内IgE抗体的特异性结合所引起的,且结合位点可能与N-糖链的类型相关,但目前对银杏种仁中糖蛋白糖链的研究较少。本研究以银杏种仁蛋白为研究对象,对其糖蛋白的糖链类型及其致敏性进行分析,为研究银杏种仁糖蛋白的生物学功能奠定基础。所取得的主要研究结果如下:1.采用苯酚硫酸法和考马斯亮蓝法对银杏种仁蛋白的糖含量和蛋白含量进行了测定,结果表明:银杏种仁蛋白中糖含量约为11.6%,蛋白含量约为54.5%。2.采用ESI-MS及在线LC-UV-MS/MS2等技术,对银杏种仁蛋白及经SDS-PAGE分离得到的蛋白凝胶上的N-糖链进行定性定量分析。结果表明,银杏种仁蛋白中共有11条N-糖链。其中高甘露糖型N-糖链占总糖链的4.88%,复杂型N-糖链占95.12%,且相对丰度最高的糖型组成为H3N2X1F1(75.25%),其次为H3N2X1(11.22%)。此外,银杏蛋白经SDS-PAGE凝胶电泳分离所得的11种蛋白全部为糖蛋白,其中分子量为21,36和50 kDa的糖蛋白所释放的核心α-1,3-岩藻糖和β-1,2-木糖修饰的N-糖链所占比率较高,分别为68.23%,64.37%和75.09%。3.运用生物信息学技术,预测了银杏种仁中潜在的致敏糖蛋白Ginnacin的B细胞表位。Ginnacin中共预测到6条B细胞抗原表位,分别为peptide1-6:NAQEP,GCPETFQSSTSRGGEGQQSQE,TSNDQNQ,PGPPSDDYERER,RAGQNPNRPKRR,PTPQHQQPR。4.以Balb/c小鼠为受试动物,建立了银杏种仁糖蛋白的动物过敏模型,并对银杏种仁糖蛋白和去糖基化蛋白的致敏性进行评价。与去糖基化蛋白组小鼠相比,糖蛋白组小鼠的体重增长快,直肠温度变化大,组胺含量和IgE表达水平显著升高,同时观察组织病理学切片发现,糖蛋白组小鼠的组织损伤程度更大。结果表明,N-糖链在银杏糖蛋白引起的小鼠致敏反应中可能具有增强作用。

Abstract

yin xing (Ginkgo biloba L.)shi yi chong yao shi tong yuan de zhi wu ,ju you kang yang hua 、kang pi lao 、yan huan cui lao deng zuo yong 。ran er ,yin xing chong ren ju you zhi min xing ,ji zhong de tang dan bai shi qian zai de guo min yuan 。yan jiu biao ming ,guo min fan ying shi you yu tang dan bai shang N-tang lian yu ti nei IgEkang ti de te yi xing jie ge suo yin qi de ,ju jie ge wei dian ke neng yu N-tang lian de lei xing xiang guan ,dan mu qian dui yin xing chong ren zhong tang dan bai tang lian de yan jiu jiao shao 。ben yan jiu yi yin xing chong ren dan bai wei yan jiu dui xiang ,dui ji tang dan bai de tang lian lei xing ji ji zhi min xing jin hang fen xi ,wei yan jiu yin xing chong ren tang dan bai de sheng wu xue gong neng dian ding ji chu 。suo qu de de zhu yao yan jiu jie guo ru xia :1.cai yong ben fen liu suan fa he kao ma si liang lan fa dui yin xing chong ren dan bai de tang han liang he dan bai han liang jin hang le ce ding ,jie guo biao ming :yin xing chong ren dan bai zhong tang han liang yao wei 11.6%,dan bai han liang yao wei 54.5%。2.cai yong ESI-MSji zai xian LC-UV-MS/MS2deng ji shu ,dui yin xing chong ren dan bai ji jing SDS-PAGEfen li de dao de dan bai ning jiao shang de N-tang lian jin hang ding xing ding liang fen xi 。jie guo biao ming ,yin xing chong ren dan bai zhong gong you 11tiao N-tang lian 。ji zhong gao gan lou tang xing N-tang lian zhan zong tang lian de 4.88%,fu za xing N-tang lian zhan 95.12%,ju xiang dui feng du zui gao de tang xing zu cheng wei H3N2X1F1(75.25%),ji ci wei H3N2X1(11.22%)。ci wai ,yin xing dan bai jing SDS-PAGEning jiao dian yong fen li suo de de 11chong dan bai quan bu wei tang dan bai ,ji zhong fen zi liang wei 21,36he 50 kDade tang dan bai suo shi fang de he xin α-1,3-yan zao tang he β-1,2-mu tang xiu shi de N-tang lian suo zhan bi lv jiao gao ,fen bie wei 68.23%,64.37%he 75.09%。3.yun yong sheng wu xin xi xue ji shu ,yu ce le yin xing chong ren zhong qian zai de zhi min tang dan bai Ginnacinde Bxi bao biao wei 。Ginnacinzhong gong yu ce dao 6tiao Bxi bao kang yuan biao wei ,fen bie wei peptide1-6:NAQEP,GCPETFQSSTSRGGEGQQSQE,TSNDQNQ,PGPPSDDYERER,RAGQNPNRPKRR,PTPQHQQPR。4.yi Balb/cxiao shu wei shou shi dong wu ,jian li le yin xing chong ren tang dan bai de dong wu guo min mo xing ,bing dui yin xing chong ren tang dan bai he qu tang ji hua dan bai de zhi min xing jin hang ping jia 。yu qu tang ji hua dan bai zu xiao shu xiang bi ,tang dan bai zu xiao shu de ti chong zeng chang kuai ,zhi chang wen du bian hua da ,zu an han liang he IgEbiao da shui ping xian zhe sheng gao ,tong shi guan cha zu zhi bing li xue qie pian fa xian ,tang dan bai zu xiao shu de zu zhi sun shang cheng du geng da 。jie guo biao ming ,N-tang lian zai yin xing tang dan bai yin qi de xiao shu zhi min fan ying zhong ke neng ju you zeng jiang zuo yong 。

论文参考文献

论文详细介绍

论文作者分别是来自西北大学的李成,发表于刊物西北大学2019-10-11论文,是一篇关于银杏种仁糖蛋白论文,糖链论文,细胞抗原表位论文,动物模型论文,西北大学2019-10-11论文的文章。本文可供学术参考使用,各位学者可以免费参考阅读下载,文章观点不代表本站观点,资料来自西北大学2019-10-11论文网站,若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权,请联系我们删除。

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