胡云霞（平凉市第二人民医院检验科甘肃平凉744000)
【中图分类号】R446.1【文献标识码】A【文章编号】1672-5085（2012）5-0165-02
【关键词】EDTA-K2抗凝剂血小板计数假性血小板减少
全自动血细胞分析仪具有快速、方便、重复性好、工作效率高等优点，目前已广泛应用于各医院检验科进行临床血常规分析。随着全自动血细胞分析仪的推广和普及，EDTA-K2也作为较理想的血常规的抗凝剂被广泛应用，乙二胺四乙酸二钾（EDTA-K2）是国际血液学标准化委员会（ICSH）推荐使用的对血细胞影响较小的血液抗凝剂。最近我科在血常规检验中发现2例由EDTA-K2抗凝剂引起的血小板假性减少病例，现进行报道。
1资料与方法
1.1仪器：日本Sysmex公司生产的XT-2000i和Kx-21全自动血细胞分析仪（两台仪器已进行了比对试验）；与仪器配套的试剂及质控品；奥林巴斯显微镜；改良牛鲍氏计数板。
1.2材料
EDTA-K2真空静脉采血管，枸橼酸钠（109mmol∕L）真空静脉采血管，草酸铵稀释液，瑞-姬氏混合染液。
1.3临床资料
病例1，患者，男，66岁，2011年10月12日入住我院泌尿外科，择期手术治疗前列腺增生。入院后进行手术前各项检查：①无肝、脾、淋巴结肿大，全身无出血点及瘀斑；血压正常；心电图正常；B超示前列腺5×3×5mm，实质回声均匀，中央沟不清，前列腺增生；②实验室检查：凝血功能检查（PT、APTT、TT、Fbg）正常；肝肾功能、血脂、血糖、尿常规、便常规及潜血的检查均正常；乙型肝炎表面抗原（HBsAg），丙型肝炎抗体（HCV），梅毒检测（RPR），艾滋病毒检测（HIV）均为阴性。血常规（XT-2000i全自动血细胞分析仪）WBC5.66×109∕L，RBC3.57×1012∕L，HGB119g∕L，PLT13×109∕L，同时用抗凝血推制血涂片，瑞-姬氏染色后复检，发现血小板聚集成簇，甚至成片，极少见单个血小板存在。10月14日复查血常规（XT-2000i全自动血细胞分析仪），血小板计数为31×109∕L，此标本同时用Kx-21全自动血细胞分析仪进行检测，血小板计数为27×109∕L，并推EDTA-K2抗凝血制成血涂片，瑞-姬氏染色后复检，发现片中仍是大量血小板聚集。遂报告给临床医生，医生要求我们手工复查血小板，采末梢血20ul加入草酸铵稀释液0.38ml中，用改良牛鲍氏计数板计数血小板为170×109∕L。难道是EDTA-K2抗凝剂对血小板计数产生影响？有文献报道，用枸橼酸盐抗凝可消除此现象[1]。我们遂用不同抗凝剂和手工法计数血小板进行对比检查，结果见表1。同时血涂片检查：EDTA-K2抗凝血镜下见血小板聚集成簇，枸橼酸钠抗凝血镜下血小板散在易见，末梢血推片镜下见血小板散在及成丛易见。
病例2，患者，女，46岁，5年前体检时查出患有乙型肝炎，2011年10月25日因“恶心，呕吐”入住我院消化内科。查体：血压正常；全身无出血点及瘀斑；X线、心电图检查正常；B超示脾脏轻度肿大，肝、胆、胰未见异常。凝血功能检查（PT、APTT、TT、Fbg）正常；血常规检查WBC3.49×109∕L，RBC3.28×1012∕L，HGB104g∕L，PLT12×109∕L，血涂片镜下见血小板聚集成簇。是否和病例1患者情况一样，遂报告临床，用不同抗凝剂和手工法复查血小板，结果见表1，同时推制血涂片，结果同病例1患者一致。
不同抗凝剂和手工法计数血小板（×109∕L）结果对比
表1
方法病例1病例2
XT-2000iKx-21XT-2000iKx-21
EDTA-K2抗凝血24291519
枸橼酸钠抗凝血136149177179
草酸铵稀释液
(手工法)128169
2结果
XT-2000i和Kx-21全自动血细胞分析仪两台仪器无差异。两位患者用EDTA-K2抗凝血检测血小板均减低，并用此抗凝血制成血涂片镜检血小板聚集；而改用枸橼酸钠抗凝血和手工法计数血小板均正常，血涂片镜检血小板分布正常。两位患者全身均无出血现象，凝血功能也都正常，那就说明是EDTA-K2抗凝剂导致血小板聚集，使仪器不能识别，而导致血小板假性减少。
3讨论
临床上引起血小板假性减少的原因很多，常见的有：①计数血小板方法学的缺陷造成；②血小板体积偏大；③标本放置时间太短；④抗凝剂EDTA的影响造成；⑤高镁血症、高胆固醇和高甘油三酯血症，糖尿病、高血压患者等。这两例患者均属于EDTA-K2抗凝剂所致的血小板假性减少。按照国际血液学标准化委员会（ICSH）的建议，1.5～2.2mg的EDTA-K2抗凝1ml的全血可以抑制血小板聚集，从而达到抗凝的目的。但有极少数人的血小板在用EDTA抗凝时，反而会出现血小板聚集，这种EDTA依赖性假性血小板减少可能与血浆中存在的抗血小板抗体和∕或抗心磷脂抗体等自身抗体有关，但无任何病理、生理意义，也与特殊药物使用无关，多发生在肿瘤患者、自身免疫病、肺心病、晚期孕妇、肝病、毒血症及一些不明原因疾病，此现象是其他疾病发生的伴随现象，因其出现于其他疾病开始或治疗过程中，故随着疾病好转而消失。对于这类标本，只能换用非EDTA抗凝剂进行重新计数，比如枸橼酸盐或在EDTA抗凝血中加入肝磷脂[2]。全自动血细胞分析仪多采用电阻抗原理，根据血小板的体积大小及通过微孔时产生的脉冲数计数的，当血小板发生聚集时，会使一些血小板误认为小红细胞而不纳入血小板计数范围，使血小板计数假性减少[3]。
血细胞分析仪的结果仅仅是初筛，不能完全代替显微镜检查。在临床工作中，若不能鉴别血小板是真性减少还是假性减少，有可能误诊，使手术推迟、延误治疗等，给患者造成经济损失和精神损失，甚至引发医疗纠纷。因此提醒广大检验工作者遇到血细胞分析仪检测血小板结果明显降低，与临床不相符者，应及时制血涂片染色观察血小板形态与分布情况，并换用枸橼酸钠抗凝剂采血检测血小板和手工法计数血小板，抗凝血涂片及不含抗凝剂的血涂片染色后观察血小板分布情况，为临床诊断及治疗提供方便，为患者减少不必要的医疗费用，避免医疗纠纷的发生。
参考文献
[1]迟林.血细胞分析仪检测血小板假性减少2例[J].中华现代临床医学杂志，2004，2（11B）.
[2]朱中勇.准确计数血小板方法学研究进展[J].国外医学临床生物化学与检验学分册，2002，23（3）：131～132.
[3]林粤.EDTA-K2导致血小板假性减少原因分析，2009，5（10）：843.