导读:本文包含了血管内皮诱导分化论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:诱导分化,血管内皮样细胞,血管内皮细胞,实验研究
血管内皮诱导分化论文文献综述
文汉,常聪聪,沈奥林,万圣云,丁洋[1]（2018）在《兔骨髓间充质干细胞诱导分化为血管内皮细胞的实验研究》一文中研究指出干细胞移植治疗是当今一种极为先进的医疗技术,该治疗方法对于临床中某些疑难杂症的医治带来了希望的曙光,而干细胞移植有着让人体组织细胞修复、重建的作用。MSCs在人体中属于骨髓间充质干细胞,其可以对骨髓中的造血干细胞有促进、支持等作用~([1])。近年来,干细胞移植治疗在临床组织再生各方面应用广泛,但是干细胞是具有多向分化潜能的细胞,移植后有成瘤的风险,其安全性需进一步研究~([2,3])。本课题组前期实验从活体大鼠股骨的骨髓中提取(本文来源于《中国地方病防治杂志》期刊2018年06期）
蒋星海,赵彪,吴凯,肖仁顺,王晓梅[2]（2018）在《血管内皮生长因子165、神经营养因子3、血管生成素1基因转染诱导骨髓间充质干细胞向神经元及血管内皮细胞分化》一文中研究指出背景:骨髓间充质干细胞是一种多功能间充质干细胞,具有多向分化潜能,可通过腺病毒转染等方法对其进行基因修饰,使其能够产生多种生长因子,如血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、神经营养因子3(neurotrophin 3,NT-3)、血管生成素1(angiopoietin 1,Ang-1)等,从而应用于组织工程研究中。目的:探讨VEGF165、NT-3、Ang-1基因转染大鼠骨髓间充质干细胞向神经元及血管内皮细胞诱导分化的可能性。方法:采用差速贴壁法分离培养骨髓间充质干细胞,进行流式细胞术和成骨、成脂诱导分化能力鉴定。以巨细胞病毒(CMV)作为启动子,构建2个腺病毒载体,其一为双顺反子载体,携带h VEGF165及Ang-1基因(Adv-Bic);其二为携带NT-3基因载体,即Adv NT-3。以不同感染复数值将Adv-Bic(绿色荧光)及Adv NT-3(红色荧光)同时转染大鼠骨髓间充质干细胞,转染2 d后根据荧光显微镜下绿色及红色荧光蛋白表达情况确定最佳感染复数值。将生长良好的第3代骨髓间充质干细胞分为2组,实验组以最适感染复数值转染Adv-Bic(无荧光标记)及Adv NT-3(无荧光标记);对照组以相同感染复数值转染空白对照病毒。两组分别于体外培养7 d后进行免疫荧光及q PCR检测。结果与结论:(1)间质干细胞表面分子CD29、CD44呈阳性表达,造血干细胞表面分子CD34、CD45呈阴性表达。骨髓间充质干细胞能够定向分化为成骨细胞及脂肪细胞;(2)病毒转染骨髓间充质干细胞48 h后荧光显微镜下观察有绿色及红色荧光蛋白表达,随着感染复数值增大荧光表达量逐渐增强,感染复数值为100时荧光表达最强烈;(3)免疫荧光及q PCR结果显示,实验组VEGF165、NT-3、Ang-1表达水平高于对照组,且血管内皮特异性标记物CD31、CD34表达水平高于对照组,神经元特异性标记物NSE、Nestin表达水平高于对照组;(4)结果提示,VEGF165、NT-3、Ang-1基因转染骨髓间充质干细胞,使其过表达VEGF165、NT-3、Ang-1生长因子,能够诱导骨髓间充质干细胞定向分化为神经元及血管内皮细胞。(本文来源于《中国组织工程研究》期刊2018年25期）
吕继忠[3]（2018）在《成纤维细胞来源诱导性多能干细胞定向分化为血管内皮样细胞及与牙髓干细胞的共培养》一文中研究指出背景:牙髓的血管重建是为组织工程牙髓再生提供养分与能量供给的重要环节。干细胞的选择和血管内皮样细胞的定向分化已经成为真正实现牙髓再生的重要研究方向。目的:将小鼠成纤维细胞来源诱导性多能干细胞定向分化为血管内皮样细胞,探讨其与牙髓干细胞共培养促进血管新生的可行性。方法:(1)采用酶消化法制备小鼠睾丸支持细胞饲养层;(2)外源添加血管内皮生长因子和碱性成纤维细胞生长因子诱导小鼠皮肤成纤维细胞来源诱导性多能干细胞定向分化为血管内皮样细胞并进行鉴定;(3)建立血管内皮样细胞与牙髓干细胞共培养体系,荧光实时定量PCR检测CD34、血管内皮生长因子mRNA的表达。结果与结论:(1)诱导分化14 d后倒置显微镜下观察到细胞形态改变,呈现血管内皮形态;(2)流式细胞术鉴定诱导分化细胞CD31阳性,呈现内皮细胞表型;(3)诱导分化14 d后,培养液上清中内皮型一氧化氮合酶水平明显高于未分化细胞(P<0.01);(4)诱导分化14 d后,与未分化对照组相比,实验组细胞内皮素表达增高(P<0.01),前列环素表达降低(P<0.01);(5)血管内皮样细胞与牙髓干细胞共培养5 d后,与血管内皮样细胞单独培养组相比,共培养组CD34和血管内皮生长因子表达增高(P<0.01);(6)结果表明,小鼠成纤维细胞来源的诱导性多能干细胞可以定向分化为血管内皮样细胞,与牙髓干细胞共培养后有形成血管的倾向。(本文来源于《中国组织工程研究》期刊2018年21期）
王承恩,杨敏,李渊,刘绘绘,梁赜隐[4]（2018）在《无血清EGM-2 BulletKit对骨髓间充质干细胞向血管内皮细胞分化的诱导作用》一文中研究指出目的探讨无血清内皮细胞生长培养基套装(EGM-2 Bullet Kit)对骨髓间充质干细胞(MSC)向血管内皮细胞分化的诱导作用。方法通过贴壁培养获取MSC,用流式细胞仪检测MSC表面标志物表达。将获得的MSC随机分为对照组与诱导组。对照组用无血清EGM-2基础培养基进行培养,诱导组选用无血清EGM-2基础培养基+Bullet Kit进行诱导。于诱导第2、6、10、14天用流式细胞仪、细胞免疫荧光法检测内皮细胞表面分子CD31表达。采用Di I标记的乙酰化低密度脂蛋白吞噬实验检测MSC诱导分化后的吞噬功能,用基底膜基质胶成管实验检测细胞体外成管功能。结果贴壁培养获得的MSC呈长梭形,流式细胞仪检测结果显示MSC标志物表达阳性的比例均大于95%,而内皮细胞标志物无表达。诱导组诱导第2天CD31开始表达,随诱导时间增加,CD31表达量逐渐升高,诱导第14天CD31表达量最高,CD31表达阳性的内皮细胞比例为55.8%;对照组无CD31表达。诱导第14天,诱导组能够摄取脂质,而对照组无摄取现象。诱导组细胞能够形成典型的管状结构;对照组细胞未形成典型的线状、管状结构。结论无血清EGM-2 Bullet Kit可诱导MSC分化为血管内皮细胞,且具有内皮细胞的特性、功能。(本文来源于《山东医药》期刊2018年21期）
王新文[5]（2018）在《低氧诱导人骨肉瘤MNNG/HOS细胞转分化为血管内皮样细胞的研究》一文中研究指出【目的】血管内皮细胞是形成肿瘤新生血管的重要组成部分,与肿瘤的发展及转移密切相关,因此本课题旨在探讨低氧条件下人骨肉瘤MNNG/HOS细胞是否可转分化为血管内皮样细胞,并进一步探讨其分子机制。【方法】1.将人骨肉瘤MNNG/HOS细胞在各组不同条件下培养,观察其是否出现血管内皮细胞所具有典型的“铺路石”外观;应用3D培养技术,观测是否出现网状结构;应用RT-PCR技术,从m RNA水平检测内皮细胞所特有的标记物(CD31、CD34、v WF)的表达情况;采用细胞免疫荧光技术,从蛋白质水平检测CD31、CD34、v WF的表达情况。2.将人骨肉瘤MNNG/HOS细胞在各组不同条件下培养96小时后,接种于裸鼠皮下,构建裸鼠人骨肉瘤异种移植瘤模型,接种49天后,取下异种移值瘤并予抗人的CD31抗体进行免疫组织化学染色,检测其异种移植瘤血管内皮细胞是否有来源于人骨肉瘤MNNG/HOS细胞。3.将体外各组不同条件下培养的人骨肉瘤MNNG/HOS细胞株,应用流式细胞仪进行分析,检测能被CD133抗体染色的细胞的比例,应用q PCR技术检测干细胞基因Oct4和Nanog转录水平;接种于裸鼠皮下,观察其成瘤能力。4.应用m TOR通路抑制剂雷帕霉素100nmol/L,30分钟预处理人骨肉瘤MNNG/HOS细胞,然后低氧条件下培养,接种于裸鼠皮下,观察其成瘤能力;接种49天后,取下异种移值瘤予抗人的CD31抗体进行免疫组织化学染色,检测移植瘤血管内皮细胞是否有来源于人骨肉瘤MNNG/HOS细胞。并观察予雷帕霉素预处理的低氧条件下培养的MNNG/HOS细胞是否出现“铺路石”外观;应用3D培养技术,观测是否出现网状结构;应用细胞免疫荧光技术,从蛋白质水平检测CD31、CD34、v WF的表达情况;用流式细胞仪分析能被CD133抗体标记的细胞比例;应用q PCR技术检测干细胞基因Oct4和Nanog转录水平,以及HIF-α转录水平;应用Western blot技术检测HIF-α及m TOR信号通路中的m TOR、p-m TOR、P70S6K及p-P70S6K蛋白表达水平,探讨低氧诱导人骨肉瘤MNNG/HOS细胞转分化为血管内皮样细胞的分子机制。【结果】1.预处理理组和低氧组可观察到血管内皮样细胞所具有典型的“铺路石”外观,叁维培养可观测到网状结构形成,m RNA和蛋白质水平均可检测到CD31、CD34、v WF的表达;而常氧组和常氧对照组未能观察到“铺路石”外观及网状结构形成,m RNA和蛋白质水平均未能检测到CD31、CD34、v WF的表达。2.预处理理组和低氧组的异种移植瘤,免疫组织化学染色可见被抗人的CD31抗体染色阳性细胞;常氧组和常氧对照组均未见被抗人的CD31抗体染色阳性细胞。3.低氧组能被CD133抗体染色的细胞的比例较对照组显着增加(P﹤0.05);干细胞基因Oct4和Nanog转录水平较常氧对照组显着增加(P﹤0.05);异种移植瘤,体积和重量较对照组显着增大(P﹤0.05)。4.雷帕霉素组的皮下异种移植瘤的体积和重量较低氧组均显着减小(P﹤0.05);未见被抗人的CD31抗体染色阳性细胞;未能观察到“铺路石”外观,未见网状结构形成;蛋白质水平均未能检测到CD31、CD34、v WF的表达;HIF-α在m RNA转录水平较低氧组无显着差异(P﹥0.05),但蛋白表达水平显着降低(P﹤0.05);m TOR信号通路中m TOR及P70S6K蛋白的磷酸化水平较低氧组显着降低(P﹤0.05)。【结论】1.低氧条件下培养的人骨肉瘤MNNG/HOS细胞可转分化为血管内皮样细胞,并具有典型的“铺路石”外观和形成网状结构,m RNA和蛋白质水平均检测CD31、CD34、v WF的表达显着增加。2.低氧条件下培养的人骨肉瘤MNNG/HOS细胞接种于裸鼠体内可转分化为血管内皮样细胞;3.低氧条件下培养的人骨肉瘤MNNG/HOS细胞可去分化为肿瘤干细胞,其成瘤能力增强。4.HIF-1α可能通过m TOR信号通路,参与低氧条件下人骨肉瘤MNNG/HOS细胞转分化为血管内皮细样胞这一过程。(本文来源于《福建医科大学》期刊2018-06-01）
高山泉,廖延,姜美花,杜钰,谢冬梅[6]（2018）在《体外诱导小鼠心脏CD51~+细胞分化为血管内皮细胞的研究》一文中研究指出目的探讨小鼠心脏CD51~+细胞的分离培养及体外定向诱导分化为血管内皮细胞的可行性,为其治疗心脏血管内皮损伤提供理论依据。方法取出日龄为7 d的C57 BL/6乳鼠心脏,用流式分选法分选原代细胞、悬浮培养法培养及纯化心脏CD51~+细胞。用内皮生长培养基(EGM-2)对纯化和扩增后的CD51~+细胞进行体外诱导内皮分化20 d。诱导后观察细胞形态变化;实时荧光定量PCR分析内皮相关基因CD31、CD34、v WF、VEGFR-2及VE-Cadherin的mRNA表达;细胞免疫荧光技术、流式表型分析术检测内皮相关标志CD31、VEGFR-2及v WF的表达;测定细胞一氧化氮(NO)含量、行体外血管形成实验以鉴定其功能。结果诱导内皮分化后细胞变为短梭形,呈铺路石样排列生长;荧光定量PCR结果显示诱导后细胞CD31、CD34、v WF、VEGFR-2、VE-Cadherin的mRNA相对表达量较诱导前增加(t值分别为24.529、6.383、25.872、5.256、5.255,P均<0.05);细胞免疫荧光染色及流式表型分析结果均显示诱导后细胞表达CD31、VEGFR-2及v WF;诱导后细胞NO含量较诱导前增加(t=9.549,P=0.011)并具有体外形成管腔样结构的能力。结论心脏CD51~+细胞具有在体外定向诱导分化为血管内皮细胞的能力。(本文来源于《新医学》期刊2018年05期）
刘明颖[7]（2018）在《海藻酸钙微纤维中包封的骨髓间充质干细胞被诱导向血管内皮分化的研究》一文中研究指出人工构建生物性血管在组织器官工程与血管替代治疗、血管发育与生理病理等领域中展露其重要价值。将血管细胞贴附于一定表面或者将其包封于基质环境中并促使其向“血管”组织形态生长,是构建生物性血管的一类技术策略。但是这类技术策略,在朝向构建微小型血管时面临一些挑战。其主要问题在于用于人工血管构建的生物材料往往不能兼具良好的机械性能和生物相容性,植入体内通常会导致内膜增生进而形成血栓,甚至引起假性动脉瘤。而目前文献中用来构建管状材料的方法较多采用静电纺丝法和相转化法等,其加工过程需要高压或者高温的相对复杂的设备装置,常常引起生物材料的变性,同时也难于直接在加工中引入细胞;而细胞片技术(cell sheet technology,CST)虽然可直接采用成熟的血管细胞(如血管内皮细胞,vascular endothelial cells,VECs),但是成熟血管的细胞获取较为困难,而且分裂能力十分有限,往往不能形成完整整合的内皮层。骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)的体外多向分化、跨分化与免疫调控能力,尤其是抗血栓潜力,引起了人工血管研究界的关注,值得把它作为人工构建血管中的主要种子细胞作出系统探索。本论文利用微流控微纤维生成中包封细胞的技术途径,来探索微尺度流控空间约束条件下调控间充质干细胞向血管内皮分化的可能性。首先,将海藻酸钠和氯化钙溶液引入有机玻璃微流控装置实现交联反应,制备出具有良好生物相容性和力学性能的海藻酸钙微纤维;进一步在海藻酸钙微纤维的微流控生成过程中,将MSCs联合血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)和成纤维细胞生长因子(fibroblastic growth factor,FGF)一并包封入微纤维,建立起藻酸钙微纤维流控包封MSCs叁维立体培养体系,以此为基础探讨促使其向微血管内皮形态分化的若干分子机制;继而将微纤维-细胞复合体移植入动物体内,评估微纤维-细胞复合体对机体的急性毒性。本文的主要工作和研究结果如下:(1)海藻酸盐微纤维的微流控合成首先自制T型微流控聚焦流装置,其中在结构上利用拉锥毛细管尖端直径的精确截取,以及在加工有T型交叉结构通道装置内的合理置放,使这种流控装置具有生成可控直径的聚焦流能力。在这种聚焦流微流控装置的拉锥毛细管段入口引入海藻酸钠溶液(作为核心流),侧向通道中引入氯化钙(鞘流),在一定的流量比范围内,可在装置的出口连续生成不同直径的海藻酸钙凝胶微纤维。检测结果显示所合成的长0.3m-0.5m直径<600?m的海藻酸钙微纤维形态较均匀,内部纹理清晰,表面富有微孔。微纤维的直径与核心流的流量呈线性正相关关系,随核心流流量的增加而增加。直径为500?m和300?m左右的具有类似于以其他人工聚合物为材料的人工血管的缝合强度。(2)MSCs在微纤维中的生长、增殖及血管内皮定向分化将MSCs联合细胞生长因子VEGF和FGF包封入微纤维中进行叁维培养,利用DiO活细胞染色,Live/dead细胞染色和CCK-8法观察海藻酸盐微纤维中叁维培养中MSCs生长增殖情况,并用Elisa法检测VEGF从海藻酸盐微纤维中的释放特性;进一步利用免疫荧光化学,RT-PCR,Western blot和流式细胞等技术,观察VEGF和FGF在藻酸盐微纤维包封培养中对MSCs向VECs诱导分化的影响。结果显示,细胞生长因子VEGF和FGF在藻酸盐微纤维中能促进MSCs增殖并维持其活力,且双细胞生长因子的协同作用下对MSCs增殖的促进更为明显。MSCs的增殖主要集中在一周之内,两周左右MSCs趋于成团生长并出现凋亡,其生长周期与二维平板培养无显着差别。海藻酸盐微纤维具有良好的生化物质承载性能、缓释性能以及细胞包封率,包封的MSCs在微纤维内能够连续分泌VEGF并通过微纤维释放。这些结果表明,VEGF和FGF在藻酸盐微纤维中能够诱导MSCs定向分化为VECs。(3)海藻酸盐微纤维-细胞复合物急性毒性的评估将海藻酸盐微纤维-细胞复合物腹腔移植入小鼠体内利用组织病理学定性评估移植物的心血管系统急性毒性。结果显示海藻酸盐微纤维-细胞复合物对于生物机体无明显毒性,具有较好的生物相容性和良好的抗血栓潜能。综合上述结果,本文利用微流控方法制备的海藻酸盐微纤维具有良好生物物理性和生物相容性,细胞因子VEGF和FGF能够在微纤维中促进MSCs的生长增殖以及内皮分化,同时微纤维-细胞复合体对机体无急性毒性,这表明这种体系有利于人工血管的初步构建。本研究为人工血管的合成以及后续血管疾病的治疗预示了新的可行性。(本文来源于《重庆大学》期刊2018-04-01）
文汉[8]（2018）在《兔骨髓间充质干细胞诱导分化为血管内皮细胞的实验研究》一文中研究指出目的1.分析兔骨髓间充质干细胞定向诱导分化为血管内皮细胞并进行鉴定的实验过程、步骤及结果。2.研究诱导培养时间对所得血管内皮细胞NO分泌量的影响及意义。3.探讨以家兔替代大鼠作为骨髓间充质干细胞供体和自体移植受体的可行性。实验方法一、选取3~4月龄的健康清洁级新西兰大白兔进行静脉麻醉操作,麻醉完成后于右下肢股骨用骨髓穿刺针于穿刺点垂直骨面穿刺进入骨髓腔,抽吸骨髓3ml,立即注入离心管中,充分混合成骨髓悬液。离心5min,去除上层的脂肪及组织液,收集管底的细胞。二、将收获的细胞进行原代培养,将收获的细胞用PBS液重悬,加入Percoll分离液中,进行离心;吸取中间厚度约0.2cm的乳白色细胞层,洗涤后再用培养液重悬;细胞计数,调整细胞浓度后以接种于塑料培养皿中,置于培养箱中培养;定期换液,去除未贴壁细胞。叁、原代培养完成后接种传代培养,待细胞汇合达80%时,弃培养夜,清洗3次,加入0.125%胰蛋白酶消化后,光镜下观察细胞形态变化,待细胞间隙扩大,细胞呈不规则时,终止消化;收集细胞悬液并离心,用含青-链霉素的培养液重悬细胞,再按1:2接种传代。四、定向诱导骨髓间充质干细胞分化为血管内皮细胞选择细胞性状较稳定,生长状态良好的第3代细胞弃去培养液并清洗,加入含青-链霉素、VEGF、b FGF的内皮细胞诱导培养液,定期换液。连续镜下观察细胞形态的变化。五、流式细胞术鉴定取诱导培养的第叁代血管内皮细胞应用流式细胞仪检测CD31、v WF的表达。细胞消化离心后,用PBS重悬,调整细胞浓度后分别加入到3个流式管中并标记为123,分别在123管中加入pbs、CD31、v WF,定容后上机鉴定。六、NO分泌量检测取诱导培养第5d、第10d、第15d的上清液,按照Griess试剂说明书方法操作,应用EXCEL绘制标准曲线,将所测样品吸光度代入计算NO分泌量,以均数±标准差表示,并采用配对样本t检验比较两两之间结果,以P<0.05为差异具有统计学意义。结果一、(1)原代细胞接种4h后可见细胞贴壁生长,48h后换液时可见细胞集落生长,细胞呈梭形、叁角形,10-12d后见细胞簇集,呈网状、旋涡状排列。传代细胞接种后生长迅速,培养5-6d后,呈长梭形排列均匀。加入内皮细胞诱导培养液后48h后,镜下观察可见部分细胞变为短梭形;诱导10 d后,细胞集簇生长,呈鱼群样排列;诱导20d后,可见内皮样细胞呈铺路石状排列细胞长度增加,形态扁平(2)流式细胞仪检测结果示:诱导产生的血管内皮样细胞CD31阳性率97.3%±0.8%,v WF阳性率95.7%±1.1%。(3)检测诱导培养第5d、第10d和第15d后上清液中的NO分泌量,显示:第5d上清液中NO分泌量为(31.25±2.67)μmol/L,第10d上清液NO分泌量为(65.88±3.64)μmol/L,第15d上清液中的NO分泌量为(86.31±3.93)μmol/L。二、对诱导分化获得的血管内皮细胞NO分泌量采用配对样本t检验比较叁组结果,t=26.574≥t(df)0.05,差异存在统计学意义(P<0.05)。NO分泌量第5d<第10d<第15d。叁、实验采用相同的VEGF+b FGF的诱导方案,成功获得兔血管内皮细胞,与课题组前期的大鼠实验研究得出一致的结果。结论1.兔骨髓间充质干细胞可在VEGF与b FGF联合诱导下分化为血管内皮细胞。2.在诱导分化过程中,血管内皮细胞活性在15d内随培养时间逐渐增加,从而使NO分泌量增加。3.家兔可以替代大鼠作为骨髓间充质干细胞供体和自体细胞移植的受体,可以通过诱导兔骨髓间充质干细胞分化为血管内皮细胞为自体细胞移植提供种子细胞。(本文来源于《安徽医科大学》期刊2018-03-01）
张明杰[9]（2017）在《小鼠CD45~-/CD31~+肺侧群细胞诱导分化为血管内皮细胞及平滑肌细胞的研究》一文中研究指出目的肺器官是呼吸系统的一个重要组成部分,其功能是进行气体交换,保持肺功能处于良好的状态是维持生命的基本保障。肺部疾病在当今比较常见,而且非常严重。其中急性肺损伤(Acute Lung Injury,ALI)是肺部疾病中常见的一类疾病,其由多种致伤因素导致,会引起肺功能衰竭。肺部疾病严重影响人类健康。本实验选用CD45~-/CD31~+小鼠肺侧群细胞进行体外分化诱导,探讨CD45~-/CD31~+小鼠肺侧群细胞是否是血管内皮细胞及平滑肌细胞的祖细胞,进而为临床应用细胞疗法治疗肺部疾病提供新的策略。方法1、收集小鼠肺组织的细胞,流式细胞术分选CD45~-/CD31~+小鼠肺侧群细胞,免疫荧光检测其ABCG2的表达。2、RT-PCR检测分选的CD45~-/CD31~+小鼠肺侧群细胞的与血管内皮细胞相关的基因(Tie2、v WF)以及与平滑肌细胞相关的基因(SMA、α-SMT)的表达。3、对分选的CD45~-/CD31~+小鼠肺侧群细胞进行细胞克隆形成实验以及用流式细胞术检测该侧群细胞的细胞特性是否发生改变。4、用平滑肌细胞培养基SmGm-2及内皮细胞培养基EGM-2分别在体外培养CD45~-/CD31~+小鼠肺侧群细胞,应用免疫荧光技术检测α-SMT和v WF的表达。5、RT-PCR检测未诱导和诱导后的CD45~-/CD31~+小鼠肺侧群细胞的平滑肌细胞相关基因α-SMT和SMA,以及血管内皮细胞相关基因v WF的表达水平。结果1、流式细胞术成功分选出CD45~-/CD31~+小鼠肺侧群细胞,并且用免疫荧光染色检测到其ABCG2的表达。2、血管内皮细胞相关基因检测结果显示:该侧群细胞表达Tie2,不表达v WF;平滑肌细胞相关基因检测结果显示:该侧群细胞表达SMA,不表达α-SMT。3、CD45~-/CD31~+小鼠肺侧群细胞形成细胞克隆,流式细胞术的结果显示该侧群细胞的细胞特性未发生改变。4、免疫荧光染色的结果显示:经SmGm-2培养基分化诱导的细胞表达α-SMT;经EGM-2培养基分化诱导的细胞表达v WF。5、RT-PCR的结果显示经SmGm-2培养基分化诱导的细胞表达α-SMT、SMA;经EGM-2培养基分化诱导的细胞表达v WF。两者均不表达ABCG2。结论CD45~-/CD31~+小鼠肺侧群细胞可以在体外发育成血管内皮细胞和平滑肌细胞,提示CD45~-/CD31~+小鼠肺侧群细胞是血管内皮细胞和平滑肌细胞的祖细胞。(本文来源于《锦州医科大学》期刊2017-03-01）
王俊力,许慧芳,冯莉,魏丹,陈国华[10]（2016）在《不同组织来源间充质干细胞向血管内皮细胞诱导分化的研究与进展》一文中研究指出背景:间充质干细胞可诱导分化为血管内皮细胞,在体外可形成血管移植物用于临床治疗缺血性疾病、血管组织工程及再生医学等领域。目的:总结间充质干细胞的生物学特征,不同组织来源间充质干细胞诱导分化为血管内皮细胞的相关研究进展。方法:文章由第一作者于2015年9至11月期间检索PubM ed、Sciencedirect、Medline数据库2000年1月至2015年6月的相关文章,限定文章语言种类为English,检索词为"mesenchymal stem cells,vascular endothelial cell,cell differentiation",初检文章156篇,筛选后对51篇文章进行分类总结。结果与结论:(1)间充质干细胞来源广泛,其中骨髓来源研究最早最多,但随供者年龄增大,其增殖及分化能力随之减弱;(2)脐带、胎盘、羊膜都是产妇自体产物且分娩后会遗弃,故获取间充质干细胞比较容易,同时对新生儿和产妇不会造成任何痛苦和心理负担,受者更易于接受,不会引起道德伦理及法律方面的纠纷;(3)脐血来源充足,免疫原性较弱,且受胎盘屏障保护使其成分被病毒、细菌污染的概率低;(4)羊水因取材方式等限制其在临床应用。(本文来源于《中国组织工程研究》期刊2016年36期）
血管内皮诱导分化论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
背景:骨髓间充质干细胞是一种多功能间充质干细胞,具有多向分化潜能,可通过腺病毒转染等方法对其进行基因修饰,使其能够产生多种生长因子,如血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、神经营养因子3(neurotrophin 3,NT-3)、血管生成素1(angiopoietin 1,Ang-1)等,从而应用于组织工程研究中。目的:探讨VEGF165、NT-3、Ang-1基因转染大鼠骨髓间充质干细胞向神经元及血管内皮细胞诱导分化的可能性。方法:采用差速贴壁法分离培养骨髓间充质干细胞,进行流式细胞术和成骨、成脂诱导分化能力鉴定。以巨细胞病毒(CMV)作为启动子,构建2个腺病毒载体,其一为双顺反子载体,携带h VEGF165及Ang-1基因(Adv-Bic);其二为携带NT-3基因载体,即Adv NT-3。以不同感染复数值将Adv-Bic(绿色荧光)及Adv NT-3(红色荧光)同时转染大鼠骨髓间充质干细胞,转染2 d后根据荧光显微镜下绿色及红色荧光蛋白表达情况确定最佳感染复数值。将生长良好的第3代骨髓间充质干细胞分为2组,实验组以最适感染复数值转染Adv-Bic(无荧光标记)及Adv NT-3(无荧光标记);对照组以相同感染复数值转染空白对照病毒。两组分别于体外培养7 d后进行免疫荧光及q PCR检测。结果与结论:(1)间质干细胞表面分子CD29、CD44呈阳性表达,造血干细胞表面分子CD34、CD45呈阴性表达。骨髓间充质干细胞能够定向分化为成骨细胞及脂肪细胞;(2)病毒转染骨髓间充质干细胞48 h后荧光显微镜下观察有绿色及红色荧光蛋白表达,随着感染复数值增大荧光表达量逐渐增强,感染复数值为100时荧光表达最强烈;(3)免疫荧光及q PCR结果显示,实验组VEGF165、NT-3、Ang-1表达水平高于对照组,且血管内皮特异性标记物CD31、CD34表达水平高于对照组,神经元特异性标记物NSE、Nestin表达水平高于对照组;(4)结果提示,VEGF165、NT-3、Ang-1基因转染骨髓间充质干细胞,使其过表达VEGF165、NT-3、Ang-1生长因子,能够诱导骨髓间充质干细胞定向分化为神经元及血管内皮细胞。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
血管内皮诱导分化论文参考文献
[1].文汉,常聪聪,沈奥林,万圣云,丁洋.兔骨髓间充质干细胞诱导分化为血管内皮细胞的实验研究[J].中国地方病防治杂志.2018
[2].蒋星海,赵彪,吴凯,肖仁顺,王晓梅.血管内皮生长因子165、神经营养因子3、血管生成素1基因转染诱导骨髓间充质干细胞向神经元及血管内皮细胞分化[J].中国组织工程研究.2018
[3].吕继忠.成纤维细胞来源诱导性多能干细胞定向分化为血管内皮样细胞及与牙髓干细胞的共培养[J].中国组织工程研究.2018
[4].王承恩,杨敏,李渊,刘绘绘,梁赜隐.无血清EGM-2BulletKit对骨髓间充质干细胞向血管内皮细胞分化的诱导作用[J].山东医药.2018
[5].王新文.低氧诱导人骨肉瘤MNNG/HOS细胞转分化为血管内皮样细胞的研究[D].福建医科大学.2018
[6].高山泉,廖延,姜美花,杜钰,谢冬梅.体外诱导小鼠心脏CD51~+细胞分化为血管内皮细胞的研究[J].新医学.2018
[7].刘明颖.海藻酸钙微纤维中包封的骨髓间充质干细胞被诱导向血管内皮分化的研究[D].重庆大学.2018
[8].文汉.兔骨髓间充质干细胞诱导分化为血管内皮细胞的实验研究[D].安徽医科大学.2018
[9].张明杰.小鼠CD45~-/CD31~+肺侧群细胞诱导分化为血管内皮细胞及平滑肌细胞的研究[D].锦州医科大学.2017
[10].王俊力,许慧芳,冯莉,魏丹,陈国华.不同组织来源间充质干细胞向血管内皮细胞诱导分化的研究与进展[J].中国组织工程研究.2016